慢性粒细胞白血病骨髓体外净化的实验研究

目的　探讨白细胞介素、干扰素 α2 a、bcr- abl反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病骨髓体外净化效果。方法　采用体外克隆形成培养技术 ,分别用白细胞介素、干扰素 α2 a、bcr- abl反义寡核苷酸不同的组合方案 ,体外净化 5例慢性粒细胞白血病 (CML)骨髓。结果　联用 IL- 2、IFN- α2 a(各 80 0 u/ m l)、bcr- abl AS- ODN(30 μg/ ml)方案 ,对白血病细胞克隆形成单位 (L- CFU)抑制作用有显著差异 (P<0 .0 1) ,而相同条件下 ,GM- CFU及 L- CFU的集落存活率分别为 2 6 .91%和 3.49% (P<0 .0 1)。结论　联用 IL- 2、IFN- α2 a(各 80 0 u/ m l)、bcr- abl AS- ODN(30 μg/ml)方案 ,选择性体外净化慢性粒细胞白血病细胞的效果好 ,可用于临床净化 CML 骨髓     

慢性粒细胞白血病骨髓体外净化的实验研究

OBJECTIVE: To investigate the effect of IL-2, IFN and bcr-abl AS-ODN on bone marrow purging in vitro for patients with chronic myelogenous leukemia (CML). METHODS: By amplifying in vitro clone forming culture, and purging the bone marrow of 5 CML patients through different combined use of IL-2, IFN and bcr-abl AS-ODN, we compared the effects of 4 combined regimens. RESULTS: It was found that the suppressive effects of the 4th regimen combining IL-2 (800 U/ml), IFN (800 u/ml) and bcr-abl AS-ODN (30 micrograms/ml) on leukemia cell clone forming unit (CFU) were significantly different from the suppressive effects of the other 3 regimens (P < 0.01). With the use of the 4th regimen, the GM-CFU and L-CFU survival rates were 26.91% and 3.49% respectively (P < 0.01). CONCLUSION: The combined regimen of IL-2 (800 U/ml), IFN (800 u/ml) and bcr-abl AS-ODN (30 micrograms/ml) has good effect on selective CML bone marrow purging in vitro and can be used in clinical purging of CML bone marrow.     

慢性粒细胞白血病反义核酸基因治疗的实验研究

目的单独应用ｂｃｒ－ａｂｌ反义硫代磷酸寡聚脱氧核糖核酸（ＡＳＰＯ）或ｃ－ｍｙｂＡＳＰＯ作用于慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）细胞的研究已有报道，但抑制的不彻底性是个主要问题。由于ＣＭＬ的发生是多癌基因协同作用及相互影响的结果，为进一步提高ＡＳ－ＰＯ对ＣＭＬ细胞的作用效果，用互补于两种类型（ｂ２ａ２及ｂ３ａ２）的ｂｃｒ－ａｂｌ基因融合位点两侧各１３个核苷酸的ＡＳＰＯ（ｂ２ＡＳＰＯ和ｂ３ＡＳＰＯ）及ｃ－ｍｙｂ基因起始密码子２－７互补的ＡＳＰＯ（ｍＡＳＰＯ）联合作用于Ｋ５６２细胞株和原代ＣＭＬ细胞。方法硫代磷酸寡核基酸（ＰＳ－ＯＤＮ）的合成由３９２－０５型ＤＮＡ－ＲＮＡ合成仪自动合成，经ＯＰＣ柱纯化；细胞与ＰＳ－ＯＤＮ共培养后２４，４８，９６，１２０ｈ倒置显微镜下活体观察，０．４％台盼蓝拒染法进行死活细胞计数；ＣＦＵ－Ｋ５６２、ＣＦＵ－ＧＭ、ＣＦＵ－ＧＥＭＭ采用０．８％甲基纤维素半固体培养法；采用两对引物ＲＴ－ＰＣＲ半定量法检测细胞ｂｃｒ－ａｂｌｍＲＮＡ表达；通过流式细胞仪检测及电镜观察细胞凋亡情况。结果（１）ＡＳＰＯ能够特异性抑制ｂｃｒ－ａｂｌ基因表达；经ＲＴ－ＰＣＲ的检测发现１０μｍｏｌＡＳＰＯ作用４８ｈ，两种反义     

74例慢性粒细胞性白血病骨髓和外周血涂片的观察

慢性粒细胞性白血病（CML）是血液学特征方面表现异质性的疾病。我们回顾性地观察了53例慢粒的骨髓涂片和21例外周血涂片，其中符合典型慢粒（CGL）的有62例，另有10例和2例可能分别为非典型慢粒（aCGL)和慢性粒单核细胞白血病（CMML）。观察结果为慢粒的诊断和分型提供了血液细胞形态学依据。     

