制首乌总多糖对贫血小鼠造血祖细胞增殖的影响

目的观察制首乌总多糖(PPS)对放化疗所致骨髓抑制贫血小鼠造血祖细胞增殖的影响。方法建立骨髓抑制贫血小鼠模型,采用造血祖细胞培养技术,观察PPS体内ip给药和细胞培养直接用药对造血祖细胞增殖和骨髓有核细胞(BMC)数目的影响。结果体内用药能显著增加BMC数目,提高BFU-E、CFU-E和CFU-Meg集落数产率(P<0.01),能增加CFU-GM集落数产率(P<0.05);在一定浓度下,体外直接用药,能增加CFU-Meg集落数产率(P<0.01)。结论PPS能通过间接作用促进红系和粒系祖细胞的增殖,能通过间接和直接作用刺激巨核系祖细胞的增殖。     

制首乌总多糖对骨髓抑制贫血小鼠脾脏促红细胞生成素受体和转录因子GATA- mRNA表达的影响

目的观察制首乌总多糖(PPS)对放、化疗所致骨髓抑制贫血小鼠脾脏促红细胞生成素受体(EpoR)及转录因子GATA- 21mRNA表达的影响, 探讨PPS补血作用的分子机制。方法建立骨髓抑制贫血小鼠模型, 提取PPS, 经ip给药, 观察其对骨髓抑制贫血小鼠外周血及脾脏EpoR和GATA-21mRNA表达的影响。结果PPS能促进骨髓抑制贫血小鼠外周血象恢复, 并明显上调脾脏EpoR和GATA-21mRNA的表达。结论PPS能通过促进EpoR和GATA-21mRNA的表达, 从而促进骨髓抑制贫血小鼠造血功能的恢复。     

制首乌总多糖对骨髓抑制贫血小鼠脾脏促红细胞生成素受体和转录因子 GATA-1 mRNA 表达的影响

目的观察制首乌总多糖(PPS)对放、化疗所致骨髓抑制贫血小鼠脾脏促红细胞生成素受体(EpoR)及转录因子GATA-1 mRNA表达的影响,探讨PPS补血作用的分子机制。方法建立骨髓抑制贫血小鼠模型,提取PPS,经ip给药,观察其对骨髓抑制贫血小鼠外周血及脾脏EpoR和GATA-1 mRNA表达的影响。结果PPS能促进骨髓抑制贫血小鼠外周血象恢复,并明显上调脾脏EpoR和GATA-1 mRNA的表达。结论PPS能通过促进EpoR和GATA-1 mRNA的表达,从而促进骨髓抑制贫血小鼠造血功能的恢复。     

熟地多糖对小鼠免疫功能的影响

目的 :观察熟地多糖 (RGP)对小鼠免疫功能的影响。方法 :小鼠连续给药 7天 ,取全血比色法检测血清溶血素水平 ;小鼠连续给药 10天 ,分别用DNCB致敏、攻击 ,尾静脉注射伊文思蓝溶液 ,取蓝染皮肤检测迟发性超敏反应 ;小鼠连续给药 8天 ,尾静脉注射印度墨汁后 ,立即取血读取OD值。结果 :熟地多糖 1 73g/ (kg·d) ,3 4 6 g/ (kg·d)灌服小鼠 ,可促进小鼠血清循环抗体溶血素的生成 (P <0 0 5 ) ,明显增强小鼠DNCB诱导的DTH反应 (P <0 0 5 ) ,提高小鼠巨噬细胞吞噬指数 (P <0 0 5 ,P <0 0 1) ,而对于吞噬系数无明显影响。结论 :熟地多糖具有提高小鼠免疫功能的作用。     

小鼠白细胞及骨髓有核细胞减少模型的研究

目的:建立白细胞及骨髓有核细胞减少的小鼠模型.方法:用直线加速器不同剂量照射小鼠.结果:小鼠白细胞及骨髓有核细胞明显减少.结论:此方法可建立比较理想的白细胞、骨髓有核细胞减少模型.     

肉苁蓉多糖对骨髓抑制性贫血小鼠造血调控的实验研究

目的：观察肉苁蓉多糖对骨髓抑制贫血小鼠造血功能的影响,探讨其造血调控作用机制。方法：采用Co^60照射和注射环磷酰胺复合制备贫血小鼠模型。应用流式细胞术（FCM）检测肉苁蓉多糖对骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞周期的影响,采用造血祖细胞培养术观察三系造血祖细胞集落数。结果：低剂量和高剂量肉苁蓉多糖能明显促进骨髓G0/G1期细胞向S期细胞以及S期细胞向G2/M期细胞的转化,G2/M期细胞比例明显升高,增殖指数（PI）也明显升高。给药组CFU-E,BFU-E,CFU-MeG与贫血对照组集落数有显著差异。结论：肉苁蓉多糖可能通过促使骨髓抑制贫血小鼠骨髓细胞细胞周期的转化,促进骨髓造血功能的恢复,并促进红系巨核系造血。     

