柱色谱-高速逆流色谱法分离纯化虎杖中大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷

目的建立从虎杖药材中高效制备分离大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(EG)的方法。方法采用大孔吸刚树脂柱色谱和ODS柱色谱分离目标组分,高速逆流色谱(HSCCC)纯化目标化合物,质谱和核磁共振波谱数据鉴定结构,HPLC不加校正因子的主成分自身对照法检测纯度。结果优化确定以二氯甲烷-醋酸乙酯-甲醇-水(8:1:6:5)为HSCCC溶剂系统,上相为固定相,下相为流动相,纯化制备了符合定量测定用要求的EG对照品,HPLC法检测质量分数大于98%。结论方法适于从虎杖药材中大量制备高纯度EG,为含有该成分的天然产物及其制剂质量评价提供对照物质。     

何首乌中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的分离纯化与抗癌活性研究

目的:建立对何首乌中大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷分离纯化的方法,以及研究其抗癌活性。方法:何首乌中药材粉末先经乙醇回流提取、氯仿回流提取、乙酸乙酯回流提取后,再经D101大孔吸附树脂柱,70%Me OH洗脱,得到化合物I,经1H-NMR、13C-NMR确定该化合物的结构。采用MTT比色法抗癌活性筛选试验对化合物I作抗苯并芘等致癌活性的筛选。结果:经1H-NMR、13C-NMR谱图分析,确定化合物I为大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷,该化合物对苯并芘致癌具有抑制活性。结论:该分离纯化方法准确、可靠;大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷抗癌活性的证实,对其药理活性研究具有重要意义。 更多还原     

大黄5种炮制品中芦荟大黄素-3-CH_2-O-β-D-葡萄糖苷和大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷变化规律

目的:研究大黄5种炮制品中2个蒽醌苷类成分含量的变化规律。方法:HPLC法同时测定芦荟大黄素-3-CH2-O-β-D-葡萄糖苷、大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的含量,以Agilent TC-C18(2)为色谱柱,以四氢呋喃-1%冰醋酸溶液(25∶75)为流动相,检测波长410 nm,流速0.9 mL.min-1,柱温35℃。结果:芦荟大黄素-3-CH2-O-β-D-葡萄糖苷的测定范围为0.009 0～0.270 4μg,r=0.999 6,大黄素-8-O-β-D-葡萄糖苷的测定范围0.039 6～1.188μg,r=0.999 6;平均回收率分别为97.85%,97.19%。结论:大黄炮制过程中2个蒽醌苷类成分含量发生了明显变化,生片、醋片的含量没有显著性差异,酒片的含量较生片增加但不显著,熟片、炭片含量较生片下降明显。     

大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的促智活性及其机制

目的 研究制首乌活性单体化合物大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(PMEG)的促智活性以及作用机制。方法 小鼠跳台实验以及胆碱酯酶活力测定。结果 igPMEG后,正常小鼠及东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠错误次数显著减少;离体实验和整体实验中PMEG对酶活力具可逆性抑制作用,体内外酶活力恢复50%所需时间分别为T1/2=115min,T1/2=165min。结论 PMEG能提高正常小鼠学习记忆功能,对东莨菪碱所致学习记忆障碍具防护作用;初步认为PMEG作用机制是对胆碱酯酶可逆性的抑制。     

大黄素-8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的促智活性及其机制

目的:研究制首乌活性单体化合物大黄素-8-0-β-D-吡喃葡萄糖苷(PMEG)的促知性以及作用机制,方法,小鼠跳台实验以有胆碱酯酶活力测定,结果:ig PMGE后,正常小鼠及东莨菪碱所致学习记忆障碍小鼠错识次数显著减少,离体实验和整体实验中PMEG对酶活力具有可逆性抑制作用,体内外酶活力恢复50%所需时间分别为T1/2=115min,T1/2=165min.结论:PEMG能提高正常小鼠学习记忆功能,对东莨菪碱所致学习记忆障碍具防护作用,初认为PMEG作用机制是对胆碱酯酶可逆性的抑制.     

大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷对CCl4致小鼠急性肝损伤的作用

目的 研究大黄素甲醚-8-O-β-D-葡萄糖苷（PMG）对四氯化碳（CCl₄）致小鼠急性肝损伤的作用及可能机制。方法 将60只雄性ICR小鼠按随机数字表法分为正常对照组,模型组,低、中、高剂量组,联苯双酯组,每组10只。每组小鼠每次均按照0.1 mL/10 g体质量灌胃给药,正常对照组和模型组灌胃0.5%羧甲基纤维素钠（CMC-Na）溶液,低、中、高剂量组分别灌胃1、2、4 mg/mL PMG混悬液,联苯双酯组灌胃30 mg/mL联苯双酯混悬液。2次/d,连续灌胃3 d。末次给药1 h后,除正常对照组外,其余各组均按0.1 mL/10 g体质量一次性腹腔注射0.5%CCl₄油溶液,建立急性肝损伤模型。各组小鼠禁食不禁水16 h后取血和肝组织,采用比色法检测血清谷丙转氨酶（ALT）、谷草转氨酶（AST）水平;HE染色观察肝组织形态结构病理改变;免疫组织化学法观察肝组织中NF-κBp65、TNF-α、IL-6蛋白表达;RT-PCR法检测肝组织中ICAM-1、MCP-1 mRNA相对表达量。结果与正常对照组比较,模型组血清ALT、AST水平显著升高...     

