金乡县2005～2008年动物粪便O_(157)∶H7大肠杆菌带菌监测情况分析

目的为进一步摸清O157∶H7大肠杆菌在本地区动物携带情况,于2005～2008年采集金乡县部分农家动物粪便共计1654份。方法用免疫磁珠富集方法捕获O157∶H7,接种于山梨醇—麦康凯培养基,可疑菌落转种科玛嘉大肠杆菌O157∶H7显色培养基之后进行生化和血清学鉴定。结果4年从牛、鸡、猪、羊等动物粪便中共检出O157∶H7大肠杆菌59株,检出率为3.57%,其中牛携带率最高为8.02%,结论提示本地区有肠出血性大肠杆菌O157:H7感染的可能,应加强动物管理和疫情监测,防止疫情扩散蔓延。     

天津市蓟县大肠杆菌O157；H7带菌动物监测及防治

为了解天津市蓟县动物大肠杆菌O157：H7的带菌情况，做好大肠杆菌O157：H7感染的预防与控制工作，作者于2001年8月在全县范围开展易携带病原菌的猪、牛、羊、鸡等家畜家禽的监测工作，共采集动物粪便标本403份，用增菌培养法从3份羊粪标本中检出5株大肠杆菌O157；H7（经流研所PCR鉴定），检出率为0.74%。本次是天津市首次从羊粪中检出大肠杆菌O157：H7，证实羊是天津市带菌动物之一。今后开展大肠杆菌O157：H7防治工作的关键在于加强腹泻病人及带菌动物监测，管好传染源，做好饮食饮水卫生，把住“病从口入关”。     

金乡县7年动物粪便O157：H7大肠杆菌带菌监测情况分析

目的 为了解O157:H7大肠杆菌在本地区动物携带情况,探索疾病发生的原因,制定防治对策.方法 于2000-2002年和2005～2008年采集金乡县部分农家动物粪便,用免疫磁珠富集方法捕获O157:H7,接种于山梨醇一麦康凯培养基,可凝菌落转种科玛嘉大肠杆菌O157:H7显色培养基之后进行生化和血清学鉴定.结果 7年共检测牛、鸡、猪、羊等动物粪便3114份,检出O157:H7大肠杆菌124株,检出率为3.98%,其中牛携带率最高为6.52%.结论 本地区有肠出血性大肠杆菌O157:H7感染的可能,应加强动物管理和疫情监测,防止疫情扩散蔓延.     

肠出血性大肠杆菌O157：H7流行病学调查

目的 了解芜湖县动物宿主携带肠出血性大肠杆菌P157：H7的情况，为防治工作提供依据。方法选择芜湖县境内家畜粪便、水样以及各类养殖场饲料等标本821份，以免疫磁珠法和血清学方法检测EHEC0157：H7。结果821份标本检出1株EHEC O157：H7，检出率为0．12％。结论芜湖县部分动物携带EHEC O157：H7。     

江苏省建湖地区肠出血性大肠杆菌O157：H7监测分析

目的 了解建湖地区腹泻患者肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染情况,家禽、家畜O157∶H7带菌情况,水源水中O157∶H7污染情况. 方法 在2008年5月-9月采集腹泻患者和家禽、家畜的粪便以及水源水、肉制品、苍蝇等标本计836份,应用免疫磁珠浓集、山梨醇麦康凯琼脂(SMAC)分离、生化和血清学反应进行鉴定.结果 共检出肠出血性大肠杆菌O157∶H7 阳性标本17份,其中腹泻患者阳性率为1.15%,4种动物粪便、肉制品均检出阳性标本,但水、苍蝇标本中均未检出阳性.菌株对青霉素耐药性最高,达100%,对其他受试抗生素均敏感.结论 该地区腹泻患者和家禽、家畜中存在肠出血性大肠杆菌O157∶H7感染,且具潜在的流行性危险.     

