灵芝破壁与不破壁孢子显微鉴定的制片效果比较

在灵芝孢子粉的显微鉴定中,对水、甘油醋酸、水合氯醛、95％乙醇等4种试剂的制片效果作了比较,总结出灵芝破壁与不破壁孢子显微鉴定的制片技巧,以和同行商榷。1 材料、仪器与试剂 灵芝孢子粉。电子天平(BP2211北京赛多利斯天平有限公司)生物显微镜(GALEN-Ⅲ型南京江南光电(集团)股份有限公司)。蒸馏水、甘油醋酸、水合氯醛、95％乙醇。     

两个厂家灵芝孢子粉质量比较

目的对拟用于医院制剂研发的两个厂家的灵芝孢子粉进行质量比较,为购买优质灵芝孢子粉原料药提供依据。方法依据2010年版《中国药典(一部)》并参考相关文献中有关中药灵芝的检测方法,对北京A厂和山东B厂两厂家灵芝孢子粉的破壁率、水分、灰分、多糖进行比较。结果两厂家供试品的薄层色谱图在波长365 nm处均与灵芝对照药材相同位置有相同颜色的荧光斑点;北京A厂的灵芝孢子破壁率为90%,山东B厂的破壁率为97%,二者含水量、多糖均符合药典规定,但北京A厂灵芝孢子粉的总灰分含量为3.37%,超出药典规定的含量限度。结论山东B厂灵芝孢子粉的质量较优,可作为医院制剂灵芝孢子粉胶囊研制的原料药。     

段木灵芝与代料灵芝的化学成分的研究Ⅱ.主要营养成分、孢子、多肽、油脂成分

目的研究段木灵芝多肽、孢子破壁前后油脂与多糖变化。结果一般化学成分分析中代料灵芝的蛋白质含量14．34％,是段木灵芝的1.6倍,代料灵芝多糖含量高于段木灵芝1～2.6倍。灵芝破壁孢子油脂释放能力是未破壁孢子的5．2倍;破壁孢子的活性成分多糖肽是未破壁孢子多糖肽含量1.69倍。灵芝多糖肽由16种氨基酸组成。从脂肪分析结果来看,灵芝孢子油的饱和脂肪酸含量为23．70％,不饱和脂肪酸为76.20％,对于孢子油是否有应用价值,值得进一步研究。     

蒽酮-硫酸法测定灵芝破壁孢子粉中多糖含量的研究

目的 建立灵芝破壁抱子粉中多糖含量的测定方法。方法 采用紫外分光光度法,检测波长为625nm,用葡萄糖为对照品,测定灵芝破壁抱子粉中多糖含量。结果 不同的提取方法对于多糖的提取率不同。最佳提取方法为沸水浴提取8h。结论 本法稳定可靠,简便快捷,适用于灵芝破壁抱子粉多糖含量测定。     

灵芝孢子胶囊的质量控制

目的:建立灵芝孢子胶囊质量控制方法。方法:采用显微镜鉴别破壁灵芝孢子。采用TLC法鉴别灵芝。利用硫酸-蒽酮显色,采用紫外分光光度法在波长625nm处测定制剂中多糖的含量。结果:显微镜下可明显观察到卵形孢子。TLC色谱可明显鉴别灵芝。灵芝多糖在5.25～31.50μg·ml^-1的浓度范围内线性关系良好,r=0.999 8（n=6）;平均回收率99.07%,RSD=1.08%。结论:定性、定量方法简单、快捷、可靠、准确,可作为该制剂的质量控制。     

灵芝孢子粉破壁率的检验方法研究进展

目的综述近些年来对灵芝孢子粉破壁率检验的具体方法方面的研究进展。方法搜索并阅读大量相关文献,听取相关专家意见,进行分析并作出合理总结归纳。结果灵芝孢子粉破壁率的检测方法可分为血球计数法、水装片结合显微技术法、悬浮法结合物理技术、化学指纹法。结论灵芝孢子粉的药用价值潜力巨大,目前的破壁方法及破壁率检测形式多样,但仍具有发展的空间。     

破壁灵芝孢子质量标准研究

目的:探讨建立破壁灵芝孢子的质量控制方法.方法:采用薄层色谱法,以灵芝对照药材为对照,鉴别破壁灵芝孢子,考察破壁灵芝孢子的含水量、总灰分、色泽均匀度与粒径分布.采用紫外-可见分光光度法测定破壁灵芝孢子三萜类化合物的含量.结果:各检查相方法成熟;供试品色谱中,在与灵芝对照药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点;以紫外-可见分光光度法测定破壁灵芝孢子中三萜类物质(以齐墩果酸(C30H48O3)计)方法简单,可靠.结论:该质量标准的研究为破壁灵芝孢子质量标准的制定以及破壁灵芝孢子三萜类成分的深入研究提供了参考.     

