过氧化物酶体增殖物激活受体α在实验性大鼠脂肪肝中的表达

目的:研究过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)表达异常在脂肪肝发生中的作用。方法:采用小剂量CCl₄后肢皮下注射, 并高脂饮食复制大鼠脂肪肝动物模型, 检测肝脏甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)和游离脂肪酸(FFA)含量及血清谷丙转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和FFA含量, 并做病理切片, 测定肝脂变面积。提取肝脏总RNA, 运用半定量RT-PCR方法对肝脏PPARαmRNA的表达情况进行分析。结果:脂肪肝模型组大鼠肝脏TG、TC、FFA含量分别为(1.88±0.20)mmol·L^-1、(11.03±1.12)mmol·L^-1和(1260.38±151.27)μmol·L^-1, 正常对照组则为(0.53±0.10)mmol·L^-1、(1.25±0.25)mmol·L^-1和(334.30±27.09)μmol·L^-1(P＜0.01)。血清ALT、TNF-α和FFA含量亦明显高于对照组。肝脏PPARα的灰度比值:脂肪肝模型组0.41±0.28, 正常对照组1.41±0.29(P＜0.01)。结论:肝细胞中毒性脂肪肝时, 肝脏PPARα表达减少, 使肝中脂质的利用和脂肪酸的氧化均发生障碍, 导致肝脂蓄积。     

肾上腺髓质素对豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的作用及其信号转导机制

目的: 研究肾上腺髓质素( adrenomedullin, ADM)抑制豚鼠心室肌细胞L-型钙通道的信号转导机制。方法: 应用全细胞膜片钳技术,记录应用ADM(1-100 nmol·L^-1)前后L-型钙电流(I_Ca,L),以及分别记录应用ADM特异性受体拮抗剂ADM_22-52(100 nmol·L^-1)+ADM(100 nmol·L^-1)、蛋白激酶A (PKA) 特异性拮抗剂H-89(10 μmol·L^-1) + ADM(100 nmol·L^-1)、蛋白激酶C (PKC) 特异性拮抗剂PKC_19-36(10 μmol·L^-1)+ADM(100 nmol·L^-1)、PKC特异性激动剂PMA(1 μmol·L^-1)前后I_Ca,L。结果: ADM(1-100 nmol·L^-1)浓度依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞I_Ca,L,并可被ADM_22-52(100 nmol·L^-1)完全阻断;H-89(10 μmol·L^-1)对ADM抑制I_Ca,L的作用无影响。PKC_19-36(10 μmol·L^-1)可完全阻断ADM 对I_Ca,L的抑制效应,且PMA(1 μmol·L^-1)可模拟ADM 对I_Ca,L的抑制效应。结论: ADM作用于特异性ADM受体可浓度依赖性地抑制豚鼠心室肌细胞I_Ca,L,此作用有可能与PKC激活相关。     

转基因细胞系CHL-3A4可使硝苯吡啶的多药耐药逆转作用丧失

目的:检测本实验室构建的表达人细胞色素P450 3A4同功酶转基因细胞系CHL-3A4的硝苯吡啶氧化酶活性。方法:利用多药耐药细胞K562r的阿霉素(ADR)耐药性可被硝苯吡啶逆转,而硝苯吡啶又可特异地被CYP3A4代谢,观察硝苯吡啶在CHL-3A4 S9混合物 (S9 mix) 中孵育前后的生物学活性变化来判断CHL-3A4细胞的CYP3A4硝苯吡啶氧化酶活性。结果:K562r细胞在含有硝苯吡啶(NIF) (12.5 μg·L^-1)的培养基中培养时,对阿霉素的IC₅₀值从不含NIF时的(6.47±0.60) mg·L^-1降至(0.89±0.15) mg·L^-1(P＜0.01)。K562r细胞在含有分别经CHL-3A4、CHL细胞的S9组分和灭活的CHL-3A4细胞的S9组分预处理的NIF(12.5 μg·L^-1)的培养基中培养时,阿霉素对其的IC₅₀值分别为(6.10±0.50) mg·L^-1、(0.32±0.09) mg·L^-1和(0.32±0.04) mg·L^-1。前者和后两者相比P＜0.01。 结论:实验室构建的表达人细胞色素P450 3A4同功酶转基因细胞系CHL-3A4具有硝苯吡啶氧化酶活性,从而进一步确证其表达产物为人CYP3A4同功酶。并为今后检测CYP同功酶活性提供了一种新的途径。     

