nm23基因在肝细胞肝癌组织中表达及临床意义

肝细胞肝癌（ＨＣＣ）经手术治疗的病人约５０％死于肝内复发，如何从分子生物学阐明ＨＣＣ肝内转移及复发的机理是当今研究的课题。ｎｍ２３是一与转移有关的基因，有Ｈ１和Ｈ２两个亚型，与转移有关的主要是ｎｍ２３－Ｈ１。本文应用Ｓ－Ｐ免疫组化法检测６１例ＨＣＣｎ...     

增殖细胞核抗原在原发性肝癌中的表达及其临床意义

目的　研究增殖细胞核抗原(PCNA)在原发性肝癌(PHC)中的表达及其与临床病理特征的关系。　方法　收集50例人PHC及其癌旁肝组织用标记链亲和素生物素(LSAB)法进行PCNA免疫组织化学研究。　结果　癌与癌旁肝组织PCNA标记指数(LI)有显著差异,癌的PCNALI平均为331±310,而癌旁为38±53,正常对照肝组织均阴性。癌组织分化越差,PCNALI越高,除Ⅲ与Ⅳ级外,PCNALI在组织学分级之间差异均具有显著意义。高表达PCNALI组(≥33%)在肝癌大小、组织学分级、肝硬化中的表达与低表达PCNALI组(<33%)之间差异均有非常显著意义。　结论　PCNALI是反映组织分化程度和生物学行为的一项重要指标,并对PHC的诊断和预后评估具有一定价值     

人肝癌相关抗原表达与细胞周期的关系

The expression of human hepatoma associated antigen A25 in relation to the different stages of cell cycle is reported as studied by monoclonal antibody and flow cytometry methods. A25 antigen was found to express all the four human hepatoma cell lines we tested. Hepatoma cell line PUMC-H1 expressed the antigen at higher levels than SMMC-7721 and QGY-7703 whereas BEL-7402 expressed at lower levels. Further studies showed that the cell lines PUMC-H1, SMMC-7721 and QGY-7703 were found to be at the similar stages of cell cycle while QGY-7703 was different from these three cell lines by having more cells in S state but fewer cells in G0-G1 stages. In the same cell line, A25 was expressed during all cell cycle stages though at different levels. It was expressed at the lowest level in G0-G1 stages, a slightly higher level in S stage and the highest in G2-M stage. The results in this paper suggest that the expression of A25 is related to the stage of cell cycle in the same cell line but not related to the stage of cell cycle in different cell lines with similar tissue origin.     

人类白细胞抗原(HLA)与恶性肿瘤

 人类白细胞抗原(HLA)是目前研究较为广泛和深入的一种人类主要组织相容性抗原系统。已知它与许多疾病有关,但HLA与恶性肿瘤之间的联系则是近十几年来才于始逐渐加以重视。本文就该领域近几年来所取得的某些研究成果和进展,简述如下: 自1966年Lilly等学者发现小鼠感染致癌病毒后的肿瘤发病率与小鼠体内的H-2组织相容性抗原.     

肺癌细胞的HLA抗原表达与组织类型及免疫修饰

目的 了解肺癌细胞的ＨＬＡ抗原表达及肺癌的组织类型和免疫饰对其的影响。方法 采用免疫组织化学方法和流式细胞术从体探讨肺癌组织的ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达。结果 在５６例病理确诊的肺癌患者癌组织中,腺癌７６％（２３／２９）,鳞癌８％（２／２４）表达为ＨＬＡ－ＤＲ抗原阳性,而３例小细胞癌均为阴性。腺癌的阳必同于鳞癌和小细胞癌（Ｐ〈０．０５）。ＨＡＬ－ＤＲ抗原阳性癌细胞周围可见较多的淋巴细胞浸润,二者呈明显的     

