Survivin在儿童急性白血病骨髓及外周血单个核细胞中的表达及意义

目的研究survivin在急性白血病(AL)儿童骨髓及外周血单个核细胞(MNC)的表达情况及意义.方法应用RT-PCR的方法检测21例AL患儿骨髓及外周血MNC中survivin mRNA的表达.结果 12例初诊AL患儿骨髓MNC中survivin阳性表达6例(50%);11例外周血MNC中survivin阳性表达4例(36.37%),均明显高于对照组(P<0.05).初诊组急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性髓细胞白血病(AML)患儿survivin表达无显著差异(P>0.05).完全缓解组患儿中1 例骨髓survivin阳性表达(11.11%),明显低于初诊组(P<0.05),该例患儿7周后复发.AL初诊组4例外周血MNC survivin阳性表达者与7例阴性表达者外周血原始和/或幼稚细胞平均值分别为(76.43±43.28)×109/L和(5.86±13.85)×109/L,有显著性差异(P<0.05 ).结论① Survivin在AL初诊患儿骨髓及外周血MNC中高表达,提示survivin可能参与了儿童AL的发生发展;②完全缓解患儿骨髓survivin阳性表达可能可作为AL复发的早期指标.     

急性白血病患者骨髓Livin、Smac mRNA的表达

目的：研究急性白血病（AL）患者凋亡蛋白抑制因子Livin及其促凋亡因子Smac基因的表达及临床意义。方法：选取52例AL患者（初治组。化疗1疗程后，52例AL患者中有28例达完全缓解（缓解组），其中6例于观察期间复发（复发组））和10名健康人（正常对照组）。取骨髓液并分离单个核细胞，提取细胞总RNA，并以白血病HL-60细胞株为阳性对照，采用RT—PCR方法检测Livin、SmacmRNA表达情况。分析Livin和SmacmRNA表达的相关性和2者的表达与AL缓解率的关系。结果：初治组中Livin、SmacmRNA的阳性表达率（40．3％、59．6％）较正常对照组（0％、10．0％）明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。缓解组中LivinmRNA的阳性表达率（0％）与复发组的阳性率（50．0％）相比，差异有统计学意义（，=9．769，P〈0．05）。缓解组中SmacmRNA阳性表达率（14．2％）与复发组的阳性率（60．7％）相比差异有统计学意义（X2=4．905，P〈0．05）。AL患者Livin、SmacmRNA的表达具有关联性（r=0．267，X2=4．020，P=0．045）。在初治组中，Livin、SmacmRNA表达阳性患者的完全缓解率均低于表达阴性的患者。44例可进行疗效评估的患者中，LivinmRNA表达阳性者与表达阴性者完全缓解率相比差异有统计学意义（X2=4．762，P=0．029）。SmacmRNA表达阴性者与表达阳性者完全缓解率相比差异有统计学意义（X2=5．135，P=0．023）。结论：Livin、SmacmRNA过度表达和急性白血病的发病呈正相关；Livin、Smac高表达的患者完全缓解率低，预后不良。     

急性白血病细胞凋亡抑制基因Livin表达及临床意义

目的 观察 Livin 基因在急性白血病(AL)病人白血病细胞中的表达及其临床意义.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测41例不同时期AL病人白血病细胞Livin mRNA的表达水平,以10例健康人作为正常对照.结果 AL病人白血病细胞Livin mRNA 阳性表达率为53.7%.其中急性淋巴细胞白血病(ALL)和急性非淋巴细胞白血病(ANLL)病人Livin mRNA 阳性表达率分别为53.8%、53.6%,二者比较差异无显著性,但均高于正常对照组(10.0%)(P=0.035、0.017).初治和复发AL病人白血病细胞Livin mRNA 阳性表达率分别为52.4%、85.7%,明显高于对照组(P=0.025、0.004).缓解组病人Livin mRNA阳性表达率为15.4%,明显低于初治组和复发组(P=0.004、0.030),而与对照组相比差异无统计学意义.白细胞计数≥50×109/L的初治白血病病人Livin mRNA的阳性表达率(77.8%,7/9)明显高于白细胞计数＜50×109/L的初治病人(25.0%,3/12)(P=0.022),其表达水平也明显高于后者(T=6.50,P<0.05).结论 Livin mRNA过度表达参与了AL的发病,可作为AL的诊断、复发及预后判断的指标之一.Livin mRNA表达在AL细胞的增殖分化和(或) 抗凋亡过程中发挥了重要作用,可能是导致AL细胞对化疗药物不敏感的原因之一,可作为治疗的一个潜在靶点.     

