三氯乙烯体内诱发小鼠及人外周血淋巴细胞 DNA 链断裂

三氯乙烯体内诱发小鼠及人外周血淋巴细胞ＤＮＡ链断裂唐国慧庄志雄１张锦周２（西安医科大学预防医学系，西安，７１００６１；１中山医科大学公共卫生学院，广州５１００８９；２深圳市卫生防疫站，深圳５１８０２０）三氯乙烯（ＴＣＥ）可导致小鼠肝脏肿瘤和大量肾脏肿...     

单细胞凝胶电泳技术在甲基汞对小鼠胸腺淋巴细胞DNA损伤中的应用

目的 探讨甲基汞对小鼠胸淋巴细胞DNA损伤的作用。方法 采用单细胞凝胶电泳技术进行检测。结果 1／200－1／2LD。剂量组的甲基汞均可引起淋巴细胞DNA不同程度电泳迁移；A组（1／200LD50）、B组（1／20LD50）、C组（1／2LD50）DNA平均迁移长工与对照组之间差异有显著性（P＜0．05），并且C组与A、B两组之间差异也有显著性（P＜0．001）；B组尾直径／头直径、尾面积／总面积之比均与A组差异有显著性（P＜0．05）、C组各项之比均与A、B组差异有显著性（P＜0．05）。结论 甲基汞引起DNA链断裂损伤，随着甲基汞剂量的增加，淋巴细胞DNA损伤加重。     

硫芥对犬外周血淋巴细胞DNA损伤的作用

硫芥是典型的双功能烃化剂 ,进入体内后产生烃化作用 ,攻击的主要靶分子是ＤＮＡ。目前 ,单细胞凝胶电泳(ＳＣＧＥ)技术发展很快 ,国内、外将该法作为ＤＮＡ损伤检测的基本方法之一。先前我们用此法进行硫芥对人外周血淋巴细胞ＤＮＡ损伤的体外实验[1 ] ,本次选用犬外周血淋巴细胞 ,观察体内、外硫芥染毒后ＤＮＡ损伤的剂量效应与时间效应关系 ,为寻找研究硫芥细胞毒性作用及中毒早期敏感的检测方法提供实验依据。1　材料与方法1 1　主要仪器设备　奥林巴斯ＢＸ - 6 0显微镜、目测微尺(日本 )、电泳仪ＤＤＹ Ⅲ 6Ｂ、电泳槽ＤＤＹ Ⅲ 34Ａ…     

砷对小鼠骨髓细胞DNA的损伤作用

了解砷对体内细胞ＤＮＡ的损伤作用及其机制。「方法」在小鼠饮水加入Ａｓ２Ｏ３喂养６个月,采用单细胞凝胶电泳技术对骨髓细胞ＤＮＡ断裂进行了分析。「结果高剂量组（１２．５ｍｇ／Ｌ）小鼠骨髓细胞ＤＮＡ的迁移度和迁移率显著高于阴性对照组,Ｐ〈０．０５;中、低剂量组小鼠骨髓细胞ＤＮＡ的迁移度和迁移率与性对照组无显著差异。     

单细胞凝胶电泳检测单细胞DNA损伤

遗传毒理学家主要关注的三大遗传学损伤 ,即基因突变、染色体畸变及染色体数目改变。这些损伤多因 DNA受损所致 ,其本质是相同的 ,区别在于其损伤的程度 [1 ]。由此DNA损伤与修复就成为生物医学领域特别是遗传毒理学及肿瘤学等领域的核心内容之一。传统的毒理学检测终点是组织病理学改变 ,过程繁琐且不理想。迄今为止检测DNA损伤与修复最敏感的终点是测量 DNA单链断裂 [2 ] 。本文所论述的单细胞凝胶电泳 (single cell gelelectrophoresis assay,SCGE) ,又称彗星实验 (comet assay)或微凝胶电泳 (m icrogel electrophoresis,MGE) ,…     

高剂量硒对人外周血淋巴细胞的遗传毒性

硒（Se）是一种人体必需微量元素,1957年,由Schwarz等首次发现Se的营养作用.Se-Cys因其重要性被称作蛋白质的第21种氨基酸.食物中缺Se会引起一系列疾病,如癌症、心脏病、关节炎和免疫系统功能紊乱等.流行病学调查结果表明适量补Se有益于人体健康.但是由于Se具有有益和有害的双向性,其安全剂量范围较小,其有效剂量接近于中毒剂量,因此,有关Se对DNA损伤的保护作用及其剂量-效应关系值得深入研究.     

