共查询到20条相似文献,搜索用时 250 毫秒
1.
pcDNA3-hbFGF转染角朊细胞对真皮成纤维细胞增殖的生物学效应 总被引:8,自引:2,他引:6
目的:观察含外源性人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)基因的角朊细胞(HK),对真皮成纤维细胞(HDFib)增殖的影响;探讨转hbFGF基因HK对创面愈合的生物学效应及作用机理,为这种转基因HK细胞用于创面基因治疗的可行性提供实验依据。方法:收集含真核表达质粒pcDNA3-hbFGF的HK细胞培养上清,加入培养的HDFib细胞内;MTT法测定细胞的增殖率、^3H-TdR掺入法测定细胞DNA合成率 相似文献
2.
用IL-2/LAK细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探讨IL-2/LAK细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响,用3H-TdR掺入DNA法测定了17例中晚期癌症病人在IL-2/LAK细胞治疗前后外周血加PHA或不加PHA淋巴细胞体外增殖试验,结果显示无论空白对照(11/16)还是PHA诱导的T淋巴细胞增殖试验(12/16),cpm值较治疗前均有明显的提高(P<0.05,P<0.01);在T细胞亚群的测定中,IL-2/LAK细胞治疗前后比较,CD3+和C8+细胞都未发现明显的差异,只有C4+细胞较治疗前(13/17)有了显著提高(P<0.01);NK细胞虽未达到正常水平,但也显示较治疗前有显著增高的倾向;结果表明,IL-2/LAK细胞疗法既对肿瘤细胞有直接杀伤作用,也对细胞免疫起了明显的促进作用。 相似文献
3.
目的 采用α-CD28单抗增强α-CD3单抗刺激的肿瘤特异性T细胞的杀瘤活性。方法 采用2种方案培养FBL-3免疫的小鼠脾细胞。(1)使用α-CD3单抗48h后,加入α-CD28单抗同时使用48h后,加入α-CD3单抗、α-CD28单抗和20U/ml rIL-2(α-CD3+α-CD28+IL-2组)。^3H-TdR掺入法检测两组效应细胞的增殖水平。标准4h-^51Cr释放法检测两组效应细胞的杀伤 相似文献
4.
用IL—2/LAK细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
为了探讨IL-2/LAK细胞对中晚期癌症病人细胞免疫的影响,用^2H-TdR掺入DNA法测定了17例中晚期癌闰病人在IL-2/LAK细胞治疗前后外周血加PHA或不加PHA淋巴细胞外增殖试验,结果显示无论空白对照(11/16)还是PHA诱T淋巴细胞增殖试验(12/16),cpm值较治疗前均事明显的提高(P〈0.05,P〈0.01);在 T细胞亚群的测定中,IL-2/LAK细胞治疗前后比较,CD^+和 相似文献
5.
急性髓细胞白血病细胞IL—2受体基因的研究 总被引:2,自引:1,他引:1
羊裔明 《华西医科大学学报》1997,28(3):288-292
为研究髓细胞白血病(AML)细胞白介素-2受体(IL-2R)基因及IL-2在AML中的作用,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对41例AML患者化疗前白血病细胞IL-2Rα mRNA和IL-2RβmRNA进行检测,并对部分IL-2R基因阳性表达细胞用^3H-TdR掺入法测定其对重组人IL-2(rHIL-2)的反应。结果显示,AML组织IL-2Rα和IL-2β基因表达是一普遍现象,41例中白血病 相似文献
6.
选用3H-TdR释放法及掺入法分别检测LAK细胞活性、LAK细胞增殖功能及9种临床常用肺癌化疗药物对LAK细胞抗肿瘤活性的影响。结果显示,不同化疗药物对IL-2诱导LAK细胞活性的影响不同,同种化疗药物不同浓度间的影响也有差异。卡铂(Carbo)、足叶乙甙(VP16)、5-氟尿嘧啶(5-Fu)有增强作用;环磷酰胺(CTX)、顺铂(CDDP)、长春新碱(VCR)、甲氨喋呤(MTX)对IL-2诱导LAK细胞活性无明显影响;阿霉素(ADM)、丝裂霉素(MMC)在较高浓度时,抑制LAK细胞活性产生。除CTX外的8种药物均显著抑制LAK细胞增殖功能。实验表明:常规剂量的化疗不会抑制LAK细胞活性的产生,5-Fu、Carbo、VP16与IL-2结合抗癌可望产生协同疗效.IL-2先于化疗给药并维持至化疗后一定时间,其联合抗癌效果可能更佳。 相似文献
7.