破壁灵芝孢子粉胶囊的TLC鉴别研究

目的研究破壁灵芝孢子粉胶囊的TLC鉴别方法。方法通过对集中提取及展开系统的比较,发现最佳方法。结果对破壁灵芝孢子粉的TLC鉴别应选择用GF254板,用石油醚(60~90℃)∶甲酸乙酯∶甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂。结论该法具有操作步骤简单、分离时间短的优点,而且TLC的鉴别效果很好,也能很好把破壁灵芝孢子粉和灵芝区别开来。     

灵芝孢子粉抗肝纤维化作用的实验研究

目的观察破壁灵芝孢子粉对CCL4诱导的大鼠肝纤维化的影响。方法CCL4诱导大鼠肝纤维化动物模型,观察破壁灵芝孢子粉对大鼠肝纤维化形成过程中转化生长因子β1、金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)表达的影响及肝脏组织学变化。结果破壁灵芝孢子粉明显减少肝脏胶原沉积,可以明显降低TGF-β1．TIMP-1的表达(P<0．05)。结论破壁灵芝孢子粉可通过下调TGF -β1、TIMP-1抑制胶原合成及加强胶原分解,从而抑制肝纤维化形成。     

HPLC-PDA法测定破壁灵芝孢子粉中腺苷含量

目的建立破壁灵芝孢子粉中腺苷含量的测定方法。方法采用LiChrospher RP-C18色谱柱（4.5mm×100mm,5μm）,以甲醇：0.02mol·L^-1乙酸钠溶液=10∶90（V/V）为流动相,以260nm为检测波长。结果测得破壁灵芝孢子粉中腺苷的含量为0.2667mg·g^-1,平均加样回收率为94.80%,RSD为3.31%。结论本方法简便快捷,准确,适用于破壁灵芝孢子粉中腺苷含量的测定。     

粪便中灵芝孢子与肝吸虫卵形态学鉴别

目的 探讨粪便中灵芝抱子形态与肝吸虫卵形态的鉴别要点.方法 将口服灵芝保健品患者粪便用0.9%氯化钠溶液涂片,在显微镜下观察灵芝孢子形态与肝吸虫卵形态,并对两者进行比较.结果 粪便中灵芝抱子与肝吸虫卵形态上有很多相近之处,但两者还是有各自的特征.结论 在实际工作中,粪便检查查到大量肝吸虫卵样物质时,应掌握两者的形态学特征,询问病史,结合临床,可以通过显微镜下形态学特征鉴别粪便中灵芝孢子与肝吸虫卵.     

灵芝孢子粉对癫痫大鼠皮质和海马区NMDAR1免疫反应影响的研究

目的:观察灵芝孢子粉对癫痫大鼠模型皮质和海马区NMDAR1含量及神经元形态学的影响,探索癫痫发病机制以及灵芝孢子粉对癫痫的干预作用.方法:采用戊四氮(PTZ)腹腔注射制作Wistar大鼠慢性点燃模型,并将其分为空白对照组、癫痫模型组和灵芝孢子粉干预组,点燃后断头取脑,行免疫组化染色观察NMDAR1含量的变化及神经元形态学的改变.结果:所有大鼠均达到癫痫模型点燃标准.使用灵芝孢子粉的中药干预组与癫痫模型组相比,脑内NMDAR1含量明显下降(P<0.05),同时神经元形态学改变明显好转.结论:灵芝孢子粉能够有效降低皮质和海马区兴奋性氨基酸受体NMDAR1的含量,使神经元兴奋性减弱,抑制癫痫的发作,从而减轻癫痫发作给神经系统带来的损伤, 以达到抗癫痫作用.所以灵芝孢子粉可能具有减轻痫性发作、保护神经元的作用.     

