基于PI3K/Akt/FoxO3a信号通路探讨壮骨止痛胶囊防治肌少-骨质疏松症的作用机制

目的：通过网络药理学联合动物实验的方法,预测并证实壮骨止痛胶囊防治肌少-骨质疏松症（OS）的作用机制。方法：首先利用网络药理学方法筛选壮骨止痛胶囊的有效成分及靶点和OS的靶点,将筛选出的关键靶点进行GO和KEGG富集分析。采用去势+地塞米松腹腔注射方法建立OS大鼠模型,灌胃壮骨止痛胶囊水溶液,观察用药后大鼠体质量、骨密度、前肢抓力、骨骼肌质量指数、四肢骨骼肌质量指数以及PI3K/Akt/FoxO3a信号通路相关蛋白的变化情况。结果：壮骨止痛胶囊防治OS的关键通路主要有PI3K/Akt信号通路、叉头转录因子信号通路和肿瘤坏死因子信号通路等。动物实验表明,去势+地塞米松腹腔注射可造成大鼠全身骨密度、腰椎骨密度、前肢抓力、骨骼肌质量指数和四肢骨骼肌质量指数下降（P <0.05）。壮骨止痛胶囊可明显提高大鼠全身骨密度、腰椎骨密度、前肢抓力、骨骼肌质量指数和四肢骨骼肌质量指数,并增加PI3K、p-Akt和p-FoxO3a蛋白表达（P <0.05）。结论：去势+地塞米松腹腔注射可成功构建OS大鼠模型,壮骨止痛胶囊防治OS的作用机制与上调PI3K/Akt/FoxO3a信号通路密切相关。     

PI3K/Akt信号通路调节创伤愈合的机制

<正>磷酯酰肌醇3激酶(PI3K)是特异性的催化磷酯酰肌醇(PI)3位羟基磷酸化,产生具有第二信使作用的激酶。丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Akt)处于PI3K/Akt通路的中心环节,在细胞的凋亡、存活、增殖等活动中发挥重要的生物学作用。     

PI3K/Akt信号通路与胰岛素抵抗的研究进展

胰岛素信号转导在胰岛素生理作用的发挥中起着至关重要的作用,其减弱或受阻,使得胰岛素生理作用减弱,导致IR形成。本文概述了PI3K/Akt通路成员及功能,与IR关系及临床药物应用等研究进展。     

补肾活血方含药血清通过PI3K/Akt信号通路促进成骨细胞增殖分化研究

目的：观察补肾活血方含药血清对人成骨细胞增殖分化以及PI3K/Akt信号通路的影响,探讨补肾活血方防治骨质疏松症的作用机制。方法：通过新西兰大白兔制备补肾活血方含药血清,将人成骨细胞株分为空白组（Control组）、补肾活血方组（Z组）、补肾活血方含药血清＋10%μmol/L的抑制剂LY294002组（Z＋LY组）,采用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测各组成骨细胞的增殖情况,生化方法检测成骨细胞的碱性磷酸酶（ALP）活性,Western blot法检测AKT的活化情况。结果：补肾活血方含药血清能促进成骨细胞的增殖,并使之分化增强,且较Control组差异有统计学意义（P〈0.01）;阻断PI3K/AKT信号通路后,Z＋LY组对成骨细胞增殖分化的抑制较Z组差异有统计学意义（P〈0.05）,且对成骨细胞的分化功能有显著抑制作用（P〈0.01）;Western blot结果显示,补肾活血方含药血清能促进磷酸化AKT（p-AKT）的表达,用LY294002阻断PI3K/Akt信号通路后,p-AKT表达含量明显减少（P〈0.01）。结论：补肾活血方可能通过PI3K/Akt信号通路促进成骨细胞的增殖,并促进成骨细胞分化功能,这可能是补肾活血方防治骨质疏松症的机制之一。     

PI3K/Akt信号通路与帕金森病相关性及中医药治疗概述

帕金森病(PD)是目前第二大神经退行性疾病,研究发现PI3K/Akt信号通路与PD存在一定关联,可通过影响氧化应激反应、线粒体功能、炎症反应、神经元凋亡等途径干预PD的发生发展。近年来,越来越多的证据表明,中医药可为PD的治疗提供有效的辅助作用,并有多种治疗手段,如中药单药、单药提取物、中药复方、针刺等。参考文献32篇。     

