口服SabinⅢ型脊髓灰质炎疫苗减毒的基因基础

作者分析了SabinⅢ型脊髓灰质炎疫苗P3/利昂/12a_1b株及其神经毒子代P3/利昂/37株核酸序列中10个位点突变的差异并进行了比较.作者按常规方法从P3/利昂/12a_1b株和P3/利昂/37株中获得cDNA克隆,用限制性核酸内切酶切割对减毒表型重要的突变位点,经琼脂凝胶电泳和酚抽提纯化后,由T4DNA连接酶连接形成重组质粒转化到大肠杆菌JA221中,重组质粒经CsCl梯度离心     

原代猴肾细胞或Vero细胞制备的OPV的遗传稳定性:在细胞培养和人胃肠道中传代的影响[英]

作者用肠道和细胞培养进行疫苗株传代,通过测定与减毒和毒力回复密切相关碱基的回复率,比较了利用原代猴肾(VK)细胞或Vero细胞制备的口服脊髓灰质炎疫苗(OPV)的遗传稳定性.对21名未接种过OPV的健康婴儿,接种用VK或Vero细胞制备的OPV,其中三型病毒量之比为10:1:3.所用减毒株为1型LS-c,2ab/KP_2(P1/Sabin);2型 P712,Ch,2ab/KP_2(P2/Sabin);3型Leon 12a_1b/KP3(P3/Sabin).分别在接种后 2、7、14和 21天收集粪便样品.     

美国口服脊髓灰质炎疫苗:Sabin 3型疫苗病毒经肠道繁殖后的分子生物学特征

由于发达国家野毒株引起的脊髓灰质炎基本消灭,故人们的兴趣趋向该疫苗的遗传稳定性研究。作者选择8名2月龄婴儿,服用由猴肾细胞生产的Sabin三价活疫苗。然后采用指纹图谱、序列分析及猴体神经毒力试验对从粪便分离的3型病毒,着重研究了RNA5′端非编码区与减毒表型相关的472位核苷酸的突变。服苗后2天内全部标本均分离出3型病毒,个别于服后10小时即检出病毒。然而排毒持续时间不尽相同,短至1周,长达5周以上。许多资料表明,服苗者排出的3型病毒RNA5′端非编码区472位核苷酸突变与毒力     

从1名健康疫苗接种者分离到的重组3型/2型脊髓灰质炎病毒及其包含的嵌合核壳VP1的鉴定

从接种口服脊髓灰质炎疫苗后约 1 2周的 1名 2岁男孩的粪便标本中分离到Sabin3/Sabin2 /Sabin3( S3/2 /3)型间重组脊髓灰质炎病毒。　　由于该分离株的初步鉴定为嵌合 Sabin3/Sabin2核壳结构 ;从而使作者进一步研究了这个病毒的整个基因组序列、抗原特性和温度敏感性。　　研究表明 ,第 1个重组连接位于编码VP1核壳蛋白的基因区 ,在 32 74和 32 85位核苷酸之间 ;第 2个连接则位于 RNA聚合酶区域 ( 6 82 4和 6 82 5位核苷酸 )。重组把 6个 Sabin2衍生氨基酸引入 Sabin3核壳中的VP1羧基末端。重组病毒的全基因组与其亲代 Sabin株在 33…     

蔗糖对减毒的Ⅲ型脊髓灰质炎疫苗株的稳定作用

脊髓灰质炎减毒活疫苗已广泛用于控制麻痹型脊髓灰质炎流行,但有时在冷链系统不健全的热带国家其效果令人失望.本文报道对温度高度敏感的减毒的Ⅲ型脊髓灰质炎病毒Leon 12a_1b株以不含Mgcl_2的15%蔗糖作为热稳定剂在37℃下能稳定保存.作者将蔗糖置于铝箔上,用4支15瓦的     

新一代脊髓灰质炎疫苗

1953年Salk研制了脊髓灰质炎灭活疫苗,嗣后Sabin研制成功了减毒活疫苗,使本病的发生得以控制。但服用Sabin疫苗后,儿童及与服苗儿童密切接触者中分别有1/800万及1/550万的疫苗相关病例发生。三个型Sabin弱毒株中,Ⅱ及Ⅲ型遗传学上不稳定,特别是Ⅲ型,易发生毒力回升。因而疫苗生产中对原种毒株的传代次数有所限制,而在Ⅲ型则更严格。各国均在试图以Ⅲ型Sabin株以外的Ⅲ型病毒生产疫苗。现将新疫苗的研究进展简述如下: 1.新疫苗株病毒的研究:最近各型Sabin病毒及其相应的强毒株的RNA碱基序列     