灵芝孢子粉多糖Lzps-1的化学研究及其总多糖的抗肿瘤活性

目的研究微波软化灵芝孢子粉中的多糖组分及其抗肿瘤活性。方法用水提取微波软化灵芝孢子粉总多糖，总多糖经分级沉淀得到多糖组分Lzps-C，再采用DEAE-cellulose和Sephadex G-50柱色谱进行分离纯化，用化学和光谱方法分析其结构。结果从微波软化灵芝孢子粉的水提物中分得一个多糖Lzps-1，其平均分子量为8 000，为葡聚糖。微波软化灵芝孢子粉的水提物得到的总多糖Lzps对小鼠Lewis肺癌、小鼠S₁₈₀肉瘤有较好的抑制作用，并能明显提高荷Lewis肺癌小鼠NK活性。结论Lzps-1是首次从灵芝孢子粉中分离得到。Lzps具有抗癌活性。     

Comparison of the antitumor activity on spore polysaccharides （G／-SP） and broken spore polysaccharides （Gl-BSP） isolated from Ganoderma lucidum

AIM: To compare the antitumor activity of spore polysaccharides (GI-SP) and broken spore polysaccharides (GI-BSP) from spores of Ganoderma lucidum (Leyss ex fr) Karst. METHODS: BALB/c mice were implanted with Sarcoma 180 and administered intragastrically with Gl-SP or G/-BPS (50, 100, 200 mg/kg)respectively for 14 d. At the end of experiment, the tumor were removed and weighted. At the same time, spleens of tumorbearing mice were prepared to observe the effect of Gl-SP and     

赤芝多糖肽GL-PP-3A的分离纯化和结构研究

分离纯化赤芝多糖肽，得到具有活性部位GL-PP-3A，对其进行结构分析。水提醇沉透析得赤芝多糖肽，经分级沉淀，Bio-Gel P-10柱色谱纯化得GL-PP-3A。经HPGPC、糖基组成、甲基化分析、 ¹H NMR和 ¹³C NMR等方法研究分析GL-PP-3A的结构。GL-PP-3A是以葡萄糖为主的杂多糖，含Rha、Xyl、Man、Gal、Glc糖残基和17种氨基酸。其M_w为1.7×10⁴；M_n为1.1×10⁴；M_w/M_n为1.49。M_p为1.3×10⁴。该多糖主链由1,6-或1,3-连接的β-D-Glcp构成，二者的比例约为2∶1，在部分1,6-连接的主链葡萄糖的2或3位有分支，分支的非还原末端均主要为β-D-Glcp,少量为鼠李糖，分支内部含有1～3个1,6-连接的β-D-Galp或1,3-连接的α-D-Manp。     

HPLC指纹图谱结合系统聚类分析法对灵芝孢子油质量的研究

目的:建立灵芝孢子油的高效液相色谱指纹图谱,并结合聚类分析法初步考察不同采收时间、产地及破壁工艺对灵芝孢子油质量的影响。方法:采用反相高效液相色谱法测定灵芝孢子油中甘油三油酸酯的含量,色谱柱为LiChrospher RP-18e(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-异丙醇(梯度洗脱),蒸发光散射检测器检测。采用系统聚类法对灵芝孢子油样品色谱中各特征峰的相对峰面积进行分析。结果:系统聚类法将供试品分成两大类,其中采收时间及破壁工艺对灵芝孢子油的质量影响明显,产地影响则不明显。结论:该方法能较好地为灵芝孢子油的质量评估提供有益的信息。     

灵芝孢子对雄性糖尿病大鼠睾丸AGEs的影响

目的：观察灵芝孢子对雄性糖尿病大鼠睾丸AGEs的影响。方法：Wistar雄性大鼠50只,随机分成3组,应用链尿佐菌素（STZ）加高脂高糖饮食制备Ⅱ型糖尿病模型．灵芝组同时给予灵芝孢子粉,12周后检测睾丸组织AGEs变化。结果：Ⅱ型糖尿病模型制备成功,模型组睾丸组织AGEs显著高于正常组和灵芝组（P〈0．05）。结论：在糖尿病睾丸组织损伤中AGEs也是其中的因素。灵芝孢子粉对糖尿病大鼠睾丸组织具有保护作用。