SELDI-TOF-MS技术在预测肿瘤化疗敏感性中的应用

表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术是新一代蛋白质组研究技术,它使用特殊的增强表面直接捕获待测样本中的蛋白质分子,能够快速、敏感地发现并鉴定蛋白,提供一个高通量和高灵敏度的检测平台。最初主要应用于疾病早期诊断相关的蛋白质标志物。目前在预测肿瘤化疗敏感性方面的应用也逐渐增多。本文除对表面增强激光解析离子化飞行时间质谱技术做详尽的介绍外,重点阐述其在预测肿瘤化疗敏感性方面的应用,并对其优缺点和发展前景进行评估。     

SELDI-TOF-MS蛋白芯片技术在宫颈癌早期诊断和鉴别诊断中的应用

目的 采用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)蛋白质芯片技术检测宫颈浸润癌和原位癌患者血清蛋白质指纹图谱,通过差异蛋白组学筛选特有的蛋白标记物.方法 应用SELDI-TOF-MS技术和WCX2(弱阳离子)芯片采集74例宫颈癌(44例宫颈浸润癌和30例宫颈原位癌)患者和51例健康人血清蛋白质指纹图谱,采用Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白,应用Biomarker patternsoftware 5.0.2版建立诊断模型,并盲法验证其诊断效率.结果 宫颈癌患者与对照组血清蛋白质指纹图谱有12个差异表达的蛋白质峰(P<0.05),筛选出分子量分别为5642、5912、5905、5660、2288和8700 Da 6个标志蛋白,将125例血清随机分为30例宫颈癌和30例健康人血清作为训练组用于建立人工神经网络(ANN)模型,44例宫颈癌和21例健康人血清作为验证组,其对宫颈癌的诊断敏感性为95.45%,特异性为95.23%.宫颈浸润癌与原住癌血清蛋白质谱有16个差异表达的蛋白质(P<0.01),筛选出分子量分别为13776、2796、2697、2070、2768和9222 Da 6个标志蛋白,随机将15例宫颈浸润癌和15例原位癌血清分为训练组,29例浸润癌和15例原位癌作为验证组,其鉴别宫颈浸润癌的敏感性为93.10%.特异性为93.33%.宫颈原位癌患者与对照组血清蛋白质谱比较有6个差异表迭的蛋白质(P<0.05),分别随机选取15例宫颈原位癌和15例健康人血清作为训练组,15例原位癌和36例健康人血清作为验证组,其诊断宫颈原位癌的敏感性为60%,特异性为98.08%.结论 血清蛋白质谱技术可望用于宫颈浸润癌和原位癌的鉴别,标志蛋白的鉴定可能对宫颈癌浸润机制的探讨和新的治疗手段的开展具有重要的指导意义.     

SELDI-TOF-MS技术在筛选肝癌患者血清标记物中的应用

目的:筛选肝癌患者血清中特异标记物.方法:利用表面加强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术及其配套蛋白质芯片,对33例肝癌患者、33例正常人和17例慢性肝病患者的血清蛋白质图谱进行检测,结合Biomarker Patterns Software(BPS)建立诊断模型.结果:肝癌患者与正常人和慢性肝病患者血清蛋白质图谱在相对分子质量为2 000～50 000范围内,有73个蛋白质峰差异有统计学意义(P＜0.05).经软件分析,建立由相对分子质量为4 177和7 789的标记蛋白组成的肝癌诊断模型,其诊断肝癌灵敏度为81.8%(27/33),特异度为80%(40/50).结论:SELDI-TOF-MS蛋白质芯片技术是一种快速、简便易行、用量少和高通量分析方法,不仅能直接筛选出肝癌患者血清中相对特异的潜在标记物,而且具有较好的临床应用价值.     