17β-雌二醇对骨髓基质细胞骨形态发生蛋白受体ⅠA、B mRNA表达的影响

目的:研究骨髓基质细胞在向成骨细胞分化的介质中,17β-雌二醇(E₂)对其骨形态发生蛋白受体(BMPR)ⅠA,ⅠBmRNA表达的影响,探讨雌二醇对成骨细胞生成的作用。方法:用1,25(OH)₂D₃和地塞米松(DEX)诱导大鼠骨髓基质细胞向成骨细胞分化,应用半定量RT-PCR技术,观察不同浓度E₂对骨髓基质细胞分化过程中BMPR-ⅠA,ⅠBmRNA表达的影响,以α-磷酸奈酚为底物测定细胞碱性磷酸酶的活性,VanGieson染色法显示Ⅰ型胶原的含量。结果:E₂能明显抑制骨髓基质细胞分化过程中BMPR-ⅠAmRNA的表达,且呈剂量依赖性,随E₂浓度增加,BMPR-ⅠAmRNA从(23.7±1.7)%降至(16.3±1.5)%(P<0.05)和(8.3±1.2)%(P<0.01);BMPR-ⅠBmRNA随E₂浓度增加而增加,从(1.3±0.6)%增至(5.7±2.0)%(P<0.05)和(15.3±3.0)%(P<0.01)。ALP活性随E₂浓度增加而降低,从(42.6±2.5)U·L^-1·g^-1protein降至(10.8±1.5)U·L^-1·g^-1protein和(3.6±1.7)U·L^-1·g^-1protein(P<0.01);细胞Ⅰ型胶原的含量随E₂浓度增加而减少。结论:E₂能明显抑制体外培养的骨髓基质细胞分化过程中BMPR-ⅠAmRNA的表达,降低成骨细胞生成。     

IgA肾病患者血清IgA1诱导正常人肾小球系膜细胞钙离子释放、转化生长因子β表达上调和纤连蛋白分泌

目的:研究IgA肾病患者血清IgA₁对正常人肾小球系膜细胞(HMC)活化及分泌炎症硬化因子的刺激作用,比较与正常人IgA₁的差异,探讨IgA肾病患者血清IgA₁病理生理作用。方法:亲和层析提取血清IgA₁,加热聚合(aIgA₁),激光共聚焦显微镜检测细胞内游离钙离子(Ca²⁺)释放,RT-PCR法检测细胞内TGF-β mRNA表达,间接竞争ELISA法检测细胞上清纤连蛋白(Fn)含量。结果:IgA肾病患者aIgA₁呈时间依赖性诱导正常HMC细胞内游离Ca²⁺释放、TGF-β mRNA表达和Fn分泌,作用趋势与正常人aIgA₁相同,高峰时间分别为孵育后60 s、24-36 h和36-48 h,但作用强度显著高于正常人aIgA₁;在作用高峰时间,患者组和正常人组Fluo-3最大相对荧光强度增加值分别为(95.83±11.43)和(55.88±12.72),TGF-β／GAPDH的比值分别为0.96±0.06和0.74±0.02,Fn含量分别为(6.45±0.18)μg/L和(5.54±0.43)μg/L,均有显著差异(P<0.05)。结论: IgA肾病患者血清IgA₁可以诱导体外培养的正常HMC活化并分泌炎症硬化因子,其作用较正常人IgA₁强,提示患者血清IgA₁分子与肾小球系膜细胞直接相互作用可能是IgA肾病发病机制之一。     