脊髓灰质炎病毒的无神经毒力、遗传稳定性克隆(Sabin Ⅲ型疫苗株)

目前,世界上所有大国都使用口服脊髓灰质炎疫苗(OPV)来预防脊髓灰质炎。OPV的主要的、也许是唯一的缺点,就是在服苗者及其接触者中引起极少数麻痹病例。在报道的麻痹病例病因中,以Ⅲ型病毒最多。已经证明,服苗后3或4天内,服苗者大便中排出的SabinⅢ型病毒对猴子有完全的神经毒力;病毒基因组中与神经毒力有关的5′端非编码区会产生回复突变,第472位的尿苷变为胞苷。为了获得更加稳定的Ⅲ型疫苗,作者用cDNA-RNA杂交法制备了SabinⅢ型克隆。构建了含有Sabin-Ⅲ基因组全长DNA拷贝     

从1名健康疫苗接种者分离到的重组3型／2型脊髓灰质炎病毒及其包含的嵌合核壳VP1的鉴定

从接种口服脊髓灰质炎疫苗后约12周的1名2岁男孩的粪便标本中分离到Sabin3／Sabin2／Sabin3(S3／2／3)型问重组脊髓灰质炎病毒。     

通过在基因组5′端非编码区顺序中引入缺失构建低神经毒力脊髓灰质炎病毒

降低病毒复制中某些关键步骤的效率可能引起病毒减毒,作者用病毒株传染性cDNA克隆,在Ⅰ型脊髓灰质炎病毒的Mahoney和Sabin株的基因组的5'端非编码区742个核苷酸长的顺序中引入缺失,从而在体外构建低神经毒力脊髓灰质炎病毒株.     

脊髓灰质炎病毒抗原嵌合体可作为一种新疫苗

目前使用的脊髓灰质炎减毒活疫苗由野型病毒在非人灵长类动物和组织培养中经多次传代而得。有证据表明,1型疫苗与亲代野毒株相比,有多处减毒突变;而3型病毒仅有两处突变。在发达国家2和3型Sabin疫苗株与接种者的少数脊髓灰质炎有关。脊髓灰质炎病毒分子生物学和遗传学的最新进展提示有可能制备新的、与1型病毒同样安全的2和3型疫苗。作者将含1型Sabin疫苗抗原位点1的1174个硷基对的PstⅠ限制性内切酶片段亚克隆到噬菌体M13 mp18中。用3型3.370株抗原位点1区的8个氨基酸取     

SabinⅢ型脊髓灰质炎活疫苗的猴体神经毒力比较

1974年到1978年期间,英国国立生物学标准与检定研究所在检定SabinⅢ型脊髓灰质炎活疫苗过程中,发现有几批疫苗在爪哇猴脊髓注射组中的神经毒力比同源参考毒株为高。为证实1961年以来Ⅲ型疫苗的神经毒力是否发生了改变,作者对该所检定过的所     

全球首个Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗获批上市

本刊讯2015年1月14日,国家食品药品监管总局批准了全球首个Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(单苗)的生产注册申请。该疫苗是由中国医学科学院医学生物学研究所研发,通过采用现行脊髓灰质炎减毒活疫苗的生产毒株(Sabin株),经在Vero细胞生物反应器培养收获病毒,结合灭活疫苗生产工艺制备而成。该疫苗主要通过注射途径用于儿童预防脊髓灰质炎病毒的感染,它的上市将对我国彻底消灭脊髓灰质炎发挥至关重要的作用。脊髓灰质炎是一种由Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型脊髓灰质炎病毒引起的急性传     

Ⅰ型和Ⅱ型脊髓灰质炎减毒活疫苗的猴体神经毒力

[Marsden SA et al:J Biol Stand8(4):303,1980(英文)] 猴体神经毒力试验对脊髓灰质炎减毒活疫苗来说,仍然是一项重要的检定项目。Ⅲ型Sabin株脊髓灰质炎减毒活疫苗使用历史表明,它的猴体神经毒力随病毒株在细胞培养中传代水平而增高。为了确定Sabin株Ⅰ、     