SELDI技术预测FOLFIRI方案治疗结肠癌疗效敏感性的应用研究

目的:应用SELDI技术发现预测FOLFIRI方案治疗晚期结肠癌患者疗效敏感性的界定指纹,探索新的用药指征。方法:选择12例行FOLFIRI方案化疗,并有可观察疗效的晚期结肠癌术后患者,应用表面增强飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术在化疗前对患者的血清样本进行检测,根据RECIST实体肿瘤疗效评价标准将FOLFIRI方案治疗1疗程(3周期)后2周～3个月内的患者分成稳定组(SD)和无效组(PD)。应用ProteinChip3.2.0和Biomarker Wizard3.1软件分析两组之间有显著差异的指纹(峰型及丰度)并进行比较。结果:术后稳定组与无效组相比有3个蛋白质峰有显著差异性,M/Z分别为1372、1698、1865,与稳定组相比,无效组上调的峰M/Z为1372和1698,下调的峰M/Z为1865。结论:应用SELDI技术可以获得预测FOLFIRI方案治疗结肠癌疗效敏感性的标识指纹,其M/Z为:1372±50H+、1698±50H+、1865±50H+。其中M/Z:1372±50H+丰度10、1698±50H+丰度5、1865±50H+丰度10为预计FOLFIRI方案治疗结肠癌可获得稳定的标识指纹;其M/Z:1372±50H+丰度≥10、1698±50H+丰度≥5、1865±50H+丰度≤10为预计FOLFIRI方案治疗结肠癌无效的标识指纹。     

NP方案化疗治疗老年晚期非小细胞肺癌

[目的]评价NP方案治疗老年非小细胞肺癌疗效、毒性反应及其耐受性。[方法]以国产长春瑞宾（NVB）联合顺铂（DDP）方案治疗老年晚期非小细胞肺癌（NSCLC）23例,NVB 25 mg/m^2静脉滴注,第1、8天;DDP 60mg/m^2,第1-3天静脉滴注,每21-28天重复,每周期观察其不良反应,每两周期评价疗效。[结果]本组共完成化疗67个周期,中位周期数2个（2-6个）,总有效率26%,中位生存期10.3个月,1年生存率34.7%。最常见的毒性反应为白细胞减少,发生率为82.6%。胃肠道反应较轻。未见明显肝肾功能损害。[结论]老年非小细胞肺癌患者对于NP方案耐受良好,毒性反应较轻,近期疗效令人满意。     

三种化疗方案治疗晚期非小细胞肺癌的临床回顾性分析

目的:探讨化疗方案GP、EP、IHP治疗晚期非小细胞肺癌的临床效果。方法:对我院1991年以来3种化疗方案治疗中晚期非小细胞肺癌(NSCLC)243例(其中GP 101例,EP 64例,IHP78例)进行回顾性分析。结果:3种方案的缓解率分别为36.6%、28.1%、26.9%,差异有统计学意义;1年生存率分别为49.6%、18.3%和19.2%,差异有显著性;中位生存期达10.4、7.3和7.8个月,差异无统计学意义。结论:第三代抗肿瘤药物联合顺铂与第二代抗肿瘤药物联合顺铂治疗晚期非小细胞肺癌在临床有效率、一年生存率方面差异有显著性,中位生存期差异无显著性。     

不同化疗方案对晚期非小细胞肺癌临床疗效及肿瘤标志物的影响

目的:对不同化疗方案在晚期非小细胞肺癌患者临床治疗中的应用效果观察。方法:选取实施治疗的晚期非小细胞肺癌患者中随机选取48例,依照患者治疗方式将其分成两组,其中对照组患者实施吉西他滨联合顺铂化疗方案治疗,观察组患者实施培美曲塞联合顺铂化疗方案治疗,对比两组患者临床疗效及肿瘤标志物变化。结果:和对照组患者相比,观察组患者的临床治疗有效率显著偏高,差异有统计学意义(P<0.05);观察组患者的血清肿瘤标志物改善效果显著优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:培美曲塞联合顺铂化疗方案在晚期非小细胞肺癌患者临床治疗中的应用效果显著,能够对患者肿瘤标志物起到显著改善作用,值得推广。     

