维生素K3诱导乳腺癌细胞凋亡作用及调控因素的观察

目的：观察维生素K3（VitK3）对乳腺癌MCF-7细胞的凋亡诱导作用,探讨其可能机制.方法：采用噻唑蓝比色实验（MTT法）检测不同浓度VitK3对MCF-7细胞增殖的影响,观察过氧化氢酶（Catalase）对VitK3作用的影响;采用流式细胞技术（FCM）检测细胞的凋亡;应用RT-PCR检测VitK3作用前后核转录因子RelA、凋亡相关基因Bcl-2、Bax和细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物p21 CIP1/WAF1、p27KIP1 mRNA表达的变化.结果：（1）VitK3对MCF-7细胞的生长有明显的抑制作用,Catalase能降低VitK3的生长抑制作用;（2）VitK3能够诱导MCF-7细胞发生凋亡并随浓度的增加而增强;（3）VitK3作用后,Rcla、Bax、p21 CIP1/WAF1在mRNA水平表达增强.结论：VitK3能够诱导MCF-7细胞发生调亡,细胞周期停滞和Bax表达增加是其可能的作用机制.     

膀胱移行细胞癌组织中Caspase-3和Bcl—2蛋白的表达及其意义

目的：探讨Caspase3和Bcl2蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达及其与病理分级和临床分期的关系。方法：采用免疫组化SABC法并结合图像分析方法检测32例膀胱移行细胞癌和10例膀胱正常组织中Caspase3和Bcl-2蛋白的表达。结果：Caspase-3和Bcl-2两种蛋白在膀胱移行细胞癌中的表达与正常膀胱组织之间都有显著性差异（P〈0．05）。Caspase-3与病理分级和临床分期均无显著性差异（P〉0．05）,Bcl-2与病理分级和临床分期均无显著性差异（P〉0．05）,Caspase-3和Bcl-2两者之间呈负相关（FS=-0．358,P〈0．05）。结论：在膀胱癌组织中Caspase3的表达降低和Bcl-2的表达升高可能与膀胱癌的发生发展有关。     

瘦素对三苯氧胺诱导的乳腺癌MCF-7细胞的凋亡抑制作用及相关机制

目的 探讨瘦素在体外对乳腺癌MCF-7细胞的凋亡抑制作用及其抑制MCF-7细胞凋亡的相关机制.方法 将MCF-7细胞接种于48孔板中.分组处理48 h后,ELISA测定不同浓度瘦素对不同浓度三苯氧胺引起的MCF-7细胞凋亡.实时荧光定量PCR方法检测各组细胞中Survivin、BCL-2、BAX的mRNA的相对表达水平改变.结果 103 ng/mL和104 ng/mL瘦素可以有效抑制TAM诱导的MCF-7细胞凋亡.104 ng/mL明显上调了乳腺癌MCF-7内Survivin mRNA的表达,而BCL-2、BAX mRNA改变无统计学意义.结论 瘦素可以有效抑制TAM诱导的MCF-7细胞凋亡,其机制可能与瘦素上调Survivin mRNA的表达有关.     

肿瘤坏死因子凋亡诱导配体诱导结肠癌细胞凋亡的机制

目的探讨肿瘤坏死因子凋亡诱导配体(TRAIL)诱导结肠癌细胞发生凋亡的机制。方法流式细胞仪技术、酶联免疫吸附技术、荧光显色技术检测500μg／L TRAIL和／或Caspase抑制剂Z-VAD．fmk处理后,结肠癌细胞SW1116在不同时点(0、2、4、6、24 h)凋亡情况、Caspase-3酶活性及4 h线粒体△ψm、cardiolipin、细胞ROS变化。结果 TRAIL可引起结肠癌细胞凋亡,并于 4 h达凋亡高峰,凋亡指数为32．98％;并出现线粒体△ψm下降、cardiolipin丢失增加及Caspase-3酶活性增加,4 h达到最大峰值为(37．56±2．572)μmol／L·hr-1·mg-1蛋白。但TRAIL所诱导的细胞凋亡作用可被Caspase抑制剂Z-VAD．fmk所抑制。同时证实TRAIL所诱导的结肠癌细胞凋亡与细胞氧自由ROS的生成无关。结论 TRAIL通过Caspase依赖方式引起线粒体△ψm下降、cardi- olipin丢失增加导致线粒体内膜损伤,从而诱导细胞发生凋亡。     

