建立幽门螺杆菌感染BALB/c小鼠动物模型

目的在普通饲养条件下用云南cagA+、vacA+的毒力单株3-21建立小鼠动物模型。方法口服0.2 mol/LNaHCO3,15 min后用胃管灌喂H.Pylori3-21菌株5次,1周内连续完成。灌胃后4周处死动物,用胃黏膜匀浆液进行细菌培养实验、尿素酶实验、胃病理组织学检查,并应用RFLP-PCR法确定动物小鼠感染的H.Pylori为定植所用的菌株。结果灌胃4周后,处死的10只BALB/c小鼠经细菌培养实验、尿素酶实验、胃病理组织学检查均感染上H.Pylori。而对照组动物的胃黏膜匀浆液经各项检测均为阴性。结论成功地建立了H.Pylori感染的小鼠实验动物模型,为H.Pylori致病机制的研究、疫苗开发研制等奠定了一定基础。     

不同品系小鼠骨髓间质干细胞扩增能力及细胞表型差异的比较

背景：虽然近年来对小鼠骨髓间质干细胞分离培养的报道层出不穷，但就其方法而言，有的操作步骤过于繁琐，有的不适用于国内相关实验，如采用一系列抗体负选或利用自行研制的新抗体筛选。目的：拟建立简便稳定的小鼠骨髓间质干细胞体外分离和扩增的方法，并比较不同品系小鼠骨髓间质干细胞的生物学特点。设计、时间及地点：细胞学体外对比观察，于2007—04／09在中山大学中山医学院病理生理教研室完成。材料：清洁级6周龄雄性C57BL／6和BABL／C小鼠各5只，由中山大学中山医学院实验动物中心提供。方法：取两种品系小鼠双侧股骨，去除股骨上附带组织，用含10％FCS的DMEM培养基冲洗骨髓腔，过200目不锈钢网，收集骨髓细胞，用Tris—NH4Cl红细胞裂解液溶解2min，用含10％FCS的DMEM培养基调整细胞浓度，按500个细胞，孔低密度接种于24孔板，置于37℃、体积分数为0．05的CO2培养箱中。出现成纤维样细胞克隆后消化收集并移至6孔板，待细胞70％～80％融合时消化传代。主要观察指标：细胞形态和生长特点，流式细胞仪检测细胞表型，茜素红染色观察成骨诱导情况，油红O染色观察成脂诱导情况。结果：约培养2周可形成细胞克隆，经历一缓慢扩增阶段后，第6～7代细胞生长明显加快，可见形态均一的成纤维细胞群，呈典型的旋涡状生长，两种品系小鼠骨髓间质干细胞均可传至10代以上，但C57BL／6小鼠骨髓间质干细胞体外扩增能力更强。C57BL／6和BABL／C小鼠骨髓间质干细胞均呈CD45^＋CD11b^-CD117^-，CD44和Sca-1呈阳性表达，可连续表达MHC—Ⅰ，少量表达CD80，此外前者可少量表达MHC—Ⅱ，而后者几乎不表达MHC-Ⅱ。两者体外均能够向成骨、成脂方向分化。结论：通过低密度培养技术可简单方便的体外分离并扩增C57BL／6和BALB／c小鼠骨髓间质干细胞。两品系小鼠骨髓间质干细胞均易向成骨成脂分化，但在扩增能力、细胞表型上略有不同。     