应用SELDI-TOF-MS技术建立鼻咽癌诊断中的血清蛋白质指纹图谱模型

目的:检测鼻咽癌、耳鼻部良性疾病和正常人血清中蛋白质指纹图谱,筛选特异的蛋白质标志物,构建用于鼻咽癌诊断的分类树模型.方法:采用CM10芯片及SELDI-TOF-MS技术对30例鼻咽癌患者及24例对照组血清样本进行蛋白质指纹图谱检测分析,所得到的结果采用Biomarker Wizard和Biomarker Patterns System软件分析并建立用于鼻咽癌诊断的分类树模型,并用其余10例鼻咽癌患者和12例对照组标本进行双盲验证.同时用酶联免疫法(ELISA)检测两组的血清EB病毒VCA-IgA抗体,将诊断模型的判定结果通过与血清EB病毒VCA-IgA抗体检测结果相对比验证其对于临床的应用价值.结果:从两组血清中筛选出Mr为8559,15 115,15 836,15 937,16 089的5个差别有统计学意义(P<0.05)的标志蛋白,所建立的诊断模型对鼻咽癌诊断的准确率、灵敏度和特异度分别为98.1%(53/54),96.7%(29/30)和100%(24/24).双盲验证后的准确率、灵敏度和特异度分别86.4%(19/22),80.0%(8/10),和91.7%(11/12).灵敏度优于血清EB病毒VC...     

化疗和免疫治疗对非小细胞肺癌患者淋巴细胞免疫功能的影响

目的 :观察化疗或化疗联合免疫治疗对非小细胞肺癌 (NSCL C)患者淋巴细胞免疫功能的影响及其与疗效的相关性。方法 :6 6例 NSCL C初治患者按治疗方式分成单纯化疗组 36例 ,化免组 (化疗联合 CD3AK细胞液治疗 ) 30例 ,在治疗前后检测患者淋巴细胞免疫的变化。以健康献血员外周血 T细胞亚群为正常对照。结果 :治疗前两个组 NSCL C患者的淋巴细胞免疫(CD3、CD4 和 CD4 / CD8比值及 NK计数 )均显著低于对照组 (P <0 .0 5 )。化疗组和化免组的有效率无显著性差异 (P >0 .0 5 )。化疗组中治疗有效病例 (CR+PR)淋巴细胞免疫较治疗前明显上升 (P <0 .0 5 ) ,但仍显著低于对照组 (P <0 .0 5 ) ,而稳定 (SD)和进展 (PD)病例的淋巴细胞免疫进一步下降 (P <0 .0 5 )。化免组中 CR+PR病例的细胞免疫明显改善 ,与对照组无显著性差异 (P >0 .0 5 ) ,SD病例的细胞免疫功能无明显变化 (P >0 .0 5 ) ,而 PD病例的细胞免疫仍显著下降 (P <0 .0 5 )。结论 :治疗有效病例的细胞免疫功能得到明显改善。联合 CD3AK治疗可以加快治疗有效病例的免疫功能恢复正常。SD、PD病例接受 CD3AK过继治疗未能改善其免疫功能     

非小细胞肺癌治疗新进展

非小细胞肺癌(NSCLC)在世界各地的发病率逐年上升,由于患者就诊时80%～90%的病例已有转移,因此化疗是不可缺少的治疗手段.随着一些新药的问世,明显提高了NSCLC的疗效.本文综述了各期非小细胞肺癌的治疗新进展.     

羟基喜树碱联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌

目的 :观察羟基喜树碱 (HCPT)联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌 (NSCLC)的疗效及其不良反应。方法 :随机将 6 2例经病理证实为NSCLC的患者分为研究组 31例 ,接受CAP方案化疗 ,同时加用羟基喜树碱10mg/d静滴 ;对照组 31例 ,单纯接受CAP方案化疗。结果 :研究组鳞癌的治疗有效率为 5 2 .6 4 % ,腺癌的治疗有效率为 5 0 .0 0 % ,与对照组相比有显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;而研究组的不良反应明显小于对照组 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论 :羟基喜树碱联合化疗能提高中晚期非小细胞肺癌的疗效 ,毒副反应小 ,耐受性好。     