凋亡调控基因Bcl-2、Bax、Caspase-3与骨肉瘤

细胞凋亡是一种基因控制的细胞自主性的死亡过程，是维持内环境稳定的重要机制之一，其概念最早由Kerr等提出。目前普遍认为，细胞凋亡的改变可以引起肿瘤的发生，因此探讨细胞凋亡机制及其调节将对肿瘤防治产生积极的影响。细胞凋亡的发生和发展可以这样概括为3个阶段：信号转导阶段、中央调控阶段和结构改变阶段。     

前列腺疾病细胞凋亡及Bcl—2／Bax,Fas／FasL调控研究

前列腺疾病与细胞增殖及凋亡的状态有密切关系。Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ是决定细胞凋亡抑制作用强弱的极重要基因,Ｆａｓ／ＦａｓＬ同为细胞死亡因子,在介导细胞凋亡中起重要作用。本文就细胞增殖及凋亡状态及Ｂｃｌ－２／Ｂａｘ、Ｆａｓ／ＦａｓＬ基因调控与前列腺疾病的关系及展望作一综述。     

维生素E琥珀酸酯诱导MCF 7乳腺癌细胞的凋亡

目的检测维生素E琥珀酸酯（VES）对MCF-7乳腺癌细胞的增殖抑制和凋亡诱导作用，并分析凋亡诱导分子Fas表达的变化。方法人乳腺癌细胞株MCF-7[雌激素受体阳性，ER（＋）]以VES刺激12，24h和48h，VES浓度为5μg／mL，10μg／mL和20μg／mL，用MTT法测定VES对细胞增殖的抑制作用；以流式细胞仪分析细胞周期和细胞表面Fas的表达；Western蛋白印迹法检测VES作用后Fas蛋白水平的变化。结果VES对MCF-7乳腺癌细胞具有显著的抑制作用，并表现为时间和剂量依赖关系。MCF-7乳腺癌细胞的自然凋亡率为1．2％；5μg／mL，10μg／mL和20μg／mL的VES作用48h后凋亡率分别升高至11．2％，16．4％和41．2％。VES作用后乳腺癌细胞Fas蛋白水平和细胞表面Fas表达升高。结论VES对ER（＋）乳腺癌细胞具有显著的增殖抑制作用，并诱导细胞凋亡，其机制与细胞表面Fas表达上调有关。     

维生素K3促肝癌细胞凋亡的实验研究

目的观察维生素K3(VitK3)对肝癌细胞系HEPG2、Caspase3、BCL2基因的凋亡诱导作用。方法将不同浓度的VitK3作用于HEPG2细胞观察其作用的时间效应及剂量效应,应用细胞形态学,流式细胞术,DNA凝胶电泳等方法检测细胞凋亡的发生。应用逆转录聚合酶链反应(RTPCR)法检测凋亡相关基因Caspase3,Bcl2mRNA表达的变化。结果VitK3对HEPG2细胞的生长有明显的抑制作用,并诱导肿瘤细胞发生凋亡;细胞体积缩小,核固缩,折光性加强;DNA凝胶电泳显示DNALadder在G1期之前出现SubG1峰。凋亡相关基因Caspase3转录水平比用药前增强。结论VitK促HEPG2细胞凋亡,且与Caspase3基因表达有关。     

应用RNAi沉默STAT3基因促裸鼠移植瘤细胞凋亡及对Bax/Bcl 2基因表达的影响

目的应用RNAi技术沉默信号转导子与转录活化子3(STAT3)基因,探讨其对人乳腺癌裸鼠移植瘤的细胞凋亡及其对Bax/Bcl2基因表达的影响。方法于雌裸鼠皮下种植MCF7细胞,肿瘤长至一定大小时,随机分为盐水对照(A)组、空质粒对照(B)组及实验(C)组。于肿瘤局部分别注射盐水、psilencer1.0U6空质粒和psilencer1.0U6STAT3siRNA重组质粒。当A组肿瘤长至足够大时处死全部动物,取肿瘤,测其大小及重量,行HE及免疫组化染色,同时用Westernblot检测STAT3,Bax,Bcl2基因的表达水平。结果C组肿瘤瘤块的体积和重量明显小于A,B组(P<0.01)。免疫组化及HE显示C组肿瘤中心区出现大面积细胞坏死及细胞凋亡征象,STAT3免疫组化呈阴性,而A,B组无此现象。Westernblot显示C组STAT3的表达明显低于A,B组(P<0.01),而Bax的表达明显高于A,B组(P<0.05),各组Bcl2的表达水平差异无显著性(P<0.05)。结论应用RNAi技术沉默STAT3基因可以降低人乳腺癌裸鼠移植瘤中STAT3的表达,同时引起Bax基因的表达上调,导致细胞凋亡进而抑制肿瘤的生长。     

