蕨麻正丁醇部位对EAHY926内皮细胞缺氧损伤的保护作用

【目的】探讨蕨麻正丁醇部位对内皮细胞缺氧损伤的保护作用。【方法】采用人脐静脉内皮细胞株(EAHY926)建立缺氧损伤实验模型,通过MTT法测定各实验组细胞代谢率;比色法测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和NO浓度;放射免疫法测定内皮素-1(endothelin-1,ET-1)的活性。【结果】3.00 mg/ml、1.50 mg/ml和0.75 mg/ml蕨麻正丁醇部位均能显著减少缺氧损伤内皮细胞LDH的外漏量,并可显著提高细胞内SOD活性,增加NO分泌、减少ET-1的生成。【结论】蕨麻正丁醇部位对内皮细胞缺氧损伤具有显著的保护作用,其机制之一可能是清除缺氧导致的内皮细胞自由基堆积,减少ET-1的释放,增加NO分泌,从而减轻内皮细胞损伤。     

槲皮素对培养入脐静脉内皮细胞在缺氧条件下ET-1和NO水平的影响

目的研究槲皮素在缺氧条件下对血管内皮细胞的保护作用。方法体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)，缺氧造成内皮细胞损伤，通过放免法和比色法测定培养上清中ET-1、NO的水平。结果HUVEC缺氧48h后，NO含量下降，而ET-1含量明显增加，如在缺氧前用不同浓度槲皮素(10、20、40、80μmol／L)与HUVEC预孵48h，则可对抗缺氧引起的ET-1和NO水平的改变。结论槲皮素能分别提高和降低血管内皮细胞在缺氧时ET-1和NO的水平，可能因此而产生保护作用。     

缺氧时心肌血流量的变化及一氧化氮和内皮素-1的调节作用

目的 探讨一氧化氮和内皮素-1在缺氧时对心肌血流量的调节作用.方法 大鼠随机分为平原组和急性缺氧组,用99mTc标记蟾蜍红细胞测定心肌血流量,用Gess法和放免法分别测量血浆和心肌NO2-、内皮素-1(endothelin-1,ET-1)含量,用双波长分光光度法测量一氧化氮氧合酶(nitric oxide synthase,NOS)活性.结果 急性缺氧导致左右心室心肌血流量、血浆和心肌血NO-2、ET-1含量、NOS活性明显增高(P＜0.05),左右心室心肌血管阻力和心肌ET-1/NO-2-比值明显下降(P＜0.05),血球压积(Hct)及心室重量指数无明显变化.结论 急性缺氧时,左右心室心肌血流量增加,ET-1/NO参与了急性缺氧时心肌血流量的调节,以NO的扩血管作用为主.     

模拟飞行对内皮细胞损伤机制研究

目的 探讨模拟飞行对主动脉内皮细胞损伤的影响机制.方法 将16只雄性新西兰白兔随机分为对照组和模型组.模拟飞行内皮细胞模型由离心机训练建立.ELISA法检测细胞悬液血红素氧化酶-1(HO-1)及内皮素-1(ET-1)含量;测定细胞悬液丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD).结果 与空白对照组相比,模拟飞行组的主动脉内皮细胞SOD活性显著降低(P＜0.05);MDA含量显著增加(P＜0.05).与空白对照组相比,模拟飞行组的主动脉内皮细胞HO-1含量增高(P＜0.05);ET含量显著增加(P＜0.05).结论 模拟飞行可能通过氧化应激及释放血管活性物质ET-1,诱导内皮细胞损伤;而HO-1可能起到自我保护作用.     

缺氧大鼠血管内皮功能的变化及通心络超微粉的干预作用

目的观察缺氧大鼠血管内皮功能的变化及通心络超微粉的干预作用。方法50只大鼠随机分为空白对照组、缺氧模型组、通心络大剂量组、通心络中剂量组和通心络小剂量组。缺氧模型组与通心络组大鼠灌胃后置于常压低氧舱内,每天7h,每周6d,共计5周。实验结束后检测大鼠动脉血气分析,HE染色观察大鼠胸主动脉的形态学改变,透射电镜观察主动脉内皮细胞超微结构的改变,放射免疫均相竞争法检测大鼠血浆内皮素(ET)含量,硝酸酶还原法检测大鼠血清一氧化氮(NO)含量,双抗夹心ELISA法测定大鼠血浆血管性假血友病因子(vWF)的含量。结果与空白对照组比较,缺氧模型组大鼠动脉血PaO2显著降低(P<0.05);血浆ET-1与血清vWF水平显著升高,血清NO水平显著下降,差异均有统计学意义(P<0.01);通心络超微粉可明显升高血氧分压(P<0.05),降低血浆ET-1与血清vWF水平(P<0.05),升高血清NO水平(P<0.01)。光镜下可见缺氧模型组大鼠胸主动脉结构改变明显,透射电镜下主动脉内皮细胞超微结构明显改变,而通心络组病变减轻。结论缺氧可造成大鼠血管内皮结构破坏和功能损伤,通心络超微粉对缺氧引起的血管内皮结构破坏和功能损伤具有明显改善作用。     