凋亡抑制因子Livin在胃癌中的表达及意义

目的探讨凋亡抑制因子Livin在胃肿瘤中的表达及其与胃肿瘤临床病理的关系。方法采用逆转录多聚酶链式反应（RT—PCR）检测胃癌组织中的Livinet和Livinβ的表达。结果20例胃癌组织中Livin表达的阳性率为55．00％，相应的癌旁组织中Livin不表达或表达很低。结论Livin的两种异构体在胃癌组织中的表达使其可能成为胃癌的分子标记物或胃癌治疗的新靶点。     

抗凋亡基因Livin在成人急性淋巴细胞白血病细胞中的表达及临床意义

目的 探讨成人急性淋巴细胞白血病(ALL)原代细胞Livin基因的表达及临床意义.方法 采用RT-PCR检测52例成人急性淋巴细胞白血病患者Livin基因表达与否及相对表达水平,以12名健康人为正常对照.结果 LivinmRNA在初治ALL患者中的阳性表达率明显高于正常对照组(P＜0.05);治疗缓解后表达率明显下降(P＜0.05);复发后其表达率又升高.在初治成人ALL患者中,Livin mRNA表达阳性的患者完全缓解率低于表达阴性的患者(P＜0.05).结论 Livin基因的表达可能和成人ALL的发病、复发相关;Livin基因阳性表达的患者完全缓解率低,预后不良;Livin基因检测可能作为成人急性淋巴细胞白血病的发病、复发及预后判断的指标之一.     

凋亡抑制蛋白Livin真核表达载体的构建及表达

目的:构建凋亡抑制蛋白Livin真核表达载体pIRES2-AcGFP-Livin。方法:设计合成扩增Livinα和Livinβ基因全长cDNA序列的特异性PCR引物,以食管鳞状细胞癌EC9706细胞总RNA为模板,进行RT-PCR,将获得的cDNA序列克隆入T载体,再用BglⅡ和EcoRⅠ双酶切,亚克隆入真核表达载体pIRES2-AcGFP,将重组质粒用脂质体包裹转染NIH3T3细胞,G418筛选得到稳定表达的细胞克隆,Western-blot检测转染细胞Livinα和Livinβ蛋白的表达情况。结果:构建了真核表达载体pIRES2-AcGFP-Livinα和pIRES2-AcGFP-Livinβ,测序分析证实插入序列正确;转染的NIH3T3细胞,可稳定表达Livinα或Livinβ蛋白。结论:成功构建Livinα和Livinβ真核表达载体。     

抗凋亡蛋白XIAP和促凋亡蛋白Smac在儿童急性白血病中的表达及临床意义

目的:探讨抗凋亡蛋白XIAP和促凋亡蛋白Smac在儿童急性白血病(AL)中的表达及临床意义。方法:应用SP-免疫组织化学方法检测60例AL患儿初治组、缓解组、复发组及25例非恶性血液病患儿(对照组)中XIAP、Smac的表达情况。结果:1 XIAP、Smac在初治AL患儿骨髓中表达阳性率及阳性强度均高于缓解组(P<0.05,P<0.008)和对照组(P<0.05,P<0.008),与复发组相比无显著性差异(P>0.05)。2初治AL患儿骨髓中XIAP、Smac蛋白表达显著正相关(r=0.795,P<0.01)。结论:XIAP、Smac过度高表达和急性白血病的发病和复发相关,XIAP、Smac在儿童AL的发生与发展中可能互相影响。     

TRAIL受体在儿童急性白血病中的表达及其临床意义

目的 探讨肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)的4种受体TR1～R4在儿童急性白血病(AL)中的表达,及其与临床分型和预后的关系.方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定22例AL患儿(AL组)和10例骨髓正常的非恶性血液病患儿(对照组)TR1～R4 mRNA的表达情况.结果 AL组死亡受体DR4(TR1)和DR5(TR2)mRNA的表达明显高于对照组(P<0.01);而AL组蒙骗受体DcR1(TR3)和DcR2(TR4)mRNA的表达明显低于对照组(P<0.05).AL组与对照组均表达DR5,但AL组内DR5表达相对量明显高于DR4,差异具有统计学意义(P<0.05).AL患儿不同亚型之间TRAIL受体表达差异无统计学意义.结论 TRAIL受体TR1～R4在儿童急性白血病中表达有明显差异性,TRAIL及其受体在白血病细胞凋亡中起重要作用.     

