泛素结合酶基因UbcH10在脑星形胶质细胞瘤组织中的表达及意义

目的 探讨泛素结合酶基因UbcH10在脑星形胶质细胞瘤组织中mRNA和蛋白表达水平及其与星形胶质细胞瘤病理级别的相关性. 方法 应用实时荧光定量PCR、免疫组织化学染色和蛋白印迹实验检测UbcH10 mRNA和蛋白在32例不同级别脑星形胶质细胞瘤和6例正常脑组织中的表达,并检测UbcH 10蛋白表达与增殖抗原Ki-67蛋白表达的相关性. 结果实时荧光定量PCR结果、免疫组织化学染色结果和蛋白印迹实验结果提示:与正常脑组织(1.00±1.57;O%;0.43±0.42)比较.UbcH10 mRNA和蛋白表达水平在高级别星形胶质细胞瘤(64.33±60.98;9.65%±5.75%;0.69±0.38)和低级别星形胶质细胞瘤(8.36±8.15;4.82%±3.30%;0.10±0.08)中明显上调,差异均有统计学意义(P<0.05);且高、低级别星形胶质细胞瘤之间比较差异也有统计学意义(P<0.05).UbcH10阳性细胞表达率与增殖抗原Ki-67阳性细胞表达率呈显著的正相关关系(r=0.67,P=0.000). 结论 泛素结合酶基因UbcH10可能在星形胶质细胞瘤的发生发展恶变过程中具有重要作用.     

DLC1基因在人脑胶质瘤组织中的表达

目的 探讨抑癌基因DLC1在人脑胶质瘤组织中的表达和功能.方法 收集广州医学院第二附属医院神经外科自2007年1月至2009年6月手术切除的胶质瘤标本39例及同期行颅脑减压术治疗的颅脑损伤患者的正常脑组织10例,实时荧光定量PCR检测DLC1 mRNA的表达;将质粒pCS2-DLC1转染体外常规培养的人胶质瘤细胞株U251,同时用空载体pCS2-MT转染作为对照组,转染后36 h应用Western blot检测DLC1表达标签蛋白Mvc,应用MTT检测U251细胞增殖能力的变化.结果实时荧光定量PCR结果显示胶质瘤组织中DLC1 mRNA表达水平高于对照组,差异有统计学意义(P=0.000),且Ⅰ级胶质瘤组织DLC1 mRNA的表达水平高于Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级,差异有统计学意义(平均秩次分别为44.20、30.23、32.25、31.0,H=18.818,P=0.001);Western blot检测结果显示DLC1标签蛋白Mvc在pCS2-DLCI转染组细胞呈过表达,在pCS2-MT转染组细胞无明显表达;MTT检测显示pCS2-DLC1转染组U251细胞吸光度值高于pCS2-MT转染组,差异有统计学意义(P=0.002).结论 高表达的DLC1可能促进胶质瘤的形成和发展.     

垂体腺瘤中叶酸受体α的表达及意义

目的探讨叶酸受体α（FRα）在垂体腺瘤中的表达情况及其临床意义。方法收集23例垂体腺瘤的新鲜标本,其中无功能性垂体腺瘤13例,功能性垂体腺瘤10例。采用实时荧光定量PCR及Westernblotting分别检测FRα在垂体腺瘤中的mRNA和蛋白表达量。结果实时荧光定量PCR显示：FRα的mRNA相对表达量在无功能性垂体腺瘤中为64．83±43．77．在功能性垂体腺瘤中为1．07±0．51,两者差异有统计学意义（P〈O．05）。Westernblotting结果显示：FRα蛋白在无功能性垂体腺瘤组中明显高表达,而在功能性垂体腺瘤组中不表达（P〈O．05）。结论FRα在无功能性垂体腺瘤中的表达明显高于功能性垂体腺瘤,这为无功能性垂体腺瘤新的分子靶向诊断和治疗提供一定的基础。     

CYB561D2基因在神经胶质瘤组织中的表达及临床意义

目的 基于生物信息学分析,检测CYB561D2基因对于神经胶质瘤的患者的预后评估和意义。方法 选取2018年10月―2022年12月安庆市立医院神经外科接受手术治疗的神经胶质瘤患者的手术病理标本,共78例进行研究。手术路径过程中必须切除的正常脑组织作为对照组,共32例。采用荧光实时定量PCR和免疫组化分别对实验组与对照组的CYB561D2基因mRNA和蛋白浓度进行检测。结果 实验组患者的肿瘤组织中CYB561D2基因的表达程度均较高,肿瘤组织病理级别越高,具有越显著的表达,而对照组中并无明显的CYB561D2基因mRNA(χ²=2.75)和蛋白表达(χ2=2.19),P<0.05,有统计学差异。结论 神经胶质瘤中CYB561D2基因mRNA和蛋白表达明显增高,提示CYB561D2与神经胶质瘤的发生、发展及恶性程度有一定相关。     

