重组人胰岛素效价测定中生物测定与理化测定的相关性验证

在胰岛素效价测定方法中，以前一直用生物测定法。本文用ＨＰＬＣ法和小鼠血糖生物测定法进行了多批ＤＮＡ重组人胰岛纱效价测定，结果表明两法间有良好的相关性，对高纯组分ｒｈ－Ｉｎｓｊｌｉｎ的效价测定，ＨＰＬＣ法可代替生物测定法。     

紫外分光光度法测定麦迪霉素及其胶囊剂的含量

对麦迪霉素及其胶囊、片剂的含量测定，国内外均采用微生物法，方法繁锁费时，本文应用紫外分光光度法测定麦迪霉素及胶囊的含量测定，方法快速简便，并与中国药典法对照，结果满意。1．仪器与药品：日本岛津UV－2201分光光度计、751－G分光光度计（上海分析仪器厂）波长均经校正，麦迪霉素（日本）批号MEB5704，效价890u／mg，无水乙醇（AR），麦迪霉素胶囊，建阳市制药厂生产。2．标准曲线的绘制：精密称取麦迪霉素2．2472g，加无水乙醇稀释至100ml，振摇至溶，滤过、精密吸取续滤液1ml，加无水乙醇稀释至100ml，分别吸取3ml，5ml，7m…     

发酵液中麦迪霉素效价的化学测定

在测定发酵液中麦迪霉素效价时,由于发酵液中存在可溶性蛋白质,经pH调节、过滤,蛋白质未能全部除去。进行溶媒萃取时产生乳化现象,致使效价的测定结果不准确,误差在8～10％。 一、改进试验 发酵液中加入硫酸铝或三氯醋酸,结果前者效果好,化学测定结果与生物测定结果 接近。麦迪霉素在酸性条件下由溶媒相转入水相时,我们试用了pH3.0,浓度为0.IM的NaH_2PO_4溶液和pH3盐酸水溶液,结果后者化学效价与生物效价接近,误差小。 二、测定方法 标准曲线的制备:精确称取标准品20～30mg,用0.35％K_2CO_3溶液稀释成1000μ/ml,再将此液用0.35％ K_2CO_3溶液稀释成     

麦迪霉素效价测定方法的探讨

目的：探讨麦迪霉素效价的测定方法,方法：采用中国药典2000年版附录ⅥA操作方法,比较不同培养基对麦迪霉素抑菌圈清晰度的影响。结果：选用Ⅱ号培养基浓度5－40u、ml^－1时相关系数为0．9979回收率为99．5％,3批样品含量测定结果均符合规定,可信限率均低于5％,结论：确定了采用PH7．8－8．0Ⅱ号培养基,PH7．8－8．0磷酸盐缓冲液、枯草芽孢杆菌为鉴定菌的麦迪霉素微生物效价测定法、测定麦迪霉素胶囊的含量。     

乙酰麦迪霉素生物效价测定

参照日抗基1998版中关于乙酰麦迪霉素效价的测定方法 ,结合中国药典2000版二部附录中抗生素微生物检定法来测定乙酰麦迪霉素的效价 ,并对其方法进行验证 ,以保证供试品的含量(效价)准确、可靠 ,为生产的正常进行打下坚实的基础。1材料与方法1 1材料 :参比标准品 :为韩国产乙酰麦迪霉素工作对照品。样品为 :重庆大新药业股份有限公司乙酰麦迪霉素成品010603批。1 2方法 :按中国药典2000版二部附录XIV微生物效价测定方法进行 ,通过线关系和精密度(重现性)来验证乙酰麦迪霉素效价测定方法的有效性。2线性关系的测定将标准品及乙酰麦迪霉素成…     

比浊法测定麦迪霉素效价及其影响因素分析

目的:建立微生物比浊法测定麦迪霉素效价的方法.方法:以金黄色葡萄球菌为试验菌,菌液浓度为1.0％,培养测定时间为3-4小时.结果:麦迪霉素浓度在1.0～3.0U/mL的范围内,浓度的对数与吸光度成良好的线性关系(r =0.9985),平均回收率为100.5％,RSD为0.12％.结论:微生物比浊法测定麦迪霉素的效价简便,快速.     