运动对BALB/c小鼠肺巨噬细胞吞噬活性的影响

目的:探讨运动对BALB/c小鼠肺巨噬细胞(BAMs)吞噬活性的影响。方法:选择300只8—10周龄的雄性BALB/c纯系小鼠为实验对象,随机分为对照组(CE)、急性中度组(ME)或剧烈运动组(SE),每组100只,在传动式跑步机上持续跑步。CE组不运动,ME组和SE组速度由9m/min开始,每隔3min增速1次,ME组强度为17m/min,SE组运动直至体力耗尽为止。各组小鼠经由重复的肺部沖洗收集巨噬细胞(BAMs),应用荧光显微镜及流式细胞分析仪分析BALB/c小鼠巨噬细胞吞噬活性的变化,比较各组肺巨噬细胞吞噬活性之间的差异。结果:急性中度运动与剧烈运动分别造成约40%及100%以上的白细胞增加。剧烈运动后白细胞计数呈两相式增加,剧烈运动刚结束时淋巴细胞和性粒细胞分别比运动前增加24.9%和21.6%。中度运动组以及剧烈运动组吞噬细胞百分比(%P)和平均吞噬颗粒数(PI)分别为:34%、79%和1.92、5.09,与对照组比较剧烈运动可促进肺泡巨噬细胞吞噬失调颗粒的能力,而中度运动则否。剧烈运动结束后(Post-SE0h)的肺巨噬细胞(BAMs)吞噬活性最强,且随休息时间增加而渐减,Post-SE1h仍有显著的促进作用,而在4h后回到基值,一直到16h后不再变化。Post-SE0h组%P和PI与同组对照组比较增加明显(P<0.05),而吞噬IgG和IgG/c’颗粒活性只稍微增加,与同组对照组比较差异未达到显著水平(P>0.05)。结论:急性剧烈运动对BALB/c小鼠肺巨噬细胞吞噬无调理颗粒的能力具有促进作用。     

SPF级BALB/c小鼠感染幽门螺杆菌的造模方法研究

目的 比较现有的幽门螺杆菌(Hp)菌液直接灌胃造模法和预先用抗生素灌胃破坏原籍菌群再用Hp灌胃造模法效果的差异,以建立一种造模周期短且可靠的Hp感染的慢性胃炎模型.方法 60只SPF级BALB/c小鼠随机分为三组,抗生素造模组用抗生素灌胃后再予Hp菌悬液灌胃造模,直接造模组予Hp菌悬液灌胃造模,生理盐水对照组予生理盐水灌胃对照.小鼠均于灌胃后8周处死.用快速尿素酶试验、Giemsa染色和微需氧细菌培养检测Hp定植,用选择性培养基培养法分析造模前后小鼠胃内菌群的变化,用H-E染色检查小鼠胃黏膜病理组织学改变.结果 ①Hp感染结果 :抗生素造模组小鼠胃内Hp感染率为100%,直接造模组为60%,生理盐水对照组未检测到Hp定植.抗生素造模组Hp感染率和定植量均较直接造模组明显为高(P＜0.05).②菌群分析结果 :抗生素造模组小鼠胃内细菌总数为104～105CFU/g组织,直接造模组为105～106 CFU/g组织,生理盐水对照组为105～106 CFU/g组织.抗生素造模组的各种细菌数与直接造模组和生理盐水对照组相比显著下降(P＜0.05),直接造模组和生理盐水对照组各种细菌数无显著性差异(P＞0.05).③病理组织学结果 :抗生素造模组、直接造模组小鼠胃黏膜均有炎症改变,直接造模组小鼠较抗生素造模组小鼠炎症程度明显为轻(P＜0.05).生理盐水对照组未见炎症改变.结论 用抗生素灌胃可破坏小鼠原籍菌群,促进Hp的定植.此种造模方法 效果好于已有的Hp菌悬液直接灌胃造模法,用此法可成功建立Hp标准株感染SPF级BALB/c小鼠的造模周期短而稳定的慢性胃炎模型.     

不同时期幽门螺杆菌感染趋势探讨

目的：探讨慢性胃炎、消化性溃疡幽门螺杆菌感染趋势。方法：选择1992/1996年（A组）和2002/2006年（B组）本院住院和门诊患者共367例,其中慢性胃炎（胃炎组）259例,消化性溃疡（溃疡组）108例,分别对两个时期的HP感染情况进行比较分析。结果：在不同时期,胃炎组HP感染率差异有显著性（χ^2=6.588,P〈0.05）;溃疡组HP感染率差异无显著性（χ^=0.858,P〉0.05）。结论：近10 a来慢性胃炎HP感染率下降;消化性溃疡HP感染率无明显变化。     