靶向PTTG1基因的微小RNA转染后诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的研究

目的 构建表达靶向抑制垂体瘤转化基因1 (PTTG1)基因表达的RNA干扰载体microRNA,导入人脑胶质瘤细胞株U251中,研究靶向抑制PTTG1基因对U251细胞的凋亡诱导作用.方法 以PTG1为靶基因,根据pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR载体要求,设计针对PTIG1的microRNA序列,脂质体转染法将重组质粒转入U251细胞,采用荧光定量多聚酶链反应(PCR)以及Western blot分别从mRNA和蛋白水平检测干扰效果;膜联蛋白Ⅴ与碘化丙啶(annexinⅤ/PI)双色标记的流式细胞仪法检测microRNA诱导的细胞凋亡,碘化丙锭(PI)染色检测细胞周期阻滞.结果 实时荧光定量PCR以及Western blot检测显示,PTTG1基因的mRNA转录水平以及蛋白水平的表达均得到显著抑制;转染后,流式细胞仪检测分析显示,PTTG1基因表达被抑制后,U251细胞凋亡率明显增高,细胞周期出现明显的G2/M阻滞.结论 靶向PTTG1基因的重组microRNA干扰载体pcDNA6.2-GW/EmGFP-miR-PTTG1介导的RNAi显著靶向抑制了PTTG1基因在人脑胶质瘤细胞中的表达,并明显地诱导了脑胶质瘤细胞发生凋亡和G2/M期细胞周期阻滞.     

亚低温脑内冷诱导RNA结合蛋白的表达特征

目的初步检测RNA结合蛋白(CIRP)在低温大鼠模型中,尤其是脑组织中的表达特征。方法大鼠被分为两组:对照组和低温组。低温组大鼠先置于低温下2 h,复温后2 h断头处死。提取总RNA,反转录后得到c DNA,实时多聚酶链反应(RT-PCR)方法检测CIRP在大鼠脑内的表达情况。利用实时PCR定量检测大鼠脑、心脏、肝脏中CIRP mRNA表达。结果常温下CIRP mRNA均能在脑、心、肝组织中检测出。低温情况下,脑组织中下丘脑、皮层和海马均可见CIRP mRNA表达增高,且海马中CIRP mRNA表达增高最显著。定量PCR检测显示低温情况下CIRP mRNA在脑皮层中的表达比对照组高1.5倍。心脏和肝脏中CIRP mRNA的表达在低温时与对照组差别不大。结论低温情况下CIRP mRNA在脑皮层和海马中会明显增高,而肝脏、心脏中CIRP mRNA的表达不受低温影响。提示低温可以使CIRP在神经组织中的表达特异性增高。     

糖原合成酶激酶-3β及其磷酸化产物在难治性癫痫患者颞叶前部的表达

目的探讨糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）及其磷酸化产物（p-GSK-3β）在难治性癫痫（RE）患者颞叶前部的表达。方法应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）、实时荧光定量（FQ）PCR、免疫组化及免疫印迹法检测36例RE患者颞叶前部GSK-3β及其p-GSK-3β的mRNA和蛋白的表达,并与8例对照者进行比较。结果RE患者脑内神经元及胶质细胞GSK-3β mRNA及蛋白表达明显增多（均P〈0.05）,p-GSK-3β表达明显减少（P〈0.05）。结论GSK-3β及其磷酸化产物表达异常,可能与RE的发生和发展有关。     

人脑胶质瘤中TPX2的表达及其病理相关性分析

目的研究TPX2在不同级别脑胶质瘤组织中的表达,及其表达水平同胶质瘤病人生存时间的关系。方法正常脑组织、低级别和高级别脑胶质瘤标本分别为5、21、31例,采用免疫组化染色和Western blot法检测TPX2蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测TPX2 mRNA的表达水平。结果 正常脑胶质细胞TPX2蛋白染色为阴性,绝大部分胶质瘤标本中可见TPX2蛋白的阳性表达,胶质瘤组织TPX2表达水平与病人生存时间成负相关(P<0.01)。TPX2蛋白及mRNA表达水平在胶质瘤组织中均明显上调,与正常脑组织相比差别显著(P<0.01),其在高级别与低级别胶质瘤中的表达有显著差异(P<0.05)。并且TPX2蛋白的相对表达量与胶质瘤的病理级别呈正相关(r=0.408,P<0.05)。结论 TPX2的表达可能同恶性胶质瘤进展有关。     