构建细小核糖核酸病毒活疫苗的策略

利用感染性cDNA克隆,已构建了若干1型脊髓灰质炎病毒Mahoney有毒株与sabin1减毒株之间的重组病毒。这些重组病毒的猴体神经毒力试验表明,病毒颗粒的表面结构与神经毒力表型有些相关,神经毒力强的决定簇位于5′端非编码序列。这些结果产生了两种构建活的小核糖核酸病毒减毒株的可能的策略。一种是利用Sabin 1株作为携带外来抗原的载体:另一种是在5′端非编码序列引入突变来构建减毒的细小核糖核酸病毒。Sabin 1株的抗原性成功地改变为脊髓灰质炎病毒其他血清型的抗原性,而疫苗质量不降低。还证明,在Sabin 1株和Mahoney株基因组的5’端非编码序列引入缺失突变可构建具有弱神经毒力表型的病毒。     

3型脊髓灰质炎活疫苗贮存过程中感染性损失的研究[英]

1991年扩大的免疫计划（EPI）要求脊髓灰质炎（PV）疫苗在37℃下培育7天,感染性滴度损失不超过0.5log10,但现有疫苗无一达到此标准。鉴于脊髓灰质炎活疫苗中3型病毒最不稳定,因此对该病毒株的研究最多。作者将3型病毒Pf218、SKB321、WP/Ⅲ、71/303和Leon株及世界卫生组织（WHO）病毒标准品分别加至含有1％人血清白蛋白     

简讯

2015年1月14日,国家食品药品监管总局批准了全球首个Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(单苗)的生产注册申请。该疫苗是由中国医学科学院医学生物学研究所研发,通过采用现行脊髓灰质炎减毒活疫苗的生产毒株(Sabin株),经在Vero细胞生物反应器培养收获病毒,结合灭活疫苗生产工艺制备而成。该疫苗主要通过注射途径用于儿童预防脊髓灰质炎病毒的     

在Vero细胞内传代的脊髓灰质炎Sabin减毒疫苗株中突变株的累积分析

口服脊髓灰质炎疫苗 ( OPV)是全球消灭脊髓灰质炎的主要手段。有经验显示Sabin疫苗病毒在 Vero细胞中培养的毒力回复突变比在原代猴肾细胞中培养的高。本研究以聚合酶链反应和限制性内切酶酶切技术作突变分析 ( MAPREC) ,分析经 Vero细胞或次代绿猴肾 ( s GMK)细胞培养的脊髓灰质炎 Sabin疫苗病毒中含神经毒力基因的病毒比例 ,评估两种细胞传代后疫苗病毒的遗传学稳定性 ,来确证 OPV病毒在 Vero细胞中培养的安全性。　　在 33.3℃ ,低感染复数 ( MOI)状态 (约1 0 - 3.5CCID50 /细胞 ,正常的 OPV生产状态 )下 , 型病毒 IS- 77N…     

全球首个Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗获批上市

本刊讯2015年1月14日,国家食品药品监督管理总局批准了全球首个Sabin株脊髓灰质炎灭活疫苗(单苗)的生产注册申请。该疫苗是由中国医学科学院医学生物学研究所研发,通过采用现行脊髓灰质炎减毒活疫苗的生产毒株(Sabin株),经在Vero细胞生物反应器培养收获病毒,结合灭活疫苗     

在分子遗传学基础上研制新脊髓灰质炎病毒疫苗

本文报道用电子计算机分析3个型的脊髓灰质炎病毒(PV)Sabin疫苗株和Ⅰ型Mahoney株[PVI(M)]毒粒RNA全部核苷酸序列的结果,并讨论病毒的基因结构与其生物学性质之间的关系。病毒基因组序列分析方法:从纯化的PV毒粒RNA合成病毒基因组的双链cDNA,经HindⅢ酶处理,并嵌入到PBR322克隆载体的适宜位置,筛选克隆,用Maxam等法测定克隆cDNA核昔酸序列,对非克隆DNA基因组的5′末端序列也作了测定。结果:Ⅰ型脊髓灰质炎Sabin株[PV1(sab)]的毒粒RNA分子有7,441个核苷酸长度,PV2(sab)有7,439个,PV3(sab)有7,434     

脊髓灰质炎病毒嵌合体诱生广泛反应性HIV-1中和抗体

1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)包膜蛋白(env)具有广泛的序列异质性和抗原变异性,也存在着抗原性保守位点.理想的疫苗应含有此保守位点,以便诱生能与许多病毒分离株起反应的抗体.作者选用HIV-1跨膜糖蛋白gp41(组特异性抗原决定簇),以Ⅰ型脊髓灰质炎病毒Sabin疫苗株为表达载体(pCASl),用DNA重组技术构建成脊髓灰质炎病毒/HIV-1抗原嵌合体Sl/env/3.