肝细胞肝癌组织中survivin和caspase 3、Ki67的表达及意义

目的研究survivin和caspase 3、Ki67在肝细胞肝癌(HCC)及癌旁肝组织中的表达及其意义.方法利用RNA提取试剂获取新鲜肝癌组织RNA,用RT-PCR方法测定survivin基因mRNA;用免疫组化方法检测肝细胞肝癌及其癌旁组织中caspase 3和Ki67蛋白的表达.结果17例新鲜HCC组织,survivin基因表达阳性13例,阳性率为76.5%,癌旁肝组织和正常肝组织survivin表达全为阴性.13例survivin表达阳性的肝癌组织其caspase 3蛋白表达平均染色强度为0.98±0.35,显著低于4例survivin表达阴性的HCC组织1.36±0.47(P＜0.01),而survivin表达阳性的HCC组织其Ki67表达强度平均评分为2.787±0.71,又显著高于survivin表达阴性的HCC组织1.662±0.38(P＜0.01).88例肝癌组织caspase 3蛋白的阳性表达率明显低于癌旁肝组织(18.5%vs38.6%,P＜0.01),caspase 3蛋白的表达强度与HCC的分化程度相关,分化愈差,caspase 3蛋白表达愈弱(F=8.651,P＜0.01);Ki67在肝癌组织中其平均表达强度评分为2.44±1.12,在癌旁肝组织中为散在灶性表达,Ki67表达强度评分与HCC分化程度有关,分化愈差,Ki67表达强度评分愈高(F=9.121,P＜0.01).结论本文结果提示在HCC发生过程中survivin的表达或许可通过抑制caspase3而抑制细胞凋亡,促使细胞增殖,使HCC呈现无限制的生长及恶性程度不断增高.     

增殖细胞核抗原PCNA、bcl-2在肝细胞癌组织中的表达及意义

 肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)的发生是多种癌基因激活,抑癌基因失活的复杂过程, 应用免疫组织化学方法检测肝细胞癌及正常肝组织中增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和凋亡抑制基因bcl-2的表达及意义。     

凋亡抑制因子Survivin在肝细胞肝癌的表达及临床意义

目的:探讨Survivin蛋白表达与肝细胞肝癌(HCC)临床病理特征相关性及临床意义.方法:应用链霉菌抗生物素-过氧化物酶免疫组织化学法(SP法),检测67例HCC中Survivin、血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达.结果:67例肿瘤组织中35例Survivin呈阳性表达,阳性率为52.2%.肿瘤组织表达阳性率高于癌旁组织(P＜0.05).Survivin的表达与HCC肿瘤镜下门静脉癌栓发生密切相关(P＜0.05).VEGF阳性表达者为41例,阳性率为61.1%.VEGF的表达与HCC肿瘤大小、门静脉癌栓发生以及肿瘤TNM分期密切相关(P＜0.05).应用Kaplan-Meier法制作累积生存曲线并经Long-rank检验,结果显示Survivin表达阳性与阴性组患者术后累积生存率有显著性差异(P=0.0018).结论:HCC中Survivin、VEGF蛋白表达上调,Survivin和VEGF均与HCC门静脉癌栓发生密切相关.HCC患者Survivin表达者预后不良,应密切随访.     

肺癌组织中HLA—DR抗原表达的临床意义

目的探讨HLA-DR抗原在肺癌中的表达及其临床意义.方法采用免疫组化ABC法检测57例原发性肺癌组织中HLA-DR抗原表达情况,并分析了该抗原表达与肺癌临床病理的关系.结果 57例肺癌组织中,腺癌、鳞癌和大细胞未分化癌的阳性表达率分别为72.0%、42.1%和28.6%,6例小细胞未分化癌(SCLC)和20例癌旁组织均未见阳性表达.腺癌的阳性率明显高于鳞癌和大细胞未分化癌(P<0.05).随着肿瘤进展,HLA-DR表达逐渐降低,Ⅰ期和Ⅱ Ⅲ期之间其阳性率差异有显著性(P<0.05),分化程度高的肺癌HLA-DR阳性表达率明显高于中、低分化程度的肺癌(P<0.01).HLA-DR表达与肺癌有无淋巴结转移无明显相关性(P>0.05).结论 HLA-DR异常表达可能是肺癌发生和发展过程中的标志物之一,对判断肺癌患者的生物学行为具有一定的意义.     

神经生长因子在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨神经生长因子(NGF)在原发性肝癌组织中的表达及其临床意义。方法选取2017年4月至2019年4月间上海复旦大学附属中山医院青浦分院收治的50例原发性肝癌患者作为研究组,以及同期门诊体检的50名健康人员作为对照组,两组患者均进行NGF检测,比较两组患者NGF检测水平、检测阳性率,并分析原发性肝癌病理特征与血清NGF相关性。结果研究组NGF水平为(34. 26±3. 62) ng/L,显著高于对照组的(11. 05±0. 21) ng/L,差异有统计学意义(P <0. 05)。研究组NGF检测阳性率为96. 0%,显著高于对照组的8. 0%,差异有统计学意义(P <0. 05)。不同性别和不同年龄原发性肝癌患者的血清NGF水平比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。肿瘤直径≥5cm患者NGF水平显著高于肿瘤直径<5cm者,高侵袭患者NGF水平显著高于低侵袭者,低分化患者NGF水平显著高于高分化者,Ⅲ～Ⅳ期患者NGF水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。结论血清NGF检测可为诊断原发性肝癌患者病情提供一定的科学依据,根据血清NGF检测,可协助临床诊断肿瘤侵袭性、病理分级、临床分期以及肿瘤直径等,值得借鉴。     