济宁市E．coli O157宿主动物粪便带菌监测情况和分析

为查明O157大肠杆菌(E．coli O157)在本地区动物携带情况，2000—2002年采集部分农家动物粪便，用免疫磁株富集方法捕获0157：H7，接种于山梨醇一麦康凯培养基，可疑菌落转种科玛嘉E．coli O157显色培养基之后进行生化和血清学鉴定。结果显示，3年共检出猪、牛、鸡、羊动物粪便1460份，检出E．coli O15765株(O157：H726株)，检出率为4．45％，其中猪携带率最高为7．35％，提示本地区有肠出血性大肠杆菌O157：H7感染的可能．．应加强动物管理和疫情监测，防止疫情扩散蔓延。     

应用插入序列PCR进行大肠杆菌O157:H7基因分型的研究

目的对不同地区、不同宿主大肠杆菌O157：H7分离株进行基因分型。方法应用插入序列PCR方法，对反应体系中dNTPs、引物以及镁离子浓度等反应条件进行优化。扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳检测和分析。结果14株不同来源O157：H7分离株根据插入序列PCR图谱可分为A、B、C、D四个基因型。不同地区O157：H7菌株存在不同的基因型；同一地区、毒力基因谱相同的O157：H7菌株基因型也不相同；不同宿主O157：H7菌株也存在相同的基因型。结论插入序列PCR技术用于大肠杆菌O157：H7的基因分型，简便、快速、敏感，对大肠杆菌O157：H7的分子流行病学研究具有重要价值。     

改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157：H7

目的建立改良分子信标实时PCR快速检测大肠杆菌O157：H7的快速方法。方法根据GenBank公布O157：H7的rfbE保守序列，设计一对引物和改良分子信标探针，用FAM荧光剂标记探针的5’端，建立改良分子信标实时PCR检测O157：H7的反应体系，应用于食物中毒快速诊断和食品微生物检测。结果共检测11种细菌。只有大肠杆菌O157：H7有荧光信号，其余10种全无荧光信号，且与其他细菌无交叉反应，DNA灵敏度为64fg，菌液灵敏度为59cfu／ml或2cfu／PCR反应体系。应用改良分子信标实时PCR反应体系检测10株O157：H7均出现特异的荧光信号，无干扰。对89份食品样品进行检测，5份O157：H7实时PCR阳性，其余样品为阴性，检测仅需2h。5份阳性样本，经传统方法培养，有3份检出大肠杆菌O157：H7。结论改良分子信标实时PCR检测体系快速、灵敏度高，特异性强，可用于大肠杆菌O157：H7食物中毒的快速诊断和食品微生物检测，为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

肠出血性大肠杆菌O157：H7流行特征和控制对策研究

肠出血性大肠杆菌O157：H7(以下简称O157：H7)是一种新发现的病原菌。1982年首次在美国引起出血性肠炎暴发，其后世界上许多发达国家和一部分发展中国家发生了O157：H7感染的疫情，特别是1996年在日本发生的O157：H7暴发，9000多名儿童感染，引起全世界的广泛关注。O157：H7感染已成为世界性的公共卫生问题。1986年我国首次在江苏省徐州地区从腹泻病患者的粪便标本中分离到O157：H7，到1998年之前我国已经在14个省市分离到该菌，     

应用多重引物PCR方法检测O157：H7毒力基因的初步研究

目的 研究一种快速、特异的检测大肠杆菌O157：H7毒力的复合RSR方法。方法 选用针对大肠杆菌O157：H7志贺样毒素I、Ⅱ的两对引物，在同一扩增体系中进行PCR，检测不同来源的大肠杆菌O157：H7及E．coli ATEEE5922株。结果 EHEC O157：H7 933W株扩增出两条志贺样毒素基因产物，而E．coli ATOC25922株和EHEC O157：H7 97-l-68的扩增结果均为阴性。结论 应用多重引物RCR方法检测大肠杆菌O157：H7毒力基因，简便、快速、特异、敏感，对流行病学调查分析、制定预防和控制对策有重要的参考价值。     

四川省在奶牛中检出O157：H7大肠杆菌

O157：H7大肠杆菌是致泻大肠杆菌中的一个重要血清型，被世界卫生组织定为新的食源性疾病病原菌(WHO，1997)。90年代，欧、美及日本等国多次暴发由该菌引起的出血性肠炎。近年来，我国也加强了对该菌的研究和监测工作。卫生部和中国预防医学科学院已多次部署在全国加强O157：H7大肠杆菌分布调查，食品及环境监测，临床检测与诊断等工作。     