凋亡抑制蛋白livin在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

目的 检测一种新的凋亡抑制蛋白livin在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达并分析其与NSCLC的组织类型、分化程度、淋巴结转移之间的关系。方法 采用免疫组织化学（SABC）的方法检测livin蛋白在40例NSCLC以及12例正常和良性疾病肺组织的蛋白表达。结果 22例腺癌和18例鳞癌组织中的livin阳性表达率分别为45．5％和50％,而正常肺组织和良性疾病肺组织未检出livin阳性蛋白表达,经统计学处理,腺癌与鳞癌组织中livin的表达率差异无显著性（P〉0．05）。低分化NSCLC组织中阳性表达率为42．8％,而中分化NSCLC为44．4％,高分化NSCLC为37．5％,不同程度分化类型之间差异无显著性（P〉0．05）。有无淋巴结转移的肺癌组织中livin的阳性表达率分别为72．7％和11．1％,两组差异有显著性（P〈0．01）。结论 livin作为一种新的凋亡抑制蛋白在NSCLC组织中高表达,与肺癌病理类型、分化程度无关,但与淋巴结转移有关。     

HIF-1α在成人急性淋巴细胞白血病患者骨髓单个核细胞中的表达及意义

目的探讨低氧诱导因子-1α（HIF-1α）在成人急性淋巴细胞白血病（ALL）患者骨髓单个核细胞中的表达及意义。方法选取73 例成人初诊ALL患者,同期留取非白血病骨髓30 份作为对照组,采集并分离骨髓单个核细胞,利用实时荧光定量聚合酶链反应技术检测骨髓单个核细胞中HIF-1α 基因表达,利用Kaplan-Meier生存分析分析HIF-1α 基因表达对患者无复发生存时间的影响。结果成人初诊ALL患者骨髓单个核细胞中HIF-1α mRNA 相对表达量（1.86±0.18）,高于对照组（1.17±0.09）,差异有统计学意义（t =25.020, p=0.000）;B 系-ALL（B-ALL）和T 系-ALL（T-ALL）患者骨髓单个核细胞中HIF-1α mRNA 相对表达量均高于对照组（p <0.05）,而B-ALL和T-ALL患者之间差异无统计学意义（t =0.807,p =0.211）;费城染色体（Ph）阳性和Ph 阴性患者HIF-1α mRNA 相对表达量均高于对照组（p <0.05）,而Ph 阳性和Ph 阴性患者之间差异无统计学意义（t =1.314,p =0.096）;B-ALL和T-ALL成人初诊ALL患者骨髓单个核细胞中HIF-1α 信使核糖核酸（mRNA）相对表达量均与性别、年龄、白细胞水平和危险度分级无关（p >0.05）;以HIF-1α mRNA 相对表达量的P25 为截点,将患者分为低表达组（n =18）和高表达组（n =55）,低表达组随访中复发4 例,复发率22.2%,高表达组随访中复发20 例,复发率36.4%,Kaplan-Meier生存分析显示,低表达组无复发生存时间11.2 个月,长于高表达组的8.6 个月,但差异无统计学意义（χ2=1.771, p=0.183）。结论HIF-1α在成人初诊ALL患者骨髓单个核细胞中呈高表达,可能与ALL患者化疗耐药及复发相关。     

凋亡抑制蛋白Survivin在儿童急性白血病中的表达及临床意义

目的探讨凋亡抑制蛋白Survivin在儿童急性白血病(AL)中的表达及其临床意义。方法49例AL患儿,其中初诊未治26例,治疗后完全缓解23例;对照组为10例非恶性血液病患儿。应用免疫组织化学方法检测骨髓细胞Survivin蛋白的表达。结果AL初诊未治患儿Survivin蛋白表达阳性率(65.38%)显著高于治疗后完全缓解患儿(17.39%)和对照组(10.00%,P<0.017);初诊未治患儿Survivin蛋白表达阳性率在急性淋巴细胞白血病(63.16%)和急性髓细胞白血病(71.43%)比较无显著性差异(P>0.05)。结论Survivin可能通过抑制肿瘤细胞的凋亡参与了儿童AL的发生发展,为儿童AL的治疗提供了新的思路。     

儿童周围血单个核细胞端粒酶活性检测在诊断急性淋巴细胞白血病中的临床意义

目的：寻求一种利用周围血来检测微量的白血病细胞的方法。方法：采用TRAP－ELISA法检测周围血单个核细胞（MNC）端粒酶活性。结果：急性淋巴细胞白血病（ALL）病例组周围血MNC端粒酶活性表达阳性率为92．11％，正常对照组为2．63％。结论：TRAP－ELLSA法检测周围血MNC端粒酶活性可作为诊断ALL一种简单、敏感的方法。     

