LC-ESI-MS快速同时测定冬虫夏草中主要核苷类成分

目的:建立同时快速测定冬虫夏草中腺嘌呤、腺苷和虫草素含量的方法.方法:LC-ESI-MS法,采用选择性离子检测(SIM)和电喷雾离子化(ESI),色谱条件为shimadzu VP-ODS色谱柱;流动相为水-甲醇-甲酸(92∶7∶1),以甲醇为提取溶剂和2-氯腺苷为内标.结果:腺嘌呤线性回归方程为Y=0.072 64X+0.006 22,线性范围为0.8～130.0 mg·L~(-1),r=0.998 7;腺苷线性回归方程为Y=0.159 7X+0.014 6,线性范围为0.5～124.5 mg·L~(-1),r=0.9991;虫草素线性回归方程为Y=0.194 2X+0.018 6,线性范围为0.5～128.5 mg·L~(-1),r=0.999 4;腺嘌呤、腺苷和虫草素的加标回收率分别为98.76%,99.37%和99.26%.结论:方法灵敏、快速和选择性好,可用于同时快速测定冬虫夏草中腺嘌呤、腺苷和虫草素含量及质量控制.     

冬虫夏草中核苷类成分含量测定及HPLC指纹图谱研究

目的:建立冬虫夏草中尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷4种核苷类成分含量测定及HPLC指纹图谱分析的方法。方法:采用Grace Prevail C18色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),流动相为水-甲醇,梯度洗脱,流速1.0 m L/min,检测波长260 nm,柱温25℃。结果:测定了不同产地冬虫夏草药材中4种核苷类成分的含量,并建立了该药材的HPLC指纹图谱,在指纹图谱中共有13个共有峰,并指认了尿苷、肌苷、鸟苷和腺苷,指纹图谱的相似度均大于0.95,各色谱峰分离效果良好,符合指纹图谱要求。10个不同产地冬虫夏草样品指纹图谱的聚类分析和主成分分析结果相似。结论:该方法较好的反映了冬虫夏草药材中的化学成分信息,重复性好,样品间的相似性良好,说明这一药材所含的核苷类化学成分分布及比例较稳定。将指纹图谱与主成分分析、聚类分析运用于不同来源冬虫夏草的质量鉴别,可为药材特征评价方法的建立提供依据。     

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定

蛹虫草菌丝与冬虫夏草中核苷类成分的含量测定刘静明,刘岱,杨立新,钟裕容,崔淑莲(中国中医研究院中药研究所北京100700)蛹虫草CardycepsmiliLaris(L.)Link,为冬虫夏草同属真菌,近年来发现蛹草有重要的药用价值,越来越受到国内外的重视,国外报道从蛹虫草人工培养液中分离出虫草素,3′-氨基-3-去氧腺甙及肌氨酸氨基腺音。我们从蛹虫草菌丝中分离得6种成分:β-谷甾醇、麦角甾醇、D-甘露醇、腺嘌呤、腺苷和虫草素￣[1]。并对5批样品....     

冬虫夏草中核苷类化学成分的含量测定研究进展

通过检索、阅读文献,分析与归纳文献内容,综述近年来冬虫夏草中核苷类物质的的含量测定研究进展。包括HPLC法、毛细管电泳法、薄层色谱扫描法,以上含量测定方法各有特点,均可用于冬虫夏草中核苷类物质的含量测定。     

冬虫夏草不同部位核苷类成分比较分析

目的：建立一种同时测定冬虫夏草中尿苷、肌苷、鸟苷、腺苷和虫草素5种核苷类成分含量的高效液相色谱法。方法：ZORBAX SB-Aq（150 mm×4.6 mm,5 μm）色谱柱,0.1%甲酸水溶液-乙腈梯度洗脱,检测波长260 nm,柱温30℃,流速0.8 mL·min-1。结果：对6批冬虫夏草样本子座、虫体和全草的核苷类成分进行了分析,结果发现冬虫夏草子座核苷类成分含量高于虫体和全草。结论：该方法重复性好,准确性高,可用于冬草夏草中核苷类成分的含量测定。     