消癌平注射液通过PI3K/Akt信号通路调节卵巢癌细胞增殖研究

目的研究消癌平注射液对卵巢癌细胞株Caov-3增殖作用的影响,以探讨其抗癌机制。方法 MMT法检测消癌平注射液对Caov-3细胞增殖活性的影响;相差显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术分析消癌平注射液对Caov-3细胞周期的影响;免疫印迹方法检测消癌平注射液对Caov-3细胞质中Akt、pAkt、p27蛋白表达的影响。结果消癌平注射液能以时间和剂量依赖方式抑制Caov-3细胞增殖,并诱导Caov-3细胞发生G0/G1期阻滞;随着消癌平注射液作用时间的延长,Caov-3细胞质中pAkt蛋白表达减少,p27蛋白表达增加。结论消癌平注射液通过抑制PI3K/Akt通路,使细胞周期发生阻滞,从而抑制细胞增殖。     

水蛭素通过PI3K/Akt信号通路抑制卵巢癌细胞增殖的机制研究

目的：探讨水蛭素抑制卵巢癌的潜在分子机制。方法：培养卵巢癌SKOV3细胞株，将其分为空白组、水蛭素组、顺铂组、水蛭素+顺铂组，通过CCK-8法确定水蛭素的最佳抑制浓度，免疫组化评估各组PI3K/Akt通路相关因子的表达情况，流式细胞术检测各组细胞凋亡情况，通过Western blot法检测水蛭素对癌细胞IL-1及PI3K-Akt信号通路中相关蛋白表达量的影响。结果：水蛭素能明显降低卵巢癌SKOV3细胞组织中IL-1水平，水蛭素组、顺铂组及水蛭素+顺铂组诱导人卵巢癌SKOV3细胞的凋亡(P<0.05),下调了PI3K/Akt信号通路中p-PI3K、p-Akt蛋白的表达水平(P<0.01),且水蛭素+顺铂组的p-PI3K、p-Akt蛋白表达下调最为明显。结论：水蛭素对卵巢癌有抑制作用，其机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。本研究为进一步深入阐释水蛭素抗卵巢癌机制提供了研究基础。     

白藜芦醇通过PI3K/Akt信号通路协同5-氟尿嘧啶对结肠癌细胞的抑制作用

[目的] 观察白藜芦醇（RES）对5-氟尿嘧啶（5-FU）化疗结肠癌敏感性及磷脂酰肌醇激酶（PI3K）/蛋白激酶（Akt）信号通路的影响。[方法] 体外培养SW620细胞,CCK8法检测细胞活力,倒置显微镜分析细胞克隆数,流式细胞术分析细胞凋亡率,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测凋亡蛋白Cle-caspase 9、Cle-caspase 7和Cle-PARP及PI3K/Akt信号通路相关蛋白表达水平。[结果] 与对照组比较,RES组、5-FU组和RES+5-FU组SW620细胞活力、克隆数及p-p85、p-110β、p-PDK1和p-Akt表达水平明显降低,而细胞凋亡率及Cle-caspase 9、Cle-caspase 7和Cle-PARP表达水平明显增高（P<0.05）;与RES组和5-FU组比较,RES+5-FU组SW620细胞活力、克隆数及p-p85、p-110β和p-PDK1和p-Akt表达水平明显降低,而细胞凋亡率及Cle-caspase 9、Cle-caspase 7和Cle-PARP表达水平明显增高（P<0.05）。PI3K抑制剂LY294002增强RES和5-FU联合处理对SW620细胞生长的抑制作用,而PI3K基因过表达则降低RES和5-FU联合处理对SW620细胞生长的抑制作用。[结论] RES与5-FU协同抑制PI3K/Akt信号通路诱导结肠癌的化疗效果。     