当归多糖干预调节再生障碍性贫血小鼠骨髓单个核细胞线粒体自噬稳态的实验研究

目的 探讨当归多糖对再生障碍性贫血(AA)小鼠骨髓单个核细胞(BMMNCs)线粒体自噬造成的影响。方法 选取50只小鼠,按照体质量利用均衡随机法将小鼠随机分为正常组、模型组、当归多糖低剂量组、当归多糖中剂量组、当归多糖高剂量组,每组10只。除正常组外,其余组均采用化学方法制备AA小鼠模型。证实成模后,正常组、模型组小鼠每天给予0.2 mL生理盐水灌胃1次;当归多糖低、中、高剂量组分别每天给予当归多糖40 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg灌胃1次。各组均连续灌胃14 d,观察各组小鼠外周血白细胞(WBC)、血红蛋白(Hb)、血小板(Plt)、BMMNCs计数和BMMNCs线粒体膜电位及骨髓细胞线粒体自噬情况。结果 模型组小鼠外周血WBC、Hb、Plt、BMMNCs计数和BMMNCs线粒体膜电位均明显低于正常组(P均0.05);当归多糖各剂量组各指标均明显高于模型组(P均0.05),且高剂量组明显高于中、低剂量组(P均0.05),中剂量组明显高于低剂量组(P均0.05)。电镜下观察,模型组小鼠骨髓细胞内线粒体损伤,存在过度自噬现象;而当归多糖各剂量组小鼠骨髓细胞内线粒体损伤明显较模型组减轻,自噬泡数量较模型组明显减少。结论 当归多糖能够促使AA小鼠骨髓造血功能的恢复,线粒体自噬的改变可能是其机制之一。     

琼玉膏减轻实验肺癌小鼠化疗导致抑制骨髓有核细胞分裂的研究

目的:观测琼玉膏对化疗实验性肺癌小鼠导致的骨髓抑制的保护作用.方法:使用肿瘤癌株接种的方法制造肺癌模型,分别观测空白对照组(生理盐水)、化疗组(顺氨氯铂)及联合组(顺氨氯铂加琼玉膏)小鼠的骨髓有核细胞计数及其细胞周期变化.结果:化疗组骨髓有核细胞计数及S期细胞明显低于联合组与对照组(P＜0.01);而联合组与对照组相比,对照组又高于联合组(P＜0.05).化疗组C11期细胞明显高于联合组与对照组(P＜0.01),而联合组与对照组相比,对照组又低于联合组(P＜0.05).各组间C12 M期细胞没有显著差异.结论:琼玉膏对实验性肺癌小鼠化疗所致骨髓抑制可能有明显的减轻作用.     

首乌熟地饮对MPTP致帕金森病小鼠模型多巴胺能神经元的影响

为了研究首乌熟地饮对1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶(1-methy-4-phenyl-1,2,3,6-te-trahydropyridine,MPTP)诱致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元的影响及其可能机制。该实验将小鼠分为4组:正常组、首乌熟地饮组(对照组)、MPTP组(模型组)、MPTP+首乌熟地饮组(干预组),分别给予首乌熟地饮(对照组和干预组)和去离子水(正常组和模型组)灌胃30d;随后模型组和干预组腹腔注射MPTP,正常组和对照组腹腔注射等量生理盐水,7 d后应用免疫组化检测各组黑质区酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元细胞数目,聚合酶链式反应(PCR)检测各组TH m RNA及谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)m RNA的表达量。结果显示,腹腔注射MPTP的模型组和干预组的TH阳性神经元数和TH m RNA表达量均明显少于正常组和对照组(P0.05);但模型组与干预组之间黑质的TH阳性神经元数和TH m RNA表达量无明显差异。与模型组相比,首乌熟地饮使干预组黑质区4种亚型谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)的m RNA表达量均有不同程度增加,但差异并无统计学意义。这表明了首乌熟地饮对MPTP诱致帕金森病模型小鼠多巴胺能神经元凋亡不具有预防保护作用,但其或许通过增加GPX表达从而增强小鼠的抗氧化能力。     

湖北地黄多糖超声波提取工艺条件及含量测定研究

目的建立超声波提取湖北地黄多糖的最佳工艺和测定湖北地黄各部分中多糖的含量。方法对超声波提取湖北地黄多糖的条件进行了研究并用蒽酮-硫酸法测定了湖北地黄各部分的多糖含量。结果由正交实验得出超声波提取的最佳条件为:湖北地黄与水的质量比为1∶40,提取温度为40℃,提取时间为30 m in。采用蒽酮-硫酸法于624 nm比色,得湖北地黄中各部分多糖含量为:根、茎、叶分别为15.74%,8.36%,4.21%。结论湖北地黄的多糖依据不同提取方法、不同部位含量有较大差异。     