乙酰肝素酶mRNA在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的　探讨乙酰肝素酶 (HPSE)mRNA在肝癌组织中的表达及其与肝癌临床病理特征和血管生成的关系。方法　以逆转录 -聚合酶链反应 (RT PCR)检测HPSEmRNA在 5 1例原发性肝细胞癌组织中的表达 ,以Ⅷ因子抗体免疫组织化学染色检测肝癌组织的微血管密度 (MVD)。结果　 5 1例肝癌组织中有 2 5例 (4 9.0 % )HPSEmRNA表达阳性。直径≥ 3cm的肝癌组织中 ,HPSE的表达阳性率(6 3.6 % ,2 1/33)明显高于直径 <3cm的肝癌组织 (2 2 .2 % ,4 /18) ,差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。高侵袭性肝癌组织中 ,HPSE表达阳性率 (70 .0 % ,14 /2 0 )明显高于中等侵袭性 (4 6 .7% ,7/15 )和低侵袭性肝癌组织 (2 5 .0 % ,4 /16 ;P <0 .0 5 )。微血管密度高的肝癌组织中HPSE表达阳性率 (6 2 .5 % ,2 0 /32 )明显高于微血管密度低的肝癌组织 (2 6 .3% ,5 /19;P <0 .0 5 )。结论　HPSEmRNA表达对肝癌的生长、侵袭和血管生成具有重要作用。     

中晚期肝细胞癌预后影响因素分析

目的研究中晚期肝细胞癌(HCC)患者的预后相关因素,建立具有临床实用性的预后模型.方法根据166例HCC患者临床及随访资料,采用Kaplan-Meier和Cox回归模型方法,分析HCC患者的预后影响因素,并建立预后指数(PI)模型.结果单因素分析显示Child-Pugh分级、肝外转移、腹水、治疗、胆红素、血清钠、碱性磷酸酶、γ-谷氨酰转肽酶、肿瘤形态和大小、临床分期和门静脉癌栓与HCC患者生存率有关.多因素分析表明,肿瘤形态(P=0.001)、肿瘤大小(P=0.002)、甲胎蛋白(P=0.014)、血清钠(P=0.011)和Child-Pugh分级(P=0.001)是独立的预后影响因素.预后指数(PI)定义为回归方程:PI=ey,y=0.585(肿瘤形态-2.0542) 0.747(肿瘤大小-1.879) 0.477(AFP-1.4157)-0.570(血清钠-1.6933) 0.786(Child-Pugh分级-1.7590).PI＜1和≥1患者的中位生存期分别为10.2个月和1.8个月(P＜0.01).结论肿瘤形态、肿瘤大小、甲胎蛋白、血清钠和Child-Pugh分级是中晚期HCC患者独立的预后影响因素,根据独立预后因素建立的预后指数模型可帮助临床预测中晚期HCC患者的预后.     

人原发性肝细胞癌核基质蛋白的研究

目的比较正常肝与原发性肝细胞癌（ＨＣＣ）核基质蛋白的异同,观察是否有ＨＣＣ特异性核基质蛋白的存在。方法用双向电泳方法比较了３例正常肝和８例ＨＣＣ核基质蛋白成分。结果正常肝和ＨＣＣ的核基质蛋白组成极为相似,但在ＨＣＣ中发现至少有４个ＨＣＣ的特异性核基质蛋白。其中以分子量为６２０００、等电点为５．３的蛋白最具代表性,它存在于所研究的８例ＨＣＣ中。其余３个ＨＣＣ特异性蛋白亦存在于大多数ＨＣＣ中。３例正常肝组织中未见有这４个ＨＣＣ特异性核基质蛋白。结论ＨＣＣ确实有ＨＣＣ特异性核基质蛋白的存在,它的发现可能会为ＨＣＣ的发生、发展、发病机理的研究提供一个新途径。     

