应用RT-PCR检测乳腺癌前哨淋巴结微转移的研究

目的评价前哨淋巴结（SLN）活检及其微转移检测临床意义。方法本组46例原发性乳腺癌患者，应用美蓝进行前哨淋巴结定位和活检，随后行腋窝淋巴结清扫（ALND），行SLN、腋淋巴结（ALN）中CK19的RT-PCR检查。结果46例乳腺癌患者中，41例检测到SLN（89．1％），SLN的成功定位活检与肿瘤大小有关。对上述41例的SLN的常规病理检查的敏感性是75％，准确性是90．2％，假阴性25％。在行RT-PCR检查中，敏感性是96％，准确性是97．6％，假阴性4％。结论RT—PCR法较常规病理更为敏感，通过SLN定位和RT-PCR的联合应用，可明显提高乳腺癌淋巴结微转移的检出率。     

甲状腺癌前哨淋巴结微转移分子检测及其临床意义

目的探讨甲状腺癌前哨淋巴结活检(SLNB)的可行性及临床意义,探索逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术对诊断前哨淋巴结微转移灶的价值。方法对21例甲状腺癌患者应用亚甲蓝染色法行SLNB,对SLN进行HE染色、细胞角蛋白19(CK19)的免疫组化染色(IHC)及RT-PCR检测,比较3种方法对SLN微转移灶检出的敏感性、准确率的差异。结果21例中,成功检出SLN 16例,检出率为76.2%。IHC、RT-PCR与HE比较差异有统计学意义。结论前哨淋巴结活检可有效判断甲状腺癌转移状态,应用RT-PCR检测CK19在SLN中的表达,可提高敏感度及准确率。     

RT-PCR检测人乳腺球蛋白在乳腺癌SLN微转移灶检出率及假阴性作用分析

目的探讨逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测乳腺癌前哨淋巴结(SLN)中人乳腺球蛋白(HMAM)在诊断微转移灶的临床价值。方法选取2014年1月—2015年12月拟行手术治疗的73例乳腺癌患者,术前采用Y探测仪定为SLN,采用RT-PCR技术检测SLN中HMAM mRNA的表达水平,并且将检测结果与常规病检结果进行比较,同时分析发生微转移与患者临床病理特征的关系。结果常规病检共检出34例患者存在SLN微转移灶,检出率为51.52%;RT-PCR检出42例患者存在SLN微转移灶,检出率为63.64%;其中常规病检10例患者SLN微转移灶阴性,RT-PCR发现其SLN微转移灶阳性;有2例患者常规病检SLN判定为微转移灶阳性,RT-PCR检出结果为阴性;RT-PCR对SLN发生微转移灶检出率显著的高于常规病检(P0.05);RT-PCR检出的24例SLN微转移灶阳性患者,有2例患者SLN微转移灶为阳性,RT-PCR检出的假阴性率8.33%(2/24)。SLN发生微转移主要与患者的病灶大小、淋巴管浸润有显著关系(P0.05)。结论 RT-PCR检测乳腺癌SLN中HMAM诊断微转移灶的检出率显著的高于常规病理检查,检查假阴性率较低。     

乳腺癌基质金属蛋白酶-9及前哨淋巴结CKl9 mRNA表达的相关性

目的研究乳腺癌组织中基质金属蛋白酶(matrix metallo-proteinases-9,MMP-9)基因表达与乳腺癌前哨淋巴结(SLN)微转移分子CK19 mRNA检测的关系,揭示乳腺癌的浸润和转移机制.方法应用S-P免疫组化法检测76例乳腺浸润癌组织和20例乳腺非恶性肿瘤组织中MMP-9的表达情况采用原位杂交技术检测同组76例乳腺浸润癌SLN微转移分子CK19 mRNA的表达,同时与常规病检法比较其检测敏感性,并比较淋巴结转移组、微转移组、无转移组患者的临床资料.结果76例乳腺浸润癌中,常规病检无淋巴结转移36例,淋巴结转移40例.MMP-9在淋巴结转移组和无淋巴结转移组原发灶阳性表达的平均秩次为45.95、30.19,转移组明显高于无转移组.两者差异具有显著性(P＜0.05).原位杂交法检出36例阴性淋巴结中9例有CK19 mRNA表达.原位杂交法与常规病检法转移的检出率比较差异有统计学意义(P＜0.05).结论淋巴结的转移与MMP-9的表达具有相关性.检测MMP-9蛋白表达将有助于判断乳腺癌的转移及预后.应用原位杂交法可明显提高乳腺癌的检出率.     