急性肺栓塞溶栓治疗中ET-1和NO的动态变化及葛根素的干预作用

目的研究急性肺栓塞溶栓治疗中内皮素-1(ET-1)和一氧化氮(NO)的动态变化及葛根素的干预作用。方法日本大耳白兔21只,随机分为假手术组(A组)、溶栓组(B组)、溶栓+葛根素组(C组)。自体血栓经右心导管注入,制备兔急性肺栓塞模型。心导管法监测肺动脉压,各组在栓塞前、栓塞后2h、溶栓后2h、4h检测血浆中ET-1和NO含量;光镜、电镜观察肺组织病理。结果在溶栓开始后1h,B组和C组肺动脉平均压(mPAP)即显著下降(P<0.01),且C组mPAP明显低于B组(P<0.05);在栓塞后2h、溶栓后2h、4h,B组和C组血浆ET-1含量均明显高于栓塞前(P<0.05,P<0.01),而NO含量明显低于栓塞前(P<0.05,P<0.01);与B组同期比较,C组在溶栓后2h、4h血浆ET-1和NO含量分别有明显下降和升高(P<0.05,P<0.01)。组织病理显示,C组肺组织结构破坏减轻,血管内皮细胞和肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤较B组明显减轻。结论葛根素可有效提高急性肺栓塞溶栓后血浆中NO含量和减低ET-1含量,有内皮保护作用,对溶栓治疗后再灌注损伤有保护作用。     

吡格列酮对血管内皮细胞一氧化氮和内皮素分泌的影响

目的观察吡格列酮(Pio)对血管内皮细胞一氧化氮(NO)和内皮素1(ET-1)分泌的影响。方法不同浓度Pio处理体外培养的血管内皮细胞(ECV304)72 h,硝酸还原酶法和放射免疫法测定细胞上清液内NO和ET-1水平。结果(1×10-8~1×10-5)mmol/L Pio可显著促进ECV304细胞NO的释放和抑制其ET-1分泌,作用呈浓度依赖性。结论Pio可促进血管内皮细胞NO释放和抑制其ET-1分泌,这可能是Pio血管保护作用的机制之一。     

PPAR-γ激动剂对AngⅡ刺激血管内皮细胞分泌血管活性因子的影响

目的 探讨过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)激动剂对AngⅡ刺激血管内皮细胞分泌血管活性因子的影响,并与AngⅡⅠ型受体(AT1R)拮抗剂losartan相对照,即从细胞水平进一步揭示PPARγ与高血压病的关系.方法 以脐静脉内皮细胞为研究对象,观察PPARγ激动troglitazone对内皮细胞分泌内皮素-1(ET-1)和NO的影响,及其对AngⅡ刺激内皮细胞分泌ET-1和NO的影响,并与losartan相对照.结果 10 μmol/L和50μmol/L troglitazone使人脐静脉内皮细胞分泌ET-1含量与对照组相比虽有下降但无统计学意义,而NO与对照组相比明显升高(P＜0.05);50μmol/L troglitazone可明显抑制AngⅡ(1×10-6 mol/L)刺激的ET的分泌(P＜0.05);两种浓度troglitazone均能抑制AngⅡ对内皮细胞生成NO的减低作用(P＜0.05);losartan抑制AngⅡ刺激内皮细胞合成和分泌ET-1增加和抑制AngⅡ减弱内皮细胞合成和分泌NO的作用比troglitazone更为明显(P＜0.05).结论 PPARγ激动剂troglitazone可抑制AngⅡ刺激内皮细胞合成和分泌ET-1的增加和NO的减少,但其作用并没有losartan明显,提示troglitazone通过影响血管活性因子的分泌而调节血压的作用并非完全是通过AT1R途径.     