芹黄素通过PI3K/Akt通路抑制肾癌786-0细胞增殖研究

目的:探讨芹黄素对肾癌细胞的作用及其潜在机制。方法:利用中药系统药理学技术平台(TCMSP)寻找芹黄素潜在的作用靶点;利用注释可视化数据库(DAVID)分析潜在靶点的通路富集情况。用不同浓度的芩黄素干预人肾癌786-0细胞,利用CCK8法检测芹黄素对人肾癌786-0细胞增殖的作用;流式细胞术检测芹黄素对786-0细胞周期的影响;Western blot法检测细胞中蛋白激酶B (Akt)、磷酸化蛋白激酶B (p-Akt)蛋白的表达;利用人肾癌786-0细胞构建的实体瘤裸鼠模型验证芹黄素对肿瘤的作用。结果:共筛选出82个芹黄素的潜在靶点。通路富集分析结果显示符合条件的通路有102条,绝大部分通路与肿瘤密切相关,其中包括肾癌、细胞周期及磷脂酰肌醇激酶(PI3K)/Akt通路等。用不同浓度的芩黄素干预786-0细胞后,与0μmol/L组比较,10μmol/L组、20μmol/L组、40μmol/L组细胞增殖抑制率升高(P<0.05,P<0.01);20μmol/L组和40μmol/L组G1期细胞比例及p-Akt蛋白下降(P<0.05),G2期细胞比例升高(P<0.05)...     

针刺治疗对卵巢早衰大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响

目的:探讨针刺与药物治疗对卵巢早衰大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路的影响。方法:50只SPF级雌性SD大鼠随机取10只为正常组,其余40只连续5d腹腔注射环磷酰胺30mg/kg,建立卵巢早衰动物模型。将造模成功的35只大鼠随机分为模型组(9只)、药物组(9只)、针刺Ⅰ组(9只)、针刺Ⅱ组(8只)。正常组、模型组不干预;药物组采用乙烯雌酚灌胃治疗,每天1次;针刺Ⅰ组和针刺Ⅱ组分别取不同腧穴进行针刺治疗,每天2次,均治疗4周。治疗结束后,采用酶联免疫吸附测定(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测各组血清雌二醇(estradiol,E2)、孕酮(progesterone,P)、促卵泡激素(follicle stimulating hormone,FSH)和促黄体生成素(luteotropic hormone,LH)水平,卵巢组织进行病理苏木精-伊红(HE)染色以及RNA和蛋白提取,分别检测雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)、雌激素受体β(estrogen receptor beta,ERβ)、磷脂酰肌醇-3激酶(phosphatidylinositol 3-kinase/serine/threonine kinase,PI3K)、丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(protein kinase B,PKB,Akt)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,mTOR)mRNA的表达量。结果:大剂量短期内给予环磷酰胺可以建立卵巢早衰动物模型,成功率为87.5%。与正常组比较,模型组大鼠阴道细胞涂片呈雌激素缺乏征象,早期卵泡减少,卵泡结构破坏,成熟卵泡数目减少,血清E2水平明显降低(P0.05),P、FSH和LH水平升高(均P0.05),与雌激素相关的ERβ、PI3K、Akt和mTOR mRNA表达量均降低(均P0.05);与模型组相比,药物组和针刺组成熟卵泡有所增加,血清E2水平明显升高(均P0.05),FSH含量下降明显(均P0.05),相关信号通路的PI3K、Akt和mTOR mRNA表达量呈升高趋势(均P0.05);针刺组与药物组各指标组间比较差异无统计学意义(均P0.05)。结论:针刺治疗卵巢早衰具有一定的优势,并且取得与雌激素相当的治疗效果,作用机制可能与上调PI3K/Akt/mTOR信号通路相关基因和蛋白表达水平有关。     

PI3K/Akt信号通路与血管性痴呆的关系及中药干预作用研究进展

血管性痴呆(vascular dementia,Va D)的临床表现主要包括脑血管病变和认知功能障碍,其发生、发展与脑血流量和神经元存活状态密切相关。研究表明,磷酸肌醇3-激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase,PKB/Akt)信号通路广泛存在各种细胞中,在脑微血管内皮细胞(brain microvascular endothelial cells,BMEC)中可以通过下游内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,e NOS)/一氧化氮(nitric oxide,NO)途径调节血管舒缩功能及脑血流量;在神经元中可以对抗神经元凋亡,促进神经元存活,是Va D发生、发展过程的重要环节之一。到目前为止,一些研究发现部分中药、有效成分及复方可通过激活PI3K/Akt信号通路而发挥神经保护作用,有必要对该方面研究进展做一综述,以期为今后深入研究提供参考。     

