TiO2纳米光催化剂薄膜对牛晶状体上皮细胞黏附及移行的影响

目的观察经光激发后TiO2纳米光催化剂薄膜对体外培养的牛晶状体上皮细胞（LECs）黏附及移行的影响。方法采用溶胶-凝胶法在载玻片表面制备TiO2光催化剂薄膜,对载玻片行接触角测量。体外培养牛LECs爬片生长于此薄膜上。未经TiO2纳米光催化剂薄膜修饰的载玻片设为对照。进行细胞黏附和迁移实验,测定并比较牛LECs在TiO2薄膜修饰载玻片与对照载玻片表面的生长、移行情况。结果对TiO2薄膜组和对照组载玻片行接触角测量：对照组载玻片接触角为18.825°±2.342°,TiO2镀膜组载玻片接触角为0°±2°,TiO2镀膜组载玻片的接触角明显小于对照组。通过细胞黏附实验,TiO2镀膜组载玻片表面细胞黏附数平均为36.60±11.20,对照组细胞黏附数平均为96.40±19.67,差异有统计学意义（P=0.000）。细胞迁移实验（划痕法）中,对照组细胞移行距离平均为0.951mm,TiO2镀膜组细胞平均移行距离为0.640mm,差异有统计学意义（P=0.000）。结论TiO2纳米光催化剂薄膜具有超亲水性,能够明显抑制牛LECs在其表面的黏附和移行。     

乙二胺四乙酸二钠对晶状体上皮细胞清除作用的实验研究

目的:探讨乙二胺四乙酸二钠(EDTA)对晶状体囊膜上皮细胞的清除效果。方法:收集白内障超声乳化囊外摘除术中环形撕取的晶状体前囊膜32例,将其随机分为4组,分别用5mmol/L,10mmol/L,20mmol/L EDTA及生理盐水进行前囊膜消化处理,观察晶状体上皮细胞的清除情况。结果:经过20mmol/L EDTA溶液处理的晶状体前囊膜,上皮细胞可以完全脱落,经过5mmol/L,10mmol/L EDTA溶液处理的晶状体前囊膜,上皮细胞部分脱落,生理盐水对照组仅见少量晶状体上皮细胞脱落。结论:EDTA可以清除晶状体囊膜的上皮细胞,并随浓度增加效果增强,该结果可为临床应用EDTA清除晶状体上皮细胞以防治后发性白内障(posterior capsular opacification,PCO)的发生提供实验基础和理论依据。     

低相对分子质量肝素对牛晶状体上皮细胞在人工晶状体表面增殖的影响

目的　体外比较研究低相对分子质量肝素 (lowmolecularweightheparin ,LMWH)和普通肝素影响牛晶状体上皮细胞 (bovinelensepithelialcell,BLEC)在聚甲基丙烯酸甲酯 (polymethylmethacrylate,PMMA)人工晶状体表面增殖的作用。方法　体外将BLEC接种到PMMA人工晶状体表面培养 ,LMWH组和肝素组培养液中分别含LMWH(1× 10 5U/L)和普通肝素 (1× 10 5U/L) ,对照组培养液中不含上述药物。 72h后用流式细胞仪对人工晶状体表面黏附的细胞进行计数分析。结果　经LMWH和普通肝素处理的PMMA人工晶状体表面BLEC形态幼稚 ,对照组BLEC呈纤维化趋势 ;细胞计数对照组为(878 2± 10 7 8)个 /ml,肝素组为 (5 4 5 5± 5 8 2 )个 /ml,LMWH组为 (40 7 8± 36 6 )个 /ml,3个组比较差异有非常显著意义 (P <0 0 0 1)。结论　LMWH可显著抑制晶状体上皮细胞在人工晶状体表面的黏附和增殖 ,有望成为更为安全、有效的防治后发性白内障的药物     

