瑞香狼毒提取物逆转肺癌细胞耐药的免疫组化研究

目的:探讨瑞香狼毒逆转肺癌化疗耐药的机制。方法:用瑞香狼毒水提取物处理肺癌细胞株,用药前后分别用免疫组织化学SP法检测肺癌细胞中:多药耐药相关蛋白(MDM2)、肺耐药蛋白(LRP)、热休克蛋白27(HSP27)和多药耐药基因(MDR-1)的表达状况。利用形态学图像分析,比较瑞香狼毒用药前后四种耐药基因表达的差异。结果:两个肺癌细胞株瑞香狼毒用药前后四种癌基因表达情况如下:NCI-H446细胞株用药前MDR-1、LRP和MDM2细胞阳性率和辉度均高于用药后(P<0.05),而HSP27的表达用药前后差异不显著(P>0.05)。NCI-H157细胞株用药前MDR-1、LRP和HSP27细胞阳性率和辉度均高于用药后(P<0.05),而MDM2的表达用药前后差异不显著(P>0.05)。结论:瑞香狼毒提取物对两种肺癌细胞株的某些耐药基因蛋白的表达有明显的抑制作用。     

瑞香狼毒与黄花瑞香狼毒的生药鉴定

对瑞香狼毒Stellera chamaejasme及黄花瑞香狼毒Stellera chamaejasme f.chrysantha进行了生药性状、显微、薄层色谱方面的比较鉴别,以供扩大药源、控制质量参考.     

瑞香狼毒提取物对肺癌细胞超微结构的影响

目的探讨中药瑞香狼毒水提取物对肺癌细胞超微结构的影响。方法用瑞香狼毒水提取物处理两个肺癌细胞株(人小细胞肺癌NCI-H446和人非小细胞肺腺癌NC I-H157)。用药前后分别取材,按悬浮细胞操作规程常规制备超薄切片,透射电镜观察用药前后两肺癌细胞株超微结构的变化。结果用药后较用药前两肺癌细胞株的超微结构变化主要表现在:①细胞形态的改变:多数细胞体积变小,形态不规则,胞质电子密度增高。少数细胞体积增大,表面胞膜突起消失,部分细胞膜呈线性中断。②细胞器的改变:细胞器减少或变形、结构不清。个别细胞线粒体呈气球样肿胀,嵴减少或消失。③细胞核的改变:细胞核内染色质边集,基质电子密度增高。有些细胞核内异染色质分界不清,核仁呈均一电子密度,网状结构消失。结论中药瑞香狼毒水提取物对肺癌细胞有明显的细胞毒作用。     

瑞香狼毒总黄酮提取物的抗肿瘤作用

目的:　研究瑞香狼毒总黄酮提取物的抗肿瘤作用。方法:体外抗肿瘤活性研究采用MTT比色法和集落形成法测定,靶细胞采用人胃癌细胞SGC- 790 1、人肝癌细胞BEL- 74 0 2和人白血病细胞HL- 6 0 ;通过提取物对小鼠的移植性肿瘤S180和H2 2生长的影响来评价体内抗肿瘤作用。结果:瑞香狼毒总黄酮提取物对体外培养的肿瘤细胞有较强的抑制作用,体外抗肿瘤活性高于长春新碱;瑞香狼毒总黄酮提取物急性毒性较小,对小鼠移植性肿瘤S180和H2 2的生长也有显著的抑制作用,并和剂量正相关,高剂量组对小鼠移植性肿瘤S180的抑制率为4 5 . 6 4 % ,H2 2的为4 7 .5 9% ,与阳性对照组环磷酰胺的抑制率接近。结论:瑞香狼毒总黄酮提取物具有较强的体内和体外抗肿瘤作用。     

蒙药瑞香狼毒急性毒性实验研究

瑞香狼毒一次灌服12g·kg^-1,相当48g药材·kg^-1,LD50无法测出。用最大耐受量方法测定1日2次给药,计算出最大耐受量相当临床240倍（按50ks体重计算）,最大服药量为24g·k^-1,相当96g药材·k^-1。测定表明,瑞香狼毒无明显急性毒性,临床使用比较安全。     

瑞香狼毒提取物逆转人肝癌耐药细胞多药耐药的实验研究

1实验材料实验动物:Balb/c小鼠40只,体重18g～22g,SPF级,由黑龙江中医药大学实验动物中心提供.瑞香狼毒水提物(SCLA)的制备:将瑞香狼毒(由内蒙医药公司提供,经鉴定为瑞香科狼毒)200g加水400mL,煮沸20min2次,上清液混合后过滤、浓缩,制成口服液,每毫升含生药1.0g.细胞系:人肝癌细胞系Bel-7402引自中国科学院上海细胞生物研究所细胞库.主要试剂及仪器:酶联免疫检测仪,南京华东电子管厂产品.     