不同激素剂量和组合对不同品系小鼠超数排卵的影响

背景:超数排卵效果受动物品系、营养水平、年龄、发情周期阶段、光照、超排方法、超排所用激素种类和剂量等诸多因素影响,其中激素剂量和动物品种是关键因素.目的:探讨不同剂量孕马血清促性腺激素(pregnant mare serum gonadotropin,PMSG)和人绒毛膜促性腺激素(human chorionic gonadotropin,HCG)组合,对不同品系小鼠超数排卵效果的影响.方法:分别用不同剂量的PMSG和HCG对ICR鼠、KM鼠和BALB/c鼠进行超数排卵处理,比较激素处理后各品系小鼠超数排卵的胚胎总数、平均胚胎率、正常胚胎及平均可用胚率.结果与结论:5 IU PMSG+7 IU HCG剂量组合对ICR鼠和KM鼠超排处理效果较好,BALB/c鼠超排的最适激素剂量为3 IU PMSG+5 IU HCG;使用5 IU PMSG+7 IU HCG剂量组合分别处理3种品系小鼠时,ICR鼠和KM鼠平均胚胎率和平均可用胚率显著高于 BALB/c鼠(P < 0.05).为获得较多的胚胎进行相关实验,应当选择ICR和KM等小鼠进行超排,特别是选择国际通用的ICR鼠.     

幽门螺杆菌感染根除治疗的研究进展

幽门螺杆菌( Helicobacter pylori,Hp)为慢性活动性胃炎的主要致病菌,消化性溃疡的重要致病因素,与胃癌、胃黏膜相关淋巴样组织(MALT)淋巴瘤的发生密切相关.1994年世界卫生组织国际癌症研究机构(IARC)将其列为人类I类致癌原[1],因此对于H.pylori的根除治疗在临床上具有重大意义.经典的三联疗法的临床应用,使H.pylori的根除率可达85％～90％,但近些年来H.pylori的根除率明显下降,可能与H.pylori的耐药有关,因此就这一问题做如下综述.     

幽门螺杆菌感染根除失败的再治疗

【目的】探讨幽门螺杆菌（HP）感染根除失败的再治疗方法。【方法】70例HP感染根除失败患者随机分为A和B组,以雷贝拉唑、莫西沙星和克拉霉素组成方案,分为7d疗程组（A组,n=35）和14d疗程组（B组,n=35）进行对比研究。【结果】A组根除率为74．29％（26／35）,B组为94．29％（33／35）,两组比较差异有统计学意义（χ2=5．2851,P〈0．05）。A和B组不良反应发生率分别为14．29％（5／35）,25．71％（9／35）,两组比较差异没有统计学意义（χ2=1．4286,P〉0．05）。【结论】以雷贝拉唑、莫西沙星和克拉霉素组成方案作为HP感染根除失败的再治疗方案有较高的根除率,且用药14d的疗效更佳。     