反义技术在慢性粒细胞白血病治疗中应用的意义

近几年来,由于分子生物医学特别是DNA重组技术的发展,基因治疗的研究已成为国际上的重要课题。慢性粒细胞白血病(慢粒)是染色体易位引起原癌基因被激活致癌的范例,Ph染色体及基因的改变较为恒定,且阳性率高达96%以上,因此以慢粒为对象是基因治疗研究的方向。其中反义技术特别受到关注。1　bcr/abl融合基因的结构及其发病原理ph染色体被认为是慢粒多能干细胞的克隆标志,是由于9号和22号染色体易位t(9:22)(q34;q")所产生。导致9号染色体长臂34区(9q34)部分abl原癌基因5端易位于22号染色体长臂11区(22q")bcr基因3端,形成bcr/abl融合基因。通…     

自体树突状细胞用于慢性粒细胞白血病骨髓净化的初步研究

目的 考察慢性粒细胞白血病（CML）树突状细胞（DC）刺激自体骨髓T细胞,清除白血病细胞的作用。方法 采用3例CML病人（2例慢性期和1例急变期）外周血,分离单个核细胞（PBMNC）,经塑料贴壁后在含自体血浆、重组人白介素4（rhIL－4)、重组人粒－单集落刺激因子（rhGM－CSF）和重组人肿瘤坏死因子（rhTNFα）的RPMI－1640培养液。37℃CO2孵箱培养10天,或用免疫磁珠从PBMNC分离DC,在含自体血浆、rhGMCSF和rhTNFα的RPMI1640培养液培养3天,收获的细胞即DC加到含rhIL－2的Dexter骨髓长期培养体系,置37℃,5％CO2孵箱培养7天,观察前后骨髓细胞的免疫表型和P210阳性细胞比例。结果 从CML病人外周血获得的DC大多数表达P210。在含rhIL－2的Dexter体系加入DC能进一步增加体系中的T细胞数。在2例慢性期病人体系中的P210。在含rhIL－2的Dexter体系加入DC能进一步增加体系中的T细胞数。在2例慢性期病人体系中的P210阳性细胞减少,但在急性期病例,体系中P210细胞明显增加。结论 CML病人的DC表达P210,能刺激自体骨髓中T细胞增生,在慢性期病人,这些自体DC活化的骨髓T细胞有清除白血病细胞的作用。     

慢性粒细胞白血病骨髓的体外净化

目的 :探讨白细胞介素、干扰素α2α、bcr -abl反义寡核苷酸对慢性粒细胞白血病骨髓体外净化效果。方法 :采用体外克隆形成培养技术 ,分别用白细胞介素、干扰素α2α、bcr-abl反义寡核苷酸不同的组合方案 ,进行体外净化 5例慢性粒细胞白血病 (CML)骨髓。结果 :联用IL - 2、IFN -α2α(各 80 0um/ml)、bcr-ablAS -ODN(30ug/ml)方案 ,对白血病细胞克隆形成单位 (L -CFU)抑制作用有显著差异 (P <0 .0 1 ) ,而相同条件下 ,GM-CFU及L -CFU的集落存活率分别为 2 6 .91 %和 3 .49% (P <0 .0 1 )。结论 :联用IL - 2、IFN -α2α(各 80 0u/ml)、bcr-ablAS -ODN(30ug/ml)方案 ,选择性体外净化慢性粒细胞白血病细胞的效果好 ,可用于临床净化CML骨髓。     

慢性粒细胞白血病骨髓组织学变异的探讨

本文报道16例慢性粒细胞白血病(CGL)骨髓活检组织学变异的结果,其中CGL慢性期初治6例,复治4例;CGL急变4例和完全缓解2例。各期骨髓组织学变化与细胞成分和造血细胞过度增生有关。急变期可出现骨小梁紊乱、水肿和坏死等。骨髓细胞学检查2例完全缓解,骨髓组织学检查仅1例完全缓解。纤维组织增生在各期均可发生,完全缓解时似可恢复正常,增生是病情进展和预后不良的指征。     

慢性粒细胞白血病合并骨髓坏死1例报告

慢性粒细胞白血病合并骨髓坏死的临床报告较少 ,本院于2 0 0 0年 5月曾见到 1例 ,现报告如下。患者女性 ,5 2岁。 4年前确诊为慢性粒细胞白血病慢性期 ,费城 (PH)染色体阳性 ,bcr/ abl基因阳性。 4年来 ,用羟基脲及干扰素治疗。 2 0 0 0年 2月骨髓常规显示仍处于慢性粒细胞白血病慢性期。患者 2 0 0 0年 4月份以来反复感冒 ,5月份开始头昏、乏力 ,持续高热 ,腰部及髂骨疼痛 ,血常规示 :白细胞 15 .3×10 9/ L,中幼粒细胞 4% ,晚幼粒 2 % ,中性粒细胞 72 % ,淋巴细胞 17% ,单核细胞 5 % ,血红蛋白 5 6 g/ L,血小板 77× 10 9/ L,于5月 12日…     