金属硫蛋白对羟自由基损伤的大鼠肝细胞核核苷三磷酸酶的保护作用

目的:研究金属硫蛋白(MTs)是否对羟自由基(hydroxylradical,·OH^-)损伤的大鼠肝细胞核核苷三磷酸酶(NTPase)具有保护作用。方法:以羟自由基发生系统Fe³⁺/H₂O₂单独或与MTs共同孵育大鼠离体肝细胞核,检测分别用ATP和GTP作底物时大鼠肝细胞核NTPase活性。结果:不同浓度Fe³⁺/H₂O₂(μmol·L^-1/μmol·L^-1:0.1/0.5、0.5/2.5、1/5、5/25)孵育肝细胞核,浓度依赖地增强核NTPase活性,与对照组差异显著(P＜0.01)。用不同浓度的MT(10^-9-10^-4mol·L^-1)与Fe²⁺/H₂O₂(1μmol·L^-1/5μmol·L^-1)共孵育,浓度依赖地拮抗Fe³⁺/H₂O₂诱导的效应(P＜0.01)。用MT单独孵育肝细胞核对NTPase的活性没有影响(P＞0.05)。结论:Fe³⁺/H₂O₂系统产生的·OH对核NTPase活性具有强烈的抑制效应,MT浓度依赖地拮抗·OH导致的NTPase活性降低。     

间歇性高容量血液滤过对肾替代治疗病人血清莫西沙星药物浓度的影响

目的: 研究间歇性高容量血液滤过(PHVHF)治疗时莫西沙星的血清药物浓度变化,为临床用药提供依据。方法: 8名行PHVHF治疗患者在治疗开始60 min内匀速静滴莫西沙星400 mg,给药后不同时间收集滤器前、后血样和置换液,采用高效液相色谱法(HPLC)测定血清及置换液中莫西沙星浓度。用DAS 2.1.1软件计算药代动力学参数。结果: PHVHF治疗前后血尿素氮(BUN)及肌酐(SCr)、血清钾(K⁺)水平显著下降(P<0.05),血清钠(Na⁺)氯(Cl^-)维持稳定。HPLC分析方法测定血滤患者血清及置换液中莫西沙星浓度,线性关系良好,准确度及精密度高。静滴莫西沙星400 mg后在该患者体内的药代动力学符合开放型二室模型。主要药代参数:峰浓度(C_max)=(4.843±1.854) mg/L,半衰期(T_1/2)=(4.822±2.126) h,达峰时间(T_max)=(1.31±0.59) h,总体分布容积 (V_d)=(82.63±24.69) L,总体清除率(CL_tot)=(14.36±8.43) L/h ,AUC/MIC₉₀在MIC₉₀值分别为0.25 mg/L、0.12 mg/L、0.03 mg/L时均大于100,C_max/ MIC₉₀在MIC₉₀值分别为0.25 mg/L、0.12 mg/L、0.03 mg/L时均大于10。结论: PHVHF治疗可明显改善肾功能,稳定内环境,部分清除血清中莫西沙星,但PHVHF治疗后血清药物浓度仍可达到针对病原菌的有效治疗浓度。     

白三烯D4在促进培养的人气管 平滑肌细胞增殖中的作用

目的和方法:研究白三烯D₄(LTD₄)是否剌激培养的人气管平滑肌细胞(ASMC)增殖。将分离的人ASMC进行传代培养,在培养基中加入各种浓度的LTD₄,计数细胞并测定 [³H]-胸腺嘧啶核苷([³H]-TdR)掺入量和三磷酸肌醇(IP₃)累积量。结果: LTD₄在一定范围内(0.1 nmoL·L^-1~10 nmoL·L^-1)以浓度依赖的方式增加人ASMC(P＜0.01)。LTD₄也增加[³H]-TdR的掺入量和IP₃累积量(P＜0.01)。磷脂酶C抑制剂新霉素(1 μmol·L^-1)阻止IP₃累积量的增加(P＜0.01)。结论:LTD₄剌激培养的人ASMC增殖并且可能在哮喘的气道重塑中起了作用。     