术中前哨淋巴结定位及CK-20检测淋巴结微转移在结肠癌患者中的临床意义

目的 探讨提高结肠癌患者区域淋巴结阳性检出率的方法 及其临床意义.方法 对48例行根治性手术的结肠癌患者前哨淋巴结(SLN)进行了术中染料法定位检测,使结肠癌系膜前哨淋巴结染色并统计淋巴结数目,同时行抗细胞角蛋白20(CK20)免疫组化检查,检测其微转移情况.结果 48例患者中有46例发现SLN,检出率95.8%.93.8%(45/48)的患者的前哨淋巴结能准确地预测其引流区域淋巴结受累情况;假阴性 1例,假阴性率 5.0%(1/ 20).6例患者的前哨淋巴结中包含的微转移灶或单个癌细胞转移被常规HE染色遗漏,但是经CK20免疫组化染色检出.5例患者由于发现异常淋巴引流途径而导致肠系膜切除的范围的改变.结论 对结肠癌病例,前哨淋巴结定位技术能较准确地预测其引流区域淋巴结受累情况和发现异常淋巴引流途径,有助于决定切除范围;对常规病理检查阴性的淋巴结行CK20免疫组化染色检测其微转移情况,可提高淋巴结阳性检出率,两者结合可准确的对结肠癌患者进行分期、判断预后、指导治疗.     

乳腺癌前哨淋巴结活检24例临床分析

目的:探讨检测乳腺癌前哨淋巴结(SLN)的方法,研究前哨淋巴结活组织检查(SLNB)预测腋窝淋巴结状况的准确性。方法:对24例乳腺癌患者行美蓝染色法检测SLN,并行腋窝淋巴结清扫术(ALND)后,将腋窝淋巴结转移状况与SLN进行对比,分析SLN检出率。结果:24例患者检测出SLN 20例,成功率83.33%,检出SLN42个,平均每例检出1.75个。24例中,17例SLN阳性,阳性率70.83%。2例出现假阴性,假阴性率8.34%,S LNB预测腋窝淋巴结(ALN)的敏感性为89.4%,准确率为91.6%。结论:SLND可以较准确预测乳腺癌患者腋窝淋巴结的转移状况。     

乳腺癌基质金属蛋白酶-9及前哨淋巴结CK19mRNA表达的相关性

目的：研究乳腺癌组织中基质金属蛋白酶（matrixmetallo-proteinases-9，MMP-9）基因表达与乳腺癌前哨淋巴结（SLN）微转移分子CKl9mRNA检测的关系，揭示乳腺癌的浸润和转移机制。方法：应用S—P免疫组化法检测76例乳腺浸润癌组织和20例乳腺非恶性肿瘤组织中MMP-9的表达情况；采用原位杂交技术检测同组76例乳腺浸润癌SLN微转移分子CK19mRNA的表达，同时与常规病检法比较其检测敏感性，并比较淋巴结转移组、微转移组、无转移组患者的临床资料。结果：76例乳腺浸润癌中，常规病检无淋巴结转移36例，淋巴结转移40例。MMP-9在淋巴结转移组和无淋巴结转移组原发灶阳性表达的平均秩次为45．95、30．19，转移组明显高于无转移组，两者差异具有显著性（P〈0．05）。原位杂交法检出36例阴性淋巴结中9例有CK19mRNA表达，原位杂交法与常规病检法转移的检出率比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：淋巴结的转移与MMP-9的表达具有相关性，检测MMP-9蛋白表达将有助于判断乳腺癌的转移及预后。应用原位杂交法可明显提高乳腺癌的检出率。     

CK-19 mRNA表达水平在乳腺癌微转移检测及治疗监测中的应用

目的探讨细胞角蛋白19(CK19)mRNA表达水平在乳腺癌微转移检测及治疗监测中的应用。方法采用荧光定量PCR(FQ-PCR)和RT-PCR检测45例健康女性、40例良性乳腺肿瘤和86例乳腺癌患者外周血中CK19mRNA水平并进行对比分析。结果CK19mRNA在乳腺癌组表达高于良性乳腺疾病组(P<0.01),乳腺癌淋巴结转移组高于无淋巴结转移组(P<0.01)。FQ-PCR对乳腺癌诊断的灵敏度和特异性均显著高于RT-PCR法。结论FQ-PCR检测CK19对乳腺癌诊断灵敏度和特异性较高,可有效监测乳腺癌微转移和疗效。     

