霉酚酸酯对2型糖尿病大鼠肾组织的保护作用

目的:观察霉酚酸酯(MMF)对2型糖尿病大鼠肾组织中神经生长因子(NGF)的影响.方法:应用高糖高脂饮食加小剂量链脲佐菌素(STZ)制备2型糖尿病大鼠模型,然后分别用胰岛素、MMF及二者联合干预治疗.采用免疫组织化学技术检测各组肾小球中NGF及单核/巨噬细胞(CD68)的表达水平.结果:(1)高糖高脂饮食 小量STZ后,大鼠血糖升高,且血胰岛素水平不低.继续喂养6周后大鼠肾重/体重、内生肌酐清除率(Ccr)、尿白蛋白排泄率(UAE)等指标较正常组明显升高;(2)糖尿病组大鼠肾组织中NGF、CD68表达较正常组明显增加.治疗6周后,MMF 胰岛素组NGF表达水平显著降低,单核/巨噬细胞浸润减轻,肾功能指标及组织病理学损害明显改善.结论:(1)糖尿病模型建立后6周,已出现糖尿病肾病早期改变;(2)2型糖尿病大鼠肾组织中NGF过量表达,MMF的肾脏保护作用可能与减少肾组织中NGF表达,减轻单核/巨噬细胞的浸润有关;(3)同时应用MMF和胰岛素能增强对2型糖尿病大鼠肾脏的保护作用,这可能与MMF抗炎和胰岛素降血糖双重保护作用有关.     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织单核细胞趋化蛋白-1与细胞间黏附分子-1表达的影响

糖尿病肾病(DN)肾内单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)表达上调,单核/巨噬细胞浸润等炎症机制越来越受到重视犤1犦。本研究探讨霉酚酸酯(MMF)对糖尿病(DM)肾组织MCP-1、ED-1、ICAM-1表达的影响,旨在为DN的抗炎治疗提供实验依据。一、材料和方法1.糖尿病模型建立及分组:30只雄性昆明种SD大鼠(安医大实验动物中心提供),行右肾切除术和腹腔注射单剂量STZ65mg/kg。随机分3组:对照组(C);模型组(DM);MMF给药组(DM MMF),每组10只。MMF10mg·kg-1·d-1灌胃。整个实验期间不用胰岛素。2.指标检测:术后8周末测尿…     

霉酚酸酯对糖尿病肾脏疾病大鼠肾组织中尾加压素Ⅱ及其受体的影响

目的探讨霉酚酸酯（MMF）对糖尿病肾脏疾病（diabetickidneydisease,DKD）大鼠肾组织中尾加压素Ⅱ（urotensinⅡ,UⅡ）蛋白与其受体UT表达和肾小球病理改变的影响。方法SD大鼠随机分为正常对照组、DKD组和MMF干预组,16周末测量24h尿蛋白定量、血糖、血肌酐、尿素氮。取肾脏标本测肾质量,部分肾组织行HE染色,光镜下观察肾小球组织形态学的改变,免疫组化观察UⅡ／UT表达。结果DKD大鼠肾组织中UⅡ／UT的表达增多。MMF能显著抑制大鼠24h尿蛋白的排泄,降低血肌酐、尿素氮;减轻肾脏病理改变,下调UⅡ／UT表达。结论UⅡ／UT的表达增多可能参与了DKD的发病过程。MMF对糖尿病大鼠肾脏的保护作用可能与下调肾组织中UⅡ／UT的表达水平有关。     

塞来昔布对2型糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子表达的影响

目的:探讨塞来昔布对2型糖尿病大鼠肾脏结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法:36只大鼠分成对照组及模型组,模型组通过采用4周高糖高脂饮食配合链脲佐菌素(STZ)诱导的方法来制备类似2型糖尿病的动物模型,然后随机将大鼠分成糖尿病组及治疗组,给药8周后观察血肌酐、血胰岛素、尿微量白蛋白、血糖的变化;HE及PAS染色观察肾脏病理改变;免疫组化方法检测肾组织中CTGF的表达.结果:塞来昔布可以减少2型糖尿病大鼠尿蛋白排泄率及血肌酐;使大鼠肾脏组织中CTGF的表达降低,并使肾脏病理改变好转.结论:塞来昔布对2型糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能部分是通过下调2型糖尿病大鼠肾脏CTGF的表达来实现的.     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾组织RANTES与ED-1表达的影响