阿魏酸钠对缺氧致脑血管内皮细胞NF-κB、IκBα表达的影响

目的 研究阿魏酸钠对缺氧脑血管内皮细胞核转录因子κB(nuclear factor-κB, NF-κB)及IκBα表达的影响.方法 建立大鼠脑皮质微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cell, BMEC)体外培养模型,并施加12 h缺氧条件,分为对照组、缺氧组、阿魏酸钠组.应用MTT法测定细胞活性,采用放射免疫方法测定内皮素(endothelin-1, ET-1)含量,采用免疫细胞化学法检测BMEC的NF-κB及IκBα表达.结果 阿魏酸钠(100 μg/ml)能抑制缺氧诱导的ET-1释放(P<0.01).缺氧刺激血管内皮细胞NF-κB的表达,降低IκBα的表达,阿魏酸钠可以显著抑制缺氧内皮细胞中NF-κB的表达及核移位现象,增加IκBα的表达和BMEC活性.结论 阿魏酸钠对大鼠脑皮质BMEC缺氧损伤具有保护作用,机制与其减少BMEC分泌ET-1,抑制NF-κB蛋白表达,促进IκBα蛋白表达有关.     

丹参酮ⅡA对EVC304细胞血管舒缩因子的影响

[目的]探讨丹参酮ⅡA对血管内皮细胞分泌的血管舒缩因子的影响,以阐明其抗动脉粥样硬化作用及机制。[方法]通过建立肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的人脐静脉内皮细胞株(EVC-304)细胞损伤模型,以抗氧化剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(PDTC)做为西药对照,采用放射免疫方法及硝酸还原酶法检测丹参酮ⅡA对EVC-304细胞培养液中血管舒缩因子的含量。[结果]丹参酮ⅡA能升高EVC304细胞培养液中舒血管因子一氧化氮(NO)的含量(P<0.05),降低缩血管因子内皮素(ET-1)和血栓素A2(TXA2)的含量(P<0.05或P<0.01);而对舒血管因子中前列环素(PGI2)的含量无明显影响(P>0.05)。[结论]丹参酮ⅡA可通过降低缩血管因子ET-1、TXA2的含量,增加舒血管因子NO的含量发挥其抗动脉粥样硬化作用。     

蒲黄单体对内皮细胞的保护作用：形态学研究

体外培养血管内皮细胞。模拟体内纤维蛋白予以损伤,并给予中药蒲黄单体以观察其对内皮细胞的保护作用,实验借助扫描电镜观察内皮细胞形态变化。结果表明:(1)内皮细胞与纤维蛋白接触48小时后,细胞明显皱缩,多数细胞脱落或解体;(2)同时加入蒲黄单体组,细胞损伤明显减轻,脱落减少,多数细胞排列规则,形态正常,尤以单体Y_4的保护作用更显著;(3)血管平滑肌细胞在同样纤维蛋白作用条件下,其形态无明显改变。     

重组血管基膜衍生多功能肽对内皮细胞信号蛋白磷酸化水平的影响

目的:研究重组血管基膜衍生多功能肽(rVMBDMP)对人脐静脉内皮细胞(HUVE-12)信号蛋白磷酸化水平的影响。方法:体外培养HUVE-12细胞,C57/BL6小鼠皮下基质胶填塞法观察HUVE-12细胞体内管状结构形成;高通量蛋白磷酸化芯片研究rVBMDMP对HUVE-12细胞信号蛋白磷酸化水平改变。结果:C57/BL6小鼠皮下基质胶填塞法证实:rVBMDMP(1.0,10.0μmol/L)能有效抑制血管内皮生长因子激活的内皮细胞体内管状结构形成。蛋白磷酸化芯片检测结果显示:rVBM-DMP(1.0μmol/L)处理HUVE-12细胞后,死亡信号蛋白(caspase-3,death receptor 3,4,5)和整合素亚单位(integrinαv,β1,β3)磷酸化蛋白较对照组增高2倍以上,而EGFR,pEGFR,VEGFR-1和Survivin磷酸化蛋白较对照组降低50%以下。结论:rVBMDMP可能通过抑制血管内皮生长因子激活的内皮细胞生长和诱导凋亡发挥抗血管生成效应。     

