脊髓灰质炎病毒嵌合体诱生广泛反应性HIV-1中和抗体

1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)包膜蛋白(env)具有广泛的序列异质性和抗原变异性,也存在着抗原性保守位点.理想的疫苗应含有此保守位点,以便诱生能与许多病毒分离株起反应的抗体.作者选用HIV-1跨膜糖蛋白gp41(组特异性抗原决定簇),以Ⅰ型脊髓灰质炎病毒Sabin疫苗株为表达载体(pCASl),用DNA重组技术构建成脊髓灰质炎病毒/HIV-1抗原嵌合体Sl/env/3.     

分散在MF59中的微粒——一种有效的抗HIV-1重组蛋白质疫苗的佐剂结合物

作者对包裹重组抗原的丙交酯乙交酯共聚物 ( PL G)微粒分散于 MF5 9乳剂佐剂中的新佐剂配方进行了评价。使用的重组蛋白抗原为 1型人类免疫缺陷病毒 ( HIV- 1 SF2 )rgp1 2 0 (中国仓鼠卵巢细胞表达 )和 HIV- 1 SF22 4gag(酶母细胞表达 )。 PLG/gp1 2 0、PL G/p2 4分别表示包裹有上述抗原的 PLG微粒 ,平均大小为 1μm,约有 2 0 %的抗原于第 1天释放 ,余下的则可持续释放 5 0～ 6 0天。将上述微粒再分散于佐剂 MF5 9中 ( PL G/gp1 2 0+ MF5 9和 PLG/p2 4+ MF5 9) ,给小鼠和狒狒肌肉注射进行免疫学试验。　　结果表明 ,小鼠中 ,…     

6-O-酰化胞壁酰二肽能增强小鼠对HBsAg、流感病毒血凝素和破伤风类毒素的IgG应答

本文比较了三种具有6-O-酸基-酰基团的胞壁酰二肽(MDP)类似物〔6-O-C_(14)-O-(C_(16))-(MDP)(Me)、6-O-C_(14)-O-(C_(12))-(MDP)(Me)和6-O-C_(14)-O-(C_(14))-(MDP)(Me)〕水溶液的佐荆活性,以6-O-B30-MDP为阳性对照.将佐剂(100μg/mg)分别与HBsAg(100μg/mg)、流感病毒血凝素疫苗(9μg/ml)或破伤风类毒素(31μg/ml)等体积混合作为免疫抗原,对8～10周龄CDF1小鼠作腹腔注射(每组8只,每只0.2ml),3周后进行加强免疫.从眼眶后静脉或心脏采血,用ELISA法测定血清中IgG滴度.     

胞壁酰二肽多异戊烯乙酰衍生物的免疫学活性

本文作者对6种多异戊烯乙酸和6种胞壁酰二肽(MDP)衍生物的免疫学活性进行了研究。取350～400g的雌性豚鼠,足垫免疫细菌α-淀粉酶(BαA)抗原,总剂量为300μg/0.4ml,抗原溶剂是弗氏不完全佐剂(FIA)。免疫时对照组不用佐剂,试验组使用不同种类的佐剂(100μg)。4周后从后眼窝静脉丛取血,用酶学方法测定抗BαA抗体。取血后24小时皮内注射100、50或10μg BαA,于注射后4、24和48小时观察皮肤反应。抗原为单偶氮苯胂酸盐(ABA)-N-乙酰-L-酪氨酸(50μg),免疫两周后皮内注射ABA-牛血清白蛋白(BSA)(50或10μg)并于     

不同的脑膜炎球菌PorA外膜蛋白提呈形式在小鼠中的免疫原性

作者比较了脑膜炎球菌 Por A外膜蛋白(OMP)的三种提呈形式 :(1 )以 Al PO4或Quil- A作为佐剂的纯化 OMP;(2 )以 Al PO4为佐剂的含脂多糖 (LPS)的外膜囊 (OMV)配方 ;(3)以 Ouil- A为佐剂的免疫刺激复合物 (iscom)配方 (OMP- iscom)。　　研究分别以 B群脑膜炎球菌 H - 5株的纯化 OMP、OMP- iscom、基因工程 H44/76株 (PL1 6 2 1 5 ,表达三种不同 Por A蛋白 )为抗原 ,用不同剂量 (0 .33～ 1 0μg或 30μg)的抗原对 8～ 1 2周龄雌性 NIH/RIVM小鼠进行 2次皮下接种 ,每次间隔 2 8天。每次接种后采集血清样品 ,通过血清抗体测…     