印片细胞学联合快速免疫组化检测在乳腺癌前哨淋巴结活检术中诊断的应用

目的:探讨乳腺癌前哨淋巴结活检(SLNB)术中,印片细胞学(TIC)与快速免疫组化(RIHC)联合应用诊断乳腺癌前哨淋巴结(SLN)转移的价值。方法:选择89例乳腺癌患者,共281枚SLN,在SLNB中行TIC和(或)RIHC检测。RIHC检查以广谱细胞角蛋白19(pan-cytokeratin 19,pan-CK19)为指标。以术后石蜡切片诊断为对照,分析单独TIC和TIC联合RIHC诊断乳腺癌SLN转移的阳性检出率、敏感度、准确率、假阴性率。结果:TIC诊断乳腺癌SLN转移的阳性检出率为25.8%(23/89),TIC联合RIHC诊断乳腺癌SLN转移的阳性检出率为36.0%(32/89),差异有统计学意义(P0.05)。TIC及RIHC诊断乳腺癌SLN转移的特异度均为100.0%。单独TIC检查诊断乳腺癌SLN转移的敏感度为69.7%(23/33),TIC联合RIHC检查的敏感度为97.0%(32/33),差异有统计学意义(P0.001)。单独TIC检查诊断乳腺癌SLN转移的假阴性率为30.3%(10/33),TIC联合RIHC检查的假阴性率为3.0%(1/33),差异有统计学意义(P0.001)。结论:乳腺癌SLNB中联合应用TIC和RIHC检查能提高乳腺癌SLN转移的检出率、敏感度和准确率。     

淋巴结K19 mRNA检测在诊断乳腺癌微转移灶中的应用

探讨K19 mRNA表达与乳腺癌病人淋巴结微转移的关系.应用RT-PCR方法检测20例乳腺癌组织及其68枚腋下淋巴结和4份正常乳腺组织、4枚正常淋巴结、5枚良性肿瘤患者腋下淋巴结中K19 mRNA,并与传统病理学检查淋巴结癌转移对照.结果显示:正常乳腺组织及乳腺癌细胞K19 mRNA检测均为阳性,对照正常淋巴结、良性肿瘤患者淋巴结RT-PCR结果阴性;组织病理学检查存在转移的8枚淋巴结其K19 mRNA检测亦阳性,组织病理学检测无转移的60枚淋巴结中有7枚K19 mRNA RT-PCR检测阳性.因此,RT-PCR检测K19 mRNA可更敏感地检出淋巴结中的微转移灶,对乳腺癌转移的诊断有一定的实用价值.     

NSCLC术后病人外周血MUC1 mRNA和CK19 mRNA表达及其意义

目的探讨非小细胞肺癌（NSCLC）术后外周血微转移的基因诊断方法，并分析黏蛋白1（MUC1）mRNA、角蛋白19（CK19）mRNA作为肺癌微转移检测分子标志物的可行性。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR），对60例NSCLC病人（肺癌组）的外周血MUC1 mRNA、CK19 mRNA表达情况进行检测；以10例肺良性病变病人及15例健康人的外周血标本作对照。结果肺癌组外周血MUC1 mRNA阳性表达21例（35%），CK19 mRNA阳性表达18例（30％）；对照组MUC1 mRNA和CK19 mRNA表达均为阴性，两组比较差异均有显著性（x^2=7．292、5．921，P〈0．01、0．05）。结论MUC1、CK19基因均可作为RT—PCR法检测NSCLC病人淋巴结微转移的分子标志物，两者联合检测可能有助于肺癌转移早期诊断。     

