脑缺血早期大脑皮质和尾壳核一氧化氮合酶神经元的进程变化

目的：探讨一氧化氮合酶神经元在脑缺血早期（２４ｈ内）的变化规律。方法：ＮＡＤＰＨ－ｄ组织化学方法。结果：各组间正常侧ＮＯＳ神经元无明显变化，散在分布于皮质的Ⅱ～Ⅵ层，以Ⅳ～Ⅵ为主，尾壳核内ＮＯＳ神经元数量较多，密集分布于外侧区。缺血１５ｍｉｎ和３０ｍｉｎ组，缺血中心区皮质和尾壳核ＮＯＳ神经元数量减少，形态无明显变化；缺血１ｈ和２ｈ组，皮质和尾壳核内ＮＯＳ神经元数量进一步减少，突起变短；缺血３ｈ和６     

大鼠大脑皮层－尾壳核和尾壳核－黑质间的往返定位投射

用霍乱毒素Ｂ亚单位（ＣＢ）追踪法系统地研究了大鼠大脑皮层与尾壳核和尾壳核与黑质之间的定位投射。将ＣＢ分别泳入尾壳核不同节段的不同区域后，大脑皮层内的逆标胞体和顺标终末主要见于额叶１区和２区、顶叶１区和２区以及颗粒岛皮质；黑质内的顺标终末主要见于网状带的不同部位，而逆标胞体则主要见于致密带和腹侧被盖区。本研究结果说明在大鼠大脑皮层－尾壳核和尾壳核－黑质之间存在着且有点对点定位特征的往返联系。这种定位投射对躯体运动的精细调节提供了形态学基础。     

大鼠纹状体边缘区内5—HT2A受体的分布——原位杂交和免疫组织 …

已知纹状体边缘区有密集的５－ＨＴ纤维及终末分布。为了观察５－ＨＴ２Ａ受体ｍＲＮＡ是否在大鼠纹状体边缘区表达，从基因分子水平和细胞水平进一步证明大鼠纹状体边缘区能否合５－ＨＴ２Ａ受体，用地高辛标记的寡核苷酸探针进行原位杂交，研究了大鼠纹状体边缘区的５－ＨＴ２Ａ受体ｍＲＮＡ的表达及分布。原位杂交结果发现５－ＨＴ２Ａ受体ｍＲＮＡ阳性杂交信号在纹状体的分布不均匀，尾壳核只有少量中等大小的阳性胞体，苍白球也     

大鼠局灶脑缺血诱导巢蛋白的反应模式

目的:观察巢蛋白(nestin)在局灶脑缺血区的反应模式,以探讨其在脑梗塞灶修复过程中的作用。方法:采用局灶脑缺血模型和免疫组织化学染色方法,探查36只成年雄性SD大鼠的大脑不同区域的巢蛋白阳性细胞的形态、反应时程和分布形式。结果:假手术大鼠的巢蛋白阳性反应存在小血管、微血管和室管膜上皮,在第三脑室底壁内有许多细的阳性纤维,胞体不明显。在脑缺血3 d组,大量巢蛋白阳性细胞分布于缺血侧大脑半球,以大脑皮质缺血区、视前区、尾壳核及第三脑室底部最为显著。缺血区周围的大脑皮质浅层和视前区皮质的阳性细胞呈纤维状,而皮质深层的阳性细胞则呈星状。 巢蛋白阳性细胞的形态和数量变化在脑缺血1周时最显著。阳性细胞显示高度的肥大和增生性变化,其数量亦明显增加,以大脑皮质缺血区和尾壳核区最显著。皮质缺血区和尾壳核区的巢蛋白阳性反应持续到脑缺血6周。随后,其反应稍有减弱。结论:局灶脑缺血诱导反应型星形胶质细胞重表达巢蛋白,提示其可能参与脑缺血性损伤的修复过程。     