新型佐剂系统乙型肝炎疫苗

史克必成公司研制的新型佐剂系统SBAS4含铝剂和 3-脱酰单磷酰酯质 A,可通过在注射部位形成库存效应、增强免疫原与巨噬细胞的相互作用、增加向 T细胞呈递抗原来增强对疫苗的免疫应答。作者用 HB-s Ag/SBAS4疫苗在健康和免疫缺陷人群中进行了试验 ,该疫苗含铝剂和 SBAS4吸附的2 0μg或 4 0μg重组 HBs Ag。　　首先 ,作者选择两组各 1 5名 1 9～ 2 5岁成人以 0、 1、 6月程序分别接种 HBs Ag/SBAS4和市售乙型肝炎疫苗 (对照 )。两组获完全保护的时间分别为 90天和 2 1 0天 ,HB-s Ag/SBAS4组的抗体几何平均滴度 ( GMT)比对照组…     

由重组CMV包膜糖蛋白B和新型佐剂制备的亚单位疫苗

本文报道与新型佐剂 MF5 9结合的巨细胞病毒 ( CMV)包膜糖蛋白 B( g B)疫苗在 46名血清阴性健康成人中的随机、双盲、安慰剂对照 期试验的结果。　　作者将在中国仓鼠卵巢细胞上表达和分泌并经突变失去一个蛋白酶裂解位点和删除跨膜区的重组 CMV g B作为抗原 ,与 MF5 91∶ 1混合制成含抗原为 5、30和 10 0 μg的 3种剂量的疫苗 (每个剂量组 10名受试者 ) ,另设 10 0 μg抗原氢氧化铝佐剂组 ( 10名 )和枸橼酸盐安慰剂组 ( 6名 )。肌肉接种 3次 ( 0、1、6月 )或 4次 ( 12月 )。观察并记录每次免疫后30分钟、2 4小时至 7天的局部及全身…     

QS-21能减少HIV-1包膜亚单位疫苗的抗原剂量

作者在血清阴性志愿者中进行了候选 1型人类免疫缺陷病毒 ( HIV- 1 )包膜亚单位疫苗与佐剂 QS- 2 1合用的 3项独立 期临床试验 ,以确定 QS- 2 1能否增强重组可溶性HIV- 1 MNgp1 2 0蛋白 ( rsgp1 2 0 )所诱导的免疫应答。　　在第一项剂量变化试验中 ,将两种剂量QS- 2 1 ( 50和 1 0 0 μg)分别与 1 0 0、 30 0或6 0 0μg rsgp1 2 0或安慰剂合用 ,加入或不加氢氧化铝。对于 6 1名志愿者在 0、1和 1 0月免疫 ,另外对接受 30 0 μg rsgp1 2 0的 2 0名志愿者在 0、1及 6月免疫。在第二项试验中 ,1 1 8名志愿者分别接受加入 1 0 0 μg QS-…     

HIV包膜亚单位与α2-巨球蛋白联合再同单磷酰脂质A和GM-CSF合用可提高免疫原性

1型人类免疫缺陷病毒 ( HIV- 1 )亚单位疫苗成功开发的关键在于提高其免疫原性 ,成功的佐剂不仅比现行佐剂更能增强免疫原性 ,而且还必须能减少最佳免疫原性所需的免疫原剂量。作者报告了 HIV- 1包膜亚单位掺入活化的 α2 -巨球蛋白 ( α2 M* ) ,在与含佐剂单磷酰脂质 A的鲨烯稳定乳液 ( MPL- SE)及粒细胞 -巨噬细胞集落刺激因子 ( GM-CSF)联合投递时可导致免疫原性提高 1 0 0倍的结果。　　雌性 Balb/ c小鼠按 0、1 4及 2 8天接种程序 ,皮下注射来自 HIV B( C4 - V3 B)或猴-人免疫缺陷病毒 89.6 P( C4 - V389.6P)的 HIV-1包…     