基于PI3K/Akt信号通路探讨三七粉对血脂异常的疗效机制

目的：观察中药三七粉治疗血脂异常的有效性和安全性及其对磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号通路的调节作用。方法：选取河南中医药大学第三附属医院2021年5月至2022年6月60例痰瘀互结型血脂异常患者,按照随机、双盲对照原则分为对照组和试验组各30例,对照组给予血脂康胶囊+三七粉安慰剂,试验组给予三七粉+血脂康胶囊安慰剂,连续用药6周。分别于0、3、6周评估临床疗效、中医证候积分及肝肾功能等安全性指标;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测外周血清血管内皮生长因子（VEGF）、激酶插入区受体（KDR）、表皮生长因子（EGF）、表皮生长因子受体（EGFR）表达,采用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测外周血单个核细胞中KDR、EGFR和PI3K/Akt的mRNA表达。结果：试验组总有效率为83.33%,对照组总有效率为89.66%,两组患者疗效相当,差异无统计学意义,且未见明显不良反应发生。与本组治疗前比较,试验组患者在3、6周时中医证候积分、血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）表达均明显下降（P<0....     

基于PI3K/Akt信号通路探讨哈蟆油对卵泡发育作用的影响

目的 探讨哈蟆油对大鼠卵巢卵泡发育、卵巢磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）信号通路及怀胎功能的影响,以及哈蟆油雌激素样作用机制。方法 雌性Wistar大鼠70只,随机分为正常组、戊酸雌二醇+黄体酮组（1 mg·kg^-1+40 mg·kg^-1）,克罗米芬（10 mg·kg^-1）组,哈蟆油高、低剂量（400,200 mg·kg^-1）组,连续灌胃8周。灌胃7周时,所有大鼠测定发情周期。灌胃8周时,每组取4只大鼠进行产仔实验,其余大鼠在测定出发情期当天采血,测定血清雌二醇（E₂）,孕酮（P）,睾酮（T）,促卵泡生成素（FSH）,促黄体生成素（LH）含量,摘取子宫、卵巢,称量重量计算器官指数,一侧卵巢制成病理切片,进行不同发育阶段卵泡及黄体计数,另一侧卵巢进行实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和蛋白免疫印迹法（Westen blot）检测PI3K/Akt信号通路mRNA及蛋白变化。雌性昆明种小鼠40只,随机分为正常组、哈蟆油14 d组（400 mg·kg^-1）,哈蟆油28 d组（400 mg·kg^-1）,哈蟆油56 d组（400 mg·kg^-1）。哈蟆油各组小鼠分别在灌胃14,28,56 d后与雄性小鼠合笼饲养,18 d后观察两侧子宫内胎鼠数目及发育不良胎数目。结果 8周灌胃哈蟆油后,大鼠子宫指数明显降低（P<0.05）,血清LH明显降低（P<0.05）,卵巢中黄体数明显减少（P<0.01）,初级卵泡数明显减少（P<0.05）,卵泡闭锁率显著上升（P<0.01）,卵巢皮质层中出现短期内较多黄体或间质腺退化为间质的结构,卵巢PI3K和Akt mRNA表达水平显著升高（P<0.01）,哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）mRNA和人第10号染色体缺失的磷酸酶（PTEN）mRNA表达水平显著降低（P<0.01）;Akt蛋白磷酸化水平有降低趋势,差异无统计学意义;大鼠产仔数明显减少（P<0.05）。小鼠不同时长灌胃哈蟆油后,受孕率不同程度下降,服用14 d受孕率最低仅30%。灌胃哈蟆油28 d,左右子宫怀胎差值明显增大（P<0.05）。结论 哈蟆油长期灌胃后表现出与长期使用克罗米芬类似的使卵巢过度刺激进而呈现早衰的现象;短期灌胃出现怀孕率下降,一侧卵巢超数排卵,一侧卵巢排卵抑制等现象,对卵泡的影响机制需进一步研究。     