HPLC定量分析冬虫夏草的主要核苷类有效成分

目的探讨冬虫夏草主要核苷类成分的定量分析方法.方法采用微量提取及HPLC-UV分析法.结果建立了冬虫夏草核苷类物质的微量提取方法,在优化的HPLC-UV色谱条件下,鸟嘌呤、胸腺嘧啶、腺嘌呤、腺苷和虫草素等5种冬虫夏草主要核苷类物质的标准品分离完全.精密度、稳定性和回收率实验表明,用HPLC-UV方法即可定量分析冬虫夏草的核苷类有效成分.用该方法检测到这5种核苷类物质含量在冬虫夏草子座部分与其虫体部分之间以及冬虫夏草居群间存在显著差异.结论冬虫夏草主要核苷类成分的有效定量分析方法的建立对冬虫夏草的品质评价及质量控制具有重要的现实意义,也为进一步研究影响冬虫夏草品质的因素并建立品质评价体系奠定了基础.     

冬虫夏草中核苷类成分的毛细管区带电泳定量分析研究

目的:建立冬虫夏草中核苷类成分(腺苷、鸟苷、尿苷和次黄嘌呤核苷)的毛细管电泳定量分析方法,研究青海产天然冬虫夏草和人工发酵虫草菌粉的核苷类成分差异。方法:采用0.025mol·L^-1硼砂缓冲液,pH9.5,工作电压为20kV,毛细管温度25℃,波长检测260nm,对4种核苷定量分析。结果:用毛细管区带电泳法定量分析冬虫夏草及人工发酵虫草菌粉中的腺苷、尿苷、鸟苷和次黄嘌呤核苷,平均加样回收率分别为98.9%,95.1%,97.8%和98.8%,RSD分别为0.4%,1.7%,1.3%和5.0%。在天然冬虫夏草中未检测到腺苷,而在人工发酵虫草菌粉中未检测到次黄嘌呤。结论:本研究方法可满意地用于腺苷、尿苷、鸟苷和次黄嘌呤核苷的定量分析。青海产地道药材冬虫夏草核苷类成分组成与人工发酵虫草菌粉有明显差异。     

不同产地海螵蛸中核苷类成分测定

目的比较研究不同产地海螵蛸的指纹图谱,并测定其中核苷类成分的含有量。方法海螵蛸Na Cl水溶液采用高效液相色谱法,色谱柱为资生堂PAK-C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为0.01 mol/L磷酸二氢钾水溶液,等度洗脱,检测波长254 nm,柱温25℃。用相似度评价系统软件计算得到各批药材的相似度。结果海螵蛸中的尿嘧啶、次黄嘌呤和黄嘌呤分离度良好,线性范围分别为1.25~12.50μg/m L、1.28~12.80μg/m L和5.05~50.50μg/m L。25批样品(来自浙江、辽宁、云南、山东、广西、福建)相似度均大于0.9;广东的样品相似度在0.97~0.78,差异较大;海南的样品相似度均为0.88左右。结论本研究建立的HPLC指纹图谱方法可有效地区分海螵蛸及其他贝壳类海洋药材。     

冬虫夏草及人工虫草核苷类成分的TLCS研究

目的：以腺苷、尿苷、鸟苷为指标测定天然虫草与人工虫草菌丝体中核苷类有效成分的含量,并对不同虫草样品进行薄层色谱指纹图谱对比研究,探求虫草中核苷类化合物鉴别的专属性。方法：采用高效薄层色谱扫描法进行含量测定,同时建立了不同虫草样品的荧光淬灭薄层色谱指纹图谱。结果：虫草菌丝体中测得腺苷、尿苛鸟苷成分高于天然虫草。结论：该法快速简便,重现性好,能有效鉴别出虫草中核苷类成分以及评价不同电菌样品的质量。     