妥布霉素发酵过程中化学效价的测定

<正> 发酵单位的检测,是妥布霉素发酵过程中的重要分析项目。但如果用常规的抗生素生物效价测定法,需耗时20多个小时,严重影响了它对发酵过程的指导意义。妥布霉素属氨基糖苷类抗生素,在其分子结构中含有不对称碳原子,因此具有旋光性,又因为其旋光度与其浓度成正比,所以本法试图利用树脂交换原理和旋光法来测定妥布霉素的效价。本人经过多次试验,证明本法可行,并使测定时间缩短到1小时左右。大大提高了效价的测定结果对生产的指导意义。     

HPLC法和生物效价测定法在缩宫素注射剂质量控制中的对照研究

【】目的：采用HPLC法对缩宫素注射剂进行质量控制,同时与传统的生物效价测定法进行比照,观察两种方法的优劣。方法：随机选取8个企业生产的100个批次的缩宫素注射剂,分别采用HPLC和生物效价对样本进行测定,测定结果进行比较,并进一步观察样品的长期稳定性。结果：两种方法检测的缩宫素含量除两家药企外(P<0.05),其他企业生产的缩宫素差异无统计学意义(P>0.05)；8家药企的缩宫素注射剂含量在55.9%～126.1%之间,平均98.5%,其中有三个企业生产的缩宫素注射剂含量偏低；缩宫素注射剂储存2年后其效价显著降低。结论：采用HPLC法对缩宫素注射剂测定,操作相对简便,灵敏度和准确度高,有效避免了生物效价测定法因动物个体差异造成的误差,同时也能将人为测定的误差控制在较小的范围内。另缩宫素注射剂最佳存贮期为2年,时间过长会导致药剂中部分有效成分降解。     

用猪血浆代替兔全血测定肝素效价方法比较

<正> 肝素钠效价测定的方法很多,主要分二类;一类为生物测定法,如兔全血法、硫酸钠兔全血法、羊血浆法等。一类为化学测定法,如天青Ⅰ染色法、紫外分光光度法、纸层析法、琼脂糖电泳法等,现各国均以生物测定法为法定方法。我国药典收载的方法为兔全血法。该法     

麦迪霉素效价测定方法的改进

目的建立麦迪霉素效价测定培养基、检定菌的改进方法。方法在原培养基中加入一定比例的葡萄糖;以短小芽孢杆菌为检定菌进行测定。结果线性范围为9.22～43.40u.mL-1,r=0.9994,与《国家药品标准》2002年版方法比较,无显著性差异(Р>0.05)。结论方法简便,准确,用于麦迪霉素效价测定取得良好结果。     

差示分光光度法测定氯霉素滴眼液含量

氯霉素滴眼液为医院常用制剂,其处方为氯霉素0.25g、硼酸1.5g、硼砂0.3g、羟苯乙酯0.03g、水加至100ml.氯霉素含量测定有生物效价测定法、还原-亚硝酸钠法、紫外分光光度法等.为排除羟苯乙酯的干扰,本文采用差示分光光度法测定氯霉素的含量.     

高效液相色谱法和生物效价测定法在缩宫素注射剂质量控制中的对照研究

目的 采用高效液相色谱法(HPLC)对缩宫素注射剂进行质量控制,同时与传统的生物效价测定法进行比照,观察两种方法的优劣。方法 选取8个企业生产的100个批次的缩宫素注射剂,分别采用HPLC法和生物效价法对样本进行测定,并将结果进行比较,并进一步观察样品的长期稳定性。结果 两种方法检测的缩宫素含量除两家药企外(P=0.027、P=0.011),其他企业生产的缩宫素含量差异无统计学意义(P=0.556、0.637、0.614、0.559、0.315、0.429);8家药企的缩宫素注射剂含量在55.9%～126.1%之间,平均98.5%,其中有三个企业生产的缩宫素注射剂含量相对偏低;缩宫素注射剂储存2年后其效价显著降低,差异有统计学意义(P=0.025)。结论 采用HPLC法对缩宫素注射剂测定,操作相对简便,灵敏度和准确度高,有效避免了生物效价测定法因动物个体差异造成的误差,同时也能将人为测定的误差控制在较小的范围内。另缩宫素注射剂最佳存贮期为2年,时间过长会导致药剂中部分有效成分降解。     

螺旋霉素发酵液效价的快速测定

螺旋霉素(Spiramycin)结构具有旋光性外,还具有紫外特征吸收,其效价(含量)测定有紫外分光光度法、旋光法、硫酸显色法以及HPLC法等,但方法一般只适用于成品的含量测定或组份分析,不适于发酵液效价的测定。顾觉奋等报道大环内酯类碳霉氨基糖的埃尔森-摩根法(Elson—Morsan Method)快速化学测定麦迪霉素效价,其中需进行化学显色反应。本文提出的方法是根据螺旋霉素紫外特征吸收而设计的。     

麦迪霉素与乙酰麦迪霉素的活性测定比较

目的建立浊度法测定麦迪霉素及乙酰麦迪霉素活性的方法,并对其进行评价。方法以金黄色葡萄球菌为试验菌,加菌量为1.2%～2.5%,37℃±0.5℃培养3～4h左右测定。结果麦迪霉素抗生素线性浓度为1.0～3.0IU·mL^-1,乙酰麦迪霉素抗生素线性浓度为0.3～3.0IU·mL^-1。结论本方法灵敏,快速,影响因素较少,可作为测定麦迪霉素和乙酰麦迪霉素效价的方法。     

微生物比浊法测定麦迪霉素胶囊的效价

目的:建立麦迪霉素胶囊效价的微生物比浊法.方法:分别采用微生物比浊法和管碟法对麦迪霉素胶囊的含量进行测定和比较研究.结果:麦迪霉素胶囊效价测定的线性范围为1.0～3.3 U/ml;r=0.999 5,平均回收率为98.76%,RSD=1.52%(n=9). 结论:微生物比浊法具有简便、精确、快速的特点,可以应用于该产品的质量控制.     