糖原合成酶激酶-3β及其磷酸化产物在难治性癫(癎)患者颞叶前部的表达

目的 探讨糖原合成酶激酶-β(CSK-3β)及其磷酸化产物(p-GSK-β)在难治性癫(癎)(RE)患者颞叶前部的表达.方法 应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、实时荧光定量(FQ)PCR、免疫组化及免疫印迹法检测36例RE患者颞叶前部GSK-3β及其p-GSK-3β的mRNA和蛋白的表达,并与8例对照者进行比较.结果 RE患者脑内神经元及胶质细胞GSK-3β mRNA及蛋白表达明显增多(均P<0.05),p-GSK-3β表达明显减少(P<0.05).结论 GSK-3β及其磷酸化产物表达异常,可能与RE的发生和发展有关.     

CD133基因表达与人脑胶质瘤恶性程度相关性分析

目的探讨人脑胶质瘤组织中胶质瘤干细胞标志物CD133的表达与肿瘤恶性程度的关系。方法应用实时荧光定量PCR方法检测75例不同病理级别胶质瘤组织及4例正常脑组织中CD133基因的表达情况，并与肿瘤病理级别进行相关性分析；同时采用免疫组化法检测35例肿瘤组织和2例正常脑组织中CD133的表达情况，在蛋白表达水平予以验证。结果CD133在基因转录水平和蛋白表达水平具有良好的相关性。CD133在正常脑组织中未见表达，在各级别胶质瘤中均有表达，且差异有显著性（P〈0．01）；CD133表达量与肿瘤的恶性程度呈正相关（P〈0．01）。结论检测胶质瘤CD133表达水平有助于评价肿瘤的生物学行为，并为针对肿瘤干细胞的靶向治疗提供参考依据。     

RSF-1在胶质瘤组织中的表达及其与病人预后的关系

目的 探讨染色质重塑因子1（RSF-1）在人脑胶质瘤中的表达及其与病人预后的关系。方法 采用免疫组织化学染色法和免疫印迹法检测2010年1月~2013年4月手术切除的121例胶质瘤组织和2017年6月~2018年9月颅脑损伤内减压术中切取的50例正常脑组织RSF-1的表达水平。胶质瘤病人随访时间截止至2019年4月。多因素Cox比例回归风险模型分析影响胶质瘤病人生存预后的因素。结果 免疫组化染色结果显示胶质瘤组织RSF-1高表达率（66.12%,80/121）明显高于正常脑组织（0%;P<0.001）。免疫印迹法检测结果显示,胶质瘤组织RSF-1蛋白表达水平明显高于正常脑组织（P<0.05）,而且,随胶质瘤级别增高,RSF-1蛋白表达水平明显增高（P<0.05）。多因素Cox比例回归风险模型分析结果显示,术前KPS评分<80分、WHO分级为Ⅲ~Ⅳ级、术后未化疗和RSF-1高表达是胶质瘤病人总生存期和无进展生存期缩短的独立影响因素（P<0.05）。RSF-1高表达病人总体生存期[中位数（M）:13个月;四分位间距（IQR）:11~26个月]较低表达者（M:26个月;IQR:20~36个月）明显缩短（P<0.05）。 RSF-1高表达病人无进展生存期（M:11个月;IQR:7~23个月）较低表达者（M:21个月;IQR:16~28个月）明显缩短（P<0.05）。结论 RSF-1高表达可能预示着胶质瘤病人的不良生存预后     

GFP,TH双基因在NIH-3T3细胞及帕金森病大鼠脑内的表达

目的以绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）作为一个标记,观察ＧＦＰ标记的ＨＴＨ１基因修饰的ＮＩＨ－３Ｔ３细胞在体外及植入脑内后的生长情况,判断ＧＦＰ基因能否作为一种新的筛选标记基因。方法构建同时表达ＧＦＰ和ＨＴＨ１双基因的多基因表达载体ＧＣ－ＧＦＰ－Ｐ－ＨＴＨ１－ＳＮ。并转染ＮＩＨ－３Ｔ３细胞,且移植入Ｐａｒｋｉｎｓｏｎ病模型大鼠纹状体内。结果用荧光显微镜、流式细胞仪、免疫组化、ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ等方法均检测到ＧＦＰ、ＨＴＨ１在体外和脑内的表达。结论ＧＦＰ可作为一个筛选标记基因,可对目的基因或植入细胞的其他功能性产物的表达进行观察和检测。     