芳香化酶mRNA在小鼠脑内的表达及其分布

目的 研究芳香化酶ｍ（ＲＮＡ（ａｒｏｍａｔａｓｅ ｍＲＮＡ）在小鼠脑内的基因表达。方法 原位杂交组织化学和ＰＮＡ斑点杂交。结果 （１）斑点杂交结果显示,脑内芳香化酶ｍＲＮＡ在小鼠Ｅ１６－Ｐ３００整个发育过程中均有表达,表达高峰在生后６ｄ左右,成年后降至最低;（２）脑内芳香化酶ｍＲＮＡ主要定位于神经元;（３）芳香化酶ｍＲＮＡ在脑内的表达,阳性区域主要分布于大脑皮层,丘脑、下丘脑及边缘系统。其中,皮质锥体细胞层、内侧视前区、隔内侧核、海马各区锥体层、杏仁核群、扣带皮质、梨状前皮质及杏仁周皮质等部位阳性信号较强;中等强度的阳性信号见于丘脑腹内、外侧核,丘脑外侧背核、下丘脑室旁核、室周核等处。结论 以上结果进一步证明脑内芳香化酶的表达与脑发育存在一定的相关性,芳香化酶ｍＲＮＡ的表达部位与文献报道酶的活性分布基本一致;海     

睾丸I-1β原位杂交及输精管结扎对IL-1β mRNA表达的影响

本实验成功地建立了睾丸ＩＬ－１β原位杂交技术，并在此基础上探讨了输精管结扎对睾丸ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达的影响。结果表明：输精管结扎６ｍｏ组家兔睾丸ＩＬ－１βｍＲＮＡ的杂交信号明显地强于假手术对照组，而结扎２５ｍｏ组恢复同龄假手术组水平。杂交信号多分布在曲细精管内的支持细胞和生殖细胞中，有的分布在间质的细胞中。结论：输精管结扎早期睾丸产生ＩＬ－１确有明显增加，２５ｍｏ恢复对照组水平。     

睾丸IL—1β原位杂交及输精管结扎对IL—1βmRNA表达的影响

本实验成功地建立了睾丸ＩＬ－１β原位杂交技术，并在此基础上探讨了输精管结扎对睾丸ＩＬ－１β ｍＲＮＡ表达的影响，结果表明：输精管结扎６ｍｏ组家兔睾丸ＩＬ－１β ｍＲＮＡ的杂交信号明显地强于假手术对照组，而结扎２５ｍｏ组恢复同龄假手术组水平，杂交信号多分布在曲细精管内的支持细胞和生殖细胞中，有的分布在间质的细胞中，结论：输精管结扎早期睾丸产生ＩＬ－１确有明显增加，２５ｍｏ恢复对照组水平。     

血液透析患者IL－1β、IL－6及IL－8基因表达的研究

利用ＭｅｓｓａｎｇｅＡｍｐｌｉｆｌｃａｔｉｏｎＰｈｅｎｏｔｙｐｉｎｇ（ＭＡＰＰｉｎｇ）系统半定量测定了血液透析患者外周血淋巴细胞白介素１β（ＩＬ－１β）、白介素６（ＩＬ－６）和白介素８（ＩＬ－８）ｍＲＮＡ表达水平，结果发现，血液透析开始１ｈ患者ＩＬ－β、ＩＬ－６和ＩＬ－８ｍＲＮＡ表达增强，其中ＩＬ－８ｍＲＮＡ的变化最明显。ＭＡＰＰｉｎｇ系统检测细胞因子基因表达具有敏感、可靠和快速的优点。     

大鼠脑缺血-再灌注损伤诱导IL-1β的表达

目的：研究脑缺血－再灌注损伤早期大鼠脑组织中ＩＬ－１β的表达及其与中性粒细胞浸润的关系。方法：应用反转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）检测ＩＬ－１βｍＲＮＡ,并用图象处理系统对正常、缺血及再灌注后不同时间的ＩＬ－１βｍＲＮＡ进行相对定量分析;采用ＭＴＴ和ＭＰＯ方法分别对大鼠脑组ＩＬ－１β的多肽活性及浸润的中性粒细胞进行检测。结果：单纯脑缺血ＩＬ－１β表达不增加;再灌注２ｈ,ＩＬ－１βｍＲＮＡ表达量明     