50例慢性粒细胞性白血病骨髓象分析

目的:通过对50例慢性粒细胞性白血病骨髓象的分析,以期加强对该病的认识和骨髓象特点的掌握。方法:选取50例慢性粒细胞性白血病患者且对其基础资料、骨髓增生度和细胞形态等内容进行回顾性观察与相关数据记录、整理,然后对所得数据进行统计学处理且对其结果给予相应分析。结果:50例慢性粒细胞性白血病患者骨髓增生度极度活跃者合计43例(占86.0%)、活跃者7例(占14.0%),粒红比正常者合计2例(占4.0%)、升高者合计48例(占96.0%),而巨核细胞正常合计12例(占24.0%)、下降合计3例(占6.0%)、升高合计35例(占70.0%)。结论:骨髓象分析作为慢性粒细胞性白血病的基本检查是掌握详细病情、早期做出诊断的可靠依据且能够为制订合理、有效的治疗方案提供参考。     

慢性粒细胞白血病骨髓细胞体外培养净化作用实验研究

目的 :采用 FISH方法直接在干细胞水平对慢性粒细胞白血病 (CML )患者自体骨髓体外培养前后的间期细胞进行 bcr/abl融合基因检测 ,从而探讨 CML 骨髓细胞体外培养对自体骨髓移植物的净化作用。方法 :分离初治的慢性期 Ph+ CML 7例骨髓单个核细胞 (MNCs) ,体外培养 10 d,用免疫磁珠 (MACS)富集培养前后的 CD34+ 细胞 ,通过流式细胞仪检测培养前后 MNCs中 CD34+ 干细胞比例 ,然后用 FISH方法检测其中 bcr/abl融合基因 ,同时分别用正常人细胞及 K5 6 2细胞株作阴性及阳性对照。结果 :(1) 7例患者骨髓细胞培养前后 CD34+ 细胞中 bcr/abl融合基因平均检出率分别为 85 .3%± 4 .9%和 78%± 5 .1% ,有统计学意义 (P<0 .0 5 ) ,(2 )培养前培养体系中 CD34+ 细胞数量为 (6 .0 6 0± 1.5 6 4 )× 10 5个 ,培养后体系中的 CD34+细胞数量为 (5 .974± 1.4 2 4 )× 10 5个 ,两者无明显差异 (P>0 .0 5 )。 (3)在对照组中假阳性率为 2 .5 % ,假阴性率为 2 %。结论 :自体骨髓细胞体外培养对 CML 病人的骨髓肿瘤细胞有一定程度的净化作用 ;FISH技术直接在干细胞水平检测 bcr/abl融合基因 ,且能定量分析 ,较传统方法更适合对骨髓净化进行评价 ,为骨髓净化提供了一种更方便、可靠的评定方法     

慢性粒细胞白血病骨髓细胞增殖潜能指数及其预后价值的研究

以期前凝集染色体（ＰＣＣ）技术测定１７例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ）和８例正常对照者骨髓细胞增殖潜能指数（ＰＰＩ）。结果显示，ＣＭＬ患者的ＰＰＩ值显著高于正常对照组（Ｐ＜０００１）。患者ＰＰＩ值同骨髓原始细胞加早幼粒细胞之间无相关性（ｒ＝－００７８５）。对１３例ＣＭＬ的随访提示ＰＰＩ值具有独立于形态学的预后价值     

慢粒血片及髓片中出现小巨核细胞的临床意义

对３６例慢粒患者的血片及髓片中小巨核细胞出现的变化进行探讨分析，结果提示：慢粒不同时期小巨核细胞出现的频率各不一样，动态地观察小巨核细胞在数量上的变化，可以及时了解慢粒的病情进展及演变规律，为早期治疗提供一定的实验依据。     

慢性髓性白血病的治疗进展

慢性髓性白血病(CML)属于多能造血干细胞恶性骨髓增生性疾病,费城(Ph)染色体是CML的细胞遗传学标志,90%以上CML患者骨髓细胞中发现有Ph染色体,经过20年的研究,CML患者的生存愈后得到了显著改善,特别是伊马替尼研制成功给治疗CML带来了很大飞跃。这篇综述总结这些年来CML的治疗进展。     

慢性髓性白血病临床各期诊断标准(英文)