瑞香狼毒的化学成分研究

瑞香狼毒Stellera chamaejasme L.又名断肠草，为瑞香科狼毒属植物，广泛分布于我国西北、华北等地。该植物的根部应用历史悠久，为中药“狼毒”的正品。始载《神农本草经》，列为下品。中医认为，其性味苦平，有大毒，有逐水祛痰、破积杀虫之功效。有报道证实其有抗肿瘤作用，以及抗菌、抗结     

瑞香狼毒中的化学成分研究

 目的分离鉴定瑞香狼毒的化学成分。方法 乙醇提取,超声提取,硅胶柱层析分析,采用IDNMR,2DNMR及MS方法确定结构。结果分得5个化合物,经光谱数据的分析,分别鉴定为新瑞香素(I),B-谷甾醇(Ⅱ),伞形花内酯(Ⅲ)、东莨菪素(Ⅳ)和胡萝卜苷(V)。结论其中化合物I为新天然产物。     

瑞香狼毒水提取物对人肺鳞状细胞癌Survivin表达的影响

目的 研究瑞香狼毒水提取物对人肺鳞状细胞癌NCI-H520细胞株的抑制作用及对Survivin表达的影响.方法 用不同浓度的瑞香狼毒水提取物处理NCI-H520细胞,分别用MTT法检测肺癌细胞抑制率、半定量RT-PCR检测Survivin mRNA水平以及用Western-blotting检测蛋白水平的表达.结果 瑞香狼毒水提取物可显著抑制NCI-H520细胞的生长,随着药物浓度的升高抑制作用逐渐增强.瑞香狼毒作用4 h后细胞内Survivin蛋白的表达水平降低,而Survivin mRNA的表达变化不明显.结论 ①瑞香狼毒水提取物可抑制NCI-H520细胞的生长,并具有浓度和时间依赖性;②瑞香狼毒水提取物可降低NCI-H520细胞的Survivin蛋白表达水平,而对mRNA水平无明显影响.     

瑞香狼毒提取物抗乳腺癌MCF-7细胞多药耐药的研究

该研究将探索瑞香狼毒提取物(SCE)抗乳腺癌多药耐药的作用及相关机制。以乳腺癌化疗敏感细胞株MCF-7及阿霉素耐药细胞株MCF-7/ADR作为实验对象,通过噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖活力,采用Pi单染法测定细胞周期,4′,6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色、流式细胞术检测细胞凋亡情况,单丹磺酰尸胺(MDC)染色以及GFP-LC3B-mcherry腺病毒转染检测自噬流情况,Western blot检测凋亡蛋白Bcl-2、Bax、caspase-9、caspase-3以及自噬蛋白LC3B、p62、Beclin-1的表达水平。实验结果显示,SCE能够显著抑制乳腺癌细胞敏感/耐药株的增殖,耐药因子为0.53,远低于阿霉素的耐药因子59,同时SCE处理后敏感/耐药细胞株的G₀/G₁期细胞比例均显著增加。另外,SCE给药后的DAPI染色表明,敏感/耐药细胞株均出现核浓缩、染色加深、核碎裂等一系列凋亡现象;流式双染结果表明SCE给药后敏感/耐药细胞株凋亡细胞比例均显著上升;Western blot结果显示SCE给药后敏感/耐药细胞株caspase...     

