马来酰亚胺苯甲氨酯聚乙二醇修饰膜蛋白掩盖AB和RhD抗原制备通用血型红细胞

聚乙二醇（PEG）上的活性基团结合在红细胞表面掩盖血型抗原是制备通用血型红细胞的途径之一，这些PEG链有很强的水合作用，能覆盖红细胞表面的大片区域，阻断血型抗原与抗体结合。甲基氧PEG-5000（mPEG-5000）是常用的红细胞修饰剂，主要修饰蛋白上的氨基基团。在氯化氰脲酸（CnCl）催化下，mPEG-5000与红细胞膜上氨基形成共价键连接，掩盖Rh抗原和A或B抗原。CnCl—PEG-5000浓度越高，血型抗原的覆盖效果越好。由于微环境下A和B血型抗原处无氨基基团或者氨基基团不能被CnCl—PEG-5000修饰，不能完全阻断抗-A、B与A和B血型抗原结合。本文报道用马来酰亚胺苯甲氨酯聚乙二醇（Mal—Phe—PEG）修饰红细胞A、B和RhD抗原的方法。     

温度时间对马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇遮蔽Rh抗原的影响

目的观察时间、温度等因素对马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇遮盖Rh抗原的影响。方法马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇(30mg/ml)、2-亚氨基硫烷盐酸盐(3mg/ml),在pH7.4磷酸钠缓冲液中修饰红细胞(3%-5%),修饰红细胞与ABO/Rh抗体反应,观察马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇、乙-亚按基硫烷盐酸盐和红细胞加入的先后顺序以及温度时间对Rh抗原遮盖的效果。结果马来酰亚胺苯甲胺酯聚乙二醇、2-亚氨基硫烷盐酸盐和红细胞加入的先后顺序对红细胞RhD抗原遮盖无影响;但温度、时间对Rh抗原遮盖有明显影响,25-37℃修饰红细胞30min能完全遮蔽Rh抗原,但4℃修饰红细胞120min,仍有部分Rh抗原未被遮盖,显微镜下可见小细胞团块。结论温度、时间对聚乙二醇修饰红细胞遮盖Rh抗原有明显影响,而加入的顺序和间隔时间对抗原修饰无影响。