HIV-1 DNA-单磷酰脂质A佐剂疫苗鼻内与肌肉免疫的比较

最近作者对1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)DNA疫苗接种的研究证明,从细菌脂多糖取得的单磷酰脂质A(MPL)免疫佐剂可有效增强抗原特异性免疫力.免疫对象为BALB/c小鼠,DNA疫苗用pCMV160ⅢB和pCREV(ⅡB/REV)构建,使用稳定乳剂中的MPL(MPL-SE)作佐剂.肌肉免疫方法为:ⅢB/REV各2μg(总量4μg)溶于灭菌PBS,加(或不加)50μl MPL-SE,在小鼠股二头肌注射100μl疫苗.鼻内免疫的DNA剂量相同,仅MPL-SE改为5和20μl.用乙醚麻醉小鼠后,将30μl疫苗渐渐滴入小鼠鼻孔,让小鼠用自然方式吸入.肌肉和皮内途径均只接种1次.用ELISA检测血清IgG、IgG1和IgG2a及粪便中分泌性IgA(SIgA)滴度;用小鼠足垫试验评估迟发型超敏(DTH)反应;用标准~51Cr释放试验测定免     

一种检测抗-HIV-1和抗-HIV-2的微量ELISA系统

除1型人类免疫缺陷症病毒(HIV-1)外,HIV-2也是引起艾滋病的病因。故抗-HIV的筛检试验对HIV-1和HIV-2两种抗体均应充分敏感。本文介绍一种夹心型的免疫试验,采用HIV-1病毒裂解物和HIV-2包膜(env)合成肽联合作固相抗原。HIV-2 env合成肽经液相和固相技术结合制得,通过硅胶层析纯度达95%以上,与牛血清白蛋白     

IL-18能增强IL-12在诱导抗重组抗原Th1型免疫应答时的佐剂性

为探讨白细胞介素 1 8(IL- 1 8)在 Th1型免疫应答中的作用 ,作者用大肠杆菌 M1 5表达的重组曼氏血吸虫肌球蛋白 2 .3号片段为抗原进行研究 ,免疫动物为 C5 7BL /6雌性小鼠。作者将实验小鼠分成 3组 ,第 1组颈部皮下注射氢氧化铝、2 .3号抗原 (1 0μg)和 IL - 1 2(0 .5 μg)的混合液 ,第 2组皮下注射氢氧化铝和 IL- 1 8(0 .5 μg)和 /或 IL- 1 2 (0 .5 μg)的混合物 (佐剂对照组 ) ,第 3组注射无佐剂的 2 .3号抗原 (1 0 μg,抗原对照组 )。 1 4天后各组再注射第 2剂。 4天后通过心脏穿刺采集血清 ,取腋部淋巴结 (LN)和脾脏进行分析。结…     

LTK63粘膜佐剂与脱乙酰壳多糖释放系统联用能提高鼻腔免疫疫苗的免疫原性

大肠杆菌肠毒素 ( LT)是一种潜在的粘膜佐剂 ,经定位诱变可获得无毒性突变体 LTK63。表面带正电的脱乙酰壳多糖微粒可以吸附带负电的 LTK63和无毒性白喉毒素突变体 CRM1 97。意大利 Chiron分公司 Baudner评价了 C群脑膜炎球菌结合疫苗( CRM- Men C)鼻内免疫小鼠时 ,脱乙酰壳多糖微粒和粘膜佐剂 LTK63对免疫应答的影响。　　疫苗经鼻腔免疫或皮下注射方式于 0、2 1和 35天免疫小鼠 3次。每剂疫苗含 2 .5μg Men C寡糖、5μg CRM1 97载体蛋白、1μg LTK63或 2 0μg脱乙酰壳多糖微粒。在适宜浓度下 ,Men C结合疫苗单独或与 LTK63…     