瑞香狼毒中的黄酮类化合物

目的：研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme根的化学成分。方法：采用硅胶柱层析分离,通过理化鉴定和波普分析确定是化学结构。结果;从瑞香狼毒根中分得4个黄酮类化合物,分别鉴定为新狼毒素甲（neochamaejas-minA,I)、表枇杷素（epiafzelechin,II)狼毒色原酮（chamaechromone,III)和芫花醇乙（wikstrolB,IV),结论;其中II和IV为首次从该植物中分得,同时还利用2DNMR修正了Niwa对化合物III的^13CNMR的归属。     

瑞香狼毒中的化学成分

目的 研究瑞香狼毒Stellera chamaejasme根中的化学成分。方法 利用各种色谱法分离化学成分，通过理化性质和波谱的分析鉴定结构。结果 从瑞香狼毒根中分离得到1个木脂素类化合物和3个双黄酮类化合物，分别鉴定为bursehernin(I)，狼毒宁B(chamaejasmeninB，Ⅱ)，异新狼毒素A(isoneochamaejasminA，Ⅲ)和( )-狼毒素[( )-chamaejasmin，Ⅳ]。结论 化合物Ⅲ和Ⅳ为新旋光异构体，化合物I为首次从狼毒属中分得。     

中药狼毒的本草考证——为"瑞香狼毒"正名

对中药狼毒进行了本草考证,认为瑞香狼毒为历代本草记载的正品狼毒;狼毒大戟和月腺大戟应与瑞香狼毒区别列为大戟狼毒(或闾茹和草闾茹)较合适。     

瑞香狼毒药效组分诱导人肝癌细胞凋亡及对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的影响

目的:探讨瑞香狼毒药效组分Zp1111对人肝癌细胞的增殖抑制与诱导凋亡作用及机制。方法:MTT法比较瑞香狼毒药效组分Zp1111对体外培养的人来源肝癌细胞与正常肝细胞LO2抑制作用,采用流式细胞术检测用药前后BEL-7402细胞凋亡的变化并分析Zp1111对DNA周期分布的影响,荧光共振能量转移法检测Zp1111对细胞周期依赖性蛋白激酶CDK2的抑制作用。结果:Zp1111对体外培养的肝癌细胞HepG2、BEL-7402、SMMC-7721均有较好的抑制作用,IC50分别为37.75μg/ml、28.60μg/ml、29.22μg/ml,而对正常肝细胞LO2抑制作用不明显,在25μg/ml及以下的浓度对LO2细胞反而有一定促进作用。Zp1111能诱导BEL-7402细胞发生凋亡,一定药物浓度范围内凋亡率具有药物浓度依赖关系;Zp1111还能调控体外培养的BEL-7402细胞周期分布,显著下调S期的细胞比例,并且对CDK2具有较好的抑制作用。结论:瑞香狼毒药效组分Zp1111具有一定诱导凋亡作用,可使BEL-7402细胞周期阻滞在G1期,其作用机制可能与抑制CDK2有关。     

瑞香狼毒提取物对人增生性瘢痕成纤维细胞抑制作用的研究

 目的观察瑞香狼毒提取物对人增生性瘢痕成纤维细胞的抑制作用,为烧伤后增生性瘢痕的治疗提供实验依据。方法体外培养烧伤后的人增生性瘢痕成纤维细胞,加入不同浓度的瑞香狼毒提取物,24h后观察细胞形态学,以乳酸脱氢酶(LDH)为指标观察细胞毒性,用MTT法检测其增殖活性。结果不同浓度的瑞香狼毒提取物均能改变成纤维细胞形态,抑制细胞增殖,浓度在500μg·mL^-1以下无明显的细胞毒作用。结论瑞香狼毒提取物对人增生性瘢痕成纤维细胞具有抑制作用,并呈剂量依赖关系,具有防治增生性瘢痕的应用前景。     

瑞香狼毒药效组分抑制小鼠皮下移植瘤H22的实验研究

目的:考察两种体内给药途径瑞香狼毒药效组分对小鼠肝癌移植瘤H22抑制作用强度与量效关系及对荷瘤小鼠免疫器官的影响。方法:建立小鼠皮下肝癌移植瘤H22实验动物模型,采用灌胃与腹腔注射两种给药途径,瑞香狼毒药效组分Zp1102、Zp1103、Zp1105、Zp1111、Zp1113在小于1/3-1/5LD50的剂量范围内,观测各受试药对移植瘤H22的抑制作用及其量效情况,并测算实验小鼠胸腺与脾脏指数。结果:瑞香狼毒各药效组分对小鼠皮下移植瘤H22具有较强的抑制作用,并呈一定剂量依赖关系,其中Zp1102、Zp1103经灌胃给药2g/kg(折合成生药量)时能达到35%左右的抑瘤率;Zp1105灌胃给药效果较差(16g/kg时仅能达到35%左右的抑瘤率),而腹腔注射给药法250mg/kg时就可以达到38%的抑瘤率;Zp1111在250mg/kg剂量时对皮下移植瘤H22的抑瘤率达48.35%。多数药效组分对荷瘤小鼠的体质量与免疫器官系数较溶剂对照组有所下降,但其影响比阳性对照药要小。结论:瑞香狼毒药效组分对小鼠皮下移植瘤H22具有较强的抑制作用,且用药安全性较好,其中Zp1111抑瘤作用最强;腹腔注射给药在较低剂量即可...     