碱性成纤维细胞生长因子促人晶状体上皮细胞增生的研究

目的 探讨碱性成纤维细胞生长因子（ｂ－ＦＧＦ）在后发性白内障形成过程中的作用。方法 应用体外培养人的晶状体上皮细胞,第３代细胞悬液接种于２４孔培养板内,加入不同终浓度的ｂ－ＦＧＦ（０,１,０,１０．０,１００．０ｎｇ／ｍｌ）,每组重复３孔,培养７２ｈ后,细胞计数。结果 ｂ－ＦＧＦ添加组,细胞增生呈浓度依赖性,ｂ－ＦＧＦ浓度越高,细胞增生越快。结论 白内障手术后房水中内源性ｂ－ＦＧＦ的增加可能是后发     

维拉帕米对人晶状体上皮细胞整合素表达的抑制作用

目的研究钙通道阻滞剂维拉帕米对人晶状体上皮细胞（LECs）株SRA01/04整合素表达的影响。方法对人LECs株SRA01/04进行培养并传代,分别以0.02、0.04、0.08mmol/L的维拉帕米作用于SRA01/0424h,经流式细胞仪检测SRA01/04各整合素的阳性表达率。结果整合素α2、α3、α5、β1、β2在人LECs株SRA01/04中呈阳性表达,维拉帕米对其表达具有抑制作用,并随药物浓度的增加而逐渐增强（P〈0.05）。结论钙通道阻滞剂维拉帕米对LECs整合素的表达具有抑制作用,可能阻碍整合素介导的LECs黏附、移行和增生,有望成为防治后发性白内障的有效药物。     

牛磺酸抑制晶状体上皮细胞凋亡的实验研究

目的 探讨牛磺酸对过氧化氢所诱发的晶状体上皮细胞凋亡的抑制作用。方法 取兔晶状体离体培养，分为对照组、H2O2氧化损伤组、氧化损伤同时加牛磺酸共3组，每组64只晶状体，分别以不同时限观察各组晶状体混浊情况，DNA缺口末端原位检测法(TUNEL法)及DNA片段分析检测各组晶状体上皮细胞凋亡情况。结果 牛磺酸组的晶状体混浊情况和晶状体上皮细胞凋亡率均明显低于H2O2氧化损伤组，与对照组差别无统计学意义。DNA片段琼脂糖凝胶电泳：H2O2组培养24、36、48及72h各时限均呈现凋亡细胞的典型梯状条带；而培养24h的对照组、牛磺酸组均未出现此变化而仅呈现正常细胞电泳条带。结论 牛磺酸可抑制H2O2氧化损伤所诱导的兔晶状体上皮细胞凋亡，从而延缓或减轻白内障形成。     

8-氯腺苷对抑制人晶状体上皮细胞增生的体外研究

目的探讨8-氯腺苷(8-chloroadenonosine)是否对体外培养的晶状体上皮细胞增生有抑制作用。方法取第2、3代传代培养的晶状体上皮细胞做药物抑制试验。加入不同浓度的8-氯腺苷(2,4,8,16μmol/L)作用24、48、72和96小时后,用MTT比色测定法和流氏细胞仪检测法确定药物对兔晶状体上皮细胞增生的抑制作用。结果 8-氯腺苷在4-16μmol/L的浓度下能抑制晶状体上皮细胞的增生。并且其抑制程度呈时间、剂量依赖性。结论该结果可为临床筛选防治后发性白内障的药物提供依据。     

Lumican及其在晶状体上皮细胞的上皮间质转分化中的作用

Lumican是在全身多种组织中广泛表达的一种蛋白质,在细胞增殖迁移分化及组织修复中起着重要作用。Lumican在晶状体上皮细胞（LECs）发生上皮间质转分化（EMT）中大量表达,并具有时间依赖性,有可能对该过程起着关键的调控作用。如果Lumican缺失,则LECs的上皮间质转分化受到明显抑制,从而对抑制后发性白内障的发生具有重要的意义。因此如何调控Lumican的表达已成为研究的热点,例如通过抑制转化生长因子p2的途径下调Lumican表达已被证实是调控的途径之一。但目前有关Lumican调控的研究大多集中于肿瘤和角膜,在LECs上皮间质转分化的调控作用靶点及如何量化还需要进一步研究。     