不同疫苗传递系统诱导小鼠抗结核病保护作用的比较

作者研究了 BALB/ c鼠免疫接种含麻风杆菌 6 5k Da热休克蛋白 ( hsp6 5)抗原的不同疫苗后的免疫应答。　　小鼠分别接种 ( 1 )经弗氏佐剂乳化的重组 hsp6 5( rhsp6 5- FIA) ,每剂含抗原 2 5μg,间隔 1周先皮下注射 ( sc) 2次 ,然后再静脉注射 ( iv) 1次 ;( 2 )能产生 hsp6 5的巨噬细胞样肿瘤细胞 ( J774 - hsp6 5) ,每周 iv1 0 5 个细胞 ,共接种 4周 ;( 3)包被 hsp6 5的脂质体( hsp6 5-脂质体 ) ,每剂 5μg,间隔 2周 iv4次 ;或 ( 4 )表达 hsp6 5的质粒 DNA( hsp6 5- DNA)每剂含 DNA 50μg,间隔 3周肌肉注射 ( im) 4次。分别于完成免…     

以MontanideISA720为佐剂的三种重组无性期疟原虫抗原疫苗的Ⅰ期人体试验

本文报道了由三种重组无性期恶性疟原虫抗原组成的疫苗的免疫原性和安全性试验。疫苗含有大肠杆菌表达的三种重组疟原虫抗原 :Ag1 6 2 4相当于全长的裂殖子表面蛋白 2 (MSP2 ) ;1 90 LCS.T3为 MSP1相对保守区的 1 75个氨基酸片段与 CS蛋白上 T细胞表位的融合物 ;Ag1 5 0 5 H为裂殖子侵入红细胞时释放的蛋白质 RESA C末端的 70 %部分。每一种抗原分别与 Montanide ISA72 0佐剂乳化 ,乳化物中三种蛋白质的浓度分别为1 76 μg/ml(1 90 LCS.T3)、1 74μg/ml(MSP2 )和 1 38μg/ml(RESA)。　　作者进行了两项人体 期临床试验。第…     

通过电穿孔增加白喉类毒素及HBV肽疫苗经皮送递的非针刺无佐剂皮肤免疫法

本文首次介绍采用电穿孔 (EP)技术对C3H/He J小鼠完整皮肤进行免疫接种的研究情况。作者使用两种分子量与亲脂性各不相同的抗原 :白喉类毒素 (DT)及由 HBs Ag衍生的含 2 3个氨基酸的十四酰肽 (MYR) ,比较了皮内 (id) ,腹腔 (ip)及电穿孔皮肤免疫 (EP)的效果。 ip组的 DT剂量为 1μg;MYR为 1 0 μg,id和 EP组均分别为 1 0 μg和2 0μg。免疫程序为 :ip组第 1剂加弗氏完全佐剂 ,3周后第 2剂加弗氏不完全佐剂 ;id和EP组均免疫 3剂 ,均不加佐剂 ,间隔时间为2周。　　采用直接 EL ISA法分别于免疫后 0、2、3、4、6周检测动物的抗 DT…     

含新佐剂的乙型肝炎疫苗

研究表明 ,对目前使用的乙型肝炎疫苗出现低应答或无应答者可能具有某种遗传素质 ,因此 ,在一些特定人群中似乎需要较强免疫原性的疫苗。最近 ,Smith Kline Beecham公司研制出新佐剂系统 SBAS4,其主要成分为铝剂与 3- 0脱酰单磷酰脂质 A,它通过贮存点形成、激活巨噬细胞和向 T细胞提呈更多抗原来增强对疫苗的免疫应答。　　本研究中 ,作者选择了 1 5 0名 HBs Ag、抗 - HBs及抗 - HBc均阴性的 1 8～ 40岁健康成人 ,随机分成三组 ,第 1组 ( HB- SBAS4组 )接种乙型肝炎疫苗 + SBAS4,第 2组 ( Enger-ix- B组 )接种以氢氧化铝为佐剂…     