基于网络药理学探析瑞香狼毒活性成分治疗晚期肝细胞癌的分子机制＊

目的 探析瑞香狼毒活性成分治疗晚期肝细胞癌的分子机制。方法 首先通过检索中药系统药理数据库和分析平台（TCMSP）筛选瑞香狼毒中的活性成分及其对应的靶蛋白分子,通过IPA软件数据库筛选晚期肝细胞癌相关分子。利用软件网络分析功能分别构建靶蛋白分子和晚期肝细胞癌相关分子的分子网络。通过软件比较功能,分析二者共同作用的生物学通路及作用位点。结果 从中药瑞香狼毒中筛选出4个活性成分,其对应的靶蛋白共18个,从IPA软件中选出晚期肝细胞癌相关基因共40个。前者主要的分子网络功能是与组织损伤、机体异常及心血管疾病相关,后者的分子网络功能主要与癌症、消化道疾病及肝脏疾病相关分子有关,且各自有不同的信号通路富集。对比前5位共有的信号转导通路,发现PI3K/AKT信号通路是共有的重要信号通路之一。PI3KCG、HSP90、PTGS2是瑞香狼毒活性靶蛋白中调控PI3K/AKT信号通路的作用分子。结论 本研究推测瑞香狼毒可能通过PI3KCG、HSP90、PTGS2调控PI3K/AKT信号通路,来抑制肿瘤血管生成,发挥抗肿瘤作用。     

槐花总黄酮提取物HPLC指纹图谱研究

目的:建立槐花总黄酮提取物的高效液相色谱指纹图谱,为科学评价及有效控制其质量提供可靠方法。方法:采用高效液相色谱法,以DIKMA C18(5μm,4.6mm×250mm)为色谱柱,甲醇-1%冰醋酸为流动相梯度洗脱,流速1.0mL.min-1,检测波长257nm,分析时间70min。测定10批样品色谱图,建立指纹图谱。结果:确定了17个共有峰,其中7号、12号峰分别为芦丁、槲皮素。10批样品相似度均大于0.90。结论:建立的HPLC指纹图谱分析方法可用于槐花总黄酮的质量评价。     

马齿苋甜菜红素抗肿瘤实验研究

目的 观察马齿苋甜菜红素联合环磷酰胺(CTX)的抗肿瘤作用.方法 将接种S_(180)瘤细胞的小鼠分为荷瘤对照组、CTX组、马齿苋甜菜红素(高、中、低剂量)+CTX组.给药10 d,进行抑瘤率计算,以及外周血常规、骨髓有核细胞计数、脾脏、胸腺指数、免疫球蛋白、肝肾功能等的检测.结果 与荷瘤对照组相比,CTX组肿瘤生长明显受到抑制.马齿苋甜菜红素低、中、高剂量联合CTX各组抑瘤率明显高于CTX组的抑瘤率.与荷瘤对照组相比,单一CTX处理组脾脏和胸腺指数、IgA、IgG、IgM水平明显降低,WBC、PLT和骨髓有核细胞计数降低,ALT、BUN升高.不同剂量的马齿苋甜菜红素联合CTX处理,可以不同程度地改善脾脏和胸腺指数、IgG、IgM等免疫水平指标,提高WBC、PLT和骨髓有核细胞的数量,降低ALT和BUN.结论 马齿苋甜菜红素对小鼠S_(180)肉瘤有抑制作用,对化疗药物CTX抗S_(180)小鼠具有增效减毒的作用.     

马缨丹根水煮醇提部位镇痛镇静作用的研究

目的　研究马缨丹根水煮醇提部位的镇痛镇静作用。方法　用热板法和扭体法观察该药的镇痛作用。结果　马缨丹根水煮醇提部位对小鼠热致痛和醋酸致痛具有明显的镇痛镇静作用。结论　马缨丹根水煮醇提部位具有较好的镇痛镇静作用