柯萨奇B组病毒感染患儿细胞免疫状态及对干扰素疗效的影响 总被引:3,自引:1,他引:2
系统探讨柯萨奇病毒B感染血症的机体免疫特征及干扰素应用的评价。采用ELISA法测定CVB-Ag和CVB-IgM,采用单克隆抗体标记的间接ABC免疫组化法测定T细胞亚群;^3H-TdR标记法测定,NK细胞和LAK细胞活性。结果:1.CVB感染机体NK细胞活性。LAK细胞活性和CD4/CD8比值明显低于对照组;2.机体NK和LAK细胞活性轻中度降低,CVB-Ag可自然清除或应用α干扰素清除.若NK和L 相似文献
8.
尾加压素在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制 总被引:8,自引:1,他引:7
目的 观察近年新发现的活性肽尾加压素(Urotensin Ⅱ,UⅡ)在大鼠气道平滑肌细胞增殖中的作用及其机制。方法 (1)采用^3H-胸腺嘧啶(^3H-TdR)掺入法测定UⅡ对原代培养的大鼠气道平滑肌细胞(ASMC)DNA合成的影响,应用不同阻断剂观察UⅡ诱导细胞DNA合成的信号转导通路。(2)采用Fura-2/AM荧光探针,测定UⅡ对胞浆游离钙浓度的影响。结果 (1)UⅡ呈浓度(10^-10~10^-6mol/L)依赖性刺激ASMC^3H-TdR掺入,10^-6mol/L时,为对照组的7倍(P〈0.01);(2)蛋白激酶C(PKC)阻断剂H7、丝裂素活化蛋白激酶(MAPK)阻断剂PD98059及钙通道阻断剂尼卡的平均能抑制UⅡ刺激的ASMC^3H-TdR掺入,其抑制率分别为29%(P〈0.05),45%(P〈 相似文献
9.
猪肺动脉缺氧内皮细胞条件培养液和DDPH对肺动脉平滑肌细… 总被引:3,自引:3,他引:0
用^3H-胸腺嘧啶核苷和^3H-尿嘧啶核苷掺入法及流式细胞术。观察猪肺动脉缺氧仙皮细胞条件培养液(HECCM)和1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐(DDPH)对猪肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)DNA、蛋白合成及细胞周期的影响。 相似文献
10.
羊裔明 《四川大学学报(医学版)》1997,(3)
为研究髓细胞白血病(AML)细胞白介素-2受体(IL-2R)基因及IL-2在AML中的作用,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)对41例AML患者化疗前白血病细胞IL-2RαmRNA和IL-2RβmRNA进行检测,并对部分IL-2R基因阳性表达细胞用3H-TdR掺入法测定其对重组人IL-2(rhIL-2)的反应。结果显示,AML细胞IL-2Rα和IL-2β基因表达是一普遍现象,41例中白血病细胞有IL-2RαmRNA和IL-2RβmRNA表达分别为28例(68.3%)和32例(78.0%),IL-2RαmRNA和IL-2RβmRNA同时表达者21例(51.2%)。IL-2R基因阳性表达细胞对rhIL-2的体外反应呈不均一性,表现为细胞增殖、受抑或不反应,8例中仅1例M5型患者细胞呈增殖反应。本研究表明AML细胞IL-2R基因表达是一普遍现象,这些细胞在体外对rhIL-2的反应呈不均一性,大多表现为无反应或受抑。 相似文献
11.