盐酸小檗胺通过调控自噬和PI3K/Akt/mTOR信号通路改善索拉非尼耐药的机制

目的 研究盐酸小檗胺改善肝癌细胞对索拉非尼耐药的作用及相关机制。方法 以1.25 μmol·L^-1索拉非尼为起始浓度采用药物浓度递增法筛选索拉非尼耐药细胞株SMMC-7721/S,SMMC-7721和SMMC-7721/S分别设置0、2.5、5、10、15、20 μmol·L^-1索拉菲尼给药组,采用细胞增殖与活性检测试剂盒（CCK-8）实验检测半抑制浓度（IC₅₀）、计算耐药指数（RI）;采用蛋白免疫印迹法（Western blot）比较SMMC-7721和SMMC-7721/S细胞自噬和磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（PI3K/Akt/mTOR）信号通路相关蛋白表达差异。设置5 μmol·L^-1盐酸小檗胺与2.5、5、10 μmol·L^-1索拉非尼单独和联合组,进行CCK-8实验检测各组对肝癌细胞SMMC-7721/S细胞生长的影响;分别设置5 μmol·L^-1小檗胺与5 μmol·L^-1索拉非尼单独和联合组,进行平板克隆形成实验检测各组对SMMC-7721和SMMC-7721/S细胞增殖的影响;分别设置5 μmol·L^-1盐酸小檗胺、0.1 μmol·L^-1自噬抑制剂巴氟洛霉素（Baf）组,进行免疫荧光实验检测溶酶体酸化标志物微管相关蛋白1轻链3（LC3）及LysoTracker探针检测SMMC-7721细胞溶酶体酸化情况;设置盐酸小檗胺5 μmol·L^-1、Baf 0.1 μmol·L^-1设置0、2.5、5、10 μmol·L^-1盐酸小檗胺组及0.1 μmol·L^-1 Baf组,进行Western blot实验比较各组对SMMC-7721细胞自噬和PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白表达的影响。结果 CCK-8实验表明索拉非尼对SMMC-7721/S细胞24 h的IC₅₀为9.56 mol·L^-1（P<0.01）,对SMMC-7721细胞24 h的IC₅₀为7.99 mol·L^-1,耐药指数RI为1.20（P<0.01）,为轻度耐药;Western blot实验表明,对比SMMC-7721细胞,SMMC-7721/S细胞内磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（p-mTOR）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）、微管相关蛋白1轻链3-Ⅱ（LC3Ⅱ）表达增加,螯合体1（p62）蛋白表达显著减少（P<0.01）,化蛋白激酶B（Akt）蛋白表达水平差异无统计学意义。CCK-8实验和平板克隆形成实验表明盐酸小檗胺与索拉非尼联合使用具有协同作用（Q>1.15）,盐酸小檗胺能够改善肝癌细胞对索拉非尼的部分耐药性。免疫荧光检测LC3结果显示,盐酸小檗胺和自噬抑制剂Baf显著增加了SMMC-7721中自噬小体LC3的数量,LysoTracker探针检测结果显示,盐酸小檗胺显著抑制SMMC-7721细胞溶酶体酸性程度（P<0.01）,表明细胞自噬水平被抑制。Western blot实验显示,在SMMC-7721细胞中,盐酸小檗胺能够进一步增强索拉非尼下调p-mTOR、p-Akt蛋白表达水平的作用,对Akt蛋白无明显改变;在SMMC-7721/S细胞中,盐酸小檗胺能够抑制索拉非尼诱导的p-mTOR蛋白表达相对于野生株的增加,共同降低p-Akt蛋白,对Akt总蛋白无明显影响。结论 盐酸小檗胺能够改善肝癌细胞对索拉非尼的耐药性,机制可能与其抑制细胞自噬和PI3K/Akt/mTOR信号通路有关。     

紫草素对乳腺恶性肿瘤细胞凋亡及PI3K/AKT信号通路的影响

目的：探讨紫草素对乳腺恶性肿瘤MDA-MB-231和MCF-7细胞凋亡以及PI3K/AKT信号通路表达的影响。方法：将MDA-MB-231及MCF-7细胞系用含不同浓度紫草素的完全培养基(分组为0、0.2、0.4、0.8、1.0 mg/mL)进行培养,CCK-8法检测细胞活性,Annexin V-FTIC/PI染色后流式细胞仪检测细胞凋亡情况,蛋白质印迹法测定细胞内PI3K/AKT表达情况。结果：与空白对照组(0 mg/mL)比较,紫草素浓度为0.8 mg/mL以上时对乳腺癌MDA-MB-231及MCF-7细胞生长具有显著抑制作用,最佳作用浓度为1.0 mg/mL;与空白对照组比较,MDA-MB-231及MCF-7细胞的凋亡水平随紫草素浓度增加而增加,且差异有统计学意义(P<0.05);与空白对照组比较,经紫草素处理的MDA-MB-231及MCF-7细胞PI3K表达均出现不同程度下降,差异有统计学意义(P<0.05)。结论：紫草素具有针对MDA-MB-231及MCF-7乳腺癌细胞系的抗肿瘤作用,其机制可能与其抑制PI3K/AKT信号通路有关。     