可溶性肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体诱导肝癌细胞凋亡的研究

方法 采用原位杂交方法检测肝癌组织、肝癌细胞株以及正常肝组织中TRAILR的表达。采用不同浓度TRAIL蛋白处理肝癌细胞株Hep2和SMMC7721,应用流式细胞仪和原位末端标记,观察经药物处理前后该细胞株的凋亡发生率。结果 60例肝癌组织及20例正常肝组织均表达死亡受体DR5和DR4,但肝癌组织DR表达量显著强于正常肝组织。54例(90．0％)肝癌组织不表达诱捕受体DcR1,25例(41．7％)肝癌组织不表达DcR2,而20例正常肝组织均表达DcR。肝癌组织中DR的高表达及DcR的低表达,不同于正常肝组织中DR的低表达及DcR的高表达,两者间差异有显著性。两种肝癌细胞株中均可检测到DR5、DR4、DcR2的表达,但DcR1表达缺失。肝癌组织中DR的表达与肿瘤的分化、肿瘤分期有关,低分化的肿瘤DR表达减少(P＜0．01),Ⅲ、Ⅳ期肿瘤DR表达显著低于I、Ⅱ期(P＜0．05)。DR表达与患者的性别、年龄、HBsAg阳性与否、AFP水平、肿瘤大小以及是否转移无关。经TRAIL(100ng/ml)处理24h,肝癌细胞凋亡发生率约10％,而Jurkat细胞凋亡率达70％以上,胆管癌细胞QBC939凋亡发生率约50％。结论 肝细胞肝癌普遍存在TRAILR的表达,并存在受体类型的表达差异。但单一的TRAIL治疗只能有限的诱导肝癌细胞HepG2、SMMC7721发生凋亡,HCC对TRAIL诱导的凋亡存在耐药现象。     

层黏连蛋白与其α6整合素受体对人肝癌细胞表型的调控作用

目的 利用自制的抗整合素α6亚基胞外区的单克隆抗体(IA6ED McAb)研究人肝癌细胞表面α6整合素胞外区对人肝癌细胞系BEL-7402黏附、铺展的影响以及在控制细胞增殖与分化中的作用。方法 以层黏连蛋白(LN)、纤黏连蛋白(FN)、Matrigel分别作为细胞外基质,检测IA6ED McAb对人肝癌细胞系BEL-7402细胞在不同基质上的黏附、铺展的影响;以MTT法检测McAh对BEL-7402细胞存活或增殖的影响;以明胶酶谱法检测McAb对BEL-7402细胞分泌基质金属蛋白酶(MMPs)的影响;以微粒子免疫吸附法检测对AFP分泌的影响。结果 LN可以明显促进BEL-7402细胞AFP及MMPs的分泌;IA6ED McAb的封阻不但可以特异性抑制BEL-7402细胞在LN上的黏附及铺展,而且对BEL-7402细胞以LN为基质的存活或增殖、去分化及异常分化表型有非常显著的抑制作用。结论 人肝癌BEL-7402细胞的增殖、分化表型受LN及整合素α6的调节。人肝癌组织细胞外基质成分中LN及细胞表面整合素α6的过表达,可以增强肝癌细胞的去分化及异常分化表型;而用IA6ED McAb阻断IN与肝癌细胞表面α6β1整合素受体的相互作用,可以逆转其去分化及异常分化表型,从而可能降低癌细胞的转移潜能。     

mdm2基因表达与肝细胞癌侵袭性的关系

目的以ｍｄｍ２基因为指标,研究与肝细胞癌侵袭性有关的分子机理。方法应用ＲＴ－ＰＣＲ方法,研究ｍｄｍ２基因在３４例癌组织和１９例癌周肝组织中的表达及其与肝细胞癌侵袭性的关系。结果ｍｄｍ２基因表达值（ｘ±ｓ）癌组织高于癌周肝组织（５０．１８％±５．２４％对２７．７０％±７．４３％,Ｐ＜０．０５）,侵袭性肝癌高于非侵袭性肝癌（５９．０９％±７．２８％对３７．８７％±６．３７％,Ｐ＜０．０５）,但不同大小肝癌及不同包膜状况肝癌,其ｍｄｍ２基因表达值差异无显著意义。结论ｍｄｍ２基因表达与肝细胞癌的侵袭性有关。     