目的:研究重组人肝细胞生长因子(rhHGF)对常染色体显性遗传型多囊肾病(ADPKD)囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成的影响。方法:用^3H-TdR掺入法测定不同浓度(0.5、1、2.5、5ng/ml)rhHGF作用48h以及最适浓度的rhHGF分别作用24、48、72h ADPKD囊肿衬里上皮细胞系细胞的增殖情况;并分别用^3H-脯氨酸掺入法和放免法测定最适浓度rhHGF作用最佳时间后ADPKD囊肿衬里上皮细胞系细胞胶原及层粘连蛋白的合成情况。结果:rhHGF促进了ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖及胶原和层粘连蛋白的合成,以1ng/ml持续作用48h最为显。结论:rhHGF对体外培养的ADPKD囊肿衬里上皮细胞增殖及细胞外基质合成有明显的促进作用。 相似文献
12.
肝癌细胞在Ⅳ型胶原裱衬表面的粘附特性 总被引:23,自引:1,他引:22
定量描述肝癌细胞和肝细胞在Ⅳ型胶原裱衬表面的粘附特性,探讨细胞粘附力与Ⅳ型胶原裱衬浓度及Ⅳ型胶原与层粘连蛋白复裱衬时LN复合浓度的相关关系。方法采用分步裱衬的方法制作 有关裱衬表面,即依次在玻璃表面裱衬多聚赖氨酸和Ⅳ型胶原/LN,最后以牛血清白蛋白作用阻断非特异性粘附。细胞粘附力采用微管吸吮技术进行测定。 相似文献
13.
目的:观察去甲斑蝥素(NCTD) 对高糖刺激的HK-2 细胞外基质和TGF-β1 表达的影响。方法:常规培养HK-2 细胞,无血清DMEM 培养基同步培养24 h,细胞分为正常葡萄糖组(C,D-glucose 5.5 mmol/L)、甘露醇对照组(M,5.5 mmol/L D-glucose+24.5 mmol/L mannitol)、高糖组(HG,30 mmol/L D-glucose)、高糖+NCTD 干预组(30 mmol/L D-glucose+0.5~40 mg/L NCTD)。台盼蓝排斥实验检测NCTD 对高糖刺激的细胞毒性。MTT 法检测NCTD 对高糖刺激的细胞增殖的影响。收集培养6,24,48 h 后细胞总RNA 及蛋白,用RT-PCR 检测细胞FN,Col Ⅳ和TGF-β1 mRNA 的表达,采用Western 印迹检测FN,Col Ⅳ和TGF-β1 蛋白的表达。结果:不同浓度NCTD 作用72 h 后,浓度超过5 mg/L 的NCTD 对高糖环境下的HK-2 细胞有明显的毒性。RT-PCR 和Western 印迹结果显示: 30 mmol/L D- 葡萄糖可引起HK-2 细胞FN,Col Ⅳ和TGF-β1 mRNA 及蛋白水平的升高(P<0.05),而5 mg/L NCTD 可抑制高糖刺激的FN,Col Ⅳ和TGF-β1 的表达(P<0.05)。相同渗透浓度的D- 甘露醇组对上述指标均无影响(P>0.05)。结论:NCTD 能下调HK-2 细胞FN,Col Ⅳ及TGF-β1 的表达。 相似文献
14.
目的研究吡哆胺对血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的人近端肾小管上皮细胞株HK-2细胞增殖的影响,并通过与替米沙坦的比较探讨其作用机制。方法以吡哆胺和替米沙坦分别干预经过AngⅡ诱导的HK-2细胞,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞内活性氧簇(ROS)水平,实时荧光定量PCR及Western Blot分别检测糖基化终末产物受体(RAGE)、转化生长因子-β1(TGF-β1)的mRNA及蛋白表达水平。结果与对照组比较,AngⅡ可抑制HK-2细胞的增殖,使细胞内ROS生成增加并上调RAGE、TGF-β1的mRNA和蛋白表达水平(均为P<0.01);0.1,1mmol/L的吡哆胺均能明显减轻AngⅡ对HK-2细胞增殖的抑制作用,同时减少ROS生成,并下调RAGE、TGF-β1的mRNA和蛋白表达水平(均为P<0.01);0.1,1mmol/L浓度吡哆胺的作用均优于替米沙坦。结论吡哆胺能减轻AngⅡ对HK-2细胞增殖的抑制作用。这一效应可能与吡哆胺减轻氧化应激、抑制AGEs-RAGE及下调纤维化因子TGF-β1的表达有关。 相似文献
15.