冬虫夏草及人工菌丝体的核苷类成分的HPLC研究

冬虫夏草 Cordycepssinensis( Berk) Sacc.为麦角科虫草属的药用真菌 ,为冬虫夏草菌的子座及其寄主蝙蝠蛾科虫草蝙蝠蛾 H epialus armoricanusOberthus等幼虫尸体的复合体 ,具有广泛的药理作用。核苷类成分为虫草有效成分之一 ,具有扩张心脏和外周血管的药效作用 ,其中尤以腺苷的作用为显著 [1～ 3 ]。《中华人民共和国药典》2 0 0 0年版对冬虫夏草中腺苷规定 ,不得少于 0 .0 1 0 %。目前核苷类分析方法有 HPLC法[4～ 6] 、薄层色谱法[7,8] 、高效毛细管电泳法[9～ 11] 等。高效液相色谱法主要针对单个指标进行评估 ,如以腺苷为指标作含…     

冬虫夏草发酵菌丝体中主要核苷及核酸碱基的HPLC测定

采用HPLC法测定四种人工培养冬虫夏草发酵菌丝体产品中六个核苷及碱基成分。着重对其中的腺苷成分作了提取溶剂比较及回收率试验等。采用水为提取溶剂,提取效率较50%乙醇为高;水中加入0.1％叠氮钠,既能防腐,又对样液中核苷成分起稳定作用。超声波室温下提取,加样回收率为99.8%。     

10个产地核桃仁中核苷类成分的含量测定

目的:建立HPLC同时分离测定了核桃仁中胞苷、尿苷、鸟苷、腺苷的含量.方法:采用Agilent TC-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以甲醇-10 mmoL· L-1乙酸铵为流动相梯度洗脱,流速0.5 mL· min-1,检测波长260 nrn,柱温30℃,测定了10个产地核桃仁中胞苷、尿苷、鸟苷、腺苷的含量.结果:4种核苷类成分在各自线性范围内,峰面积值与进样量呈良好的线性关系(r =0.9993 ～0.9999);回收率为98％ ～101％ (RSD＜3％),结论:方法简便快速、结果准确、重复性和稳定性好,可为核桃的含量测定提供参考.     

HPLC法同时测定斑蝥中3种核苷类成分

目的建立HPLC法同时测定斑蝥中3种核苷类成分(尿嘧啶、尿嘧啶核苷、次黄嘌呤)的含有量。方法斑蝥75%乙醇提取物的分析采用Phenimenex Synergl 4μm Polar-RP80A柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相1%冰醋酸-甲醇,梯度洗脱;体积流量1.0 mL/min;柱温30℃;检测波长254 nm。结果尿嘧啶、尿嘧啶核苷、次黄嘌呤分别在1.01～141.40、20.24～141.68、20.32～142.24μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.9998),平均加样回收率87.0%～102.3%,RSD均不超过4.0%。结论该方法简便准确,重复性好,可用于斑蝥的质量控制。     

RP-HPLC法测定青黛中核苷类成分

目的建立RP-HPLC法同时测定青黛药材中尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、肌苷和胸苷5种核苷类成分的方法。方法色谱柱Agilent TC-18(4.6 mm×250 mm,5μm);乙腈(A)-0.05 mol/L KH_2PO_4(B)梯度洗脱:0~9 min(A,0%~0%;B,100%~100%):9~40 min(A,0%~8%;B,100%~92%);体积流量为:1 ml/min;柱温:30℃;检测波长为254 nm;进样量:20μl。结果所建RP-HPLC方法适合于检测青黛药材中的核苷类成分,尿嘧啶、胞苷、次黄嘌呤、肌苷和胸苷5种核苷成分别在1.04~5.21、1.08~5.42、2.40~12.02、0.38~1.89、0.55~2.74μg内呈良好的线性关系(r≥0.999 5),平均回收率为98.74%、100.35%、98.14%、99.80%、99.30%,RSD2.00%。结论所建RP-HPLC分析方法简单、准确可靠、重现性良好,可应用于青黛药材中的核苷类成分含量测定。     

中药中核苷类成分的研究进展

核苷类成分是生物细胞维持生命活动的基本组成元素,参与DNA代谢过程,具有抗肿瘤、抗病毒、基因治疗等多种生物活性[1],具有广泛的用途,已研究开发了多种产品。核苷类药物传统的制造方法一般为化学合成及酶法合成[2],从植物中分离核苷类化合物很少见报道。近年来,核苷类成分的生     