肝癌介入治疗模式的探讨

目的：探讨肝癌介入治疗的合理模式。方法：回顾性总结1000例以不同方式进行介入治疗的肝癌病例资料,通过分析其病理、生化、影像及生存率等临床因素,比较各种治疗方式的价值及优缺点,结果：经导管节段性肝动脉栓塞化疗（STOCE）与常规肝动脉注射碘油抗癌药混悬剂栓塞化疗（C－TOCE）比较,前者对肿瘤的杀伤作用大,对非癌肝组织的丰较C－TOCE轻,生存率亿于C－TOCE;经皮无水酒精注射术（PEI）联合栓塞治疗可起到杀死残余癌灶的作用,对非癌肝组织未造成明显损害,生存率较单纯栓塞明显提高,对肝癌的各种并发症采取不同方式的介入治疗。能不同程度地改善患者生存质量或提高生存率。结论：肝癌的介入治疗应根据肿瘤大小和类型选择不同的介入治疗方式;对肝癌的各种并发症采取积极的介入治疗有效和必要的。     

阿霉素诱导人肝癌细胞凋亡模型的建立

目的建立肝癌细胞凋亡模型,为进一步研究细胞凋亡分子机理打下基础。方法用抗癌药阿霉素诱导培养的人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞发生凋亡,用四唑盐比色试验（ＭＴＴ法）检测。结果研究发现,０．５μｇ／ｍｌ放线菌素Ｄ可明显抑制２０μｍｏｌ／Ｌ阿霉素对肝癌细胞凋亡的诱导作用。用２０μｍｏｌ／Ｌ阿霉素作用肝癌细胞３小时,换培养液继续培养１２小时后,肝癌细胞ＤＮＡ结构断裂,电泳呈梯状带型。肝癌细胞形态学改变出现膜小泡和凋亡小体形成等凋亡细胞特征。用流式细胞仪测定,出现典型的凋亡峰,凋亡细胞占７２．１％。用２０μｍｏｌ／Ｌ阿霉素诱导肝癌细胞凋亡后,细胞周期Ｇ１期、Ｓ期和Ｇ２期分别为７５．９％,２４．１％和０％,肝癌细胞活细胞率为３５．５％。结论用抗癌药阿霉素成功地诱导人肝癌细胞株ＨＣＣ－９２０４肝癌细胞发生凋亡,该细胞凋亡模型的建立,将有助于进一步探讨肝癌细胞凋亡的分子机制。     

CD133在肝癌组织中的表达及其临床意义

 摘要：目的 研究肝癌组织中CD133蛋白表达及其临床意义。方法 应用免疫组织化学染色方法（ABC法）检测190例原发性肝细胞肝癌患者手术切除肿瘤组织中CD133蛋白的表达,分析其与临床病理特征和预后的关系。结果 42例(22.1%)患者肿瘤组织中CD133蛋白表达阳性。肝癌组织中CD133蛋白表达与肝癌分化程度相关,42例CD133阳性肝癌中,低分化肝癌（Ⅲ+Ⅳ）为34例（17.9%）,高分化肝癌（Ⅰ+Ⅱ）为8例（4.2%）,差异有统计学意义（p<0.001）;同时CD133蛋白表达程度与肝癌镜下血管侵犯相关,42例CD133阳性肝癌中,存在镜下血管侵犯为33例（17.4%）,无镜下血管侵犯为9例（4.7%）,差异有统计学意义（p=0.016）。单因素方差分析结果表明肝癌分化程度、淋巴结转移、肉眼血管侵犯、镜下血管侵犯、肝癌TNM分期以及CD133蛋白表达情况与肝癌切除术后患者无瘤生存有关（p<0.05）。多因素方差分析结果表明CD133蛋白表达情况与镜下血管侵犯是预测肝癌切除术后患者无瘤生存的独立预测指标。生存分析表明CD133蛋白表达阳性组术后无瘤生存期明显短于CD133阴性组。结论 肝癌组织中CD133蛋白的表达与肝癌的侵袭转移及预后密切相关。     

周期蛋白A在原发性肝癌中的表达及意义

目的 探讨周期蛋白A（cyclinA)在原发性肝癌（HCC）中的表达,临床意义及其与乙型肝炎病毒x基因整合之间的关系。方法 分别采用PCR,RT-PCR,Western blot检测HCC及其相邻非肿瘤组织中的cyclinA基因,mRNA和蛋白的表达胃酸用PCR和Southern blot检测HCC标本中HBx基因的整合。结果 35例HCC标本中,cyclinA基因扩增率为2.8%(1/35),mRNA过表达率为45.7%（16/35）,蛋白过表达率为60.0%(21/35)。cyclinA蛋白过表达与患者年龄,肿瘤大小以及HBx基因整合之间存在统计学联系。结论 cyclinA的表达失控在肝细胞癌变的早期发生。可能是乙型肝炎病毒（HBV）影响肝细胞正常细胞周期的重要途径之一。