妊娠相关血清蛋白-A对内皮细胞生理功能的影响

目的：观察妊娠相关血清蛋白-A（PAPP-A）在体外对内皮细胞生理功能的影响。方法：体外培养人脐静脉内皮细胞株(HUVEC),随机分为4组。分别给予不同浓度(0,50,100及200ng/mL)的PAPP-A刺激,于0,12,24和48 h收集上清液和细胞,用硝酸还原酶法测定一氧化氮（NO）的浓度,用免疫组织化学法测定内皮素-1（ET-1）的表达。结果：在不同的时间点,随着PAPP-A浓度的增加,上清液NO的浓度逐渐降低,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)。随着PAPP-A浓度的增加,ET-1的表达呈浓度依赖性增加,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论：PAPP-A可能通过减少内皮细胞NO的分泌,上调ET-1的表达来影响内皮细胞的功能。     

1, 25-二羟维生素D3对软脂酸诱导的胰岛素抵抗血管内皮细胞功能的影响

目的：探讨1, 25-二羟维生素D3[1, 25(OH)2D3]对软脂酸（PA）诱导的人脐静脉内皮细胞（HUVECs） 的胰岛素抵抗的影响及其可能作用机制。方法：用含0.3、0.4、0.5、0.6、0.7、0.8、0.9mmol/LPA 的DMEM培养基培养HUVECs,建立胰岛素抵抗内皮细胞模型。分别用0、0.01、0.1、1.0、10、100nmol/ L1, 25(OH)2D3干预,硝酸盐/亚硝酸盐荧光试剂盒测定NO含量,Westernblot法测定pAkt及peNOS蛋白的 表达,qPCR法测定VDR、ET-1的表达。结果：0.6mmol/L的PA培养HUVECs18h后,培养液中的葡萄糖浓度 耗减显著低于对照组,细胞活力降低,胰岛素抵抗的内皮细胞模型建立。PA干预后NO含量较对照组HUVECs 减少（ P ＜0.05）,1nmol/L1, 25(OH)2D3干预胰岛素抵抗的内皮细胞后NO含量增加,在1min时NO量达最 大值。1nmol/L浓度1, 25(OH)2D3干预胰岛素抵抗的内皮细胞后peNOS及pAkt的蛋白表达量明显增加（ P ＜ 0.05）,ET-1的mRNA表达水平明显减少（ P ＜0.05）。结论：1, 25(OH)2D3增加PA诱导的胰岛素抵抗血管内皮细 胞peNOS、pAkt的表达,增加NO产生,降低ET-1的表达,可能对胰岛素抵抗的血管内皮细胞存在一定的保护作用。     

血管内皮功能变化与慢性阻塞性肺疾病的关系

目的探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者血管内皮功能变化与COPD病情严重程度的相关性。方法选取2008年5月—2009年3月于仁济医院呼吸科就诊的COPD稳定期患者52例,分为轻度组（n=12）、中度组（n=12）、重度组（n=14）和极重度组（n=14）;以26例健康志愿者作为对照组,分为健康吸烟对照组（n=13）和健康不吸烟对照组（n=13）。所有受试者接受肺功能检测,采用酶联免疫分析法（ELISA）和NO2-/NO3-硝酸还原酶法检测血浆内皮素-1（ET-1）、血管内皮生长因子（VEGF）和血清一氧化氮（NO）浓度。结果 COPD组血清NO和VEGF浓度均低于健康不吸烟对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;血清NO和VEGF浓度与第1秒用力呼气容积（FEV1）呈正相关（r=0.767,P〈0.01;r=0.658,P〈0.01）。COPD组血浆ET-1浓度均高于健康对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;血浆ET-1浓度与FEV1呈负相关（r=-0.816,P〈0.01）。结论 COPD患者存在血管内皮功能紊乱,且与疾病的严重程度具有相关性。     

