肝纤维化病证结合模型的研制

目的:制备客观、公认的肝纤维化病证结合模型.方法:分别设立正常对照组、单纯肝纤维化组、肝纤维化肝郁脾虚证组和气虚血瘀证组,各模型组先用CCl4注射法复制肝硬化疾病模型,然后肝郁脾虚证组附加夹尾和大黄灌胃法、气虚血瘀证组附加游泳疲劳法,并以相应药物干预以反证模型制备的成功.对各组大鼠进行一般情况和肝组织病理观察.结果:各模型组均出现一般情况较差;病理检查示不同程度肝纤维化表现;肝郁脾虚证组和气虚血瘀证组均出现相应的中医证候表现.结论:按本实验方法复制的肝纤维化病证结合模型既符合肝纤维化病理特征,又能体现中医不同证候特点.     

肝纤维化大鼠肝郁病证结合模型的建立与评价

目的 通过构建肝纤维化大鼠肝郁病证结合的模型,为相关研究提供模型参考依据和临床治疗提供诊疗思路.方法 将30只SD大鼠随机分成2组,即空白组和模型组,每组15只.模型组大鼠每天定期皮下注射四氯化碳(carbon tetrachloride,CCL4)+橄榄油,自第5周起每日加用夹尾进行刺激,每次30min,3次/天;空...     

从虚论治肝纤维化相关方剂的现代药理作用研究进展

肝纤维化表现为炎症细胞浸润、肝星状细胞激活、细胞外基质沉积及瘢痕组织形成，是各类慢性肝病向各类终末期肝病转变的关键病理过程。近年来，中医药被证明在防治肝纤维化方面成果突出，中医学对肝纤维化具有极富特色的诊疗理念，认为肝纤维化基本证候病机中“虚损”为其根本，并集中表现为气虚络瘀、肝郁脾虚和肝肾阴虚等证型，通过对以上3种常见肝纤维化证型总结相应常用效验方剂的临床及药理学研究进展，归纳其调控肝星状细胞命运、调节胆汁酸代谢、促进细胞外基质降解、抑制肝窦内皮血管化等潜在作用机制，为临床防治肝纤维化提供新思路。     

肝纤宁颗粒对CCI4所致大鼠肝纤维化模型的影响

肝纤宁颗粒是治疗慢性乙型肝炎肝纤维化的中药新药，具有舒肝活血、健脾祛湿作用，临床用于肝郁血瘀兼脾虚湿滞型乙型肝炎肝纤维化。本实验采用四氯化碳(CCI4)损伤性肝纤维化模型，探讨肝纤宁颗粒防治肝纤维化的作用机理。     

抗纤方抗肝纤维化模型大鼠肝纤维化的实验研究

目的探讨抗纤方阻断肝纤维化的作用机理．力法用ＣＣｌ_４造模后灌服药物,对照观察抗纤方与秋水仙碱。大黄■虫丸组等的不同作用结果各组谷雨转氨酶均较空模组为低（ Ｐ ＜ ０． ０１）,,而血清蛋白较空模组副 （Ｐ ＜ ０． ０１）抗纤方大、中剂量组 ＨｙＰ含量较空模组低（Ｐ ＜ ０． ０５）;光镜显示：抗纤方组肝内纤维组织增生和肝细胞变性坏死程度明显减轻;电镜结果显示：抗纤方组胶原纤维生成较少结论抗纤方能促进肝细胞修复、恢复肝脏正常功能、改善微循环、促进胶原纤维降解,以达到抗肝纤维化的作用     

肝纤维化不同证型与TGF-β_1/Smad基因蛋白表达关系的实验研究

目的:观察肝纤维化不同证型与TGF-β1/Smad基因蛋白的关系。方法:分别设立正常对照组、单纯肝纤维化组、肝纤维化肝郁脾虚证组和气虚血瘀证组,各模型组先用CCl4注射法复制肝硬化疾病模型,然后肝郁脾虚证组附加夹尾和大黄灌胃法、气虚血瘀证组附加游泳疲劳法,并以相应药物干预。采用免疫组化法测定肝组织TGF-β1、TβR-Ⅰ、Smad2/3及Smad7水平,用比色法测定肝组织Smad3 mRNA。结果:TGF-β1、TβR-Ⅰ、Smad2/3和Smad7在模型对照组中表达明显增强,以肝纤维化气虚血瘀组最为显著,肝纤维化肝郁脾虚组和单纯肝纤维化组的表达面积和强度相似。各模型组Smad3 mRNA呈上调表达,差异均具有十分显著的意义(P0.01),以气虚血瘀组升高最明显,单纯肝纤维化组与肝郁脾虚组比较差异无显著性意义。结论:TGF-β1/Smad信号转导通路参与了肝纤维化的发生发展,肝纤维化不同证型之间TGF-β1/Smad基因蛋白表达有差异。     