乳腺癌中缺氧诱导因子-2α，微血管密度与细胞凋亡的关系

应用免疫组织化学技术和末端脱氧核苷酸转移酶介导的X-dUTP缺口末端标记法（TUNEL）检测66例乳腺癌中缺氧诱导因子-2α（HIF-2α）的表达，检测微血管密度（MVD）和细胞凋亡。 结果示 66例乳腺癌HIF-2α阳性率为42.4%，其表达随病理分期的升高而增加(P<0.01)。HIF-2α的表达与乳腺癌病理分级无关（P>0.05），而与MVD呈正相关（r=0.685, P<0.01）,与肿瘤调亡指数（AI）呈负相关（r=-0.561,P<0.01）。乳腺癌MVD与AI呈负相关（r=-0.581, P<0.01）。提示在乳腺癌发展过程中，HIF-2α对肿瘤的能量代谢和新血管生成有促进作用;微血管的形成可抑制肿瘤细胞的凋亡，从而促进肿瘤的恶性进展。     

尿多酸肽对乳腺癌细胞凋亡的影响

目的研究肿瘤细胞分化诱导剂尿多酸肽（CDA—Ⅱ）对乳腺癌细胞凋亡的影响。方法将CDA—Ⅱ与不同生物学特性的乳腺癌细胞株MCF-7和MDA-MB-231进行体外培养，同时以维甲酸为阳性对照，观察CDA—Ⅱ对乳腺癌细胞生长曲线、细胞凋亡及形态学等方面的影响。结果CDA—Ⅱ可减缓两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力，诱导乳腺癌细胞凋亡。结论CDA—Ⅱ可抑制MCF-7和MDA-MB-231两株乳腺癌细胞的生长和增殖能力，诱导乳腺癌细胞凋亡．本研究为CDA-Ⅱ治疗乳腺痛提供了实验依据。     

早期乳腺癌保乳手术探讨

目的 探讨早期乳腺癌保乳手术加放疗治疗效果.方法 分析近6年76例保乳术后加放疗的乳腺癌病人临床资料.结果 76例患者3,5年生存率分别为96.05%,94.8%;3,5年局部复发率分别为5.3%,6.6%;术后3,5年乳房保留率分别为96.05%,93.3%;仅1例胸壁复发,无死亡病例.该复发病例25岁,未婚,保乳愿望强烈,复发后再次行乳房切除及化疗,现健在.术后形体美容效果满意度80.5%.结论 早期乳腺癌采用保乳手术及放射治疗可取得满意结果,规范化的切除和术后放疗、全身综合治疗是保乳治疗成功的关键.     

男性乳腺癌的特点和治疗

目的探讨男性乳腺癌的诊断及治疗方法。方法对12年间收治的11例男性乳腺癌患者的临床资料进行回顾性分析。结果2例就诊时已属晚期，活检后分别存活6个月和8个月。其余9例均手术治疗，其中3例失访，1例术后5年肺转移，采取中西医结合治疗；1例根治术后5年发现同侧腋下结节，活检为癌复发，予放疗及化疗，至今存活已逾7年，另4例术后已生存0．5～7．0年，仍在治疗中。结论重视男性乳腺癌早期诊断，行积极手术治疗和其他辅助治疗可获良好效果。     

骨形成蛋白2诱导肝癌细胞凋亡及其机制

目的观察骨形成蛋白2（BMP-2）诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的作用及机制。方法以ELISA法检测BMP-2诱导HepG2细胞凋亡，并以Westernblot法检测BMP-2处理后Bcl-2和Fas抗原的表达变化。结果1～100ng／mL浓度BMP-2均对HepG2细胞有诱导凋亡的作用，并能下调Bcl-2的表达量，同时增加Fas抗原的表达。结论BMP-2可诱导HepG2肝癌细胞凋亡，其机制可能是通过Fas介导的途径。     