大鼠三叉神经脊束核尾侧亚核及三叉神经节内PPTA,CGRP和PPE …

利用原位杂交技术和免疫组化技术，观察完全福氏佐剂致炎大鼠的三叉神经脊束核尾侧亚核和／或三叉神经节内ＳＰ、ＣＧＲＰ和Ｌ－ＥＮＫ样阳性结构及它们相应的前体ＰＰＴＡ ｍＲＮＡ、ＣＧＲＰｍＲＮＡ和ＰＰＥｍＲＮＡ分布状况的动态变化。原位杂交结果显示：ＰＰＴＡｍＲＡ在三叉神经节与三叉神经脊束核尾侧亚核浅层神经元中的表达于致炎刺激后１２ｈ明显增强，分别于１ｄ和４ｄ时达到高峰，２１ｄ后恢复正常；ＣＧＲＰｍＲＮＡ在     

转化生长因子β1 mRNA在实验性肝癌间质差异形成中的 …

目的：应用原位分子杂交技术观察了ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ在实验性大鼠胆管细胞性肝癌（ＣＣ）和肝细胞性肝癌（ＨＣＣ）中的表达,探讨肝癌间质差异形成的可能机制。方法：大鼠肝癌组织经ＨＥ和Ａｌｃｉａｎ Ｂｌｕｅ染色确认ＣＣ或ＨＣＣ,用ＴＧＦ－β１反应ＲＮＡ探针检测ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ的表达,同时以ＴＧＦ－β１正链,β－ｍＲＮＡ呈弱到中等强度的表达,少数ＣＣ的间质细胞也有ＴＧＦ－β１ｍＲＮＡ表达。结论：由于Ｔ     

电刺激VSA对IL-1_β作用下兔POAH温敏神经元放电的影响

目的和方法：本实验采用微电极细胞外记录,在３２只新西兰兔下丘脑视前区（ＰＯＡＨ）记录温敏神经元单位放电,观察电刺激腹中膈区（ＶＳＡ）对致热原ＩＬ－１β作用下兔ＰＯＡＨ温敏神经元放电的影响。结果：（ｌ）侧脑室注射白介素－１β（ＩＬ－１β）能使ＰＯＡＨ热敏神经元放电减少,冷敏神经元放电增加;而侧脑室注射人工脑脊液（ＡＣＳＦ）对热敏神经元和冷敏神经元的放电均无明显影响。（２）电刺激ＶＳＡ可反转ＩＬ－１β对ＰＯＡＨ热敏神经元和冷敏神经元的上述作用。结论：ＶＳＡ可能作为负调节中枢参与致热原作用下的体温调节。     

白细胞介素—1β及肿瘤坏死因子—α对脑损伤后胶质细胞c—fos…

本研究用分子杂交技术观察了白细胞介素－１β及肿瘤坏死因子－α对脑损伤后及培养的胶质细胞ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达的影响。结果发现：脑损伤后损伤周围组织ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ表达呈动态变化；１ｈ后增加１７０％，１２ｈ后增加３０％，２４ｈ后增加１３０％。发现白细胞介素－１β和肿瘤坏死因子－α能显著增加脑损伤后１２ｈ及２４ｈ ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮＡ的表达；当培养的胶质细胞中加入此二者后１ｈ ｃ－ｆｏｓ ｍＲＮ     

