手性固定相HPLC法拆分苏氨酸和赖氨酸对映体

目的建立了柱前衍生结合手性固定相HPLC法拆分了苏氨酸和赖氨酸2种氨基酸对映体。方法利用4-氯-7-硝基-2,1,3-苯并噁二唑(NBD-Cl)柱前衍生,采用Sumichiral OA-2500S色谱柱,以甲醇-乙腈(60∶40,含5mmol.L-1柠檬酸)为流动相,检测波长为470nm。结果应用该法检查L-氨基酸原料药中的D-型异构体,D-苏氨酸和D-赖氨酸在2.0～16.0μg.mL-1质量浓度范围内线性关系良好,回收率均为101.0%,RSD分别为1.7%和0.37%。结论在最佳色谱条件下,2种氨基酸对映体均达到了基线分离。建立的对映体杂质检查方法灵敏度高,重复性好。     

HPLC法测定L-肌肽中的游离氨基酸的含量

目的采用柱前衍生高效液相色谱法对L-肌肽原料药中的游离氨基酸进行测定。方法采用异硫氰酸苯酯(phenyl isothiocyanate,PITC)柱前衍生高效液相色谱法,使L-肌肽中游离的β-丙氨酸和L-组氨酸衍生物达到完全分离,并测定其含量。色谱柱为DiamonsilTM C18(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠溶液(体积比为13∶87),流速为1.0 mL.min-1,检测波长为254 nm,柱温为35℃。结果HPLC法测定β-丙氨酸和L-组氨酸的线性范围分别为2.01～20.10 mg.L-1(r=0.999 7)和2.00～20.00 mg.L-1(r=0.999 3);平均回收率分别为110.6%和98.2%。结论HPLC法无需专业的氨基酸分析仪,可用于L-肌肽中游离氨基酸的检查。     

外消旋达卢生坦的HPLC法手性拆分及含量测定

建立了HPLC法拆分外消旋达卢生坦对映体,并进行了含量测定.采用ES-OVM柱,以30 mmol/L磷酸盐缓冲液(pH 3-35)-乙腈(60:40)为流动相,检测波长248 nm.达卢生坦及其R-型异构体在0.01～0.10 mg/ml浓度范围内线性关系良好.平均回收率为99.6%和99.5%,RSD为0.75%和0.82%.     

HPLC测定左氧氟沙星原料中的右旋异构体

目的 采用HPLC法测定左氧氟沙星原料中的右氧氟沙星.方法 色谱柱为C18柱(200 mm×4.6 mm,5μm),流动相为L-亮氨酸硫酸铜溶液-甲醇(85:15),检测波长为330 nm,柱温40℃,流速1.0 ml·min-1.结果 检测3批原料,按外标法计算右氧氟沙星的含量分别为0.05%、0.06%、0.05%.结论 所建方法能够检测出左氧氟沙星原料中的右氧氟沙星,可用于左氧氟沙星原料中异构体的检查.     

三七中十八种游离氨基酸的柱前衍生化-HPLC法测定

建立了柱前衍生化-HPLC法同时测定三七中的18种游离氨基酸.以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用C18色谱柱,以乙腈-0.05 mol/L乙酸钠缓冲液为流动相,梯度洗脱,检测波长254 nm.结果显示三七根中的游离氨基酸以精氨酸、丙氨酸和脯氨酸为主,约占18种游离氨基酸总量的80%.18种氨基酸的平均回收率为96.5%～103.4%,RSD均小于3%.     

川芎内生菌Peniophora incarnata代谢产物研究

目的：对川芎内生菌Peniophora incarnata代谢产物的化学成分进行研究。方法：用糙米进行固体发酵获得P.incarnata菌的代谢产物,对其乙酸乙酯部位采用大孔树脂柱、中压C18柱、半制备液相等方法分离得到单体化合物,再根据核磁共振结果鉴定得到这些化合物的结构。结果：分离得到22个化合物,分别为吡咯并哌嗪-2, 5-二酮（1）、环-(脯氨酸-苏氨酸)（2）、环-(L-丙氨酸-L-脯氨酸)（3）、环-(D-丙氨酸-L-脯氨酸)（4）、环-(L-酪氨酸-L-脯氨酸)（5）、环-(苯丙氨酸-脯氨酸)（6）、环-(苯丙氨酸-缬氨酸)（7）、环-(亮氨酸-亮氨酸)（8）、环-(L-异亮氨酸-L-亮氨酸)（9）、阿魏酸甲酯（10）、反-对香豆酸甲酯（11）、(1H-indol-3-ly)oxoacetamide(12)、1H-indole-3-carboxaldehyde(13)、indole-3-acetic acid methyl ester(14)、1H-indole 3-carboxylic acid methyl ester(15)、对羟基苯甲醛（16）、对羟基苯甲酸甲酯（...     

