虫草酒对健康成人心肌氧代谢的影响

健康成人分别饮用虫草酒1．0、1．5ml／kg体重后，P均呈增加趋势，CAP、EWK亦相应增加（均P＞0．05）；而VPE、VPEI、HOV、HOI均显著增加（P＜0．05或P＜0．01），表明健康成人心肌氧耗量的增加与虫草酒的正性肌力效应有关。     

北虫草粉中有效成分分析

为明确北虫草粉中的有效成分,检测了北虫草粉中虫草素、粗多糖、氨基酸和维生素等含量。结果表明,冻干处理的北虫草粉中粗多糖、虫草素、SOD及维生素E分别为烘干处理的1．20、1．45、1．23、及1．25倍;虫草酸、蛋白质及维生素A的含量分别是烘干处理的0．97、0．97、0．06倍。结论：加工方法对北虫草粉有效成分有较大的影响,在具体应用中应根据针对目的性而选择适当的方法,以最大限度地保留所需要的有效成分。     

蛹虫草液体发酵产物冻干粉的抗氧化活性及保肝作用

目的研究蛹虫草液体发酵产物冻干粉的抗氧化活性及保肝作用。方法采用真空冷冻干燥的方法将蛹虫草液体发酵产物制成干粉并对冻干粉主要成分进行分析测定,通过DPPH自由基清除实验和衰老小鼠模型验证蛹虫草发酵产物冻干粉的抗氧化活性,通过小鼠急性肝损伤实验研究冻干粉的保肝作用,采用急性毒性试验验证冻干粉的安全性。结果蛹虫草发酵产物冻干粉含丰富的粗纤维、粗多糖、粗三萜及黄酮类物质。蛹虫草发酵产物冻干粉对DPPH自由基的半数有效浓度（EC50）为8．12mg／mL,在16mg／mL时对DPPH自由基的清除率为61．56％,与0．02mg／mL的维生素C（Vc）清除能力相当;蛹虫草发酵产物能显著提高衰老模型小鼠血清和肝脏中的总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）活力水平,降低丙二醛（MDA）含量,高剂量组的抗衰老效果与阳性药Vc组的抗氧化能力相当。小鼠急性肝损伤试验结果显示,冻干粉能有效降低模型组小鼠血液中门冬氨酸氨基转移酶（AST）与丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平（P〈0．05）。冻干粉的半数致死量（LD50）远大于国家无毒标准15g／kg,属于无毒级别。结论蛹虫草发酵产物具有良好的抗氧化活性和保肝作用,且安全无毒。     

北虫草中虫草素和虫草多糖的提取纯化研究

目的研究北虫草中虫草素和虫草多糖的提取纯化工艺。方法采用正交实验法研究提取工艺,采用柱分离法,以虫草素和虫草多糖的含量为指标,考察流速、上样体积和洗脱剂浓度对纯化工艺的影响。结果提取的最佳工艺为:加10倍量水,回流提取3次,每次1h。优化的纯化工艺为:将提取液浓缩至1mL,相当于北虫草粉0.1g,以2BV·h~(-1)的流速上样,上样体积为0.6BV,先用2BV的水洗脱,再用4BV体积分数为40%的乙醇溶液以1～2BV·h~(-1)的流速洗脱,收集乙醇洗脱液。结论该提取纯化工艺经验证实验证明可行。     

北虫草提取物对血细胞和心率的调节

为评价北虫草提取物对促进机体运动性疲劳恢复的生物学作用,以人体为研究对象,对照组与给药试验组（2．25g／d）的血红蛋白（Hb）含量、红细胞（RBC）和白细胞（WBC）计数采用血常规分析仪分别测定。应用惠普监测仪连续监测心率。结果表明,对照组中Hb含量和WBC计数在运动后分别为（146．43±18．12）g/L和（5．30±1．18）×10^9／L,与运动前（160．54±10．39和7．10±1．82）比较,差异有显著性,P〈0．05。给药组中Hh含量和WBC在运动后分别为（158．97±6．55）g／L和（6．29±1．06）×10^9／L,与对照组运动后的测值比较,差异有显著性,P〈0．05。在安静实验组中,用药后心率为（55．1±2．76）／min,低于用药前的（60．2±1．46）,差异有显著性,（P〈0．05）。乳酸阈实验组中,用药后心率为（188．3±3．26）／min,高于用药前的（168．5±3．64）／min,差异有显著性,P〈0．05。结论：北虫草提取物通过对机体血红蛋白、红细胞、白细胞和心率的调节使机体对运动的耐力增强,对训练产生的疲劳具有促进恢复的作用。     