异鼠李素-3,7-二-O-β-D-葡萄糖苷的保肝降酶试验

目的：验证异鼠李素－3，7－二－O－β-D-葡萄糖苷的保肝降酶作用，考察其作为垂盆草药材质控指标的可行性。方法：用垂盆草药材n-BuOH部分经过溶剂分离和色谱分离制得的异鼠李素－3，7-二－O－β-D－葡萄糖苷，配成一定浓度的溶液，通过保肝降酶试验（D－氨基半乳糖致小鼠急性肝损伤）,考察其活性。结果：和模型组比较，该成分具有一定的保肝降酶活性，高剂量组更加明显。结论：异鼠李素－3，7－二－O－β-D-葡萄糖苷作为垂盆草药材的质控指标是可行的。     

圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷改善血管内皮细胞损伤作用机制研究

目的:探讨河南道地药材怀菊花中圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷对血管内皮细胞损伤的干预作用及作用机制。方法:血管内皮细胞饥饿处理12 h后,以2.5μg/mL LPS诱导24 h,建立血管内皮细胞损伤模型。采用ELISA法检测细胞培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-1β、VCAM-1、ET-1水平,TBA法检测MDA水平,羟胺法检测SOD水平,一步法检测NO水平,Western blot法检测细胞内MAPK信号通路p-MEK1/2、MEK1/2、p-ERK1/2、ERK1/2、p-JNK、JNK、p-P38、P38蛋白表达。结果:怀菊花中圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷对该模型有明显的干预作用,可显著升高SOD、NO水平,降低TNF-α、IL-6、IL-1β、VCAM-1、ET-1、MDA水平,并显著下调p-MEK1/2、p-ERK1/2的表达。结论:圣草酚-7-O-β-D-葡萄糖苷可能通过调节ERK/MAPK信号通路,降低炎症因子、细胞因子及氧化应激水平,从而抵抗LPS诱导的血管内皮细胞损伤。     

大鼠ig毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷后尿中代谢产物的分离和鉴定

目的研究大鼠ig毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷后尿中代谢产物。方法采用制备液相进行分离和纯化,通过核磁和质谱数据确定化合物的结构。结果从大鼠ig毛蕊异黄酮-7-O-β-D-葡萄糖苷后的尿中提取分离得到5个代谢产物,分别为毛蕊异黄酮(M_1)、3′,4′,7-三羟基异黄酮(M_2)、大豆素(M_3)、毛蕊异黄酮-3′-O-β-D-葡萄糖醛酸苷(M_4)、毛蕊异黄酮-3′-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯苷(M_5)。结论代谢产物M_5为新的化合物。     

HPLC法测定板蓝根中落叶松脂素-4,4′-二-O-β-D-二葡萄糖苷

目的建立板蓝根药材抗病毒活性成分落叶松脂素-4,4′-二-O-β-D-二葡萄糖苷(直铁线莲宁B,clemas-tanin B)的定量测定方法。方法采用高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher-C18柱,流动相:甲醇-乙腈-水(24∶1∶75),体积流量:1.0 mL/min;紫外检测波长:280 nm。结果测定了板蓝根主要产地药材中落叶松脂素-4,4′-二-O-β-D-二葡萄糖苷的量,平均质量分数为0.041%,加样回收率为98.8%,RSD为0.60%。结论本方法简便、灵敏、结果可靠,可作为板蓝根药材质量控制的定量方法。     

HPLC法测定板蓝根中落叶松脂素-4,4′-二-O-β-D-二葡萄糖苷

目的 建立板蓝根药材抗病毒活性成分落叶松脂素-4,4'-二-O-β-D-二葡萄糖苷(直铁线莲宁B,clemastanin B)的定量测定方法.方法 采用高效液相色谱法,色谱柱为Lichrospher-C18柱,流动相:甲醇-乙腈-水(24;1:75),体积流量:1.0mL/min;紫外检测波长:280 nm.结果 测定了板蓝根主要产地药材中落叶松脂素-4,4'-二-O-β-D-二葡萄糖苷的量,平均质量分数为0.041%,加样回收率为98.8%,RSD为0.60%.结论 本方法简便、灵敏、结果可靠,可作为板蓝根药材质量控制的定量方法.     

虎杖中大黄素的提取分离研究

以10%硫酸水溶液和氯仿为溶剂,对虎杖粗粉进行热回馏提取,提取物挥去溶剂后,用苯溶解,常压过滤后,滤液拌以层析硅胶,风干成均匀粉末,依次以苯(分析纯)、乙酸乙酯:苯(体积比为2:8)为洗脱剂进行硅胶柱层析分离.经TLC-紫外灯下观察荧光斑点或氨熏,联合检测,共得8个单体化合物.     