凋亡抑制蛋白Livin两种异构体真核表达载体的构建及表达鉴定

目的构建凋亡抑制蛋白Livin两种异构体(Livinα和β)真核细胞表达载体pcDNA3.1-Livin α和pcDNA3.1-Livin β.方法利用分子克隆技术,首先设计合成扩增Livin基因异构体全长cDNA序列的特异性PCR引物,以肺腺癌SPC-A1细胞总RNA为模板,RT-PCR获得Livin基因异构体全长cDNA序列,TA克隆将Livin全长cDNA序列克隆到T载体上,用限制性内切酶HindⅢ和Xba Ⅰ双酶切取所需目的片段,然后将该片段插入真核表达载体pcDNA3.1的多克隆位点,最后对产生的重组子进行双酶切、PCR鉴定,并经过测序证实后,构建成为Livin基因异构体表达载体(pcDNA3.1-Livin).电穿孔法获得稳定表达Livin α和β的A549细胞克隆,Western blot验证Livin蛋白在转染细胞中的表达情况.结果成功获得Livinα和Livin β全长cDNA序列,并克隆到真核表达载体pcDNA3.1上;基因转染后,阳性细胞分别表达Livinα和β.结论Livin基因两种异构体真核表达载体的构建及在细胞中的表达鉴定,为进一步研究Livin异构体功能及在肺癌细胞中的抗凋亡效应奠定了基础.     

BAG-1蛋白在急性髓系白血病患者骨髓单个核细胞中的表达

目的:探讨急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白的表达及意义。方法:用免疫细胞化学SP染色法分别检测初治AML患者(76例)、急性髓系白血病完全缓解(AML-CR)患者(49例)、急性髓系白血病难治复发(RRAML)患者(17例)及正常对照者(15例)的骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白的表达。结果:四组BAG-1蛋白阳性表达率差异有统计学意义(字2=47.857,P0.001);初治AML组和RRAML组中BAG-1蛋白阳性表达率均高于AML-CR组和正常对照组(P0.001);AML各分型患者的BAG-1蛋白阳性表达率差异无统计学意义(字2=1.920,P0.05);初治AML患者骨髓单个核细胞中BAG-1蛋白阳性表达率与白细胞计数及髓外浸润有关(字2=9.248,13.689,P0.01)。结论:BAG-1可能参与了急性髓系白血病的发生发展。     

Livin在泌尿系肿瘤中的研究进展

Livin是最近发现的凋亡抑制蛋白家族新成员,在大多数正常成人组织低表达或不表达(除胎盘),而在一些恶性肿瘤中特异性高表达,与肿瘤的发生、发展及复发密切相关。其在泌尿系肿瘤(如膀胱癌、肾癌)中的特征性变化具有一定的临床应用价值,因此研究其结构和功能对泌尿系肿瘤的早期诊断、免疫治疗或基因治疗有着重要意义。     

急性和慢性白血病Livin基因表达的研究

目的：研究Livin基因在急、慢性白血病中的表达,探讨其临床意义。方法：采用半定量逆转录．聚合酶链反应（RT—PCR）检测91例急性白血病（AL）和17例慢性粒细胞性白血病（CML）患者LivinmRNA的表达水平,21名健康人的标本作正常对照。结果：初治AL患者中Livin的表达较正常对照明显升高,治疗缓解后的表达水平下降,复发时又再次升高;慢性粒细胞白血病慢性期（CML—CP）、加速／急变期（CML-AP／BP）患者Livin的表达水平均高于正常对照组;初治AL患者中,Livin阳性的患者缓解率低于表达阴性的患者。结论：Livin基因的过度表达参与了急、慢性白血病的发病,并且是AL复发的高危因素;Livin基因的高表达是判断急性白血病预后不良的指标之一。     

儿童急性白血病骨髓端粒酶活性异常的临床意义

目的研究儿童急性白血病(AL)骨髓端粒酶活性变化特点,探讨端粒酶活性异常的临床意义.方法用TRAPEZETM试剂盒测定AL患儿骨髓单个核细胞端粒酶活性,分析端粒酶活性水平异常与临床指标间的相关性.结果儿童AL骨髓端粒酶活性较正常对照高6倍;存在细胞遗传学异常者骨髓端粒酶活性高于无细胞遗传学异常者(P＜0.05);初发急性非淋巴细胞白血病(ANLL)中骨髓端粒酶活性与发病时外周血白细胞计数呈显著线性正相关(r=0.70,P＜0.05);ANLL中,高端粒酶活性组出现复发或死亡的机率高于低活性组;AL完全缓解时骨髓端粒酶活性降至正常范围,复发时骨髓端粒酶活性再度升高.结论儿童AL时骨髓端粒酶活性升高,完全缓解时降至正常;端粒酶活性与AL诸临床指标的相关性提示其作为AL危险因素的可能性.     

Livin在膀胱癌中的研究进展

Livin作为凋亡抑制蛋白家族（ IAP）中的新成员,有抑制细胞凋亡的作用,在许多肿瘤组织中高表达,与肿瘤发病机制密切相关。近年来,许多研究证明Livin与膀胱癌的发生、发展及其复发有密切相关性,本文就Livin的抗凋亡机制及其在膀胱癌诊断和治疗中的研究进展作一综述。