地西他滨联合丙戊酸钠促进胃癌MGC-803细胞凋亡和G0/G1期阻滞的机制研究

目的: 探讨地西他滨(DCA)和丙戊酸钠(VPA)联用对胃癌细胞株MGC-803凋亡和细胞周期的影响及机制。方法: DCA 1.5 μmol·L^-1、DCA 3.0 μmol·L^-1、VPA 1.5 mmol·L^-1、DCA 1.5 μmol·L^-1+VPA 1.5 mmol·L^-1和DCA 3.0 μmol·L^-1+VPA 1.5 mmol·L^-1作用MGC-803细胞72 h。Annexin V/PI法检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞周期,实时荧光定量PCR检测nm23-H1 mRNA表达。结果: VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 1.5 μmol·L^-1联合用药组 和VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 3.0 μmol·L^-1联合用药组 凋亡率均高于其相应单药组,差异有统计学意义(P<0.01)。MGC-803细胞G₀/G₁期比例在VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 1.5 μmol·L^-1联合用药组(61.55%±2.38%)和VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 3.0 μmol·L^-1联合用药组(66.75%±2.48%)的表达水平均高于其相应单药组,差异有统计学意义(P<0.01)。nm23-H1 mRNA在VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 1.5 μmol·L^-1联合用药组(1.84±0.46)和VPA 1.5 mmol·L^-1+DCA 3.0 μmol·L^-1联合用药组(2.88±0.42)的表达水平均高于其相应单药组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论: DCA联合VPA能显著促进MGC-803细胞凋亡及G₀/G₁期阻滞,其机制可能与促nm23-H1基因的表达有关。     

测定细胞培养上清液中亚硝酸盐的荧光分光光度法

目的:建立检测细胞培养上清液中亚硝酸盐的方法。方法:以2, 3-二氨基萘与亚硝酸盐反应生成荧光产物2, 3-二氨基萘三唑或1--萘三唑, 用荧光分光光度法测定。结果:2, 3-二氨基萘浓度为0.63mmol·L^-1, 反应液和终止反应后pH值各为2.00和12.10, 20℃水浴15min是较适测定条件。本法的检出限为61.34nmol·L^-1, 日内和日间变异系数分别小于3%和5%, 加入NaNO₂0.36、1.45、2.54nmol的回收率各为99.12%±4.64%、103.28%±2.68%、105.14%±4.36%。测定大鼠腹腔巨噬细胞、大鼠胎鼠大脑半球神经细胞培养上清液亚硝酸盐含量分别为(109.95±4.57)μmol·L^-1和(6.52±1.57)μmol·L^-1, 后者的95%分布范围为3.44-9.60μmol·L^-1。核磁共振氢谱显示标准品化学位移δ7.33027ppm和细胞培养上清液化学位移δ7.33023ppm。结论:本法特异、敏感、快速、简便, 对一氧化氮的研究有一定价值。     

水飞蓟宾对非酒精性脂肪性肝病线粒体膜流动性的影响

目的:探讨非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)大鼠模型中肝脏线粒体膜流动性的改变以及观察水飞蓟宾对NAFLD的防治作用。方法:采用高脂饮食建立非酒精性脂肪性肝病大鼠模型,观察大鼠甘油三酸酯(TG)、胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、肝组织HE染色、脂肪细胞染色的变化,以及肝脏线粒体膜的流动性的改变,并以水飞蓟宾抗氧化治疗,与已知有疗效的罗格列酮对比,观察其对上述指标的影响。结果:模型组血清ALT、AST、TG、TC显著升高,与空白对照组比较差异显著(P0.01)。HE染色提示肝组织呈弥散性脂质蓄积,模型组大鼠肝细胞线粒体微粘度明显高于空白对照组(P0.01)。罗格列酮治疗组TG、AST均得到明显改善(P0.05或P0.01);TC、ALT与模型组比较差异无显著(P0.05)。水飞蓟宾治疗后,TC、TG、ALT以及AST均得到明显改善(均P0.01)。两治疗组大鼠肝MDA含量、肝细胞线粒体微粘度均较模型对照组下降(P0.01),且水飞蓟宾的效果比罗格列酮显著,差异显著(P0.05)。结论:高脂饮食可诱导大鼠NAFLD发生,水飞蓟宾可以有效地防治NAFLD。稳定并维持适当的肝脏线粒体膜流动性、减轻肝脏脂质过氧化可能是水飞蓟宾肝脏保护功能的作用途径。     