逆转录病毒载体携带自杀基因对晶状体上皮细胞的抗增生作用

围绕后发性白内障防治的实验研究是当前眼科研究的热点之一。现代白内障术后，残留的晶状体上皮细胞向后囊表面增生和移行，在后发性白内障的发生过程中起着重要作用。基因疗法为疾病的治疗开辟了一条新途径，有着广阔的前景。本实验用逆转录病毒载体携带自杀基因(HSV-tk基因)导入晶状体上皮细胞，随后再给予丙氧鸟苷(ganciclovir，GCV)，观察其对晶状体上皮细胞的影响，以期为将来后发性白内障的基因治疗奠定基础。     

双氯芬酸钠水分离对晶状体上皮细胞融合的影响

目的研究双氯芬酸钠水分离及联合转核技术对残留后囊膜上的晶状体上皮细胞（LECs）融合的影响。方法将猪眼后囊膜LECs进行体外原代培养,分为对照组、加药组（双氯芬酸钠水分离）、加药转核组（双氯芬酸钠水分离联合核旋转）,观察LECs不同时期的增生、分化、融合情况及各组细胞的融合时间。结果加药组和加药转核组的细胞融合时间较对照组延长,差异有统计学意义（P〈0.01）,加药组的细胞出现核固缩现象,加药转核组残留细胞团明显减少。结论双氯芬酸钠水分离能延缓后发性白内障（PCO）的发生,双氯芬酸钠水分离联合转核能有效降低PCO的发生率。     

环孢素A对兔晶状体上皮细胞增殖的影响

目的研究环孢素A(CsA)在不同情况下,对兔晶状体上皮细胞(RLECs)超微结构和增殖的影响。方法用CsA分别处理正常生长的RLECs和经过H2O2损伤的RLECs后,用透射电镜观察RLECs超微结构变化;噻唑蓝(MTT)法测定RLECs增殖能力改变。结果CsA浓度≥10μmol/L时,明显损伤正常RLECs的超微结构和增殖;当浓度<40μmol/L时,能部分抑制H2O2对RLECs超微结构损伤和增殖抑制。与对照组比较,差异有显著意义(P<0.01)。结论CsA对不同情况下的兔晶状体上皮细胞的超微结构和增殖具有不同的作用。     

姜黄素对人晶状体上皮细胞增生的抑制作用

目的探讨姜黄素(curcumin,CUR)对人晶状体上皮细胞株SRA01/04(human lens epithelial cell line SRA01/04,HLECSRA01/04)增生的抑制作用及其剂量-效应与时间-效应的关系。方法MTT比色法分别测定不同浓度的CUR作用于HLEC不同时间后的细胞生长抑制率;不同浓度的CUR作用于HLEC24h后,流式细胞术检测HLEC的细胞凋亡率;DAPI免疫荧光染色观察HLEC的形态学改变;免疫组织化学检测HLEC的caspase-3蛋白表达情况。结果MTT比色法实验结果显示,随药物浓度增加和作用时间延长,HLEC生长抑制率增加(P<0.05)。CUR作用于HLEC24h后,流式细胞术检测表明,细胞凋亡率随药物浓度增加而明显增加(P<0.05);DAPI免疫荧光染色可见细胞核固缩、溶解碎裂、产生凋亡小体,而对照组细胞形态规则,细胞核呈现均匀的荧光染色;免疫组织化学可见,用药组caspase-3蛋白的表达随CUR浓度增加而增强(P<0.05)。结论CUR对HLEC有抑制增生和诱导凋亡作用,且呈明显的剂量-效应与时间-效应关系,可望成为后发性白内障的防治药物。     