彗星试验检测7种化合物对外周血淋巴细胞DNA的损伤

目的：检测过氧化氢（Ｈ２Ｏ２）、甲磺酸乙酯（ＥＭＳ）、丝裂霉素Ｃ（ＭＭＣ）、二甲基亚硝胺（ＤＭＮＡ）、苯并（ａ）芘（ＢａＰ）、２－氨基Ｗｕ（２－ＡＦ）和环磷酰胺（ＣＰ）诱发小鼠、大鼠及人外周血淋巴细胞ＤＮＡ单链断裂。方法：体外单细胞微量凝胶碱性电泳试验（慧星试验）。结果：除ＥＭＳ０．９７ｍｍｏｌ·Ｌ＾－１在小鼠淋巴细胞，ＭＭＣ３０μｍｏｌ·Ｌ＾－１在小鼠、人淋巴细胞中呈阴性外，其余均为阳性。最低可     

铅对妊娠期及新生期大鼠神经细胞DNA的损伤

目的 环境中低水平的铅暴露一般不会引起典型的铅中毒，但有可能对神经系统产生毒性作用，尤其是对职业妇女的健康和儿童的智力发育的影响仍是比较严重；妊娠期及新生期是神经组织发育的关键时期，铅可通过胎盘屏障和血脑屏障，直接进入胎儿和新生儿的大脑，对中枢神经系统造成不可逆的损害。现目的进一步揭示铅的神经毒性作用机制。     

青蒿素对肿瘤细胞DNA的损伤作用

目的:研究青蒿素对肿瘤细胞DNA的损伤作用。方法:体外培养人白血病K562细胞,MTT法测定IC50,应用单细胞凝胶电泳(SCGE)检测细胞核DNA的损伤。结果:青蒿素处理K562细胞IC50为1.5×10-5mol/L,1×10-5mol/L青蒿素处理细胞24h后可引起细胞核DNA的损伤。结论:青蒿素造成肿瘤细胞DNA的损伤,抑制肿瘤细胞生长。     

褐藻多糖对氧化应激诱导的淋巴细胞DNA损伤的保护作用

研究褐藻多糖（ＢＳＰ）对活性氧引起的淋巴细胞ＤＮＡ损伤的保护作用。方法是敏感的单细胞凝胶电泳（ＳＣＧＥ）。结果表明在不同的介质中Ｈ_２Ｏ_２对细胞ＤＮＡ的损伤程度不同,在同一介质中Ｈ_２Ｏ_２对细胞ＤＮＡ的损伤程度呈一定的量效关系。 １００ｍｇ／Ｌ和 ２００ｍｇ／Ｌ的大分子量多糖（ＢＳＰｈ）和小分子量多糖（ＢＳＰｓ）都能明显降低Ｈ_２Ｏ_２对细胞ＤＮＡ损伤程度。表明ＢＳＰ能够清除自由基,减低氧化应激所致的细胞ＤＮＡ损伤程度,有利于维护细胞的正常结构和功能。提示 ＢＳＰ可作为一种预防性抗氧化营养素,用于预防氧化应激引起的疾病。     

铅对小鼠睾丸细胞DNA损伤作用研究

目的:通过建立亚慢性铅中毒动物模型探讨醋酸铅对雄性小鼠睾丸细胞DNA的损伤,为进一步了解其毒性作用机制提供科学依据。方法:将45只雄性小鼠分为0.2%、0.4%染铅组及空白对照组,每组各5只。实验组醋酸铅溶于去离子水中供小鼠自由摄取,空白对照组饮用自来水。分别于第2、4、6周分别处死动物,用单细胞凝胶电泳实验(彗星实验)检测小鼠睾丸细胞DNA损伤情况。结果:醋酸铅染毒后小鼠睾丸细胞DNA单链断裂,出现彗星状拖尾。无论是拖尾细胞的百分率,DNA迁移的长度,还是olive尾矩与空白对照组相比其差异具有极显著性(P<0.01),并且随着醋酸铅染毒浓度和时间的增加DNA的损伤越重,呈现出时间-效应关系。但0.2%与0.4%各周染毒组的拖尾细胞百分率、彗星尾长、olive尾矩的差异并无显著性(P>0.05)。结论:醋酸铅可诱导睾丸生殖细胞DNA损伤,并且其损伤作用呈现出时间依赖性。     

螺旋藻多糖对紫外线诱发的人胚肺二倍体细胞DNA损伤修复的影响

目的：观察螺旋藻多糖（polysaaccharide from Spirulina platensis,PSP)对紫外线诱发的人胚肺二倍体细胞DNA损伤修复的影响。方法：使用单细胞凝胶电泳技术（single cell gel clectrophoresis assay SCGE),检测紫外线（UV）照射30min及照射后30,60,90min各组细胞DNA的损伤情况,以DNA迁移距离（migrate length of DNA,MLD)作为损伤指标。结果PSP能预防UV诱发的DNA损伤,并能促进UV诱发损伤后的DNA修复合成。结论：PSP有增强核酸内切酶和连接酶活性的作用,并且这种作用呈剂量依赖性。     

茶多酚对石英致肺巨噬细胞DNA损伤的保护作用

[目的] 探讨茶多酚对石英致大鼠肺巨噬细胞DNA损伤的保护作用.[方法] 将肺巨噬细胞分成生理盐水、石英、茶多酚及茶多酚+石英组.用单细胞凝胶电泳技术检测肺巨噬细胞彗星率出现和彗星尾长度.[结果] 低、中、高3种剂量的茶多酚+石英组的彗星出现率分别为66%、68%、67%,极显著低于石英组的78%(P<0.01);3种剂量的茶多酚加石英组彗星的尾长分别为12.6±2.2、13.6±1.17、12.9±2.6 μm,与石英组(18.7±2.7) μm 比较,极显著短于对照组(P<0.01).[结论] 茶多酚对石英致大鼠肺巨噬细胞DNA损伤有一定保护作用.     