肝损伤组织萃取物对人肝癌细胞株BEL-7402诱导分化作用初探

目的: 观察肝损伤组织萃取物对人肝癌细胞株BEL-7402的影响,探讨肿瘤诱导分化治疗的新途径。方法: 以肝损伤模型动物的肝组织萃取物为诱导剂对人肝癌细胞株BEL-7402进行诱导分化,动态观察肝癌细胞形态特点、MTT生长曲线以及细胞周期分布等生物学特征的变化规律。结果: 在肝损伤组织萃取物的影响下,肝癌细胞增殖及生长速度减慢,G₀/G₁期细胞数增加,S期细胞数下降,增殖指数(PI)降低。结论: 肝损伤组织萃取物可以影响肝癌细胞BEL-7402的分化状态,促进细胞分化,降低肿瘤特性,显示出作为肿瘤诱导分化剂的重要潜质,值得进一步研究和探讨。     

Dietary patterns in Brazilian patients with non-alcoholic fatty liver disease: a cross-sectional study

OBJECTIVE:

Recent evidence suggests that non-alcoholic fatty liver disease is associated with diet. Our aim was to investigate the dietary patterns of a Brazilian population with this condition and compare them with the recommended diet.

METHODS:

A cross-sectional study was conducted on 96 non-alcoholic fatty liver disease patients before any dietetic counseling. All patients underwent abdominal ultrasound, biochemical tests, dietary evaluations, and anthropometric evaluations. Their food intake was assessed by a semi-quantitative food-frequency questionnaire and 24-hour food recall.

RESULTS:

The median patient age was 53 years, and 77% of the individuals were women. Most (67.7%) participants were obese, and a large waist circumference was observed in 80.2% subjects. Almost 70% of the participants had metabolic syndrome, and 62.3% presented evidence of either insulin resistance or overt diabetes. Most patients (51.5, 58.5, and 61.7%, respectively) exceeded the recommendations for energy intake, as well as total and saturated fat. All patients consumed less than the amount of recommended monounsaturated fatty acids, and 52.1 and 76.6% of them consumed less polyunsaturated fatty acids and fiber, respectively, than recommended. In most patients, the calcium, sodium, potassium, pyridoxine, and vitamin C intake did not meet the recommendations, and in 10.5-15.5% of individuals, the tolerable upper limit intake for sodium was exceeded. The patients presented a significantly high intake of meats, fats, sugars, legumes (beans), and vegetables and a low consumption of cereals, fruits, and dairy products compared with the recommendations.

CONCLUSIONS:

Although patients with non-alcoholic fatty liver disease exhibited high energy and lipid consumption, most of them had inadequate intake of some micronutrients. The possible role of nutrient-deficient intake in the development of non-alcoholic fatty liver disease warrants investigation.     