肝纤维化不同证型与基质金属蛋白酶及其抑制因子表达的关系

目的 观察肝纤维化不同证型与基质金属蛋白酶(MMPs)及其抑制因子的关系.方法 清洁级雄性SD大鼠140只,依随机数字表法分为4组:正常对照组20只、单纯肝纤维化组30只、肝纤维化肝郁脾虚证组、肝纤维化气虚血瘀证组各45只.各模型组先用四氯化碳注射法复制肝硬化疾病模型,然后肝郁脾虚证组附加夹尾和大黄灌胃法、气虚血瘀证组附加游泳疲劳法,并以相应药物干预.采用免疫组化法测定肝组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和金属蛋白酶抑制剂2(TIMP-2)水平.结果 各模型组肝组织中MMP-2、MMP-9和TIMP-2均较正常组明显升高(P<0.01或P<0.05),以气虚血瘀组最为明显.结论 基质金属蛋白酶及其抑制因子与肝纤维化密切相关,在不同中医证型中表达有差异,可作为肝纤维化中医辨证分型及疗效评价的指标之一.     

疗肝3号对慢性乙型肝炎肝郁脾虚证患者抗肝纤维化疗效观察

目的:观察疗肝3号对慢性乙型肝炎肝郁脾虚证患者肝纤维化与肝功能生化指标的影响。方法:将120例慢性乙型肝炎肝纤维化患者随机分为实验组和对照组,各60例。对照组采用西医基础治疗,实验组在此基础上加用疗肝3号。分别治疗6个月后观察临床疗效、肝纤维化指标及肝功能变化情况,利用统计软件统计分析。结果:实验组在改善肝功能及临床疗效方面优于对照组(P<0.05),实验组血清透明质酸酶(HA)、血清型前胶原肽(PⅢP)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)比对照组降低更明显,具有显著性差异(P<0.05),层粘连蛋白(LN)两组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:疗肝3号具有改善肝功能和抗肝纤维化的作用。     

软肝汤联合拉米夫定对慢性乙型肝炎肝纤维化的影响

目的:观察软肝汤抗肝纤维化的疗效。方法:60例慢性乙型肝炎肝纤维化患者,随机分为自拟软肝汤治疗组30例,拉米夫定对照组30例,观察治疗前后两组患者肝功能、肝纤维化指标及B超影象学的变化。结果:治疗组临床总有效率88.9%,对照组63.8%,两组比较有显著性差异(P<0.05),治疗组和对照组均能显著改善临床症状,降低纤维化程度,改善肝功能及影像学指标(P<0.05),但治疗组在肝纤维化指标及肝功能的改善程度较对照组为优(P<0.05)。结论:软肝汤具有良好的抗肝纤维化疗效。     

胆总管结扎术造大鼠肝纤维化模型的研究

目的建立并研究胆总管结扎术造大鼠肝纤维模型的方法。方法 Wista大鼠60只,随机分成假手术组30只和手术组30只,采用胆总管结扎导致胆管阻塞,建立胆管阻塞性肝纤维化模型,分别于术后第5,10,14天将对照组与模型组随机处死10只。分别检测血清学指标,取肝组织做HE染色。结果模型组大鼠体质量均增加,对照组大鼠体质量均降低,肝脾指数明显升高,5天时LN与对照组比较差异有显著性(P<0.01),第10,14天LN、HA与对照组比较差异有显著性(P<0.01),第14天CIV与对照组比较差异有显著性(P<0.01)。模型3组TBIL(μmol/L),DBIL(μmol/L),IBIL(μmol/L)与对照组比较差异差异有显著性(P<0.05)。10天TCHO与对照组比较差异差异有显著性(P<0.05)。AST、ALT均显著升高,模型3组与对照组比较差异有显著性(P<0.05)。HE染色可见同对照组相比,在第5天,模型组的大鼠全部都处于肝纤维化Ⅰ和Ⅱ期阶段;在第10天,模型组的大鼠大部分已经处于肝纤维化Ⅲ期阶段;在第14天,模型组大鼠大部分处于肝纤维化Ⅲ期阶段,一部分处于Ⅳ期阶段。结论胆管阻塞性肝纤维化模型造模周期短,2周左右,自发逆转程度低,肝纤维化形成稳定。     