姜黄素通过PI3K/Akt信号通路抑制胃癌细胞增殖和诱导细胞凋亡

目的研究姜黄素(Cur)对人胃腺癌细胞(SGC-7901)PI3K/Akt信号通路的影响。方法采用CCK-8检测不同浓度Cur对SGC-7901细胞的24、48、72h的抑制作用;TUNEL检测各浓度Cur作用24h后SGC-7901细胞凋亡的发生率;Western blot、RT-PCR法检测各浓度Cur作用SGC-7901细胞后PI3K、p-Akt、Akt蛋白和PI3K、Akt mRNA的表达。结果 CKK-8实验证明了姜黄素对SGC-7901细胞增殖具有抑制作用,且随作用浓度的增强而增强;TUNEL法检测姜黄素作用SGC-7901细胞后凋亡率的变化,发现细胞凋亡率随浓度的增强而显著增加;Western blot、RT-PCR法检测Cur作用SGC-7901细胞后,PI3K、p-Akt、Akt蛋白和mRNA的表达水平降低。结论 Cur具有抑制人胃癌细胞增殖和促凋亡的作用,其机制与抑制PI3k/Akt信号通路有关。     

蠲痛饮对子宫内膜异位症大鼠PI3K/Akt/mTOR信号通路蛋白的影响

目的:探讨蠲痛饮对子宫内膜异位症(EMS)大鼠磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/雷帕霉素靶分子(mTOR)信号通路蛋白的影响。方法:采用自体子宫内膜移植法建立EMS大鼠模型,随机将48只大鼠分为正常组、模型组、蠲痛饮低、中、高剂量组、通路阻滞剂组(LY294002) 6组,分别给予蠲痛饮高、中、低剂量(42. 9,14. 3,4. 8 g·kg~(-1))灌胃,通路阻滞剂组予PI3K通路阻滞剂LY294002(0. 04 g·kg~(-1))腹腔注射,正常组及模型组每天按照10 mL·kg~(-1)给予生理盐水灌胃,各组持续用药28 d。应用透射电镜观察大鼠异位内膜组织超微结构,免疫组化法检测异位内膜组织PI3K,Akt,mTOR蛋白表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测核糖体蛋白S6激酶(p70S6K) mRNA相对含量。结果:与正常组比较,模型组异位内膜PI3K,Akt,mTOR蛋白和p70S6K mRNA的表达都明显升高(P 0. 05);与模型组比较,蠲痛饮中、高剂量、通路阻滞剂组干预后PI3K,Akt,mTOR蛋白和p70S6K mRNA的表达明显降低(P 0. 05)。透射电镜下可见蠲痛饮低、中、高剂量组和通路阻滞剂组均能促进腺上皮细胞萎缩或欠整齐,微绒毛减少或消失,胞核固缩,胞内线粒体肿胀或减少,间质细胞凋亡。结论:PI3K/Akt/mTOR信号通路参与子宫内膜异位症发生;蠲痛饮可能通过下调PI3K/Akt/mTOR通路蛋白的表达及p70S6K mRNA表达,从而抑制上皮间质细胞活性,促进细胞凋亡,治疗子宫内膜异位症。     

麻芍平喘汤通过PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制气道上皮细胞自噬

目的：探讨麻芍平喘汤（MSPC）通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路对脂多糖（LPS）诱导的人支气管气道上皮样细胞（16HBE）自噬的影响。方法：选用人支气管上皮细胞16HBE作为研究对象,采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测LPS诱导的16HBE活性影响和麻芍平喘含药血清对16HBE细胞活性影响;以CCK-8法筛选出的适宜条件的LPS诱导16HBE细胞,并测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量鉴定模型成立,制备麻芍平喘汤含药血清作用于LPS诱导的16HBE,将细胞分为正常组、LPS组、LPS+MSPC组、LY294002+LPS组、LY294002+LPS+MSPC组。透射电镜观察细胞的自噬囊泡和超微结构的变化;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR及微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的蛋白表达水平;酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测5组炎症因子白细胞介素（IL）-5、IL-6、TNF-α、IL-10的表达水平。结果：...     