目的 探讨尿酸诱导肾小管上皮细胞上皮-间充质细胞转化(epithelia-mesenchymal transition,EMT)的作用及机制.方法 采用不同质量浓度的尿酸预孵育肾小管上皮细胞(HK-2)48 h,通过倒置显微镜观察尿酸对HK-2细胞形态的影响,Western blot检测Fibronectin、α-SMA和E-cadherin蛋白表达变化.Real-time PCR检测炎症因子IL-1 β、IL-6以及TNF-α mRNA的表达变化,免疫荧光检测上皮细胞标志物cytokeratin和间充质细胞标志物vimentin的表达变化.结果 与正常组相比,15 mg/dL的尿酸处理HK-2细胞48 h后,HK-2细胞间隙增大,呈长梭形改变.间充质细胞标志物Fibronectin、α-SMA表达明显升高,而上皮细胞标志物E-cadherin的表达明显下降(P<0.05).同时,高浓度尿酸诱导了HK-2细胞炎症因子IL-1β、TNF-α的表达升高(P<0.05),TLR4/NF-κB信号通路活化,而靶向抑制NF-κB信号通路活化可以显著抑制尿酸诱导的EMT.结论 高尿酸可以通过活化TLR4/NF-κB信号通路诱导肾小管上皮细胞EMT的发生,靶向干预NF-κB信号通路可以显著抑制尿酸诱导的肾间质纤维化. 相似文献
16.
尿毒血清对HK-2细胞增殖和胶原蛋白分泌的影响 总被引:2,自引:1,他引:1
目的探讨尿毒血清对人肾上管上皮细胞侏(HK-2)增殖和胶原蛋白分泌的影响。方法在HK-2细胞培养液中加入正常人血清及不同浓度的尿毒血清,采用四氮甲基唑蓝(MTT)比色法和流式细胞术测定HK-2细胞增殖活性的变化;采用消化法检测细胞培养上清中羟脯氨酸的含量,换算成总胶原分泌量。结果5%-20%浓度尿毒血清组A490值均高于正常对照组,10%-20%浓度尿毒血清组G1期细胞均低于正常对照组,P1指数均高于正常对照组,但不同浓度尿毒血清组组间差异无统计意义;各浓度尿毒血清组羟脯氨酸和胶原蛋白含量较正常对照组增高,且随着尿毒血清浓度的升高而增高。结论慢性肾衰竭患者体内蓄积的尿毒症素可能通过促进肾小管上皮细胞增殖,促进细胞外基质的分泌,从而加速肾小管一间质纤维化进程,导致肾功能进行性恶化。 相似文献
17.
目的 探讨原发性肾病综合征(简称肾病)患儿的免疫细胞对肾小球固有细胞的直接作用。方法 肾病患儿28例,健康体检儿15例,分为未治组、激素组、阴转组及正常对照组。制备外周血单个核细胞条件液(PBMC-CM),运用肾小球细胞体外培养技术、同位素掺入技术、放射免疫竞争性抑制法,检测PBMC-CM刺激后的大鼠肾小球上皮细胞合成层粘连蛋白(LN)、总胶原、Ⅲ型前胶原、Ⅳ型胶原等基质成分的含量;PBMC-CM对大鼠的肾小球系膜细胞^3H-TdR掺入指数的影响。结果 4组的LN抑制指数分别为0.95,1.02,1.01,1.03;^3H-羟脯氨酸的掺入指数为0.93,1.24,1.23,1.11;Ⅲ型前胶原的抑制指数为0.96,1.00,0.99,1.01;Ⅳ型胶原抑制指数为1.04,1.05,1.04,1.08。未治组患儿 相似文献
18.