培养基组分对蛹虫草生物量及核苷、碱基积累的影响

考察了碳源、氮源和金属离子对蛹虫草发酵生物量和7种核苷、碱基积累的影响，结果表明以20％土豆汁＋2％葡萄糖为碳源，0.3％酵母膏＋0.3％蛋白胨为氮源，并在培养基中加入0．1mmol／LMn^2＋能促进菌体生长和核苷、碱基的积累。在最佳条件下，腺苷和3＇-脱氧腺苷在菌丝体中含量分别为4．96、0．199mg／g，在气生菌丝体中分别为4．91、7．22mg／g。     

虫草多糖对大鼠肾脏冷冻诱发慢性肾功能衰竭的治疗作用

目的：考察虫草多糖对肾脏冷冻诱发慢性肾功能衰竭大鼠的治疗作用。方法：通过冷冻肾脏复制大鼠慢性肾功能衰竭模型。将实验动物随机分成6组，在造模后第8周，各组大鼠开始给药（每日1次，连续14天），阳性对照组大鼠肌肉注射地塞米松磷酸钠0．1mg/kg，虫草多糖高、中、低剂量组大鼠灌胃给予虫草多糖160、80及40mg/kg。假手术组和阴性模型组大鼠灌胃给予等量生理盐水。检测给药后各组大鼠的血液生化指标、血清总超氧化物歧化酶和丙二醛含量以及肾脏病理学变化。结果：给药2周后，与阴性模型组比较，阳性对照组和虫草多糖3个剂量组大鼠血清尿素氮、肌酐、钠和磷含量以及血清丙二醛含量显著降低（P〈0．05或P〈0．01），而血清白蛋白和总超氮化物歧化酶含量显著增加（P〈0．05）；与阳性对照组比较，虫草多糖中、高剂量组大鼠血清总超氧化物歧化酶和丙二醛含量有显著差异（P〈0．05）或P〈0．01）；阳性对照组和虫草多糖高剂量组大鼠肾脏病理损伤明显好转，虫草多糖中、低剂量组则有所好转。结论：虫草多糖能有效预防慢性肾功能衰竭的发生和发展，改善肾功能，纠正代谢紊乱，促进肾单位的修复与再生。     

北虫草化学成分及药理作用研究进展

北冬虫夏草（简称北虫草），又名蛹虫草[C．militarise （L.）Link]，属子囊菌亚门（Asco mycotina）核菌纲（pyrenomycetes）球壳目（Sphaerinles）麦角菌科（claviticpitaceae）虫草属（Coedyceps），是我国名贵中药材之一。北虫草是虫草属真菌的模式种，其宿主主要为鳞翅目的蚕蛾科、舟蛾科、天蚕蛾科等，它是由子座与菌核（即虫或蛹的尸体部分）两部分组成的复合体。冬季其蛰居土里，菌类寄生其中吸收营养，最后其体内充满菌丝而死。到了夏季，自其尸体上生成子实体形似草，夏至前后采集而得。主要分布在吉林、辽宁、陕西、广东等地。北虫草和冬虫夏草是我国最常见的分布最广的药用价值极高的两种虫革菌．     

葡萄糖和Cu2+对蛹虫草Cu,Zn超氧化物歧化酶在E.coli中表达的影响

对含有蛹虫草Cu，Zn-超氧化物歧化酶（cm—SOD）基因的重组E．coli培养条件进行了初步优化。结果表明，LB培养基中含有Cu^2＋可明显提高超氧化物歧化酶比活力；而在菌体培养中补加葡萄糖，可提高重组蛋白表达量和细胞生物量。在含有0．6mmol／L Cu^2＋、Zn^2＋的LB培养基中补加22mmol／L葡萄糖，每200ml培养液可获得1g湿细胞，超氧化物歧化酶比活力达到3305u／mg。     

虫草多糖对2型糖尿病小鼠InsR／IRS-1通路及糖代谢的影响

目的：观察虫草多糖对2型糖尿病小鼠InsR／IRS—1通路及糖代谢的影响。方法：采用高脂饲料联合腹腔注射小剂量链脲佐菌素（STZ,25mg·kg-1）建立胰岛素抵抗2型糖尿病模型,每日给予不同剂量虫草多糖（200,400mg·kg-1）治疗,28d后．免疫印迹法检测实验小鼠骨骼肌内胰岛素受体（1nsR）、胰岛素受体底物（IRS-1）及葡萄糖转运蛋白（GLUT4）的表达水平。检测肝脏葡萄糖激酶（GK）、磷酸果糖激酶（PFK）活性水平。结果：虫草多糖治疗组可显著改善糖尿病小鼠InsR／IRS一1及GLUT4蛋白的畀常表达（P〈0．05）;并呈剂量依赖性地增强小鼠肝脏GK及PFK酶活性,与糖尿病模型组比较差畀有统计学意义（P〈0．05或0．01）。结论：虫草多糖可增强胰岛素信号通路敏感性,改善葡萄糖代谢,从而缓解糖尿病小鼠胰岛素抵抗及高血糖症状,为胰岛素抵抗2型糖尿病的临床治疗提供新的依据。     