白细胞介素6受体样免疫反应性细胞在大鼠脑内的分布

目的　研究白细胞介素６ 受体（ＩＬ－６Ｒ和ｇｐ１３０）免疫反应性细胞在大鼠脑内的分布。方法　采用ＡＢＣ免疫组织化学方法。结果　ＩＬ－６Ｒ免疫反应性细胞主要分布在下丘脑的视前区、腹内侧核、室旁核和弓状核;在海马,ＩＬ－６Ｒ阳性细胞呈强阳性,密集分布于齿状回颗粒细胞层和ＣＡ１ ～ＣＡ２ 锥体细胞层;在大脑皮层、嗅结节、丘脑腹内侧核、终纹床核等处也有ＩＬ－６Ｒ阳性细胞。ｇｐ１３０ 阳性细胞主要分布于下丘脑的室周核、室旁核的内侧小细胞部、弓状核及视上核,在大脑皮层也有ｇｐ１３０ 阳性大锥体细胞的分布。ｇｐ１３０ 阳性细胞亦见于尾壳核、杏仁核区、终纹床核,在海马结构内的ｇｐ１３０ 阳性细胞较ＩＬ－６Ｒ染色较浅。此外,ＩＬ－６ 两种受体亚单位的免疫反应性细胞也散在分布于小脑皮层、小脑外侧核以及延髓／脑干。结论　在大鼠脑内广泛分布着ＩＬ－６ 两种受体亚单位的免疫反应性细胞,提示ＩＬ－６ 及其受体可能具有重要的神经生物学意义。     

降钙素基因相关肽对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑cAMP反应元件结合蛋白mRNA表达的影响

目的 探讨外源性降钙素基因相关肽(CGRP)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质cAMP反应元件结合蛋白(CREB)mRNA表达的影响.方法 用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,应用原位杂交和图像分析技术检测大鼠缺血侧海马CA1区和顶叶皮质CREB mRNA表达.结果 假手术组右侧海马CAl区和顶叶皮质CREB mRNA有明显表达,缺血再灌注组右侧海马CAl区和顶叶皮质CREB mRNA阳性产物吸光度值减少,CGRP组缺血侧海马CAl区和顶叶皮质CREB mRNA表达的吸光度值比缺血再灌注组增高(P＜0.05).结论 CGRP上调局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质CREB mRNA的表达,CGRP对缺血神经元的保护作用可能通过激活CREB的转录与翻译,从而启动一系列信号通路来实现.     

成年大鼠星形细胞经LPS、前炎症因子和免疫调节因子刺激后β-趋化因子的分泌

目的研究在中枢神经系统（ＣＮＳ）的炎症性疾病中,作为构成血脑屏障结构的组成部分之一,可引起白细胞浸润的星形细胞分泌趋化因子的影响因素。方法通过星形细胞体外培养,经不同细胞因子刺激,用原位杂交检测成年大鼠星形细胞β－家系趋化因子的ｍＲＮＡ表达。结果ＩＦＮ－γ可引起ＭＣＰ－１,ＲＡＮＴＥＳ,ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达;ＴＮＦ－α可引起ＲＡＮＴＥＳ和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达;ＬＰＳ可引起ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１β的ｍＲＮＡ表达。ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０下调由ＬＰＳ引起的ＭＣＰ－１和ＭＩＰ－１α和ＭＩＰ－１βｍＲＮＡ表达。ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０可抑制由ＴＮＦ－α引起的ＭＣＰ－１和ＲＡＮＴＥＳ的ｍＲＮＡ表达。ＩＬ－１０还可下调由ＴＮＦ－α引起的ＭＩＰ－１βｍＲＮＡ表达。结论成年大鼠体外试验中的星形细胞可由ＬＰＳ和前炎症因子刺激,产生β－家系趋化因子ｍＲＮＡ的表达。而调节因子如ＴＧＦ－β和ＩＬ－１０可抑制由ＩＦＮ－γ、ＴＮＦ－α和ＬＰＳ引起的β－家系趋化因子的ｍＲＮＡ表达。     