补肾活血方通过调节PI3K/Akt/mTOR信号通路改善DOR大鼠卵巢储备功能

目的 观察补肾活血方调节磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/雷帕霉素靶蛋白（mTOR）通路相关因子改善卵巢储备功能下降（DOR）大鼠卵巢储备功能的作用机制。方法 运用Ataya法腹腔注射环磷酰胺复制60只DOR模型大鼠，将其随机分为模型组、戊酸雌二醇组（0.000 9 g·kg^-1），补肾活血方高、中、低剂量组（33，16.5，8.25 g·kg^-1），同时另设正常组，每组12只；各组相应药物治疗，正常组和模型组给予等体积生理盐水，连续灌胃14 d，每天1次。治疗结束后，苏木素-伊红（HE）染色卵巢组织，光镜观察初级卵泡数、成熟卵泡数、总卵泡数的变化；免疫组化检测卵巢组织中血管内皮生长因子（VEGF）的表达，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢组织中PI3K，Akt，mTOR，半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）法检测卵巢组织中PI3K，Akt，mTOR mRNA表达。结果 与正常组比较，模型组卵巢组织中成熟卵泡数量、总卵泡数量明显减少（P<0.05，P<0.01），卵巢组织中VEGF，Caspase-3表达升高（P<0.05），PI3K，Akt，mTOR蛋白及mRNA表达水平降低（P<0.05，P<0.01）；与模型组比较，补肾活血方中、高剂量组成熟卵泡数量、总卵泡数量均有不同程度上升（P<0.05，P<0.01），VEGF补肾活血方中剂量组升高最为明显（P<0.05），补肾活血方低、中、高剂量组及戊酸雌二醇组Caspase-3下降，补肾活血方中、高剂量组PI3K，Akt，mTOR蛋白及mRNA表达水平均升高（P<0.05，P<0.01），且补肾活血方中剂量组更加接近于正常组。结论 补肾活血方可以有效地改善DOR大鼠卵巢储备功能，促进卵泡数量增加。作用机制可能与补肾活血方通过增加卵巢组织中VEGF的表达有关，进而激活PI3K/Akt/mTOR信号通路，从而调节Caspase-3的含量，最后促进卵泡数量的增加。     

人参皂苷Rg1 通过PI3K/Akt/eNOS信号通路调控异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠心肌的抗氧化作用

目的:观察人参皂苷Rg_1预处理对异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠心肌磷酸肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(PKB/Akt)通路的影响。方法:采用异丙肾上腺素建立SD大鼠急性心肌缺血模型,将50只大鼠随机分为正常组,模型组,葛根素组,人参皂苷Rg_1高、低剂量组(20,10 mg·kg~(-1));Moor激光血流成像系统观测各组大鼠心脏表面血流值;酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定各组大鼠血清中肌酸激酶(CK),乳酸脱氢酶(LDH),一氧化氮(NO)的水平以及心肌中超氧化物歧化酶(SOD),丙二醛(MDA),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;实时荧光定量-聚合酶链式反应(Real-time PCR)法检测各组大鼠心肌内皮型一氧化氮合酶(eNOS)mRNA的表达变化;蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测各组大鼠心肌PI3K,Akt,p-Akt蛋白的表达变化。结果:与正常组比较,模型组大鼠心脏表面平均血流量明显下降,血清NO降低,CK,LDH升高;心肌MDA含量升高,GSH-Px含量下降,eNOS mRNA含量显著降低,PI3K/Akt通路蛋白的表达有所降低(P0.05,P0.01);与模型组比较,人参皂苷Rg_1高、低剂量组,心肌表面平均血流有显著提升,血清NO升高,CK,LDH降低,心肌MDA含量降低,GSH-Px含量升高,eNOS mRNA表达含量升高,PI3K/Akt通路蛋白的表达有所升高(P0.05,P0.01)。结论:人参皂苷Rg_1可以通过调控PI3K-Akt-eNOS信号通路改善急性心肌缺血大鼠心脏变化防治心血管病变。