目的：建立链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型并用霉酚酸酯（MMF）干预，动态观察细胞因子（RANTEs）、单核／巨噬细胞表面特异性标志抗原（ED-1）、Ⅳ型胶原（Col Ⅳ）在肾组织中的表达，探讨MMF能否通过抑制肾组织炎症反应达到保护肾脏的作用。方法：36只雄性SD大鼠随机分为正常对照组、糖尿病模型组和MMF治疗组，于实验第4周、14周末每组分别处死6只大鼠，处死前留取24h尿进行24h尿蛋白定量，处死后免疫组织化学染色观察RANTES、ED-1、Col Ⅳ在肾组织中的表达。结果：（1）正常肾组织RANTES有少量表达，模型组的表达均显著增高，MMF组各时间点与相应模型组比较均显著降低；（2）正常肾组织ED-1有少量表达，模型组的表达均显著增高，MMF组各时间点与相应模型组比均显著降低。结论：MMF可能是通过下调RANTES在肾组织中的表达、减少单核／巨噬细胞在肾组织中的浸润．在旱期抑制肾组织炎症反应．进而对肾脏具有一定的保护作用．     

霉酚酸酯对糖尿病肾病大鼠肾小球硬化的研究

目的通过霉酚酸酯对链脲佐菌素（STZ）糖尿病肾病大鼠模型的干预治疗,探讨其对肾组织转化生长因子β1（TGF-β1）及血浆内皮素（ETI）的影响。方法采用STZ腹腔注射法建立糖尿病肾病动物模型,将60只Wistar大鼠随机分为正常对照组（A组）、糖尿病肾病组（B组）及霉酚酸酯治疗组（C组）,每组各20只。C组给予霉酚酸酯（15mg·kg^-1·d^-1）灌胃治疗,12周后检测各组大鼠24h尿白蛋白、肌酐清除率（Ccr）、血糖、血ET-1浓度、HE和PAS染色观察肾脏病理改变、免疫组化方法检测TGF-β1的表达。结果霉酚酸酯能降低糖尿病肾病大鼠的24h尿蛋白定量、血ET-1、TGF-β1的表达;升高Ccr;减轻肾组织系膜细胞、系膜基质增生,减轻基底膜肥厚,肾小球硬化明显减少。结论霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾脏有保护作用,其机制可能与减少蛋白尿,降低血ET-1、TGF-β1的表达有关。     

尿毒清颗粒对糖尿病大鼠肾脏炎症损伤的影响

目的探讨尿毒清颗粒对糖尿病大鼠肾脏炎症损伤的保护作用。方法选用链脲佐菌素（STZ）诱导的糖尿病大鼠模型。实验分3组：正常对照组（N组）、糖尿病未干预组（D组）、尿毒清颗粒治疗组（Q组,2．6g·kg-1·d-1灌胃）,于第4、8周末检测血肌酐（SCr）、尿肌酐（Ucr）,计算肌酐清除率（Ccr）,检测血清超敏C反应蛋白（hs—CRP）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）,光镜观察肾组织病理改变,免疫组织化学检测肾组织核因子xB（NF-kB）、单核细胞趋化蛋白1（MCP-1）表达,检测肾皮质MCP-1mRNA表达。结果尿毒清颗粒可以提高糖尿病大鼠Ccr（P〈0．01）,改善肾脏病理损伤,减少血清hs-CRP、肾组织NF-kB、MCP-1表达（P〈0．1）5,P〈0．01）,对血清TNF-α、IL-6影响不显著。结论炎症反应参与糖尿病大鼠肾脏损伤,尿毒清颗粒能降低血清及肾脏炎症介质表达,对糖尿病大鼠肾脏炎症损伤起保护作用。     