柯萨奇病毒B诱导的免疫性多发性肌炎模型的建立

目的：探讨制作实验性免疫性多发性肌炎动物模型的方法，以及柯萨奇病毒感染与多发性肌炎发病的关系。方法：分别用不同毒力0．3ml的柯萨奇病毒B1（CVB1，10^-2，10^-3,10^-4 TCID50）感染和兔肌肉匀浆（30mg/ml）加完全弗氏佐剂多次免疫28只正常豚鼠，共观察3～5周；和不同毒力0．2mlCVB1，10^-2，10^-3,10^-4 TCID50分别腹腔接种各20只BALB／C和C57BL／6小鼠；以及0．1ml CVB3 10^-6 TCID50腹腔接种28只BALB／C小鼠，共观察1～3周，制成实验性多发性肌炎动物模型，观察其在血清肌酶、巨检和组织病理的改变。结果：发现0．3训毒力为10^-2（A组），10^-3（B组）和10^-4（C组）TCID50柯萨奇病毒B感染豚鼠纽，3周后仅少数豚鼠出现多发性肌炎的症状，但均能导致肌酶谱（CK，CK-MM，LDH和AST）异常升高，与正常组相比有明显差异（均P〈0．05），以B组升高值最高，但巨检肌肉无异常；4周后10^-3组（F组）豚鼠33．3％出现下肢瘫痪，巨检发现肌肉萎缩，弹性差，病理检查证实为多发性肌炎改变；3周与5周的CK和CK-MM升高值相比，无显著差异（P=0．1031和P=0．1164）。单纯兔肌肉匀浆免疫（E组）也能导致豚鼠肌酶谱异常升高，但不如病毒感染后明显，也不引起股肌肉肌炎的病理改变。柯萨奇病毒B1和B3均不能诱导BALB／C和C57BL／6小鼠出现多发性肌炎改变。结论：柯萨奇病毒B1感染的毒力和病毒量与豚鼠多发性肌炎的发病相关，在感染5周后比较明显。本模型可作为研究人类多发性肌炎的一个重要手段，为人类肌炎的发病机理和治疗提供较好的动物模型。     

C57BL/6近交系小鼠Lewis肺癌动物模型:建设性描述肺癌损害程度的指标

目的:建立肺癌动物模型,探讨肺癌的致病因素,发病机制及防治措施。方法:将传代培养的Lewis肺癌细胞接种于C57BL/6小鼠腋部皮下,制备肺癌模型。观测最佳接种剂量,成瘤率,发瘤平均潜伏期,平均存活时间,平均瘤重,肿瘤体积动态变化,彩色多普勒能量图(CDE)检测瘤内血流丰富程度及病理组织学观察。结果:最佳接种剂量为1×106个细胞,成瘤率80%,发瘤平均潜伏期为(6.3±0.4)d;平均存活时间为(28.0±2.5)d;平均瘤重(9.13±0.03)g;CDE:70%为Ⅲ级,30%为Ⅳ级,频谱(PS)为75.30cm/s,阻力指数(RI)为0.45。结论:Lewis肺癌细胞诱发肺癌模型在实验肺肿瘤研究中可作为首选造模方法。     

长期小强度跑台运动对C57BL/6J小鼠突触可塑性的影响

目的:本研究观察长期小强度跑台运动对C57BL/6J小鼠突触可塑性的影响,探讨运动提高学习和记忆能力的细胞机制。方法:3月龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为运动组(12只)和对照组(12只)。运动组小鼠进行5个月小强度跑台训练,运动训练结束后进行Morris水迷宫检测学习和记忆行为学改变,1周后采用电生理学方法在体记录海马齿状回(DG)的群体峰电位(PS)和场兴奋性突触后电位(f-EPSP)的变化。电生理学测试后制备小鼠脑石蜡切片,采用免疫组织化学方法检测海马DG区突触素(SYP)的蛋白表达情况,并取海马组织利用Western blot方法检测SYP的蛋白表达。结果:电生理学结果显示,高频刺激后运动组小鼠PS幅值和f-EPSP斜率百分数均高于对照组,差异具有显著性(P0.05);运动组小鼠海马组织突触素蛋白表达水平明显高于对照组,差异具有显著性(P0.05);运动组小鼠海马齿状回突触素阳性反应产物的整合光密度值明显高于对照组,差异具有显著性(P0.05)。结论:5个月小强度跑台运动可增强C57BL/6J小鼠的突触结构和功能可塑性。     

Time-Course of Contrast Enhancement in Spleen and Liver with Exia 160, Fenestra LC, and VC

Objective  The purpose of this study was to compare the time-course of contrast-enhancement in spleen and liver using Exia 160 in comparison with Fenestra LC and VC in healthy mice. Procedures  Healthy C57bl/6 mice were used in this study. Fenestra LC and VC was administered intravenously at a dose of 0.1 ml/20 g or 0.2 ml/20 g. Exia 160 at a dose of 0.05 ml/20 g or 0.1 ml/20 g. Each animal underwent a micro-CT scan before contrast injection (baseline) and immediately after contrast injection. Additional scans were performed at 1, 2, 3, 4, 24, and 48 h after contrast administration. The mice who received Exia 160 were also scanned after 15, 30, and 45 min. Results  The peak enhancement of Exia 160 occurred after 15 min for the spleen and after 30 min for the liver. Conclusions  Exia 160 allows rapid spleen and liver enhancement. The high iodine content results in small injection volumes.     