乳腺癌前哨淋巴结微转移术中快速检测的临床意义

目的：了解术中冰冻切片联合快速免疫组化在乳腺癌前哨淋巴结（SLN）微转移检测中的应用及效果。方法：2003年2月至2006年4月我科共62例乳腺癌患者，采取美蓝染色前哨淋巴结活检（SLNB），行SLN术中冰冻切片，阴性者行EPOS法快速免疫组化检查以发现微转移。并与术后SLN连续切片及免疫组化检查作比较，以了解快速免疫组化检查的准确性及发现微转移的能力。结果：56例成功行SLNB，成功率90．3％，术中冰冻切片发现20例SLN癌转移，36例阴性者行快速免疫组化检查．发现2例微转移，术后连续切片及常规免疫组化检查又发现2例微转移。结论：美蓝染色SLNB成功率较高、安全、价廉。术中SLN冰冻切片联合EPOS法快速免疫组化检查，可增加SLN微转移的检出率．减少假阴性率．适合基层医院开展。[著者文摘]     

乳腺癌前哨淋巴结活检在简化的腋淋巴结清扫中的应用

目的:探讨前哨淋巴结活检(SLNB)在早期乳腺癌简化的腋淋巴结清扫(ALND)中的应用及效果,了解EPOS法快速免疫组化发现前口哨淋巴结(SLN)微转移的能力及准确性。方法:30例早期乳腺癌行美蓝染色SLNB术中行SLN冰冻切片联合EPOS法快速免疫组化检查,其中阴性者28例分成两组,15例行简化的ALND(仅清扫胸小肌外侧组淋巴结,简化组),13例行标准ALND(标准组)。结果:EPOS法快速免疫组化使SLN假阴性率降了50%,简化组后腋窝引流时间、积液及患肢水肿发生率较标准组减少,患肢功能恢复良好,短期随访无腋窝局部复发及远处转移。结论:EPOS法联合冰冻切片可减少SLN的假阴性率,SLN阴性可安全使用简化的ALND,减小手术创伤和并发症。     

巢式RT-PCR对肺癌外周血中微转移灶的检测和半定量测定

目的对肺癌外周血中微转移灶的检测和半定量测定。方法以CK-19为标记,采用巢式RT-PCR和半定量方法对肺癌患者外周血中微转移灶的检测,比较治疗前后外周血中癌细胞数的相对变化。结果60例肺癌中有29例CK-19阳性,18例健康人中,仅1例检测出CK-19阳性,7例肺良性疾病患者有2例为CK-19阳性。实验组CK-19阳性率48%(29/60)与对照组12%(3/25)相比有极显著差异(P<0.01)。2例肺癌患者化疗前相对癌细胞数分别为25和16个,经1周期化疗后,相对癌细胞数分别为5和1个。结论以CK-19为标记,采用巢式RT-PCR方法检测肺癌患者外周血中的癌细胞有较高敏感性和特异性,半定量RT-PCR法,能早期反映外周血中癌细胞数的相对变化情况,有助于对临床疗效及早做出评价。     

外周血中CK18mRNA检测对食管癌微转移的诊断意义

目的探讨CK18mRNA套式逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测对食管癌微转移的诊断意义。方法采用套式RT-PCR方法检测50例无远处转移、10例有远处转移的食管癌患者及10例食管良性病变对照和10例健康对照外周血中细胞角蛋白CK18mRNA基因的表达。结果食管良性病变对照组和健康对照组的外周血中均未检测出CK18mRNA阳性细胞。50例无远处转移食管癌患者外周血中CK18mRNA表达阳性率为38.0%(19/50)。10例有远处转移的食管癌患者外周血中CK18mRNA表达阳性率为90.0%(9/10)。食管癌Ⅳ期与Ⅱa、Ⅱb、Ⅲ期相比,其阳性率有显著性差异(P<0.05),而其他各期之间没有显著差异。不同病理分化程度之间没有显著差异。结论食管癌患者临床早期已有癌细胞发生微转移。应用套式RT-PCR方法检测外周血中CK18mRNA靶基因有助于食管癌微转移的早期诊断。     

超声造影联合空心针活检在浸润性乳腺癌前哨淋巴结转移评估中的价值

目的 探讨超声造影联合空心针组织穿刺活检评估浸润性乳腺癌患者腋窝前哨淋巴结(sentinel lymph node,SLN)转移的价值.方法 120例浸润性乳腺癌患者行乳腺癌根治术前均行常规超声及超声造影检查,记录SLN数目及超声造影增强模式,对超声造影检出SLN者行超声引导下空心针组织穿刺活检;乳腺癌根治术中行SLN...