尿毒清颗粒对糖尿病大鼠足细胞损伤的保护作用研究

目的：探讨尿毒清颗粒对糖尿病大鼠足细胞损伤的保护作用。方法：将SD大鼠制备成STZ糖尿病模型,实验分3组：正常对照组、糖尿病未干预组、尿毒清颗粒治疗组（2.6g·kg-1·d-1灌胃）,于实验第4周、8周末检测血糖、血肌酐、尿肌酐及尿白蛋白排泄率,光镜、电镜下观察肾组织病理改变并计数足突宽度,免疫组化观察足细胞相关蛋白分子nepherin、podocin的表达,Real time-PCR检测肾皮质nepherin、podocin mRNA表达。结果：尿毒清颗粒可以改善糖尿病大鼠肌酐清除率,降低尿白蛋白排泄,改善肾脏病理,减轻足突融合,维持足细胞相关蛋白分子的分布与表达。结论：初步证实尿毒清颗粒能通过上调足细胞相关蛋白分子水平减轻足细胞损伤,对糖尿病大鼠足细胞损伤具有保护作用。     

霉酚酸酯对糖尿病肾组织炎性因子表达的抑制作用

目的探讨霉酚酸酯（MMF）在糖尿病肾组织中发挥抗炎作用及其机制。方法MMF治疗2型糖尿病大鼠，观察肾组织单核／巨噬细胞浸润，及转录因子（NF）-KBp65、神经生长因子表达的变化；不同浓度的霉酚酸干预高糖环境下培养的肾小球系膜细胞，测定细胞间粘附分子（ICAM）-1、单核细胞趋化蛋白（MCP）-1及神经生长因子（NGF）表达的变化。结果MMF治疗能显著改善糖尿病大鼠肾功能，伴肾小球NF-KBp65活性明显下降，NGF表达水平明显降低，单核／巨噬细胞浸润显著减轻。霉酚酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞ICAM-1、MCP-1和NGF高表达有显著的抑制作用。结论MMF很可能通过降低NF-KB活性，间接抑制炎性因子表达、炎症细胞浸润。霉酚酸对高糖环境下肾小球系膜细胞ICAM-1、MCP-1和NGF的高表达有显著抑制作用。     

霉酚酸酯对糖尿病大鼠肾间质细胞浸润及肾组织ICAM-1和MCP-1 mRNA表达的影响

炎症反应是糖尿病肾病（DN）发生的重要环节，细胞间黏附分子（ICAM）和单核细胞趋化因子（MCP）表达增加是导致单核细胞及巨噬细胞浸润肾组织的两个重要因素。近年来发现霉酚酸酯（MMF）有抗炎作用，所以在理论上可以用于包含糖尿病肾病在内的一些非移植性疾病的治疗。本研究的目的主要在于探讨MMF对糖尿病大鼠肾脏ICAM-1和MCP-1m RNA表达的影响及其对肾脏的保护作用。     

钛合金颗粒对人外周血单核细胞RANK基因表达影响

目的:探讨钛合金颗粒对人外周血单核细胞RANK基因表达影响。方法:从健康志愿者外周静脉血分离单核细胞,用无血清DMEM培养液将钛合金颗粒制成0.002％、0.01％、0.05％(v/v)三种实验浓度颗粒悬浮液,分别干预单核细胞8小时、24小时和72小时,采用RT-PCR半定量法和免疫组化结合共聚焦显微镜半定量法分别检测单核细胞RANK基因在mRNA和蛋白水平的变化。结果:0.01％浓度颗粒作用后,单核细胞RANK基因mRNA在8小时表达增强(P<0.05),24小时达到最高值(P<0.01),而且颗粒作用表现为浓度依赖效应关系;0.002％、0.01％浓度颗粒能够延缓举核细胞RANK蛋白在体外递减的变化趋势。结论:钛合金颗粒能够在mRNA和蛋白水平影响人外周血单核细胞RANK基因表达。     