磷脂组成对包裹蛋白和多肽抗原脂质体抗体应答的影响

作者对皮下注射由双棕榈酰磷脂酰胆碱(DPPC)/双豆蔻酰磷脂酰甘油(DMPG)、DP-PC/双棕榈酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、DPPC/磷脂酰丝氨酸(PS)配制的、含牛血清白蛋白(BSA)、鼠单克隆抗体(McAb)GK1.5或21肽[来自于人类免疫缺陷症病毒(HIV)gp12O第二保守区的第254-274位氨基酸]的脂质体诱生抗体的能力进行了研究,同时也观察了口服含重组曼氏血吸虫28kDa谷胱甘肽-S-转移酶(Sm28GST)的上述脂质体诱生分泌性IgA(sIgA)、IgE和IgG的情况,并与明矾(Alum)和胞壁酰二肽(MDP)佐剂作对照.作者将雌性CD_1小鼠分成5组,分别于0、14天皮下免疫(1)抗原(Ag,5μg);(2)Alum/Ag(lmg/5μg);(3)MDP/Ag(50μg/     

HPLC-MS/MS法同时测定山银花中7个有机酸的含量北大核心CSCD

目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定山银花中7个有机酸(新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸)的含量,并对其在3种不同植物来源的药材中的含量进行比较。方法:采用Shiseido Capcell Pak-C_(18)色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以0.1%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL·min^(-1),加柱后分流器,使约30%洗脱液进入质谱仪,柱温30℃,进样量5μL;质谱采用ESI-多反应监测(MRM)模式扫描,以水杨酸为内标,脱溶剂温度350℃,脱溶剂气流(N_2)600 L·h^(-1),雾化器压力0.2 MPa,毛细管电压4 kV。结果:新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、3,4-二-O-咖啡酰奎宁酸、3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸和4,5-二-O-咖啡酰奎宁酸质量浓度分别在0.032~32.224μg·mL^(-1)(R^2=0.999 5)、0.168~16.800μg·mL^(-1)(R^2=0.999 4)、0.038~15.104μg·mL^(-1)(R^2=0.999 8)、0.010~4.064μg·mL^(-1)(R^2=0.999 2)、0.013~5.372μg·mL^(-1)(R^2=0.999 5)、0.079~39.840μg·mL^(-1)(R^2=0.999 5)和0.041~16.208μg·mL^(-1)(R^2=0.999 3)范围内线性关系良好;定量限(LOQ)为10.0~19.9 ng·mL^(-1),平均回收率在94.01%和105.0%之间。样品测定结果显示,山银花中绿原酸和3,5-二-O-咖啡酰奎宁酸含量较高,分别为1.262%~7.408%和0.636%~4.803%;咖啡酸含量较低,为0.003%~0.022%。通过比较不同植物来源的样品,发现其在有机酸的含量和比例方面存在较大差异。结论:本实验建立的方法灵敏、准确,可用于山银花药材中有机酸的含量测定,测定结果可为该药材质量标准的完善提供依据。     

人用治疗性可卡因疫苗的安全性和免疫原性

治疗性可卡因疫苗 TA- CD是由琥珀酰去甲可卡因 ( SNC)与重组霍乱毒素 B( r CTB)结合 ,加入氢氧化铝为佐剂制成。　　作者采用随机双盲安慰剂对照的方法观察该疫苗的安全性和免疫原性。观察对象为34名以往可卡因成瘾者 (其中男性 32人 ) ,年龄 1 8～ 4 2岁。 34人中有 2 7人完成 3次全程注射 ,在 84天仅观察到 2 4人 ,对 1 5人追踪随访 1年。试验分 3组 ,1组为 8人 ,2、3组各 1 0人 ,肌肉注射 ,每针 0 .5ml,剂量分别为 1 3μg、82 μg和 70 9μg。每组各设 2人为对照 ,接种安慰剂 (含氢氧化铝 ) ,注射剂量为 0 .5ml。 2个月内注射 3次 …