加味鳖甲煎丸对白蛋白所致免疫性肝纤维化大鼠病理模型的影响

目的　对加味鳖甲煎丸对白蛋白所致免疫性肝纤维化大鼠的病理和病变程度进行定量分析。     

二甲基亚硝胺大鼠肝纤维化中医方证研究

目的：探讨二甲基亚硝胺（DMN）大鼠肝纤维化的中医方证。方法：腹腔注射法制备DMN大鼠肝纤维化模型，分别采用5首不同功效的经典方治疗两周，观察各组大鼠肝组织病理学、羟脯氨酸（Hyp）含量及肝功能变化。结果：造模4周后大鼠形成典型小结节性肝硬化，6周后模型组大鼠肝组织损伤较4周时有所缓解。与6周模型组相比，茵陈蒿汤组大鼠肝组织病理变化、Hyp含量及肝功能均显著改善（P〈0．05或P〈0．01）；黄芪汤组大鼠肝组织病理变化、Hyp古量亦显著改善（P〈0．05或P〈0．01）。结论：茵陈蒿汤、黄芪汤能够有效逆转DMN大鼠肝纤维化，成型期DMN肝纤维化大鼠的主要中医方证为湿热、瘀热内蕴兼气虚。     

复肝宁对实验性肝纤维化大鼠血清标志物和肝组织病理形态学的影响

目的:观察中药复肝宁对实验性肝纤维化的预防效果,探讨其作用机理。方法:采用猪血清腹腔注射法造成大鼠免疫性肝纤维化模型,观察复肝宁对实验性肝纤维化大鼠肝纤维化血清标志物透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CIV)含量及病理形态学的影响。结果:肝纤维化大鼠在应用复肝宁后,血清HA,LN,CIV含量明显降低,肝组织病理损害明显减轻,胶原纤维明显减少,肝细胞坏死明显减轻,与病理模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:复肝宁能有效地防止免疫性肝纤维化模型大鼠血清HA,LN,CIV含量的升高,减轻肝组织病理损害,可抑制肝纤维化形成,促进胶原降解,从而对肝纤维化具有一定的预防作用。     

慢性萎缩性胃炎病证结合模型大鼠肝组织病理及功能变化＊

目的 探讨慢性萎缩性胃炎（CAG）病证结合大鼠肝组织病理及功能变化特征。方法 以雄性Wistar大鼠为实验材料，采用“四因素”综合造模法制备CAG病证结合大鼠模型。用实验动物证候综合评价量表分别采集造模第28周和40周大鼠的证候要素，同时抽检大鼠血清AST、ALT水平和肝组织病理变化。肝组织病理检测方法 冰冻切片经常规过碘酸-Schiff染色和硝基蓝四氮唑染色，分别显示肝细胞内糖原和琥珀酸脱氢酶（SDH）的分布；石蜡切片经HE染色观察肝组织病理学改变；超薄切片用透射电镜观察肝细胞超微结构的变化。结果 造模28周，CAG大鼠表现为脾气虚证型；造模40周，CAG大鼠出现脾虚为主、兼有血瘀的证型。与正常组比较，造模28周大鼠血清ALT和AST水平显著增高，差异有统计学意义（P＜0.05）；造模40周，大鼠血清ALT水平仍显著增高（P＜0.05），而AST水平变化不显著（P＞0.05）。组织病理学观察：造模28周时，肝细胞索排列紊乱，肝细胞肿胀；肝组织呈现斑状糖原缺失区，中央静脉周围肝细胞的SDH含量显著减少；透射电镜下，肝细胞内线粒体肿胀、变形，内质网减少，糖原颗粒减少，胞质内出现空泡样改变。造模40周，肝细胞萎缩，肝血窦变小，炎性细胞数量增多；肝组织糖原缺失区显著扩大，肝小叶大部分呈现SDH含量减少的趋势；透射电镜下，肝细胞内线粒体肿胀、膨大、数量显著减少，内质网显著减少，糖原颗粒数量显著减少。结论 CAG“四因素”综合造模法能成功制备CAG病证结合大鼠模型，且大鼠肝脏功能和组织病理均有显著变化，具体表现为：转氨酶水平增高，肝糖原合成、储备减弱，线粒体肿胀、数量减少、氧化磷酸化功能减弱。     

酒精性肝纤维化中医症状和证候特点的研究

酒精性肝纤维化是国内外酒精性肝病研究的重点,中医药防治酒精性肝纤维化有一定的优势,对"证"的研究也是当今中医研究的热点。采用临床流行病学的原则和方法,全面地收集酒精性肝纤维化患者的中医四诊资料和相关临床检查数据,从数理统计角度探讨酒精性肝纤维化临床中医证候的特点以及中医病机特点。     