本文采用积分法将155例慢性粒细胞白血病(慢粒)分为慢性期(72例),加速期(78例)和急变期(25例),并对各期的主要的临床表现、血象和骨髓象特征以及嗜酸细胞、嗜碱细胞等进行了统计学的分析比较。     

染色体核型和bcr/abl融合基因表达与慢性髓细胞白血病急变的关系

目的 探讨慢性髓细胞白血病(chronic myelogenous leukemia,CML)的细胞遗传学特性及其与病程发展的关系.方法 短期培养法直接法G显带检测CML的骨髓染色体核型,双色荧光原位杂交检测CML的bcr/abl融合基因,统计学方法采用t 检验.结果 264例CML患者的骨髓染色体检测,检测出Ph染色体阴性14例,阴性率5.3 %,其余为Ph染色体阳性,阳性率为94.7%.在观察到CML急变的43例患者中,标准Ph染色体22例,Ph染色体阴性9例,双Ph染色体2例,变异Ph染色体3例,标准Ph染色体伴其它染色体易位3例,Ph染色体阴性伴其它染色体易位1例,Ph染色体阴性伴倒位2例,Ph染色体阳性伴倒位1例.43例患者中24例患者急变时发生了染色体核型及融合基因改变,19例患者染色体核型及融合基因没有发生变化;[t(9;22)(q11;34)]的CML患者与[Ph-,变异Ph,复杂染色体]的CML患者急变时间(月)差异有统计学意义(P＜0.05).结论(1)慢性髓细胞性白血病加速/急变期发生克隆演化;(2)[Ph-,变异Ph,复杂染色体]的CML患者急变时间(月)明显短于[t(9;22)(q11;34)]的CML患者;(3) 染色体核型和bcr/abl融合基因表达可为诊断提供可靠、可循的依据,对预后判断有重要意义.     

慢性粒细胞性白血病患者间充质干细胞的分离、纯化及向神经元样细胞分化的研究

目的研究慢性粒细胞性白血病（CML）骨髓间充质干细胞（MSCs）的分离、纯化、扩增以及在体外向神经元样细胞定向分化的能力。方法获取CML患者的骨髓MSCs，采用低血清培养液培养，瑞士染色观察其形态；流式细胞仪检测其免疫表型和细胞周期；逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）检测CML特异性表达的bcr／abl基因；分析骨髓MSCs染色体核型。全反式维甲酸（ATRA）诱导MSCs在体外分化为神经元样细胞，倒置相差显微镜观察神经元样细胞的形态，免疫组织化学染色法和Western blot法检测神经丝蛋白（NF）和神经元烯醇化酶（NSE）的表达。结果CML来源的骨髓MSCs呈纤维样贴壁生长，体外培养易扩增；表达相关抗原CD29、CD44、CD105，不表达CD31、CD13、CD34、CD45、HLA—DR；不表达bcr／abl融合基因，且具有正常的核型；不同扩增代数的MSCs在诱导剂的作用下呈现典型的神经元样细胞形态，NF、NSE呈阳性反应。结论CML患者骨髓中可以分离培养MSCs，它具有体外大量扩增并保持低分化状态的特性和定向分化为神经元样细胞的能力，是一种可用于神经系统疾病治疗的种子细胞。     

以蟾蜍为主中药在治疗慢性粒细胞白血病-加速期的疗效

目的:探讨以蟾蜍为主的中药在治疗慢性粒细胞白血病-加速期的疗效。方法:63例慢性粒细胞白血病(CML)在进入加速期后,分别用原化疗方案加用以蟾蜍为主中药治疗(A组,n=35)和DA或HA方案化疗(B组,n=28)。结果:A组22例治疗成功,占62.9%;B组21例成功,占75%。两组疗效的差别无统计学意义,P>0.05。两组间副作用的差别有统计学意义,P<0.05。结论:以蟾蜍为主的中药对慢性粒细胞白血病-加速期可能有效。     

类高雪氏细胞在慢性粒细胞白血病中的意义

目的：探讨慢性粒细胞白血病（CML）骨髓中出现类高雪氏细胞的意义。方法：利用形态学及细胞化学染色检查94例CML患者和63例类白血病反应患者的骨髓涂片;检测49例CML患者骨髓的Ph染色体;分析94例CML患者出现急变期或加速期的情况。结果：94例CML患者的骨髓涂片中有29例找到类高雪氏细胞,而类白血病反应患者的骨髓涂片中未找到类高雪氏细胞;CML患者Ph染色体的阳性率为91．8％（45／49）;65例无类高雪氏细胞的CML有21例处于急变期或加速期（急性期17例,加速期4例）,而9例有类高雪氏细胞的CML有2例发生急变,两组间有显著差异（P＜0．01）。结论：类高雪氏细胞的出现对CML的诊断及预后有重要价值。