麦迪霉素与乙酰麦迪霉素的活性测定比较

目的 建立浊度法测定麦迪霉素及乙酰麦迪霉素活性的方法,并对其进行评价。方法 以金黄色葡萄球菌为试验菌,加菌量为1.2%~2.5%,37℃±0.5℃培养3~4 h左右测定。结果 麦迪霉素抗生素线性浓度为1.0~3.0 IU·mL^-1,乙酰麦迪霉素抗生素线性浓度为0.3~3.0 IU·mL^-1。结论 本方法灵敏,快速,影响因素较少,可作为测定麦迪霉素和乙酰麦迪霉素效价的方法。     

微生物浊度法与管碟法测定乙酰麦迪霉素制剂的效价

目的:建立浊度法测定乙酰麦迪霉素制剂(片剂与干混悬剂)效价的方法,并与管碟法进行比较。方法:浊度法以金黄色葡萄球菌为试验菌,加菌量为1.2%,(37±0.5)℃培养3～4h后于抗生素比浊法测量仪530nm波长处测定吸光度,与管碟法比较片剂与干混悬剂样品效价结果。结果:浊度法乙酰麦迪霉素检测浓度线性范围为0.3～3.0u.mL-(1r=0.9983);片剂和干混悬剂样品的平均回收率分别为101.99%(RSD=1.94%,n=9)、101.68%(RSD=1.68%,n=9);2种测定方法效价比较无显著性差异(t=1.473<4.303)。结论:与管碟法比较,本文建立的浊度法准确、可靠、快捷,检测限更低,影响因素较少,与管碟法均可作为测定乙酰麦迪霉素制剂效价的方法。     

快速测定麦迪霉素效价的微生物比色法

本文介绍测定麦迪霉素生物效价的一种快速微生物方法。采用腊样芽孢杆菌756作检定菌,在葡萄糖肉汤培养基内加入试菌及抗生素的同时,加入含0.1％三苯基四氮唑(TTC)磷酸饱和溶液,于37℃水浴内培养2～3小时,根据细菌生长产生的琥珀酸脱氢酶使TTC还原呈红色的程度换算成生物效价。方法快速、敏感,操作简便、结果可靠。     

双波长法测定氯霉素眼药水

氯霉素眼药水为眼科常用制剂。由于其在临床上的广泛应用且制备方便,各医院药房常自行配制。目前测定含量的方法有效价测定法,重氮滴定法和紫外分光法等。效价测定法手续麻烦,重氮法也存在程序多;终点不易判断的缺点,而紫外分光法却由于处方中防腐剂尼泊金的存在而产     

血凝仪-APTT法测定肝素的效价

目的:建立一种基于血液凝固分析仪测定活化部分凝血活酶时间(APTT)的肝素生物测定法(简称血凝仪-APTT法)。方法:将高、中、低浓度的肝素钠标准品和供试品分别与血浆混和,用血液凝固分析仪测定各含药血浆的活化部分凝血活酶时间(APTT),结果进行对数转换后,按量反应平行线3.3法计算供试品的效价。结果:对数凝血时间与肝素钠的浓度在0.7～3 IU.mL-1范围内线性关系良好(r=0.9965);当供试品的测得效价与估计效价的比值在80%～120%范围内时,血凝仪-APTT法的测定结果准确可靠,重复性(RSD=1.45%,n=6)及中间精密度(RSD=1.61%,n=6)良好。以兔全血法、羊血浆法和血凝仪-APTT法分别测定同一批肝素钠供试品的效价(IU.mg-1,n=3),结果依次为207.56±6.87,205.59±3.62,202.79±2.08,无显著性差异(P>0.05);兔全血法和血凝仪-APTT法的可信限率(%,n=3)分别为8.51±0.77和2.63±0.21,具有显著性差异(P<0.01)。使用不同仪器测定样品效价的结果基本一致。结论:血凝仪-APTT法与兔全血法和羊血浆法的效价测定结果一致,可信限率比兔全血法更低。该法操作简便,客观准确,重复性好,精密度高,适用于不同仪器,可以用于肝素钠生物效价的测定。