Nutrition and immune system: certain fatty acids differently modify membrane composition and consequently kinetics of KV1.3 channels of human peripheral lymphocytes

Potassium (K(+)) channels of human peripheral lymphocytes play a considerable role in the signalling processes required for immune responses. Modification of the fatty acid composition of the membrane influences the functions of various membrane enzymes and ion channels. We set out to establish how the incorporation of fatty acids with different carbon chain lengths and degrees of unsaturation into the cell membrane influences the function of K(V)1.3 channels of lymphocytes, thereby potentially modifying the immune responses of the cells. The incorporation of the fatty acids into the cell membrane was monitored by gas chromatography. Whole-cell patch-clamp experiments demonstrated that the polyunsaturated linoleic acid, arachidonic acid and docosahexaenoic acid all decreased the activation and inactivation time constants of the K(V)1.3 channels, but did not affect the voltage-dependence of steady-state activation and steady-state inactivation of the channels. Treatment with the saturated palmitic acid, stearic acid and the monounsaturated oleic acid did not result in significant changes in the biophysical parameters of K(V)1.3 gating studied. We conclude that the incorporation of fatty acids unsaturated to different degrees into the cell membrane of lymphocytes influenced the rate of gating transitions but not the equilibrium distribution of the channels between different states. This effect depended on the degree of unsaturation and the chain length of the fatty acids: no effects of saturated and monounsaturated fatty acids (16:0, 18:0 and 18:1) were observed whereas treatment with polyunsaturated fatty acids (18:2, 20:4 and 22:6) resulted in significant changes in the channel kinetics.     

抗IGFBPrP1抗体对小鼠肝纤维化的预防作用及其机制的研究

目的: 明确抗胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBPrP1)抗体能否预防硫代乙酰胺(TAA)诱导的小鼠肝纤维化的形成,同时探讨其机制。方法: 将24只雄性C57BL/6野生型小鼠随机分为正常对照组、TAA 4周组和TAA+抗IGFBPrP1抗体4周组,每组8只,观察肝组织形态学改变,免疫组织化学染色和Western blotting检测肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转化生长因子β₁(TGF-β₁)、Smad3、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅰ、Ⅲ型胶原(collagen Ⅰ、Ⅲ)及IGFBPrP1的表达。结果: TAA 4周组肝损伤严重,α-SMA、TGF-β₁、Smad3、p-Smad2/3、FN、collagen Ⅰ、Ⅲ及IGFBPrP1的表达明显高于正常对照组(P＜0.01),TAA+抗IGFBPrP1抗体4周组肝损伤减轻,上述各指标表达均低于TAA 4周组(P＜0.01)。IGFBPrP1与TGF-β₁、Smad3、p-Smad2/3 、FN及collagen Ⅰ的表达呈正相关(P＜0.01)。结论: 抗IGFBPrP1抗体可预防TAA诱导的小鼠肝纤维化的形成,其机制为抑制肝星状细胞的活化和减少细胞核内p-Smad2/3的表达、抑制TGF-β₁/Smad3信号通路,进而导致细胞外基质在肝组织中沉积减少。     

Iron translocation by free fatty acids.

Organic extracts of cigarette smoke and uncombusted tobacco contain substances capable of translocating iron from aqueous solutions into immiscible organic solvents. Such extracts will also effect the organic solvation of iron present in ferruginous forms of asbestos such as amosite and crocidolite (Qian and Eaton, Arch Biochem Biophys 1989, 275:280). These substances, previously detected by their iron-translocating properties, have now been purified and identified by mass spectroscopy as saturated fatty acids, predominantly stearic and palmitic acids. Organic extracts of tobacco smoke, as well as the pure fatty acids, also transfer ferrous iron into both isolated red cell membranes and intact human erythrocytes. The increased membrane iron may enhance cellular susceptibility to exogenous oxidants; erythrocyte membranes subject to fatty acid-mediated iron accumulation show elevated peroxidation of endogenous polyunsaturated fatty acids. These observations may help explain the phlogistic effects of tobacco use and suggest, in a broader context, that free fatty acids may act as physiologic and pathologic mediators of metal translocation.     

