诱导型NOS抑制可缓解烟草烟雾导致的大鼠肺气肿及肺动脉高压

目的:探究诱导型一氧化氮合酶(iNOS)抑制剂在缓解烟草烟雾导致的小鼠肺气肿及肺动脉高压中的效果。方法:选择60只健康SD大鼠,将其随机分为对照组、损伤组和干预组,每组各20只,其中对照组大鼠常规饲养,损伤组大鼠建立烟草烟雾损伤模型,干预组大鼠在建立模型后为其注射iNOS抑制剂,采集三组大鼠肺组织,观察其外形差异,对比三组大鼠肺组织匀浆中一氧化氮(NO)、iNOS、平均肺动脉压(mPAP)、肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)及基质金属蛋白酶-9(MMP-9)水平,并采用免疫组化方法对比三组大鼠BAX及Bcl-2表达。结果:大体观察显示,损伤组及干预组大鼠肺组织充血肿胀,呈现暗红色,干预组情况优于损伤组。对比显示,损伤组大鼠肺组织匀浆中mPAP、NO及iNOS水平明显高于干预组(P<0.05),干预组明显高于对照组(P<0.05);损伤组大鼠肺组织匀浆中TNF-α、IL-6及MMP-9水平明显高于干预组(P<0.05),干预组明显高于对照组(P<0.05);损伤组大鼠BAX表达高于干预组,干预组高于对照组(P<0.05);Bcl-2表达损伤组低于干预组,干预组组低于对照组(P<0.05)。结论:烟草烟雾诱导能够使大鼠肺组织NO及iNOS水平上升,应用iNOS抑制剂能够显著缓解烟草烟雾诱导的大鼠肺气肿及肺动脉高压症状,降低其炎症因子水平,其可能与上调凋亡蛋白Bcl-2表达、下调Bax蛋白表达有关。     

经皮导管引流减轻重症急性胰腺炎大鼠炎症损伤的实验研究

目的探讨经皮导管引流(PCD)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠炎症反应的影响及意义。方法 42只Wistar大鼠随机分为假手术组(A组,10只)、逆行胰胆管注射牛磺胆酸钠诱导SAP大鼠模型(B组,16只)和SAP大鼠PCD治疗组(C组,16只),分别于建模后12h取血清及腹腔积液测定肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-10及淀粉酶、蛋白酶水平,留取胰腺组织一部分制作石蜡切片行光镜下病理检查、一部分行蛋白质免疫印迹法(Western blotting)检测环氧化酶-2(COX-2)及诱导型一氮合酶(iNOS)表达。结果 B组大鼠血清淀粉酶、TNF-α、IL-6有显著升高(P<0.05),与A、C组比较IL-10无明显变化(P>0.05);相同时点的C组大鼠血清TNF-α、IL-6、淀粉酶和腹腔积液TNF-α、蛋白酶活性与B组比较,有明显下降(P<0.05),血清IL-10水平则显著升高(P<0.05),光镜病理检查提示C组大鼠胰腺病理损伤较A组大鼠明显改善,Western blotting结果显示C组大鼠胰腺组织COX-2和iNOS表达较A组大鼠明显下降(P<0.05)。结论 PCD可缓解SAP大鼠病情并减轻胰腺炎症损伤,其可能机制与引流出富含炎症细胞因子及胰酶等有害物质的腹腔积液从而抑制机体炎症反应并降低胰腺组织COX-2和iNOS的表达有关。     

重症急性胰腺炎大鼠胰腺NF-κB、iNOS、NO表达及瘦素的干预效应

目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织核因子-κB(NF-κB)活化和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)、NO表达与胰腺损伤的关系及瘦素的干预效应。方法选取wistar大鼠36只,分成正常对照空白组、重症急性胰腺炎组、外源性瘦素治疗组。以5%牛磺胆酸钠制作SAP模型。外源性瘦素治疗组以瘦素于SAP模型大鼠关腹前行腹腔注射,造模后6h取材,检测胰腺组织NF-κB活性、NO、iNOS含量,同时观察血浆淀粉酶及病理改变等。结果正常对照组胰腺组织几乎无NF-κB活化及iNOS的表达。SAP时胰腺组织NF-κB活化及i NOS、NO高表达,瘦素治疗组胰腺组织NF-κB活性、iNOS、NO含量、血浆淀粉酶降低。NF-κB活化与i NOS表达呈正相关,相关系数为0.79(P0.01),NO含量与组织病理评分也呈正相关,相关系数为0.66(P0.01)。结论 NF-κB活化及iNOS/NO过度表达可能是SAP胰腺损害发生的原因之一。瘦素可能通过抑制NF-κB活化途径而使i NOS的活性表达得以减少,进而使过量NO的生成得以减少,使造成的胰腺病理损害得以减轻。     