黄芪诱导贫血小鼠骨髓基质细胞产生SCF的研究

研究黄芪注射液(AMI)对贫血小鼠骨髓基质细胞产生干细胞因子(stem cell factor,SCF)的影响.用大剂量环磷酰胺制备贫血小鼠模型,在造模后第4天腹腔注射AMIqd×6.于给AMI后第8天进行骨髓基质细胞培养,检测各实验组骨髓成纤维细胞集落(CFU-F)数并分别收集培养上清液,透析浓缩为冻干粉,经IMDM培养液稀释,作为条件培养液,分别加入高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)培养体系中,栓测各实验组骨髓基质细胞条件培养液中义F的水平,结果给药物组CFU-F数以及骨髓基质细胞条件培养液中SCF水平均明显升高.提示AMI可以促进贫血小鼠骨髓CFU-F增殖,升高贫血小鼠骨髓基质细胞分泌SCF的水平.     

地黄低聚糖对小鼠免疫和造血功能的作用

采用免疫学和实验血液学方法，研究和探讨了地黄低聚糖对小鼠免疫功能和造血功能的作用。结果表明：地黄低聚糖４０ｍｇ／ｋｇ可增强正常小鼠的ＰＦＣ反应，而２０、４０ｍｇ／ｋｇ，可提高Ｃｙ抑制小鼠和荷瘤小鼠的ＰＦＣ数及增强荷瘤小鼠的淋巴细胞增殖反应。同时地黄低聚糖１０～４０ｍｇ／ｋｇ可促进骨髓造血祖细胞的增殖与分化。结果提示地黄低聚糖可明显增强免疫抑制小鼠的体液免疫和细胞免疫反应，同时可促进小鼠骨髓造血祖细胞的增殖分化。     

维肝力对骨髓抑制小鼠骨髓及血清FL分泌水平的影响

目的：研究维肝力对骨髓抑制贫血小鼠骨髓及血清Flt 3配体(FL)分泌水平的影响，探讨维肝力在骨髓造血调控方面的作用。方法：制作骨髓抑制贫血小鼠模型，小鼠随机分为正常组、骨髓抑制贫血模型组、维肝力组(高、中、低剂量100，50，25 g·L^-1)；观察维肝力对骨髓抑制贫血小鼠外周血象、骨髓有核细胞(BMC)数的影响；通过酶联免疫吸附技术(ELISA)检测了骨髓抑制贫血小鼠骨髓及血清Flt3配体(Flt3 ligand, FL)的水平。结果：高剂量维肝力对粒细胞系、红细胞系、血红蛋白(Hb)及BMC均有显著的提高作用,中、低剂量维肝力对血小板促进作用更明显;维肝力组骨髓及血清FL水平均低于贫血组，其中高、中剂量组FL水平下降最为显著。结论：维肝力对放、化疗所引起的小鼠骨髓抑制能起到一定的缓解作用。     

芍药苷对人骨髓基质细胞HFCL蛋白质表达的作用

目的检测芍药苷对人骨髓成纤维样基质细胞系HFCL增殖及蛋白质表达的影响,探讨芍药苷补血作用的分子机制。方法采用流式细胞术和蛋白质组学方法测定芍药苷对HFCL细胞周期及蛋白质表达的影响。结果芍药苷能促进HFCL由G0/G1期进入S期,提高增殖指数,使HFCL的9种蛋白质表达上调,5种下调。上调的蛋白质有Ras相关核蛋白、核纤层蛋白A/C、异柠檬酸脱氢酶、磷酸丙糖异构酶、ATP合酶、核蛋白体蛋白质P2和CCT;下调的蛋白质有人类cc趋化因子和Bax。结论芍药苷能促进HFCL增殖,作用于HFCL多个靶点,促进细胞结构蛋白质的合成和蛋白质分子伴侣的表达,促进HFCL的能量代谢,抑制HFCL凋亡,间接发挥补血作用。     