阿霉素药物缓释系统抑制人工晶状体植入术后后囊膜混浊的实验研究

目的 探讨阿霉素药物缓释系统(ADM-DDS)对兔眼人工晶状体植入术后后囊膜混浊(PCO)的抑制作用及其毒副作用,为临床应用提供实验依据。方法 自制聚乳酸(PLA)为载体的眼内植入型ADM-DDS,内含ADM 22μg。采用兔眼晶状体囊外摘出联合人工晶状体植入术的动物模型,术中将ADM-DDS植入15只兔眼晶状体囊袋内。术后临床常规检查,第4周行病理组织学及电镜检查。结果 实验组与对照组比较,晶状体后囊膜混浊减轻(t=2,P<0.01),Soemmering环面积减小(t=20.51,P<0.01),兔眼晶状体上皮细胞(RLECs)细胞核固缩坏死,胞浆凝集、空泡变性。两组之间的眼压、角膜内皮细胞形态及密度以及光镜下角膜、虹膜、睫状体、视网膜组织均无差异。结论 兔眼内植入ADM-DDS通过ADM缓释作用抑制了人工晶状体植入术后RLECs的增殖。ADM-DDS对兔眼角膜、虹膜、睫状体及视网膜无明显毒性。以PLA为载体的DDS将有可能成为临床上药物预防PCO的一种有效而安全的给药途径。     

糖尿病兔后发性白内障发生过程中晶状体上皮细胞增殖的变化

目的观察糖尿病兔后囊膜混浊(posterior capsular opacification,PCO)发生过程中晶状体上皮细胞(lens epithelial cells,LEC)的增殖情况,以探讨高血糖下LEC增殖的变化规律。方法 24只12～16周龄雄性新西兰大白兔建立1型糖尿病模型后行右眼晶状体囊外摘出术,术后选取1d、7d、10d、12d及2周、4周、6周、8周8个时间点在裂隙灯显微镜下观察PCO程度,并用Odrich法对PCO进行分级,每个时间点取3只兔眼,检测增殖细胞核抗原在后囊膜LEC中的表达,并换算成增殖指数(proliferative index,PI)值。结果糖尿病兔术后10d时可观察到部分标本出现后囊膜轻度混浊;6周时可观察到完全PCO,差异有统计学意义(P<0.05)。术后1d、7d PI值均为0,10d、12d及2周、4周、6周、8周时的PI值分别为0.320±0.020、0.520±0.020、0.753±0.306、0.907±0.012、1.000±0.000、0.947±0.012,术后10d到6周每个时间点PI值与上一时间点比较差异均有统计学意义(均为P<0.05),术后6周PI值达到高峰,8周时开始下降。结论糖尿病兔晶状体摘出术后随着时间的推移PCO形成逐渐加重,术后10d LEC开始发生增殖,6周时达到高峰。     

骆驼蓬总碱及其脂质体对兔晶状体上皮细胞的抑制作用

探讨骆驼蓬总碱及其脂质体对兔后囊混浊形成的影响。方法 用改良冻融法制备ＬＴＡＨ。１０只健康纯种新西兰白兔分别每眼行晶状体囊外摘出术并分别注入０．１ｍｌ浓度为０．２ ＴＡＨ及ＬＴＡＨ。观察术后后囊,手术前后眼压,角膜内皮细胞,视网膜电图及组织病理学变化。     