内乳淋巴结在乳腺癌治疗中的重要性

目的探讨乳腺癌术后内乳淋巴结复发的原因,强调内乳淋巴结在乳腺癌治疗中的重要性。方法回顾性分析40例以内乳淋巴结转移为首先复发的女性乳腺癌患者的临床资料、初发病时的临床特征、手术方式、术后病理分期以及治疗经过。结果40例患者内乳淋巴结复发与患者年龄、经期状况、手术方式无关(P>0.05)。而与原发肿瘤直径、部位、腋窝淋巴结阳性数、临床病理分期相关(P<0.05)。结论位于乳腺内侧区、中央区的大块肿瘤(>3cm),腋窝淋巴结阳性数多(>3),且临床病理分期晚(IIb IIIab)的乳腺癌患者,内乳淋巴结转移机率较高,须加强术后综合治疗。     

男性乳癌38例临床分析

目的探讨男性乳癌的临床特点、诊治及预后。方法回顾性分析两院38例男性乳癌患者的临床资料。38例术前依据B超，钼钯摄影，细针穿刺等方法均确诊。行乳癌根治切除术3例，改良根治术27例，乳腺单纯切除术5例，放弃手术3例，术后单纯放疗4例，单纯内分泌治疗7例，放疗加化疗9例，化疗加内分泌治疗8例。结果年龄53-82（平均58．5）岁，TNM分期包括Ⅰ期13例，Ⅱ期19例，Ⅲ期4例，Ⅳ期2例。随访时间2个月至10年，平均73．8个月，随访率为73．6％（28／38）。死亡13例；其中8例死于复发及转移，5例死于心脑血管疾病。5，10年总体生存率分别为71．6％和55．3％；Ⅰ，Ⅱ期5，10年生存率分别为92．6％（25／27）和78．9％（15／19）；Ⅲ，Ⅳ期6例中随访4例，均于3年内死亡，无3年生存病例。结论男性乳癌病程长，预后差，生存率低，以改良根治术为主的综合治疗是目前对男性乳癌的主要治疗模式，预后与临床分期有一定的关系。     

脾肿瘤56例诊治分析

目的探讨脾肿瘤的临床特点、诊断方法和治疗经验。方法回顾性分析34年间56例经手术治疗并病理证实的脾肿瘤患者的临床资料。 结果良性39例，其中确诊为脾囊肿25例，血管瘤9例，错构瘤3例，血管淋巴管瘤1例，炎性假瘤1例，其中4例脾囊肿、1例脾血管瘤和1例脾错构瘤行脾部分切除术，其余均行脾切除术；除5例失访外预后均良好。原发性恶性肿瘤12例，其中淋巴瘤2例，血管肉瘤2例，网织细胞肉瘤2例，恶性纤维组织细胞瘤2例，平滑肌肉瘤1例，恶性神经鞘瘤1例，肌纤维母细胞瘤1例，未分型1例；其中1例行坏死感染引流术，1例行脾胰体尾联合切除，其余均行脾切除或加脾门淋巴结清扫术；获随访者8例中生存5年以上者3例，3年存活1例，4例手术后1年内死亡。脾脏转移癌5例，行脾切除或联合脏器切除术。结论影像学检查是诊断脾肿瘤的主要方法。脾良性肿瘤主张行脾部分切除术。脾恶性肿瘤应采用以手术为主的综合治疗。     

肿瘤切除和术后复发对乳腺癌患者血管生成平衡的影响

目的观察乳腺癌患者血清血管内皮生长因子（VEGF）和内皮细胞抑制素（ES）浓度比值在手术前、后及复发时的变化，探讨肿瘤切除和术后复发对体内血管生成平衡的可能影响。方法分别采用竞争性酶联免疫试验和ELISA法测定59例乳腺痛患者手术前、后和复发时血清VEGF及ES水平，计算VEGF／ES比值，片与30例乳腺良性肿瘤和59例正常对照组比较。结果（1）手术前乳腺癌患者血清VEGF和ES水平与两对照组相比均显著增高（P〈0．005），VEGF／ES比值为9．1；手术后3周时，血清VEGF水平明显下降，而ES仍保持在较高状态，VEGF／ES比值下降至3．3。（2）复发患者术后VEGF／ES比值与术前相比也有所下降（10．3 vs 7．4），但一旦疾病复发时VEGF水平又急剧上升，VEGF／ES比值升至14．2。多因素分析显示，术后VEGF／ES比值是影响乳腺癌患者复发转移率的一个独立因素。结论乳腺癌肿瘤切除可影响患者体内血清VEGF—ES间平衡，监测VEGF／ES比值对患者预后评估有一定的辅助意义。