银杏叶提取物对重症急性胰腺炎大鼠一氧化氮及诱导型一氧化氮合成酶的影响

目的探讨银杏叶提取物(GBE)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠模型一氧化氮(NO)及诱导型一氧化氮合成酶(iNOS)表达的影响。方法 72只SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO)、SAP组、GBE干预组。采用5%牛磺胆酸钠胰胆管注射方法建立SAP动物模型。GBE治疗组于建模后5 min将GBE溶液通过股静脉给药。SO组和SAP组注入同样量的生理盐水。检测3组6、12、24 h血清淀粉酶、胰腺组织病理评分、血清及胰腺组织NO水平、实时荧光定量PCR检测胰腺组织iNOS mRNA表达情况。结果 GBE组胰腺组织病理评分6、12 h均显著低于SAP组,但在24 h胰腺组织病理评分与SAP组无显著差异;GBE组在6 h时血清及胰腺组织NO水平、12 h时胰腺NO水平较SAP组低,但随着时间延长,两组无显著差异;6 h时GBE组iNOS mRNA表达较SAP组低(P<0.05);12、24 h时SAP组与GBE组iNOS mRNA表达无统计学意义。结论 GBE在SAP早期可能通过抑制iNOS mRNA表达而降低NO水平,对胰腺组织起保护作用;但随着病程进展,这种作用不明显。     

氯膦酸二钠脂质体对重症急性胰腺炎大鼠胰腺损伤的影响

目的:探讨氯膦酸二钠脂质体(liposomal clodronate)对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺损伤的保护作用.方法:利用薄膜法制备氯膦酸二钠脂质体.采用胰腺被膜下均匀注射5%牛磺胆酸钠制作SAP模型.SD大鼠48只,随机分为对照组(C组)、空白脂质体组(P组)、氯膦酸二钠脂质体组(T组).P组和T组大鼠制作SAP模型.制模2 h和6 h后取肠系膜上静脉血液,检测各组大鼠血清中淀粉酶、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,观察各组胰腺组织的病理学变化及胰腺病理评分,免疫组化检测胰腺Caspase-3的表达.结果:P组大鼠的血清淀粉酚水平较C组明显升高(P<0.01),T组大鼠的血清淀粉酶水平显著低于P组.P组较C组2、6 h血清IL-6、TNF-α明显升高(P<0.01),T组较P组大鼠的2、6 h血清IL-6、TNF-α水平显著降低(P<0.01).T组大鼠的胰腺病理变化较P组明显减轻,胰腺组织病理学评分明显降低 (P<0.01).胰腺Caspase-3阳性表达增多. 结论:氯膦酸二钠脂质体可选择性清除单核/巨噬细胞,对SAP大鼠胰腺损伤有保护作用.     

早期肝素治疗对重症急性胰腺炎大鼠胰腺组织微血栓形成的影响

目的 观察和评价早期肝素治疗对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠胰腺组织微血栓形成的影响和疗效.方法 SD大鼠随机分为SAP组、肝素组和假手术组.12 h检测血清淀粉酶、血浆D-二聚体(D-dimer)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6);采集胰腺行普通病理检查并计数微血栓.结果 SAP诱发后12 h,SAP组大鼠的存活率显著低于肝素组和假手术组(P<0.05);胰腺组织病理学观察显示,肝素组微血栓数、病理评分显著少于SAP组(P<0.05);血清淀粉酶、D-dimer、TNF-α以及IL-6检测结果也显示肝素组较SAP组显著改善(P<0.05).结论 早期肝素治疗能减轻胰腺病理损害,减少胰腺组织微血栓数量,降低全身炎性反应,提高SAP大鼠的生存率.     

罗格列酮对重症急性胰腺炎的保护作用

目的:探讨罗格列酮对重症急性胰腺炎(SAP)的保护作用及其作用机制。方法:72只健康SD大鼠随机分为3组:假手术组(SO组)、SAP组及罗格列酮处理组。采用经十二指肠胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导大鼠SAP模型,于模型制作前30min腹腔内注射罗格列酮(10mg/kg)进行预处理,各组于术后3h、6h和12h分批处死动物,观察各组大鼠血浆淀粉酶、TNF-α、IL-6、胰腺组织髓过氧化物酶(MPO)水平的变化以及胰腺组织病理改变,并进行病理学评分。结果:SAP组血浆淀粉酶、TNF-α、IL-6、胰腺组织MPO、胰腺组织病理学评分较SO组均明显升高(P<0.05),罗格列酮处理组各时间点血浆淀粉酶、TNF-α、IL-6、胰腺组织MPO水平均较SAP组显著降低(P<0.05),6h、12h胰腺组织病理评分均显著低于SAP组(P<0.05),各时间点胰腺组织病理损伤较SAP组明显减轻。结论:罗格列酮可能通过减少TNF-α、IL-6的产生,减轻胰腺组织损伤,从而改善SAP病情。     