KISS-1和MTA-1在侵袭性垂体腺瘤中的表达

目的 研究肿瘤转移抑制基因KISS-1和转移相关基因MTA-1在侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤中的表达情况,并分析两者与垂体腺瘤侵袭性的关系.方法 采用免疫组化SP法对31例侵袭性垂体腺瘤和28例非侵袭性垂体腺瘤组织标本KISS-1和MTA-1的蛋白表达进行检测,RT-PCR法对KISS-1和MTA-1mRNA的表达进行检测,分析它们在侵袭组和非侵袭组中的表达差异.结果 59例垂体腺瘤患者中,侵袭性垂体腺瘤组KISS-1的蛋白阳性率和mRNA表达均低于非侵袭性垂体腺瘤组(χ2=4.88,t=12.05,P<0.05),MTA-1的蛋白阳性率和mRNA表达均高于非侵袭性腺瘤组(χ2=5.43,t=12.99,P<0.05).结论 在侵袭性垂体腺瘤组织中KISS-1表达下调、MTA-1表达上调,提示可能与垂体腺瘤的侵袭性密切相关.     

Metastatic brain tumor in the elderly

Authors have reviewed 322 consecutive patients with malignant tumors confirmed by pathological studies between October 1973 and August 1987 in order to determine the frequency, clinical presentation, and lesion localization of metastatic brain tumor in the elderly. Among 322 patients with malignant tumor, 7 patients with primary brain tumor and 21 patients with metastatic brain tumors were found. The over-all frequency of metastases to the brain was 5.8%. This frequency of brain metastasis in the elderly was lower than those of the previous literature which have varied from 9 to 35%. The patients' ages with metastatic brain tumor ranged from 65 to 88 years with a median age of 77.5 years. The primary tumor sites of metastatic brain tumors were limited to 5 kinds of organs. These metastases were found in 27.3% of 11 patients with breast cancer, 17.5% of 80 patients with lung cancer, 6.7% of 15 patients with bile duct system cancer, 5.0% of 20 patients with pancreatic cancer, and 2.0% of 91 patients with gastric cancer. There was no brain metastasis in the other kinds of carcinoma. Among 21 metastatic brain tumors, there were 14 patients with lung cancer, 3 patients with breast cancer, 2 patients with gastric cancer, 1 patient with cholangiocarcinoma, and 1 patient with pancreatic cancer. In this series, the frequency of single and multiple metastases were 13 and 8 cases, respectively. The multiple brain metastases ranged from 2 to 6 nodules. In 21 metastatic brain tumors, there were 42 metastatic nodules in total.(ABSTRACT TRUNCATED AT 250 WORDS)     

Stress-response (heat-shock) protein 90 expression in tumors of the central nervous system: an immunohistochemical study

This retrospective study deals with the expression of stress-response (heat-shock) protein 90 (srp 90) in a series of 148 human brain tumors. Immunohistochemical procedures were employed; cells of the human breast cancer line MCF 7 exposed to hyperosmolar stress served as positive controls. Deposits of reaction products were found in the cytoplasm and they displayed a granular pattern. srp 90 was detected in 14/31 meningiomas and 5/10 breast cancer metastases to the brain. The protein was also present in 6/13 glioblastomas and 7/18 astrocytomas. In addition, a positive reaction was found in 2/10 medulloblastomas, 2/14 primitive neuroectodermal tumors, 1/11 pituitary tumor, 2/21 schwannomas and 2/11 lung tumor metastases; however, oligodendrogliomas and primary malignant lymphomas were not stained. The srp 90 was detected in Western blots of meiningioma tissue homogenates. No significant immunohistochemical reaction was seen with sections of normal human cerebra, brain stem, cerebella, pituitary glands and spinal cords. These results document the expression of srp 90 by a variety of primary and metastatic intracranial tumors.     

Comparative study on the expression of stress-response protein (srp) 72, srp27, αB-crystallin and ubiquitin in brain tumours. An immunohistochemical investigation

This immunohistochemical study compares the expression of stress-response (heat-shock) protein (srp) 72, srp 27, αB-crystallin and ubiquitin in 86 primary human brain tumours and 21 carcinoma metastases to the central nervous system. Normal brain tissues were included for control purposes. Serial sections of formalin-fixed, paraffin-embedded tissues were used. Most meningiomas (17/23), glioblastomas (11/12) and breast carcinoma metastases (9/10) and some astrocytomas (7/13), pituitary tumours (4/9) and lung cancer metastases (5/11) had tumour cells that reacted with one or more of the antibodies used. Around 43% of the meningiomas and 25% of the glioblastomas expressed srp 72 only. Sole expression of srp 2 7, αB-crystallin or ubiquitin was seen in several tumours. Some meningiomas (3/23) and breast cancer metastases (4/10) co-expressed srp 72 and srp 27, and 1/3 of the glioblastomas co-expressed srp 27 and αB-crystallin. We conclude that primary and metastatic tumours of the brain produce stress-related proteins and that certain tumours concurrently express two or more srp's.