虫草花与冬虫夏草腺苷成份的比较研究

目的 比较研究虫草花与冬虫夏草腺苷成份的含量.方法 采用高效液相色谱法测定腺苷的含量,色谱柱为岛津Shim-pack VP-ODS柱(200mm×4.6 mm,5μm);流动相为磷酸盐缓冲剂(pH=6.5)-甲醇(17:3);流速为1ml/min;检测波长为260nm.结果 腺苷的线性范围为0.078 35-0.399 88μg,呈现较好的线性关系,平均加样回收率为96.22%,RSD为0.21%(n=5).结论 虫草花的活性成份腺苷含量明显高于冬虫夏草腺苷含量,具有与冬虫夏草相似的滋补功效.     

冬虫夏草和虫草菌丝体中腺苷成分的比较

目的 比较冬虫夏草与虫草菌丝体(以下简称菌丝体)中腺苷成分,为菌丝体在临床治疗中替代冬虫夏草提供实验依据.方法 采用薄层色谱法对腺苷进行定性鉴别;采用高效液相色谱法(色谱柱为Hypersil ODS2 C18(250 mm×4.6 mm,5 μm);流动相为0.01 mmol·L-1磷酸二氢钾水溶液∶甲醇=17:3;流...     

高效液相色谱法测定蛹虫草人工固体培养物中核苷类化合物的含量

目的建立高效液相色谱法测定蛹虫草人工固体培养菌皮中核苷类化合物的含量。方法采用pH 6 .5磷酸盐缓冲液 甲醇 (85∶15 )为流动相 ,流速为 1.0ml/min ,检测波长为 2 6 0nm。结果蛹虫草人工固体培养物菌皮中主要成分虫草素在 4 .0 3～ 10 0 .8μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =39.5 8C - 0 .0 342 ;尿苷在 3.6 8～ 92 .0μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =2 4 .32 9C - 0 .0 0 2 7;腺苷在 3.84～ 96 .11μg/ml范围内线性关系良好 ,回归方程为A =18.0 12C - 0 .0 2 35。结论人工固体培养菌皮中核苷类成分的含量随培养时间发生一定的变化 ,高效液相色谱法可用于蛹虫草人工培养物中核苷类化合物的测定 ,为控制其质量提供了简便易行的方法。     

冬虫夏草、亚香棒虫草中多糖的含量测定

目的测定青岛产冬虫夏草与山西产亚香棒虫草中多糖的含量。方法硫酸-蒽酮比色法于波长(624±1)nm处测定吸收度。结果冬虫夏草多糖含量为3.5%（n=5）,平均加样回收率为99.2%,RSD=2.3%;亚香棒虫草多糖含量为0.7%(n=5),平均加样回收率为101.3%,RSD=1.7%。结论硫酸-蒽酮法测定虫草中多糖,方法操作简便,准确,稳定性好;亚香棒虫草中多糖含量低于冬虫夏草中多糖含量,从此方面讲亚香棒虫草不能代替冬虫夏草。     

液质联用法对两种虫草中核苷类成分的研究

目的优化色谱条件,在最佳条件下对蒙山九州虫草和冬虫夏草子座中核苷类化合物进行定性和定量研究,并比较两种虫草的不同。方法用高效液相色谱(HPLC)法对供试品中核苷类成分进行初步定性和定量的研究,然后用质谱(MS)法进行成分验证。结果HPLC与MS法联用能准确地对各组分进行定性和定量分析;洗脱液的最佳配比为:先以99%水+1%乙腈梯度洗脱5 min后过渡为96%水+4%乙腈至洗脱完全。结论首次将此方法用于虫草中核苷类成分的研究,发现蒙山九州虫草含有比冬虫夏草种类更多的核苷类成分,有望替代价格昂贵的冬虫夏草应用于临床。     

Anti-cancer effect of Cordyceps militaris in human colorectal carcinoma RKO cells via cell cycle arrest and mitochondrial apoptosis

Background

Cordyceps militaris has been used as a traditional medicine in Asian countries for a long time. Different types of Cordyceps extract were reported to have various pharmacological activities including an anti-cancer effect. We investigated the inhibitory effect of Cordyceps militaris ethanol extract on a human colorectal cancer-derived cell line, RKO.