黄芪甲苷对肾小管上皮细胞诱导单核细胞分化的影响

目的本研究通过体外细胞共培养,观察肾小管上皮细胞对单核细胞分化影响及中药组分黄芪甲苷对单核细胞分化的影响。方法体外建立单核细胞(U937)与人近端肾小管上皮细胞(human proximal tubular epithelial cell line,HK-2)共培养系统,实验分3组:对照组(U937细胞组),实验组(U937+HK-2细胞组),干预组(U937+HK-2细胞+黄芪甲苷组)。观察黄芪甲苷对HK-2细胞诱导U937细胞分化及其Toll样受体4(Toll-like receptors 4,TLR4)的表达以及黄芪甲苷对U937细胞TBK/IRF3信号通路的影响。应用Real-time PCR观察黄芪甲苷对HK-2细胞诱导的U937细胞分化影响,应用流式细胞仪及WR观察U937细胞表面Toll样受体4(Toll-like receptors4,TLR-4)的表达,应用Real-time PCR及WB观察黄芪甲苷对U937细胞TBK/IRF3信号通路的影响。结果黄芪甲苷通过抑制U937细胞TLR-4表达[对照组、实验组、干预组TLR-4表达分别为(27.32±1.34)、(34.67±1.23)、(30.12±1.67)]抑制TBK/IRF3信号通路[对照组、实验组、干预组TBK分别为(0.60±0.05)、(1.10±0.12)、(0.80±0.21),对照组、实验组、干预组IRF3分别为(0.92±0.08)、(1.35±0.23)、(1.10±0.27)],从而抑制U937细胞iNOs mRNA表达[对照组、实验组、干预组iNOs mRNA表达分别为(0.80±0.15)、(1.18±0.23)、(1.00土0.11)],上调Arg-1 mRNA表达[对照组、实验组、干预组Arg-1 mRNA表达分别为(1.10±0.23)、(0.56±0.24)、(0.78±0.23)],从而抑制U937细胞发生M1型转化。结论黄芪甲苷可能通过抑制U937细胞TLR-4表达减弱TBK/IRF3信号通路,从而抑制U937发生M1型转化,进一步抑制炎症因子产生,阻断肾脏纤维化。     

Intraoperative splanchnic hypoperfusion, increased intestinal permeability, down-regulation of monocyte class II major histocompatibility complex expression, exaggerated acute phase response, and sepsis

BACKGROUND: A compromised gut barrier function may be associated with systemic inflammatory response syndrome, sepsis, and multiple organ dysfunction syndrome in patients after major trauma or critical illness, and inadequate oxygenation of the gut mucosa has been incriminated as an underlying mechanism. The focus of this study was the relationship of splanchnic hypoperfusion to regional and systemic immune responses after major surgery. METHODS: Patients (n=20) undergoing curative oncologic resection of the esophagus or esophagogastric junction were studied. Gastric mucosal pH level was monitored by gastric tonometry. The expression of class II major histocompatibility complex antigen (human leukocyte antigen-DR) and L-selectin on systemic monocytes was assessed before surgery, during surgery (as well as portal monocytes), and for 1 week after surgery, along with C-reactive protein levels. Intestinal permeability was measured before surgery and on the first and seventh postoperative days by using dual sugar probes. RESULTS: Significant mucosal acidosis (pH<7.1) intraoperatively was evident in 5 patients (25%), and a further 7 patients (35%) had a nadir gastrointestinal mucosal pH level between 7.1 and 7.2. Severe (<7.1) mucosal acidosis was associated significantly (P< .05) with postoperative septic complications, an increase in postoperative intestinal permeability, C-reactive protein and L-selectin expression, and a decrease (P< .05) in monocyte human leukocyte antigen-DR expression. CONCLUSIONS: Intraoperative splanchnic hypoperfusion is associated significantly with down-regulation of monocyte function, increased intestinal permeability, and an exaggerated acute phase response. This suggests that splanchnic hypoperfusion alters local and systemic immune function, supporting the thesis that the gut has a central role in the immunoinflammatory response to major surgery.     

来氟米特对糖尿病肾病大鼠MCP-1表达的影响

目的：通过建立糖尿病肾病（DN）大鼠模型来研究来氟米特对大鼠肾脏MCP-1表达的影响,以进一步探讨来氟米特对DN大鼠的治疗作用及其机制。方法：健康雄性Wistar大鼠30只随机分为3组：对照组、DN组及来氟米特组,应用链脲佐菌素（STZ）诱导左肾切除大鼠DN模型,来氟米特组在成模后每日灌胃来氟米特5mg/kg。于实验第8周、12周末各组分别取5只动物测24h尿量及24h尿蛋白定量;心内采血测肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）;电镜标本观察肾组织病理改变,免疫组化法检测肾组织MCP-1蛋白的表达。结果：来氟米特组大鼠尿蛋白、Scr、BUN与同期DN组相比明显减少。病理组织学观察说明来氟米特可以减轻肾脏损害。经来氟米特治疗后,MCP-1的表达减少。结论：来氟米特可减少DN大鼠肾组织MCP-1的表达,减轻肾脏损害。     