养肝胶囊对大鼠肝纤维化的实验研究

目的：探讨养肝胶囊对大鼠抗肝纤维化的作用。方法：大鼠采用皮下注射加营养不良和乙醇饮用,造成肝纤维化模型,观察养肝胶囊对其肝指数和肝羟脯氨酸含量的影响。结果：养肝胶囊可明显减轻四氯化碳皮下注射加营养不良和饮用乙醇所致大鼠肝纤维化模型的肝指数、肝羟脯氨酸含量。结论：养肝胶囊明显减轻肝组织损伤程度,减轻肝脏纤维化及脂肪样变程度。     

加味膈下逐瘀汤对肝纤维化模型大鼠肝功能及纤维化指标的影响

目的:研究加味膈下逐瘀汤抗肝纤维化的效果及作用机制。方法:将大鼠分为正常组、模型组、秋水仙碱组及加味膈下逐瘀汤组,每组10只。秋水仙碱组按1 mg/kg药量给予秋水仙碱,加味膈下逐瘀汤组按生药量8.2 g/kg灌胃,正常组及模型组分别给予相同体积生理盐水。考察各组肝脏指数、血清肝功能和肝纤维化指标,并进行HE染色,观察肝组织病理改变。结果:与模型组比较,加味膈下逐瘀汤组大鼠肝纤维化明显改善,肝脏指数降低,丙氨酸氨基转移酶(ALT)、门冬氨酸氨基转移酶(AST)、层粘连蛋白(LN)和透明质酸(HA)水平降低,清蛋白(ALB)和总蛋白(TP)含量升高,差异有统计学意义(P0.05);组织病理学结果显示,加味膈下逐瘀汤能明显改善肝脏病理损伤程度。结论:加味膈下逐瘀汤能有效减轻肝纤维模型大鼠的肝脏损伤,降低肝纤维化程度。     

肝纤维化的中医药治疗及其特点

中医药抗肝纤维化的实验研究始于20世纪70年代末,如韩经寰的强肝软坚汤研究。此后有桃仁提取物、桃仁提取物合虫草菌丝、丹参、汉防己甲素等研究。20世纪80年代末,有关中药复方的研究逐渐兴起。近10年来,在不断涌现新组方、新组分抗肝纤维化有效的报道同时,部分研究逐步深入到从细胞、分子水平以阐述中医药抗肝纤维化的机制和复方配伍原理,以及大样本、多中心、随机双盲对照的临床研究。目前已有抗肝纤维化国家新药服务于临床。根据CBMdisc收录的有关中医药抗肝纤维化的文献,七五期间仅有6篇,八五期间76篇,九五期间473篇,十五期间前4年即达787篇,其发展之快,由此可见一斑。     

十二味穿甲片对大鼠免疫性肝纤维化模型的影响

目的:研究十二味穿甲片对大鼠免疫性肝纤维化模型的影响,并探讨其相关的作用机制。方法:将雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,阳性药组(秋水仙碱,0.1 mg·kg-1),中药十二味穿甲片2.8,1.4,0.7 g·kg-1剂量组。除正常组外,其余各组采用猪血清制备大鼠免疫性肝纤维化模型,造模同时给药进行抗肝纤维化干预,共6周。通过计算体重、肝脏指数,检测肝功能丙氨酸转氨酶(ALT),天冬氨酸转氨酶(AST),总蛋白(TP),白蛋白(ALB),球蛋白(GLO)水平和白球比(A/G),酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清透明质酸(HA)含量。苏木素-伊红(HE)染色以观察肝组织病理变化及马松(Masson)三色染色观察胶原纤维增生情况,评价药物的抗纤维化作用。结果:与正常组比较,模型组大鼠血清ALT,HA水平明显升高,肝指数明显升高(P0.01),ALB,A/G明显降低(P0.01),模型组肝组织的病变较明显;与模型组比较,十二味穿甲片除对血清AST,GLO的变化无明显影响外,能够显著降低肝纤维化大鼠血清ALT和纤维化指标HA水平(P0.01),不同程度地升高血清TP,ALB和A/G,并能显著地减轻肝组织的病变,尤以十二味穿甲片2.8 g·kg-1剂量效果最显著。结论:十二味穿甲片可明显改善模型大鼠肝纤维化程度,显示出一定的抗肝纤维化作用。     

针刺足三里穴对肝纤维化大鼠模型的影响

目的研究针刺足三里穴对实验大鼠肝纤维化的防治作用,并探讨其可能的机制。方法应用猪血清腹腔注射法诱导大鼠实验性肝纤维化,以针刺足三里穴防治。观察对照组、模型组、自然恢复组、针刺组、秋水仙碱组血清谷丙转氨酶(ALT)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)含量的变化。结果针刺足三里穴能显著减轻实验大鼠肝细胞损伤,降低HA、PCⅢ含量。结论针刺足三里穴可有效减轻肝细胞损伤,改善肝功能,降低肝纤维化程度。