非小细胞肺癌淋巴转移血清蛋白指纹图谱分析

目的 应用表面增强激光解析离子化-飞行时间-质谱(SELDI-TOF-MS)技术获得区分非小细胞肺癌患者淋巴结转移的诊断模型及血清特异性蛋白.方法 应用弱阳离子蛋白芯片CM10及SELDI-TOF-MS技术检测84例肺癌患者血清中蛋白的相对含量(其中N0、N1、N2患者分别为35例、19例和30例),从淋巴结转移(N0组对比N1+N2组)和纵隔淋巴结转移(N0+N1组对比N2组)两方面进行分析,分别建立诊断模型.结果 在随机抽取50例构建的模型中,诊断淋巴结转移组病例的灵敏度和特异度分别为96.3%(26/27)和95.7%(22/23),同时进行盲法验证;随后将15例病理确认第10至14站淋巴结均无转移的N0病例与49例出现淋巴结转移患者(N1+N2)对比构建模型,预测转移的灵敏度和特异度别为77.6%和93.3%,其中相对分子质量6682等6个蛋白峰有显著差异;而诊断纵隔淋巴结转移模型的灵敏度为80.0%(24/30),特异度为77.8%(42/54).结论 SELDI-TOF-MS技术在预测非小细胞肺癌患者淋巴结转移方面具有应用价值,而该诊断模型以及与转移相关的蛋白需进一步研究证实.     

老年晚期非小细胞肺癌患者化疗耐受性研究

目的 评价老年晚期非小细胞肺癌患者对联合化疗方案的疗效、毒副反应及其耐受性。方法 以健择联合顺铂、盖诺联合顺铂、紫杉醇联合顺铂三方案治疗老年晚期非小细胞肺癌(NSCLC)22例，观察其化疗效果和不良反应。结果 全组共完成86个周期，中位周期数4，总有效率45．45％，中位生存期14．5个月，1年生存率60．4％。最常见的毒副反应为骨髓抑制，发生率95．47％，其中I度22．74％，Ⅱ度45．45％，Ⅲ度22．74％，Ⅳ度4．54％。结论 老年非小细胞肺癌患者对于偏小剂量的联合化疗耐受良好，毒副反应较轻，初步疗效令人满意。     

MVP方案对非小细胞肺癌化疗疗效的探讨

大中城市中肺癌的发病率和死亡率显著增高，已占恶性肿瘤的首位。虽然对非小细胞肺癌（ＮＳＣＬＣ）的治疗可以手术为主进行综合治疗，但多数患者确诊时已为晚期，８２％的患者无法手术完全切除。近年来，国际上报道了对晚期非小细胞肺癌实施以顺铂类为主联合长春碱类、鬼...     

非小细胞肺癌患者血清肿瘤标记物的联合检测及其临床意义

目的　探讨血清肿瘤标记物联合检测在非小细胞肺癌(NSCLC)的诊断、分型、病情估价和疗效中的作用。方法　分别采用生化比色定量法、化学发光法和ELISA法,序贯检测98例不同TMN分期的NSCLC患者的血清TSGF、CEA、CYFRA21-1水平。结果　各型肺癌早期TSGF水平皆升高,但应与急性炎症相鉴别;CEA、CYFRA21-1水平分别在腺癌和鳞癌早期即可增高;3项指标皆明显增高时,往往提示病变广泛或已为晚期。结论　结合临床和其他辅助检查,血清TSGF、CEA、CYFRA21-1联合检测对NSCLC的早期鉴别诊断、推测病理类型、指导治疗、监测复发、判断预后有较大意义。     

XRCC1基因多态性对非小细胞肺癌患者铂类药物化疗敏感性的影响研究

目的探讨X线修复交叉互补基因1(XRCC1)Arg399Gln多态性对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)患者对铂类药物化疗敏感性的影响。方法选取23例初治的NSCLC患者,采用铂类为主的化疗方案。在化疗前,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)检测外周血XRCC1 Arg399Gln基因型多态性,比较其不同基因型对化疗敏感性的影响。结果 XRCC1 Arg399Gln存在3个基因型,即Arg/Arg、Arg/Gln、Gln/Gln,其基因分布频率分别为43.5%(10/23)、39.1%(9/23)、17.4%(4/23);3种基因型的化疗有效率分别为60.0%(6/10)、44.4%(4/9)、25.0%(1/4),其有效率差异无统计学意义(χ~2=1.445,P=0.6480.05)。结论 XRCC1 Arg399Gln位点基因多态性与NSCLC对铂类药物的化疗敏感性无明显影响。     