IGFBPrP1与硫代乙酰胺对小鼠肝组织的影响及其机制

目的:通过对胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBPrP1)与硫代乙酰胺(TAA)对小鼠肝组织影响的研究,明确IGFBPrP1在肝纤维化中的作用及其机制。方法:清洁级C57BL/6野生型小鼠32只,随机分为4组:正常对照组、重组小鼠IGFBPrP1(rmIGFBPrP1)4周组、TAA2周组及TAA4周组,每组8只。取肝组织行HE、苦味酸-天狼星红及免疫组织化学染色和Westernblotting检测。结果:rmIGFBPrP14周组肝细胞广泛脂肪变性,TAA2周组出现纤维组织增生,TAA4周组病理改变较TAA2周组严重。与正常对照组相比,rmIGFBPrP14周组、TAA2周组和TAA4周组IGFBPrP1、转化生长因子β1(TGF-β1)、Smad3、p-Smad2/3、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、I型胶原(ColⅠ)、纤维连接蛋白(FN)的表达增高(P0.05)。rmIGFBPrP14周组IGFBPrP1、ColⅠ和FN的表达与TAA2周组无显著差异。结论:IGFBPrP1在TAA诱导的肝纤维化形成过程中发挥重要作用,并可作为独立致病因子引起小鼠肝组织中细胞外基质生成增多,且该作用是通过TGF-β1/Smad3信号通路来实现的。     

大鼠肝纤维化过程中4种肝脏细胞对纤溶系统的调节

目的:探讨在大鼠肝纤维化发展过程中,肝细胞、肝星状细胞(HSCs)、Kupffer细胞和内皮细胞(ECs)对纤溶系统的调节作用。方法:采用1周2次皮下注射50%CCl4、持续12周的方法制备大鼠慢性肝纤维化模型;将肝纤维化不同时期的4种肝脏细胞进行分离;采用Northern印迹法及Western印迹法分别测定大鼠各类肝脏细胞中尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、以及它的抑制物(PAI-1)和受体(uPAR)的mRNA和蛋白表达。结果:Northern印迹法及Western印迹法分析均显示,在大鼠肝纤维化过程中,HSCs和ECs均为PAI-1、uPAR的主要产生细胞,相比之下,HSCs产生更多。结论:在大鼠肝纤维化发生发展过程中,HSCs和ECs对纤溶系统成分的产生起着重要的调节作用,而HSCs则是PAI-1、uPAR最主要的产生细胞。     

苦瓜对实验性大鼠肝纤维化的干预作用及可能机制

目的: 探讨苦瓜(BM)对四氯化碳(CCl₄)诱导大鼠肝纤维化的干预作用及相关机制。方法: 随机将32只雄性健康Wistar大鼠分为4组:对照组(C组);模型组(CCl₄,M组);BM低剂量组(BM 100g/kg饲料+CCl₄,BM-L组)、BM高剂量组(BM 200g/kg饲料+CCl₄,BM-H组)。饲养中除C组外的各组大鼠均皮下注射50%CCl₄-橄榄油溶液2 mL/kg,2次/周,共8周,诱导肝纤维化动物模型。8周后处死大鼠,留取大鼠肝脏和血清。计算肝体指数;测定血清丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性;测定肝匀浆总蛋白(TP)和白蛋白(Alb)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、羟脯氨酸(HYP)含量和单胺氧化酶(MAO)活性;胶原纤维染色观察大鼠肝组织变性与胶原沉积病理改变。结果: 与M组比较,摄入BM后的各剂量组大鼠肝体指数显著降低(P<0.01);血清MDA含量及肝匀浆HYP含量和MAO活性均明显降低(P<0.01),而血清SOD活性、肝组织TP和Alb含量、GSH-Px活性明显增强(P<0.01)。与正常大鼠相比,模型大鼠肝脏有明显胶原沉积与肝纤维化,伴有不同程度的肝细胞炎性损伤坏死;BM组明显减轻模型大鼠肝组织损伤坏死与胶原沉积等病理变化,以高剂量组更明显。结论: BM具有抗CCl₄诱导大鼠肝纤维化作用,其机制可能与其抗脂质过氧化、降低肝HYP含量及MAO活性的作用有关。