建立小鼠增生性瘢痕动物模型的研究

目的:应用小鼠建立自身产生的、与人类类似的增生性瘢痕动物模型。方法:在小鼠耳耳腹面形成边长约3mm的方形全层皮肤缺损创面,愈合后,用计数细胞层数的方法对增生块进行病理学观察,比较瘢痕增生程度。结果:小鼠耳腹面可产生类似于人类的增生性瘢痕。外观明显产生增生80%。结论:这一动物模型可能成为研究人类瘢痕的动物模型。     

维甲酸诱导BALB／C近交系小鼠产生腭裂的剂量研究

目的：研究维甲酸诱导BALB／C近交系小鼠产生腭裂所需的剂量。方法：将40只BALB／C近交系小鼠分成四组,每组10只,在妊娠10d时分别给予不同剂量的维甲酸,给药后观察所有孕鼠的反应,在妊娠15d时解剖部分孕鼠,取胎鼠头部,行冠状切片,苏木精一伊红染色法（HE染色）,进行观察。剩余孕鼠任其自然分娩,观察子鼠情况。结果：给予70mg／kg维甲酸后,孕鼠组绝大多数表现腭裂动物模型所需特征。结论：70mg／kg剂量维甲酸能够诱导BALB／c近交系小鼠产生可靠的腭裂动物模型。     

超声生物显微镜成像对正常小鼠心血管的初步研究

目的探讨超声生物显微镜对小鼠心血管成像的方法及价值。方法选择8、16、24及32周龄C57BL／6健康成年雄性小鼠32只，每组各8只，采用Visualsonics公司Vevo770小动物超声成像系统，经胸骨左缘、心尖、胸骨右缘及胸骨上窝等扫查窗口，观察并分析小鼠心脏、大血管的结构及血流频谱，并对左心收缩及舒张功能进行评价。结果经上述扫查窗口，可获得左心室长轴、左心室短轴、升主动脉长轴、主动脉弓长轴、主动脉短轴、右心室流人道、肺动脉长轴等切面，仅心尖切面显示不满意。通过这些切面能清晰显示左心房、左心室、二尖瓣、主动脉及主动脉弓、室间隔、右心房、右心室、三尖瓣、肺动脉、无名动脉及左颈总动脉等结构，进而测量其内径，并可顺利获得各瓣口的血流频谱。各切面心脏及大血管二维径线测值及各瓣口血流脉冲多普勒测值比较显示，各周龄组相关测量数据间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论超声生物显微镜可很好地应用于小鼠心脏及大血管成像，采用适当的扫查窗口和切面可获得满意的图像。超声医师经过短期培训即可熟练掌握该技术，因而具有很好的应用前景。     

正常小鼠主动脉的超声生物显微镜成像分析

目的探索超声生物显微镜进行小鼠主动脉的成像方法及其应用价值。方法采用Visualsonics公司Vevo770小动物超声成像系统对32只健康成年雄性C57BL／6小鼠进行观察,显示小鼠主动脉及其分支结构,测量升主动脉内膜-中膜厚度（IMT）并与病理结果进行对照。结果小鼠主动脉IMT的超声生物显微镜成像测值与病理测值相关性良好（r=0.593,P〈0.01）,超声生物显微镜成像与病理测值的直线回归方程为Y=0.142X＋0.076。8、16、24和32周小鼠组间比较,超声及病理所测IMT差异无统计学意义。结论超声生物显微镜成像能清晰显示正常小鼠主动脉切面,并检测升主动脉IMT,为进一步研究动脉粥样硬化小鼠模型奠定了基础。