RP-HPLC法测定土牛膝中齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量

目的:建立土牛膝药材中齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量测定方法。方法:采用RP-HPLC法,色谱柱为Hibar C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相:乙腈-0.4%磷酸(34∶66),流速:1.0 mL·min-1,检测波长:203 nm,柱温:35℃。结果:齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷在0.1426-2.851μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率为102.4%(n=6),RSD%为1.7%。结论:本方法简便、准确、重复性良好,可用于土牛膝中齐墩果酸-28-O-β-D-吡喃葡萄糖苷的含量测定。     

RP-HPLC法测定不同时期垂柳中木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷

垂柳Salix babylonica L．为杨柳科柳属植物，《中药大辞典》将垂柳的叶、枝和柳絮收载为中药。《本草纲目》中有记载：柳为本经下品，其性寒、味微苦，具有祛风、利尿、止痛、消肿的功能，可用于治疗风湿痹痛、淋病、白浊、水肿等症。现代临床上用于治疗冠状动脉粥样硬化性心脏病、慢性气管炎、烧烫伤。据报道，柳叶中含有丰富的黄酮类化合物，其次是酚糖苷类化合物，还有多糖、有机酸等其他化合物，其中大多数柳树中均含有木犀草素及其糖苷，其中木犀草素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷具有多种药理活性，如抗生物氧化、抗炎、止痉、抗组胺的作用，以及抗癌、抗辐射等诸多生物活性。     

HPLC-DAD法测定苦碟子中木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷和芹菜素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷

目的利用HPLC—DAD法建立苦碟子中木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷（LGCOP）、木犀草素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（LGCRP）和芹菜素7-O-β-D-葡萄糖醛酸苷（AGCRP）的测定方法。方法Diamonsil C18色谱柱（200mm×4．6mm,5μm）;流动相为（0．05％甲酸-水）-（0．05％甲酸-乙腈）;二元梯度洗脱：检测波长340nm;体积流量1．0mL／min;柱温35℃;进样量10μL。结果在选定色谱条件下线性关系良好（r≥0．9999）。平均回收率分别为100．5％、100．1％、100．8％,RSD值分别为O．4％、0．3％、0．7％。结论该分析方法能简便、快速地测定苦碟子中黄酮类成分,可为评价不同产地、药用部位及采收期的药材提供科学依据。     

HPLC法测定降脂减肥片中2,3,5,4’-四羟基对苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的建立以HPLC法检测降脂减肥片中2,3,5,4’-四羟基对苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定。方法色谱柱:依利特C18(4.6mm×250mm,5μm);流动相:乙腈-水(21:79);流速:0.8ml/min;检测波长:320nm;以2,3,5,4’-四羟基对苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷为对照品,采用外标法定量。结果 2,3,5,4’-四羟基对苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷线性范围为0.0621～0.5508μg(r=1.0000),平均回收率为99.05%,RSD为0.47%。结论本法简便,结果准确,重现性好,可用于该药品的质量控制。     

HPLC法测定养肝口服液中2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量

目的:建立养肝口服液的含量测定方法。方法:样品用乙醇稀释,在C18柱上以乙腈-水(14:86)为流动相,在波长320nm处检测。结果2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷在0.063 6-0.3180μg线性关系良好,r=0.999 8,平均回收率为99.0％,RSD为1.3％。结论:本法灵敏、准确,简便易行,重现性好。     

安眠补脑糖浆中2,3,5,4-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定

目的：建立安眠补脑糖浆中2，3，5，4．四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法。方法：HPLC法，流动相：乙睛-水（21：79）；检测波长：320nm。结果：2，3，5，4．四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的线性范围为（25．70～179．90）μg，平均回收率为97．5％，RSD为1．6％。结论：方法简便可靠，可有效地控制安眠补脑糖浆的质量。     

HPLC法测定养肝口服液中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷含量

目的：建立养肝口服液的含量测定方法。方法：样品用乙醇稀释，在C18柱上以乙腈-水（14：86）为流动相，在波长320nm处检测。结果：2，3，5，4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D葡萄糖苷在0.063-0.3180μg线性关系良好，r=0.9998，平均回收率为99.0％，RSD为1.3％。结论：本法灵敏、准确，简便易行，重现性好。     

HPLC法测定安乐片中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯2-O-β-D-葡萄糖苷的含量

目的:建立安乐片中2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法。方法:采用高效液相色谱法,色谱条件:Phenomenx C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);乙腈-水(20∶80)为流动相;流速1.0 mL.min-1;检测波长320nm;进样量10μL;柱温25℃。结果:2,3,5,4′-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷进样量在0.05475～0.438μg范围内,其峰面积值与进样量(μg)有良好的线性关系,r=0.9996,平均加样回收率为97.1%,RSD为1.3%(n=6)。结论:该测定方法快速简便,可用于安乐片的质量控制。