低剂量甲氨蝶呤对DNA损伤的研究

甲氨蝶呤(methotrexate MTX)是二氢叶酸还原酶抑制剂，近年来低剂量的甲氨蝶呤广泛用于治疗类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)及其他慢性炎症性疾病。关于MTX的抗炎机制及引起不良反应的机制仍不十分清楚，它可部分地解释为对二氢叶酸的拮抗作用，但关于这方面的研究很少。彗星试验(comet assay)     

阿莫西林对人HepG2细胞DNA有短暂损伤作用

目的 为了探讨阿莫西林对人HepG2细胞DNA是否有损伤作用.方法 培养的人HepG2细胞经不同浓度(2、10、50和250μmol/L)阿莫西林处理1h或经50μmol/L阿莫西林处理不同时间(20、40、60、120和180min)后,运用单细胞凝胶电泳(SCGE)技术结合彗星图像软件(CASP)分析细胞尾部DNA百分率(tail DNA%)变化情况.结果 不同浓度阿莫西林处理后结果显示,HepG2细胞尾部DNA百分率明显升高,至50μmol/L阿莫西林时达到最高值,各浓度处理组与不处理对照组相比差异皆有显著性(P<0.01);而同一浓度(50μmol/L)阿莫西林处理不同时间后结果显示,HepG2细胞尾部DNA百分率逐渐升高,至1h处理时间点时达到最高值,其后随着处理时间延长HepG2细胞尾部DNA百分率逐渐降低.结论 阿莫西林对人HepG2细胞DNA有短暂损伤作用,阿莫西林诱发的HepG2细胞DNA损伤可能随时间延长逐渐被HepG2细胞本身修复除去.     

精液标本DNA损伤检测中影响因素的探讨

为探讨一种稳定的单细胞凝胶电泳的试验方法(又称彗星试验)，对110份精液标本按以下因素进行对比分析：①精液标本采集后不同处理、保存方法；②标本采集后不同保存时间；③不同电泳条件。结果表明，精液稀释后4℃放置与原液室温放置后3h、5h的彗星细胞率显著增加，而原液4℃放置对彗星发生率的影响最小(P&;lt;0．01)；电泳时电压与电流对彗星发生率有较明显的影响，当恒压12V不稳流时彗星发生率最低(P&;lt;0．05)；电泳液的碱性pH浓度对彗星发生率有一定影响，但无统计学意义；3种不同盖玻片之间的差异对彗星发生率的影响不大。结论：影响彗星试验结果的因素很多，不同保留时间、方法、电泳条件是最重要的因素，值得重视。     

环磷酰胺衍生物SLXM-2对小鼠肝癌H_（22）细胞的DNA损伤作用

化合物SLXM-2是一种环磷酰胺衍生物,前期研究已经证实其具有良好的肿瘤抑制作用,并具有较低的毒副作用。但是其作用机制尤其是对细胞DNA的损伤作用仍不清楚。本研究旨在评价SLXM-2对肝癌H22腹水小鼠的生命延长作用与DNA损伤的关系,并探讨可能的分子机制。实验结果证实,SLXM-2能够显著提高肝癌H22腹水小鼠的生命延长率（P〈0.05）。进一步实验表明,SLXM-2能够造成肝癌H22细胞DNA损伤,显著上调γH2AX（Ser139）,p-Chk1（Ser296）,p-Chk2（Thr68）,p-p53（Ser15）,p-p53（Ser20）和p21的蛋白表达,并显著下调p-ATR（Ser428）和p-ATM（Ser1981）的表达（P〈0.05）。总之,SLXM-2对肝癌H22细胞具有显著的抑制作用,分子机制与其能够造成肿瘤细胞DNA损伤有关。     

用单细胞凝胶电泳检测砷,汞,铅致DNA损伤的研究

应用ＳＣＧＥ方法体外检测ＮａＡｓＯ２、ＨｇＣｌ２、Ｐｂ（ＮＯ３）２对人外周血淋巴细胞造成的ＤＮＡ损伤。结果表明，ＳＣＧＥ方法非常灵敏，能检测到很低剂量的ＮａＡｓＯ２和ＨｇＣｌ２所引起人外周血淋巴细胞的ＤＮＡ断裂，而且该法还具有快速、花费少等优点，值得推广使用