胎盘MSCs移植改善重症急性胰腺炎大鼠肠屏障功能研究

目的 探讨胎盘间充质干细胞(P-MSCs)移植对重症急性胰腺炎(SAP)大鼠肠屏障功能的保护作用.方法 24只健康成年雄性SD大鼠,随机均分为SHAM组、SAP组与SAP+P-MSCs组.采用4％牛磺胆酸钠胆胰管逆行注射建立SAP模型,术后6 h经尾静脉输注P-MSCs(1×106个·100 g-1).P-MSCs移植24 h后处死大鼠并取材,采用HE染色与透射电镜技术评估肠道上皮损伤程度,采用ELISA法测定血清D-乳酸、内毒素、IL-1β、TNF-α、CRP浓度与肠道IL-1β、TNF-α与KGF含量.观察P-MSCs在SAP大鼠肠道中分布情况、胰腺与肠系膜淋巴结中细菌移位情况.采用Western-blot法测定肠道中ZO-1与Occudin蛋白表达情况.结果 相比SAP组,SAP+P-MSCs组肠道损伤明显减轻并且有更多P-MSCs定植;血清D-乳酸、内毒素、IL-1β、TNF-α与CRP浓度显著降低(P<0.05);肠道中IL-1β、TNF-α含量显著降低(P<0.05),KGF含量显著升高(P<0.05);胰腺与肠系膜淋巴结组织培养获得的细菌菌落数明显减少(P<0.05);肠道中ZO-1与Occludin蛋白表达量显著升高(P<0.05).结论 外源性P-MSCs移植可减轻SAP大鼠肠道损伤与全身炎症反应,并可显著改善肠道屏障功能.     

阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注神经功能的保护作用及机制

目的 探讨阿托伐他汀对大鼠脑缺血再灌注(CIR)神经功能的保护作用及机制.方法 45只SD大鼠随机分为假手术组(sham组)、缺血2 h或6 h再灌注组(cir_2h组、cir_6h组)及缺血2 h或6 h再灌注后阿托伐他汀处理组(cir_2 h+ATV组、cir_6 h+ATV组),每组9只.线栓法制备CIR损伤模型,采用Zea-Longa评分法进行神经功能缺损评分,伊文思蓝(EB)渗透法定量分析血脑屏障通透性,湿干重法定量分析脑含水率,ELISA测定脑组织一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)水平,荧光定量PCR检测脑组织iNOS和eNOS mRNA表达,Western blot检测脑组织IRF5、NF-κB信号通路蛋白表达.结果 与sham组比较,cir_2h组和cir_6h组神经功能缺损评分、脑组织EB水平、脑含水率明显升高(P<0.05);而与cir_2 h组和cir_6 h组比较,cir_2 h+ATV组和cir_6 h+ATV组神经功能缺损评分、脑组织EB水平、脑含水率明显降低(P<0.05).与sham组比较,cir_2h组和cir_6h组脑组织NO、TNF-α和IL-6水平,iN-OS、eNOS mRNA表达,p-IκBα/IκBα、p-p65/p65,以及IRF5蛋白表达均明显升高(P<0.05);与cir_2h组和cir_6h组比较,cir_2h+ATV组和cir_6h+ATV组脑组织NO、TNF-α和IL-6水平,iNOS mRNA表达,p-IκBα/IκBα、p-p65/p65,以及IRF5蛋白表达均明显降低(P<0.05),而eNOS mRNA表达明显升高(P<0.05).结论 阿托伐他汀可以减轻大鼠CIR后神经功能损伤.     

乙酰半胱氨酸及氢化可的松对重症急性胰腺炎治疗作用的实验研究

目的探讨N-乙酰半胱氨酸(NAC)及氢化可的松对重症急性胰腺炎(SAP)的治疗保护作用及作用机制。方法72只SD大鼠随机分为4个组,假手术(SO)组、SAP组、NAC处理组及氢化可的松治疗组。采用胰胆管逆行注射5%牛磺胆酸钠诱导大鼠SAP模型;NAC处理组于模型制作前30min腹腔内注射NAC(200mg/kg)进行预处理;氢化可的松治疗组于SAP模型制作成功后10min给予舌下静脉注射氢化可的松琥珀酸钠(10mg/kg);假手术(SO)组开腹后仅翻动胰腺,即关腹。分别观察各组大鼠血浆淀粉酶、TNF-αI、L-6、肺湿/干比值、胰腺及肺组织病理以及组织髓过氧化物酶(MPO)的变化,采用RT-PCR法检测肺组织TNF-αmRNA的表达。结果SAP组血浆淀粉酶、TNF-α、IL-6、肺湿/干比值、肺组织TNF-αmRNA的表达、胰腺及肺组织MPO均较SO组明显升高,差异有统计学意义(P<0.05),NAC处理组及氢化可的松治疗组上述各检测指标均较SAP组显著降低,差异有统计学意义(P<0.05),NAC处理组胰腺及肺组织病理损伤明显减轻,氢化可的松治疗组肺组织病理损伤较SAP组减轻。结论NAC及氢化可的松可通过减...