大鼠丘脑背内侧核的传出联系——WGA-HRP法研究

将WGA-HRP微电泳导入19只大鼠的丘脑背内侧核(DM),又将WGA-HRP注射于17只大鼠前额叶皮质的前扣带回背部,前边缘叶和岛叶无颗粒皮质背部,观察DM的传出投射。 DM投射到前额叶皮质的范围广泛,并有一定的局部定位。DM外侧部主要投射到前扣带回背部,其次为中央前区内侧皮质、前边缘叶、岛叶无颗粒皮质背部及腹外侧眶区等。DM内侧部主要投射到岛叶无颗粒皮质背部,其次为前边缘叶、下边缘叶、内侧眶区及腹侧眶区等。DM中间部主要投射到岛叶无颗粒皮质背部。 DM还投射到某些皮质下核团,如丘脑网状核、外侧视前区、尾壳核、伏隔核、苍白球、丘脑下部外侧区及束旁核等。此外,DM和前额叶皮质的前扣带回背部、中央前区内侧皮质、前边缘叶、下边缘叶及岛叶无颗粒皮质背部以及和丘脑网状核、外侧视前区及丘脑下部外侧区之间均有交互投射。     

NGF对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质内CREB mRNA表达的影响

探讨外源性神经生长因子(nervegrowthfactor,NGF)对局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质内的cAMP反应元件结合蛋白(cyclicAMPresponseelementbindingprotein,CREB)mRNA表达的影响。用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,运用原位杂交和图像分析技术检测大鼠缺血侧海马CA1区和顶叶皮质内CREBmRNA的表达。结果显示:缺血再灌注组缺血侧海马CA1区和顶叶皮质CREBmRNA阳性反应产物平均光密度(OD)比假手术组减少(P<0.05),NGF组CA1区和顶叶皮质内的CREBmRNA阳性产物平均光密度高于缺血再灌注组(P<0.05)。本研究结果提示NGF可以上调局灶性脑缺血再灌注大鼠海马和顶叶皮质缺血神经元CREBmRNA的表达,NGF对缺血神经元的保护作用可能通过激活CREB的转录与翻译,从而启动一系列信号通路来实现。     

肾母细胞瘤过度表达基因mRNA在大鼠中枢神经系统的原位杂交定位

为了了解肾母细胞瘤过度表达基因（ＮＯＶ）ｍＲＮＡ在中枢神经系统的定位，用地高辛标记的ｃＲＮＡ探针原位杂交组织化学方法，研究了ＮＯＶ原癌基因ｍＲＮＡ在成年大鼠中枢神经系统的分布。结果显示，在颞叶、听区、梨状前皮质、纹状皮质、海马复合体、杏仁基内侧核、杏仁皮质核、杏仁内侧核、杏仁外侧核、丘脑腹后内侧核、丘脑腹后外侧核、丘脑外侧背核、下丘脑腹内侧核、下丘脑背侧核、下丘脑背内侧核、下丘脑弓状核、脑桥面神经核、脑桥网状结构、前庭神经外侧核、前庭神经上核、脊髓前角均有较多ＮＯＶｍＲＮＡ阳性神经元分布，提示ＮＯＶ原癌基因在大鼠中枢神经系统内可能起重要作用     

尾壳核与大脑皮质缺血区炎症细胞反应的比较

目的：观察尾壳核和大脑皮质缺血区炎症细胞的反应模式,探讨尾壳核对缺血反应敏感的病理机制。方法：采用局灶脑缺血模型和组化,免疫组化染色方法,观察尾壳核和大脑皮质缺血区ED1、OX6和CD3阳性细胞的反应。结果：HE染色显示缺血尾壳核的组织病理学变化呈明显的团块状坏死区,T淋巴细胞和单核/巨噬细胞却显示明显的团块状排列,同时,缺血尾壳核小胶质细胞亦发生强烈的激活反应,并高表达免疫分子MHCⅡ类抗原,炎症细胞在尾壳核与在大脑皮质缺血区的反应形式不同。结论：单核/巨噬细胞,小胶质细胞和T淋巴细胞在缺血尾壳核的反应和分布特征与该区的组织病理学变化明显一致。提示这些因素可能与尾壳核对缺血的敏感性有关。