氟伐他汀对UUO大鼠肾间质单核细胞趋化蛋白-1表达及巨噬细胞浸润的影响

目的观察氟伐他汀对单侧输尿管梗阻大鼠肾间质单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)表达和巨噬细胞浸润的影响,探讨其抗纤维化机制。方法90只SD雌性大鼠随机分成假手术(SOR)组、单侧输尿管梗阻术(UUO)模型组和UUO+氟伐他汀治疗组(T-UUO,氟伐他汀20mg·kg-1·d-1)。于术后第1、4、7、10、14d分别处死各组大鼠。用HE及Masson染色动态观察肾脏病理变化,免疫组织化学法测定MCP-1、单核巨噬细胞抗原(ED-1)的表达。结果UUO模型组肾小管-间质MCP-1与ED-1表达较SOR组增加(P<0.05);在术后各时间点,T-UUO组大鼠肾小管-间质MCP-1、ED-1的表达及肾间质胶原相对面积较UUO模型组显著减少,但/仍高于SOR组(P<0.05)。结论氟伐他汀可通过降低MCP-1表达、减少单核/巨噬细胞浸润以抑制肾间质纤维化。     

Reduction of CD47 on monocytes correlates with MODS in burn patients

Alternation of surface markers on monocytes is associated with the development of inflammation. The goals of the present study were to detect CD47 expression on monocytes by flow cytometry and explore its relationship with disease severity and MODS in burned patients. The results show CD47 expression on monocytes from all burned patients (n = 21) was lower than that from the healthy population (n = 21) for 24 days after burn. There was a significant difference in CD47 expression on monocytes between the patients with differing burn severity in the first 7 days after injury (P < 0.05). Considering the relationship between CD47 expression and MODS, we found the CD47 expression on monocytes from patients with MODS was lower (P < 0.05) in the first 3 days after injury than that from patients without MODS. In conclusion, diminished CD47 expression on monocytes is associated with burn severity and the occurrence of MODS in burn patients.     

Species differences in the immunophenotype of osteoclasts and mononuclear phagocytes

Summary Human osteoclasts, in contrast to mononuclear phagocytes, are known to express a well-defined restricted range of myeloid antigens. To determine whether these antigenic differences are present in other species, we examined the immunophenotype of chicken and rabbit ostoeclasts, macrophages, macrophage polykaryons, and monocytes and compared them with similarly derived and cultured human cells. Human, rabbit, and avian osteoclasts reacted with monoclonal antibodies against human 1 integrins (CD29, CD49b, CD49d), 3 integrins (CD51, CD61), as well as human macrophage-associated antigen CD68. Avian osteoclasts also reacted for CD11a/18 and CD14 which are not present on human osteoclasts. Avian and mammalian monocytes, macrophages, and macrophage polykaryons expressed all the above antigens. Both avian and human macrophage polykaryons produced by culture of peritoneal macrophages reacted with anti-CD51 antibodies indicating that expression of the vitronectin receptor alone does not distinguish between these cells in vitro.     

骨调素和单核细胞趋化蛋白在大鼠梗阻性肾病中的表达及可能作用

目的:探讨骨调素(OPN)和单核细胞趋化蛋白(MCP-1)在大鼠梗阻性模型中的表达及其在肾脏纤维化发病机制中的作用.方法:采用-单侧输尿管结扎制造梗阻性肾病模型,分别于造模后7 d、14 d取肾组织,应用HE染色观察肾脏病理改变,免疫组化方法检测肾组织畔OPN和MCP-1蛋白的表达,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法观察肾组织中OPN mRNA和MCP-1 mRNA的变化.结果:OPN、MCP-1表达主要位于肾小管上皮细胞,随着梗阻时间的延长,肾组织中OPN、MCP-1蛋白和mRNA表达明显增加.结论:OPN、MCP-1蛋白和mRNA在梗阻性肾病大鼠肾组织表达明显增加介导炎症过程,参与肾间质纤维化.