O157：H7致病性与临床特征

1 致病性：出血性大肠杆菌(EHEC)O157：H7致病因子,目前一般认为有菌毛,志贺样毒素(SLT)和溶血素等,其中志贺样毒素是最重要的致病因子,它的存在与否和产量的多少决定O157：H7的致病性的强弱。O157：H7的致病主要由两个过程构成,粘附和产毒。     

肠出血性大肠杆菌O157：H7对抗生素敏感性的研究

目的 了解和掌握O157：H7大肠杆菌对抗生素的敏感性,以便选择防治O157：H7大肠杆菌感染的药物,方法 按照NCCLS药敏试验法,选用MH平板,参照改良K－B法药敏试验判断标准进行结果判定。结果 对选择的29种药物,其中21种为敏感,4种为耐药。结论 肠出血性大肠杆菌O157：H7对大多数抗生素敏感。     

广东地区家畜、家禽肠道大肠杆菌药物敏感性和O157:H7分离状况

目的：了解O157大肠杆菌在健康人、家畜和家禽中的存在情况和粪便中分离到的大肠杆菌的药物敏感性，为病原大肠杆菌耐药率增高寻找依据。方法：2000～2001年选健康成人、小孩和健康家畜、禽粪便标本620份，一部分直接划种于选择培养基，37℃培养24h；另一部分用EC肉汤培养基，37℃培养18h，以进行增菌，然后转种于CT-SMAC平板，37℃培养24h。然后进行血清学鉴定以判断是否为O157大肠杆菌。用低片法测定分离到的620株大肠杆菌对氨苄西林(AMP)、氨苄西林／舒巴坦(AMS)、庆大霉素(GEN)、环丙沙星(CIP)和氧氟沙星(OFX)的药物敏感性；用琼脂平皿二倍稀释法测定不同来源标本分离的部分大肠杆菌对CIP和OFx的MIC值。结果：在健康猪、牛和鸡的粪便中均找到了O157大肠杆菌，检出率在1．5％左右，健康成人和小孩粪便中均未找到O157大肠杆菌；健康成人、小孩、家畜和家禽粪便中分离的大肠杆菌，β-内酰胺酶产生率较低，在6％～12％之间；分离的大肠杆菌对氨苄西林、氨苄西林／舒巴坦和庆大霉素的耐药率较低，在10％以下，且人和家畜、禽粪便分离的大肠杆菌的耐药率差别不大；从人粪便分离的大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药率低，而从家畜、禽粪便分离的大肠杆菌的耐药率高。结论：在广东，O157大肠杆菌亦存在于部分家畜、禽肠道中，有造成食物污染的危险；人类和动物肠道中正常菌群的大肠杆菌B一内酰胺酶产生率低，对常用的抗生素亦有耐药的情况，但耐药率低；对氟喹诺酮类药物，人和家畜、禽粪便分离的大肠杆菌的耐药率差别较大。     

检出山梨醇阳性肠出血性大肠杆菌O157:H7一例及特征分析

目的:肠出血性大肠杆菌O157:H7(entro-hemorrhaguc E.Coli O157:H7 or EHEC O157:H7)是具有强致病力的条件致病菌,该菌可通过污染的食物、水、以及直接接触感染的人或动物而感染。加强对该菌的检验,对预防与控制由该菌所致的感染流行十分重要。方法:本文参照中华人民共和国出入境检验检疫行业标准SN/T 0973-2000方法进行检验。结果:从进口冻猪肚中检出一例EHEC O157:H7,并用PCR方法检测VERO毒素呈阳性。结论:该菌株的生化特征与相关文献报道的EHEC O157:H7生化特征不同的是山梨醇阳性,棉籽糖阴性,检验过程中应慎重鉴别。     