HPLC法测定叶酸原料中光学异构体的含量

目的 建立高效液相色谱(HPLC)法测定叶酸原料药中光学异构体(D-叶酸)的检测方法.方法 采用QN-AX手性色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),甲醇-乙腈-乙酸-三乙胺(50:50:2:3)为流动相,流速0.6 mL·min-1,检测波长280 nm,柱温35℃.结果 D-叶酸与叶酸之间的分离度良好,D-叶...     

降糖新药三肽Diapin的化学法合成

目的:化学法合成三肽Diapin(甘氨酰-甘氨酰-亮氨酸,glycyl-glycyl-leucine,GGL),同时适用于通式(glycyl) n-leucine的多肽,包括其L-和D-构型。固相法和液相法要进行基团的保护和脱保护,然后裂解,再进行液相HPLC制备,成本高,操作繁琐。方法:以亮氨酸和氯乙酰氯为起始原料进行酰化反应,生成甘氨酰-亮氨酸氯代二肽,然后用氨水氨解得到甘氨酰-亮氨酸二肽;二肽再和氯乙酰氯进行酰化反应生成甘氨酰-甘氨酰-亮氨酸氯代三肽,然后再用乌洛托品氨解得到甘氨酰-甘氨酰-亮氨酸三肽。结果:总收率为56%(以亮氨酸计),HPLC纯度为99. 8%。结论:用化学法合成三肽Diapin或(glycyl) n-leucine的多肽,包括其L-和D-构型,比固相和液相法步骤简单,原料易得,收率高,易于工业化生产。产物经元素分析、¹H-NMR、¹³C-NMR、MS结构确证。     

柱前衍生法同时测定复方牛磺酸滴眼液中的三种成分

摘要 目的：建立同时测定复方牛磺酸滴眼液中三种功效成分牛磺酸、氨基己酸、门冬氨酸的含量的方法。方法：以2,4-二硝基氟苯为衍生化试剂，采用柱前衍生-反相高效液相色谱法测定。色谱柱为C18柱，以0.05mol·L-1乙酸铵溶液-乙腈(850:150)为流动相A，以乙腈-水(500:500)为流动相B，梯度洗脱，柱温40℃；流速为1.0mL/min，检测波长360nm。 结果：复方牛磺酸滴眼液中三种功效成分牛磺酸、氨基己酸、门冬氨酸可有效分离，门冬氨酸在0.0003～0.3 mg·mL-1范围内线性良好；牛氨酸在0.002～2.03 mg·mL-1范围内线性良好；氨基己酸在0.002～2.0 mg·mL-1范围内线性良好。门冬氨酸、牛磺酸、氨基己平均回收率分别为100.8%（RSD=2.3%,n=9）、97.8%（RSD=1.6%,n=9）、99.3%（RSD=1.9%,n=9）。测定样品5批，检测结果分别为门冬氨酸102.8%、103.1%、102.1%、102.4%、103.4%，牛磺酸102.1%、99.8%、102.6%、104.3%、103.1%，氨基己酸98.8%、99.4%、98.9%、104.2%、105.5%。 结论：所建方法简便、重复性好，可用于复方牛磺酸滴眼液中三种功效成分牛磺酸、氨基己酸、门冬氨酸的含量测定。     

作为药物释放系统的前体药物4-咪唑酮可能成为肽类α-氨基酰胺部位的生物可逆性衍生物

肽类化合物在胃肠道易被酶破坏,吸收也很差;注射给药时,肽类一旦进入血流,可因血浆与组织肽酶而引起水解代谢而导致半衰期缩短。故注射给药存在问题。将生物活性肽制成前体药物是解决药物释放及输送的一种有效方法。作者发现,4-咪唑酮在几乎所有肽的α-氨基酰胺结构部位是一种有效的前体药物。本文通过丙酮和不同的二肽类(丙氨酸-甘氨酸,丙氨酸-丙氨酸,苯丙氨酸-亮氨酸,亮氨酸-甘氨酸,门冬氨酸-苯丙氯酸甲基酯)缩合的5种4-咪唑酮水解动力学的研究,与对苯丙氨酸-亮氨酸衍生物及其母体二肽