Methods

RKO cells were treated with various concentrations of nucleosides-enriched ethanol extract of Cordyceps militaris for 48 h and cytotoxicity was measured using a CCK-8 assay. Then, xenograft Balb/c nude mice were injected with RKO cells and subsequently orally administered with ethanol extract of Cordyceps militaris every day for 3 weeks to examine the inhibitory effect on tumor growth. Lastly, the effect of Cordyceps militaris on cell cycle as well as apoptosis was measured using flow cytometry. Also, the expression of p53, caspase 9, cleaved caspase-3, cleaved PARP, Bim, Bax, Bak, and Bad were detected using western blot assay.

Results

RKO cells were highly susceptible to the ethanol extract of Cordyceps militaris (CME) and the growth of RKO cells-derived tumor was significantly delayed by the treatment of Cordyceps militaris. Cordyceps militaris induced cell cycle arrest in G2/M phase (untreated; 20.5 %, CME 100 μg/ml; 61.67 %, CME 300 μg/ml; 66.33 %) and increased early apoptosis (untreated; 1.01 %, CME 100 μg/ml; 8.48 %, CME 300 μg/ml; 18.07 %). The expression of p53, cleaved caspase 9, cleaved caspase-3, cleaved PARP, Bim, Bak, and Bad were upregulated by the treatment of Cordyceps militaris.

Conclusion

Ethanol extract of Cordyceps militaris was highly cytotoxic to human colorectal carcinoma RKO cells and inhibited the growth of tumor in xenograft model. The anti-tumor effect of Cordyceps militaris was associated with an induction of cell cycle arrest and mitochondrial-mediated apoptosis.     

Chemical study of the strain Cordyceps spp. from cell fusion between Cordyceps militaris and Cordyceps cicadae

Chemical investigation on the cultures of the fungus Cordyceps spp., a strain from cell fusion between Cordyceps militaris and Cordyceps cicadae, resulted in the isolation of 13 compounds including 2 new ones named 2-(5-(3-oxobutyl) furan-2-yl) acetic acid (1) and cordycepone (2). Their structures were elucidated from the analysis of 1D/2D NMR and CD data. Among them, compounds 1, 7–9, at a concentration of 50 μg/ml, showed weak inhibitory activity against AChE. Moreover, compounds 6, 9, and 11 showed moderate inhibitory activity against the nematode Panagrellus redivivus with mortality ratio of 79.0, 71.7, and 72.3% at 2.5 mg/ml, respectively.     

TLC法定性比较冬虫夏草与固体发酵虫草

目的:比较冬虫夏草与固体发酵虫草在化学成分上的相似性。方法:采用薄层色谱法,从总体成分和不同提取部位比较冬虫夏草和固体发酵虫草。结果:固体发酵虫草斑点位置同冬虫夏草基本一致,只是大小有所差别。结论:固体发酵虫草与冬虫夏草有相似的化学成分,有待进一步研究。     

HPLC法测定冬虫夏草中核苷类成分的含量

目的建立用HPLC法测定不同方法(熏干、新鲜和阴干)处理冬虫夏草样品中核苷类成分(腺苷、尿苷、肌苷、鸟苷和胸苷)含量的方法。方法样品用纯化水超声提取,流动相为甲醇-水,梯度洗脱,柱温:30℃,流速:1.0mL·min-1。结果虫草中含有的5种核苷标准曲线的相关系数均在0.999 0以上,精密度检测RSD值为0.31%~1.95%(n=5),重复性检测RSD值为0.50%~2.56%(n=5),回收率在99.46%~100.11%之间。结论该方法灵敏、简便、快速、准确、重复性好,能有效测定虫草中核苷类成分的含量,可为评价虫草的质量提供依据。     

工厂化培育北冬虫夏草子实体替代野生虫草的药效学研究

目的探讨工厂化培育的北冬虫夏草子实体的动物体内药效学参数。方法健康ICR小鼠或Wistar大鼠分成空白对照组、模型组和给药组,予北冬虫夏草子实体和野生虫草持续给药后,分别检测各组负重持续游泳时间和常压耐缺氧时间、小鼠脾淋巴细胞增殖和NK细胞活性、对CCl4引起的小鼠急性肝损伤的保护作用、对庆大霉素引起的大鼠急性肾损伤的保护作用。结果高剂量北冬虫夏草子实体可延长小鼠持续游泳和常压耐缺氧的平均存活时间至29.05%和31.08%;增加小鼠脾淋巴细胞增殖和NK细胞的活性;明显降低庆大霉素诱发的小鼠肾损伤导致的尿液异常,对BUN和Cr的缓解率分别为71.09%和44.96%,对CCl4诱发的小鼠转氨酶升高,特别是ALT的缓解率为37.82%。结论工厂化培育的北冬虫夏草子实体在保护肝、肾损伤、耐缺氧、抗疲劳以及增强免疫力方面与同剂量野生冬虫夏草相当,值得进一步开发。