异丙酚麻醉对肝叶切除术患者肝功能与一氧化氮／内皮素-1比例的影响

目的 观察异丙酚麻醉对肝叶切除术患者肝功能与一氧化氮（NO）／内皮素一1（ET一1）比例的影响。方法 观察组于麻醉插管后异丙酚5mg／（kg·h）微泵持续静脉输注,对照组予以等量生理盐水微泵持续静脉输注,余同观察组。观察并比较两组患者肝门阻断前（T1）、肝门阻断末（T2）和术后第3天（T3）肝功能谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）和血浆NO、ET-1含量的变化。结果 肝门阻断末两组患者ALT和AST水平均明显上升（P〈0．05或P〈0．01）,且对照组上升幅度明显高于观察组（P〈0．05）,术后第3天两组患者ALT和AST水平均恢复至肝门阻断前水平。同时肝门阻断末两组患者血浆NO水平明显下降,血浆ET-1水平明显上升（P〈0．05或P〈0．01）,且对照组上升幅度明显高于观察组（P〈0．05）,术后第3天两组患者血浆NO和ET-1水平均恢复至肝门阻断前水平。结论 肝叶切除术可引起血浆NO／ET-1的比例失衡,血管内皮细胞功能紊乱。异丙酚对肝叶切除术患者具有保护作用,能调节患者血浆NO／ET-1比例的失衡,保护血管内皮功能。     

人脐带间充质干细胞体外修复子痫前期重度患者血清损伤后血管内皮细胞内分泌功能的研究

 目的探讨人脐带间充质干细胞（UC-MSCs）在体外对子痫前期重度患者血清损伤后血管内皮细胞内分泌功能的影响。方法将人脐静脉内皮细胞株接种于6孔培养板,进行分组干预,分为无血清正常对照组（N组）、健康孕妇血清干预组（H组）和子痫前期重度患者血清干预组（P组）,每组均予UC-MSCs上清干预。采用ELISA法检测UC-MSCs干预前后细胞上清中ET-1和NO的含量。结果UC-MSCs干预前P组内皮细胞中ET-1含量最高,而NO最低;UC-MSCs干预后P组内皮细胞中ET-1含量下降,而NO升高;UC-MSCs干预前后P组ET-1和NO含量的差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论UC-MSCs在体外可修复子痫前期重度患者血清损害的内皮细胞的内分泌功能。     

Effect of Xiongshao Capsule on the function of vascular endothelium of patients with cervical atherosclerosis

Objective:To study the effect of Xiongshao Capsule (XSC), a TCM herb that can promote blood circulation to remove blood stasis, on the endothelial dependent relaxation function, serum nitric oxide (NO), and plasma endothelin-KET-1) of the patients with cervical atherosclerosis.Methods: Forty patients were randomly divided into two groups: XSC group and Probucol group (western medicine control). In addition, 20 healthy people were set as a normal control group. Plasma ET-1, serum NO, the internal diameter of basal brachial artery, endothelial dependent flow mediated dilation (FMD) and non-endothelial dependent nitroglycerin induced dilation (NID) to the trial group before and after therapy and to the healthy control group were determined respectively. Results: Compared to the healthy control group, FMD of patients with atherosclerosis was damaged obviously, the serum NO level decreased, plasma ET-1 increased (P< 0.01), NID also decreased (P<0.05), the internal diameter of basal brachial artery has no obvious difference (P>0.05). After the patients with atherosclerosis were treated with Xiongshao Capsule for 12 weeks, FMD increased evidently, plasma ET-1 decreased, serum NO and the ratio of NO/ET-1 increased, compared with the level before therapy and Probucol group, the difference was significant (P<0.05,P<0.01), NID didn’t change obviously (P>0.05).Conclusion: XSC could regulate vascular activity factor and improve the function of endothelial dependent vascular dilation of patients with atherosclerosis.     

通脉口服液对维持性血液透析患者血管内皮功能的影响

【目的】观察益气活血类中药通脉口服液对维持性血液透析(MHD)患者血管内皮细胞功能的影响。【方法】将100例MHD患者随机分为治疗组和对照组各50例,对照组仅进行稳定透析及常规用药(包括低分子肝素抗凝和促红素、降压药、钙剂及活性维生素D剂、铁剂等的应用),治疗组在稳定透析和常规用药基础上,给予通脉口服液3个月,观察治疗前后2组内皮素-1(ET-1)、血管性假血友病因子(vWF)水平变化;另外,根据是否合并心脑血管疾病再进行亚组分析。【结果】2组自身前后比较和组间比较,ET-1、vWF水平差异均无统计学意义(P﹥0.05);但亚组分析结果提示治疗前合并心脑血管疾病组ET-1、vWF水平显著高于未合并组(P<0.05),且治疗亚组治疗后ET-1、vWF水平显著降低,与自身治疗前比较及与对照亚组比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。【结论】MHD合并心脑血管疾病的患者血管内皮细胞损伤程度较重,益气活血类中药通脉口服液可降低此类患者的ET-1和vWF水平,对血管内皮细胞具有一定保护作用。