目的 探讨Palbociclib药物对肾小管上皮细胞周期进展及细胞增殖的影响。方法 体外培养肾小管上皮细胞HK-2分别给予不同浓度(0、1、5、10、20 μmol/L)的Palbociclib进行处理,通过细胞计数和CCK8法检测不同浓度及时间下Palbociclib对HK-2细胞增殖及细胞活力的影响。EDU染色检测不同浓度下Palbiciclib对HK-2细胞作用5 d后的细胞增殖情况。流式分析检测Palbociclib对HK-2细胞生长周期分布的影响。采用SA-β-Gal、C12FDG等衰老染色技术检测不同浓度下Palbociclib作用于HK-2细胞5 d后其对衰老表型的诱导情况。RT-PCR检测P16、P21、P53及衰老相关分泌表型的mRNA相对表达水平,Western blot检测P16、P21和P53的蛋白表达情况。结果 Palbociclib抑制HK-2细胞增殖并诱导细胞周期阻滞于G1期。相比于对照组而言,高剂量(10 μmol/L)的 Palbociclib 可明显抑制 HK-2 细胞增殖活性,且在第 5 天时增殖抑制效果最为明显(P<0.01)。Palbociclib诱导HK-2细胞生长周期主要阻滞于G1期,而进入S期的细胞数相比于对照组来说明显减少(P<0.01)。Palbociclib可诱导HK-2细胞发生衰老,通过SA-β-Gal和C12FDG衰老染色检测,结果表明在Palbociclib作用下,HK-2细胞的胞内衰老相关半乳糖苷酶活性明显升高。RT-PCR及Western blot结果显示Palbociclib可明显上调HK-2细胞中P16、P21、P53等衰老相关因子的基因和蛋白表达水平(P<0.01)。与对照组相比,RT-PCR检测Palbociclib作用下的HK-2细胞中衰老相关分泌因子的基因表达水平也升高(P<0.01)。结论 Palbociclib可通过抑制HK-2细胞生长并阻滞其细胞周期进程进而诱导HK-2细胞发生衰老。 相似文献
19.
目的: 探讨肝细胞生长因子(HGF)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)对肾小管上皮-肌成纤维细胞转分化(TEMT)的影响,并阐明其作用机制。方法: 体外培养人近曲小管上皮HK-2细胞,取Ⅳ期细胞分为对照组、AngⅡ(1×10-6mol·L-1)组、HGF(8 μg·L-1)组和AngⅡ(1×10-6mol·L-1)+HGF(8 μg·L-1)组。采用CCK8法检测HK-2细胞增殖情况,RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达水平,Western blotting法检测α-SMA的蛋白表达水平。结果: 与对照组比较,AngⅡ组HK-2细胞增殖活性降低(P<0.01),HGF组HK-2细胞增殖活性升高(P<0.05),AngⅡ+HGF组HK-2细胞增殖活性降低(P<0.05)。与对照组比较,AngⅡ组 HK-2细胞中α-SMA mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05或P<0.01),HGF组HK-2细胞中α-SMA mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05或P<0.01), AngⅡ+HGF组HK-2细胞α-SMA mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05); 与AngⅡ 组比较,AngⅡ+HGF组细胞增殖活性升高(P<0.05),α-SMA mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05)。结论: AngⅡ抑制肾小管上皮细胞增生而促进TEMT, HGF促进肾小管上皮细胞增生而抑制TEMT,HGF可能介导AngⅡ抑制HK-2细胞增生及促进TEMT的作用。 相似文献
20.
阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株HSC-T6增殖及胶原合成的影响 总被引:10,自引:0,他引:10
目的:研究阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株HSC-T6增殖及胶原合成的影响。方法:采用肝贮脂细胞株,以细胞增殖抑制率为指标,用噻唑蓝(MTT)法测定药物对大鼠贮脂细胞株HSC-T6增殖的影响;通过^3H-脯氨酸掺入法测定药物对HSC-T6胶原合成的影响。结果:阿魏酸钠对大鼠贮脂细胞株HSC-T6增殖及胶原合成的抑制率随药物浓度增加(28.9~462.6nmol/L)而升高,呈药物浓度依赖关系。结论:阿魏酸 相似文献