当归多糖与阿糖胞苷联合注射对人白血病模型小鼠骨髓单核细胞的影响

目的 探讨当归多糖(ASP)与阿糖胞苷(Ara-C)联合注射对移植性人白血病模型小鼠骨髓单个核细胞(BMMCs)的影响,并探讨其调控白血病细胞衰老的可能机制.方法 每只小鼠尾静脉移植2×10⁷个K562细胞,建立移植性人白血病NOD/SCID小鼠模型,模型建立后随机分为模型组、ASP组、Ara-C组和ASP+Ara-C组,移植K562细胞第31天开始分别ip ASP(200 mg/kg)、Ara-C(2.5 mg/kg)和ASP(200 mg/kg)+Ara-C(2.5 mg/kg)治疗,共14 d,模型组注射等量生理盐水.药物注射完成第2天眼球取血检测外周血白细胞总数与分类计数,取股骨测定每只股骨BMMCs细胞数;CCK8测定BMMCs增殖能力,流式细胞术分析BMMCs增殖周期,混合集落(CFU-Mix)培养检测BMMCs形成集落能力;衰老β半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色观察衰老细胞百分率;Western blotting检测衰老相关蛋白P16、Rb、CDK4及CyclinD1表达.结果 与模型组比较,无论是ASP、Ara-C单独注射或ASP+Ara-C联合用药均能有效降低白血病模型小鼠外周血白细胞总数,降低中性粒细胞百分率,提高淋巴细胞百分率;降低股骨BMMCs细胞数,明显抑制BMMCs增殖,降低CFU-Mix产率,提高G₁期细胞比例,减少S期细胞比例;显著提高SA-β-Gal染色阳性细胞百分率;上调P16、Rb表达,下调CDK4、CyclinD1表达,且联合用药组效果更为明显.结论 ASP与Ara-C可能通过调节衰老相关蛋白P16、Rb、CDK4及CyclinD1表达,进而促进移植小鼠白血病细胞衰老,为临床治疗白血病提供了新思路.     

骨髓间充质干细胞移植对四氯化碳大鼠肝损伤的影响及一贯煎的干预作用

该研究观察BMSCs早期尾静脉移植对四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)肝损伤模型大鼠的影响以及一贯煎的干预作用。雌性Wistar大鼠65只,随机分为正常组,模型组,细胞移植组,一贯煎组和一贯煎加细胞移植组。造模各组大鼠按3 mL·kg^-1每周2次腹腔注射50%CCl4橄榄油溶液,共9次;细胞移植组和一贯煎加细胞移植组在首次注射CCl4后立即经尾静脉注入第3代BMSCs 1×10^6个;用药组灌胃一贯煎水煎液。结果可见细胞移植和一贯煎均可降低首次造模48 h的血清ALT和AST。造模4周后,模型组血清ALT,AST,γ-GT活性增高,TBIL含量增高;肝组织SOD活性降低,MDA和TG含量增加;肝组织病理可见大泡型脂肪变性,油红O染色可见大量脂滴,天狼猩红染色未见明显胶原增生,血清TNF-α和IL-6含量升高(P<0.05)。BMSC细胞移植组大鼠肝功能和组织病理较模型组进一步恶化,肝组织可见少量胶原增生,肝组织SOD活性更低,MDA和TG含量进一步增高(P<0.05),血清TNF-α和IL-6含量较模型组升高(P<0.05);经一贯煎干预后,各检测指标均较模型组和细胞移植组有所改善。SRY原位杂交检测显示,BMSC移植后在心、肝、脾、肺、肾均可检测到SRY阳性表达,但以肝脏最多,经一贯煎干预后,SRY阳性细胞在肝脏表达减少。Western blot结果显示正常组高表达Wnt和β-catenin,CCl4造模后表达明显减少,细胞移植后有进一步降低的趋势,一贯煎组干预后则表达增高。该研究表明早期尾静脉BMSCs移植可加重大鼠CCl4肝损伤,促进肝纤维化形成,一贯煎可改善BMSCs移植加重的CCl4肝损伤,其机制与减少BMSCs归巢肝脏,上调Wnt/β-catenin信号通路有关。     

复方金蟾胶囊对移植性小鼠肉瘤及细胞周期的抑制作用

目的观察复方金蟾胶囊对小鼠移植性肉瘤S180的抑制作用并探讨其作用机制。方法采用移植性肉瘤S180模型进行抑制肿瘤的实验,并应用流式细胞仪检测S180肿瘤细胞增殖周期。结果复方金蟾胶囊对S180肉瘤的抑制率大于40%,生命延长率大于39%,其促进S180肿瘤细胞凋亡,使细胞周期阻滞于G0G1期,减少增殖细胞在S期的分布,且呈明显量效关系。结论复方金蟾胶囊具有良好的抗肿瘤作用,且有明显量效关系。     

芒果甙对K562细胞端粒酶活性和细胞周期的影响

目的:研究芒果甙对白血病K562细胞端粒酶活性及其细胞周期的影响。方法:采用端粒重复序列扩增(telomeric repeat amplification protocol,TRAP)PCR-ELISA方法检测K562细胞经芒果甙作用前后端粒酶活性的变化,应用流式细胞仪检测细胞周期的分布。结果:经芒果甙作用后,K562细胞端粒酶活性下降,随药物浓度增加和作用时间的延长,其抑制作用增强;芒果甙作用24小时后,K562细胞G2/M期细胞增多,S期细胞减少,出现G2/M期阻滞,并呈现剂量依赖性。结论:芒果甙能抑制K562细胞的端粒酶活性,其机制可能与其细胞周期阻滞作用有关。