常见水果中核苷类成分分析

目的：建立HPLC法分别测定桑葚、荔枝、杨梅、苹果中核苷类成分。方法：采用Agilent TC—C18色谱柱（250mm×4．6mm,5μm）,以甲醇-10mmol·L-1乙酸铵为流动相梯度洗脱,流速0．5mL·min-1,检测波长260nm,柱温30℃,测定了桑葚、荔枝、杨梅、苹果中核苷类成分。结果：4种水果中均含有一定的核苷类成分,桑葚中所含核苷类成分总含量最高。结论：核苷类成分在水果中广泛存在,核苷类成分因水果种类不同其组成和含量存在显著差异。所含核苷类成分所具有的生物活性与其保健功效有一定相关性。     

HPLC-PDA测定小半夏汤中的核苷类成分

 目的建立同时对小半夏汤中的5种核苷类成分进行含量测定的方法。方法采用Lichrospher C₁₈柱(4.6 mm×250mm,5μm),以乙腈-水(1∶99)为流动相,体积流量1.0 mL·min^-1,λ220～300 nm,柱温30℃。结果小半夏汤中的尿嘧啶、黄嘌呤、尿嘧啶核苷、次黄嘌呤核苷、鸟嘌呤核苷等的线性范围和相关系数分别为6.88～110.08 mg·L^-1(r=0.999 6),2.82～45.04 mg·L^-1(r=0.999 8),22.40～358.48 mg·L^-1(r=0.999 9),1.96～31.32 mg·L^-1(r=0.999 9),16.54～264.72 mg·L^-1(r=0.999 8);加样回收率分别为100.31%(RSD=1.36%),100.21%(RSD=1.22%),99.98%(RSD=1.30%),100.44%(RSD=1.62%)和100.27%(RSD=1.36%);方法精密度、重复性良好,RSD均小于2.0%。结论本法操作简便、结果可靠、重现性好、检测快速、定量准确,可作为小半夏汤中核苷类成分的含量测定方法。     

北虫草中核苷类成分的含量测定与质量评价

目的 建立北虫草中尿苷、腺嘌呤、腺苷、虫草素4种核苷类成分的含量测定方法,确定其含量测定指标成分及其限量标准.方法 Agilent TC-C 18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),甲醇-水为流动相梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0 mL/min;检测波长260 nm,进样量20 μL.结果 线性关系良好,精密度高,重现性好,回收率均在95.39％～103.3％;不同产地的北虫草中各核苷类成分含量变异较大.结论 该方法简便、灵敏、准确、重现性好,适用于北虫草中核苷类成分的含量测定;建议以腺苷和虫草素作为北虫草中核苷类成分的含量测定指标成分,其含量限量分别为不低于0.07％、0.27％.     

HPLC法同时测定新疆贝母中3种核苷类成分

目的建立HPLC法同时测定新疆贝母中3种核苷类成分的含有量。方法贝母水提液的分析采用Waters Sun Fire TM-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm);流动相甲醇-水(10∶90),等度洗脱;体积流量0.8 m L/min;柱温25℃;检测波长260 nm。结果尿苷、胸苷、腺苷分别在10.04~501.93μg/m L(r=0.997 5)、0.10~5.07μg/m L(r=0.999 8)、1.01~50.39μg/m L(r=0.999 9)范围内呈良好的线性关系,平均加样回收率分别为103.11%(RSD=1.45%)、99.33%(RSD=1.68%)、98.25%(RSD=1.57%)。结论该方法简便准确,灵敏度高,专属性好,可用于新疆贝母的质量控制。     

鹿鞭商品药材中核苷类成分分析

目的:比较不同品种与商品地的鹿鞭药材中5种核苷类成分的含量,同时探讨5种核苷类成分含量对总核苷含量的影响程度.方法:采用HPLC法分别测定9个鹿鞭商品中腺苷、黄嘌呤、次黄嘌呤、尿嘧啶、尿苷的含量;应用逐步回归分析方法,得到5种核苷类成分含量对总核苷含量影响程度的最优方程.结果:不同样品的5种核苷类成分及总核苷含量均有一定差异,其中以黄嘌呤含量对总核苷含量影响最为显著.结论:黄嘌呤含量为标示鹿鞭药材中总核苷含量的最佳指标,可用于该药材中总核苷类成分含量的测定指标.