晶状体囊抛光及透明质酸酶预防囊的浑浊

目的探讨晶状体囊抛光并囊袋内注射透明质酸酶预防囊的浑浊和后发性白内障的作用及安全性.方法年龄相关性白内障70例80眼,按常规进行超声乳化吸出人工晶状体植入术.治疗组40眼水分离时用含透明质酸酶1000 IU的必施（BSS）进行,乳化吸出晶状体核和皮质后在黏弹剂的保护下,囊袋内注入含透明质酸酶500IU的BSS,2分钟后用抛光针尖进行晶状体囊抛光,然后注吸清除上皮细胞碎屑,囊袋内植入人工晶状体.对照组40眼则用同等量BSS进行水分离,仅行后囊抛光.术后18月随访,进行角膜内皮、眼底及视网膜电图等检查,并对前、后囊浑浊的情况进行分级.结果术后18月治疗组前、后囊膜浑浊的发生率与对照组相比,差异有统计学意义.角膜内皮损失率与对照组相比,差异无统计学意义.两组眼底检查和视网膜电图检查显示视网膜功能正常.结论晶状体囊袋内注射透明质酸酶联合晶状体囊抛光可以预防囊的浑浊和后发性白内障发生,且眼内应用安全.     

甘糖酯对囊袋法培养的兔晶状体上皮细胞增生的抑制作用

目的应用甘糖酯（PGMS）抑制囊袋法培养的兔晶状体上皮细胞（LECs）的增生和移行能力,探讨其对后发性白内障的预防和治疗作用。方法健康纯种白兔30只模拟白内障囊外摘出术（ECCE）建立兔LECs体外培养的囊袋模型,将制备好的囊袋浸泡于不同质量浓度的PGMS中分别作用不同时间。实验组分别用0.2、0.4、0.8g/LPGMS浸泡晶状体囊袋,作用时间分别为2、5、10min,空白对照组晶状体囊袋不用PGMS浸泡。囊袋置于含质量分数5%胎牛血清的DMEM培养液中培养。7d后以囊膜细胞覆盖率作为评价指标,观察兔LECs增生、移行情况;应用苏木精-伊红染色法进行组织病理学检查,观察LECs的形态及其与晶状体囊袋的结合情况;透射电镜下观察后囊膜上LECs的超微结构。结果对照组在培养的第3天可见LECs呈铺路石样生长,第7天后囊膜LECs的覆盖率达100%;各实验组LECs的覆盖率较对照组明显下降（P〈0.05）。实验组随着PGMS质量浓度的增加和作用时间的延长,细胞增生、移行的速度明显减慢,其中质量浓度为0.8g/L,作用时间5min和10min组显著抑制兔LECs生长,与对照组和0.2g/LPGMS培养组比较差异均有统计学意义（P〈0.05）。病理组织学检测表明0.4g/L及0.8g/LPGMS作用2min组晶状体后囊膜LECs数目较对照组和0.2g/LPGMS组明显减少,细胞与囊膜连接不紧密。透射电镜下可见对照组和0.2g/LPGMS组LECs结构完整;0.4g/L及0.8g/LPGMS组可见细胞内有较多溶酶体,细胞质空泡样变性等退行性改变。结论 PGMS对囊袋培养的兔LECs的增生、移行的抑制作用呈质量浓度及时间依赖性。     

Lens epithelial cell proliferation, migration, and metaplasia following capsulorhexis

AIM—To study the behaviour of residual lens epithelial cells after capsulorhexis and expression of material from the isolated lens.
METHODS—Human and bovine lens capsules were isolated, sterile non-toxic silicone rings inserted, and the preparations placed in organ culture for up to 12 weeks. Cell coverage of the posterior lens capsule was recorded and the capsules were examined, both pre- and post-coverage, for (a) proliferative activity and (b) cytoskeletal components.
RESULTS—After a lag period outgrowth was observed across the posterior capsule. The rate of cell coverage was dependent upon both species and the presence or absence of serum. The proliferative activity of the cells was greatest at or near the leading edge and decreased once covered. Wrinkles became visible in the posterior capsule during the late stages of pre-coverage and increased in both number and complexity. All cells on both the human and bovine posterior capsules contained F-actin and vimentin and the majority were immunolabelled for α-smooth muscle actin (α-SMA).
CONCLUSIONS—This model exhibits many of the in vivo characteristics of the lens capsule after extracapsular surgery and may prove useful in further elucidating the cellular mechanisms of posterior capsule opacification.

Keywords: lens epithelial cells; posterior capsule opacification; capsulorrhexis