不同化疗方案对晚期非小细胞肺癌的疗效分析

目的探讨不同化疗方案对晚期非小细胞肺癌的疗效。方法161例晚期非小细胞肺癌患者分别用四组不同的方案化疗,MVP40例,NPH6例,CP45例．TP40例,四组患者基线资料具有可比性。结果MVP有效率44．2％,肿瘤控制率73％;NP有效率49．7%．肿瘤控制率86．4％;GP有效率55％,肿瘤控制率92．3％;TP有效率60．5％,肿瘤控制率93．7％。四种方案有效率比较无统计学差异（P〉0．05）,肿瘤控制率比较有统计学差异（P〈0．05）。结论四种化疗方案对晚期非小细胞肺癌均有效,但TP方案肿瘤控制率高．化疗副反应轻,可作为晚期NSCLC患者首选方案。     

CAP、EP与MVP方案治疗晚期非小细胞肺癌的疗效比较

非小细胞肺癌（NSCLC）即鳞状细胞癌、腺癌和大细胞未分化癌，约占肺癌的70％～80％，多数发现时已属晚期，失去手术治疗机会，因而联合化疗在晚期NSCLC中占有重要地位。我院自1997年5月至2000年1月间收治晚期NSCLC77例，随机采用CAP（环磷酰氨、阿霉素、顺铂）、EP（足叶乙甙、顺铂）与MVP（丝裂霉素、长春碱酰氨、顺铂）方案进行治疗，现将结果报告如下。     

表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱在甲状腺癌诊断及临床分期中的应用

目的:用表面增强激光解吸电离-飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)分析正常人和甲状腺癌患者血清蛋白指纹图谱的变化,建立能鉴别正常人和甲状腺癌及Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型.方法:应用SELDI-TOF-MS技术检测72例血清标本的蛋白质质谱,其中甲状腺癌 40 例(Ⅰ-Ⅱ期 26 例,Ⅲ-Ⅳ期14 例),正常人32例.应用支持向量机和判别分析的方法分析质谱数据,建立甲状腺癌诊断模型并留一法交叉验证.结果:区分甲状腺癌和正常人的诊断模型交叉检验敏感性为100%,特异性为86%,总的符合率为93%;区分Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌和Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌患者的诊断模型对Ⅰ-Ⅱ期甲状腺癌检出的敏感性为77%,特异性为86%,对Ⅲ-Ⅳ期甲状腺癌检出的敏感性为86%,特异性为77%,总的符合率为80%.结论:应用SELDI-TOF-MS技术平台和生物信息技术建立的诊断模型为甲状腺癌的早期诊断及临床分期提供了新的手段.     

晚期非小细胞肺癌化疗前后肿瘤标志物变化与疗效的关系

目的了解晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者化疗前后血清CEA、CYFRA21-1和CAl25的变化，并分析其与疗效的关系。方法应用酶联免疫吸附法检测45例Ⅳ期、初治NSCLC患者化疗前后血清CEA、CYFRA21-1和CAl25值。结果（1）化疗后，鳞癌患者CYFRA21-1显著下降（P〈0．05）；腺癌患者CEA和CAl25显著下降（P〈0．05）。（2）疗效评价为部分缓解（PR）的患者CEA、CYFRA21-1和CAl25明显下降（P〈0．05）；疾病稳定（SD）患者CYFRA21-1和CAl25显著下降（P〈0．05）；疾病进展（PD）患者CEA显著增高（P〈0．05）。结论晚期NSCLC患者化疗前后，CEA、CYFRA21-1和CAl25水平变化与组织学类型有关，同时对疗效和预后有一定的判断价值。