金乡县2000～2002年动物粪便O_(157):H_7大肠杆菌带菌监测情况

为查明 O1 57:H7大肠杆菌在本地区动物携带情况 ,2 0 0 0～ 2 0 0 2年采集金乡县部分农家动物粪便 ,用免疫磁珠富集方法捕获 O1 57:H7,接种于山梨醇 -麦康凯培养基 ,可疑菌落转种科玛嘉大肠杆菌 O1 57显色培养基之后进行生化和血清学鉴定。结果显示 ,3年共检测牛、鸡、猪、羊动物粪便 14 6 0份 ,检出 O1 57大肠杆菌 6 5株 ,检出率为 4 .4 5 % ,其中猪携带率最高为 7.35 % ,提示本地区有肠出血性大肠杆菌 O1 57:H7感染的可能 ,应加强动物管理和疫情监测 ,防止疫情扩散蔓延。     

实时荧光PCR同时检测金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157：H7

目的建立改良分子信标一双重实时荧光PCR同时检测金黄色葡萄球菌和大肠杆菌0157：H7,应用于细菌性食物中毒的快速诊断。方法根据GeneBank公布的金黄色葡萄球菌nuc基因序列和大肠杆菌O157：H7rfbE基因序列,设计引物和改良分子信标探针,建立改良分子信标一双重实时PCR检测体系。结果双重荧光PCR反应体系检测151株金黄色葡萄球菌和27株大肠杆菌O157：H7,均出现特异的荧光信号,两种细菌检测互不干扰。对8762份大便、食品等标本进行检测,315份标本金黄色葡萄球菌实时荧光PCR阳性,其中286份金黄色葡萄球菌培养阳性;31份标本大肠杆菌O157：H7实时荧光PCR阳性,其中26份大肠杆菌O157：H7培养阳性。从样品处理到检测结果仅需要时间2h～1d。结论改良分子信标-多重实时荧光PCR检测体系快速、灵敏度高,特异性强,可用于金黄色葡萄球菌和大肠杆菌O157：H7食物中毒的快速诊断和肠道传染病的初筛,为食源性疾病的分子流行病学调查提供新的检测手段。     

2003—2012年中国肠出血性大肠杆菌O157：H7病原微生物学文献计量学分析

目的：从文献计量学的角度分析2003-2012年间国内肠出血性大肠杆菌O157：H7的病原微生物学研究状况。方法：利用中国科学引文数据库为统计源,检索2003-2012年国内肠出血性大肠杆菌O157：H7病原微生物学工作的研究文献,利用文献计量学方法进行统计分析。结果：在中国科学引文数据库中共收集关于肠出血性大肠杆菌O157：H7病原微生物学研究工作相关文献279篇,其年度间变化呈逐渐上升趋势,《中华微生物学和免疫学杂志》、《中国人兽共患病学报》是刊载此类文献数量较多的期刊,张雪寒和宋宏新是报道相关文献最多的专家,《2001年中国食源性致病菌及其耐药性主动监测研究》为单篇被引频次最高的文献,所有研究中基因技术研究最多,肠出血性大肠杆菌O157：H7的免疫学研究也占有较大比例。结论：肠出血性大肠杆菌O157：H7基因技术和免疫学研究工作是相关科研工作者研究的重点。     

天津市首次在羊粪便中检出O157:H7大肠杆菌

近年来 ,关于 O15 7:H7大肠杆菌引起的感染性腹泻病例很多 ,但在天津市从羊粪便中检出 O15 7:H7大肠杆菌还是首次。为了预防和控制 O15 7:H7大肠杆菌的传播和流行 ,我站共采集牛、羊、猪、鸡的粪便 4 0 3份。采集的粪便共涉及到蓟县 13个乡、18个村、5个养猪厂、1个养鸡厂 ,188户散养业。采集牛粪便 118份 ,羊粪便 6 0份 ,猪粪便 15 2份 ,鸡粪便 72份 ,蜣螂一只。在蓟县山区小港乡古强峪村采集羊粪便 5份 ,其中三份粪便检出 5株0 15 7:H7大肠杆菌。菌落形态、O15 7:H7单克隆抗血清凝集 ,生化反应符合 O15 7:H7生物学特性。PCR2 0 ul体系反应 ,不同引物的结果为 L PS O15 7为 5 9℃ ,H7为 6 2℃ ,hly为 5 0℃ ,eae为 6 1℃ ,VT2 为 5 5℃。     

江苏省徐州市分离的大肠杆菌O157:H7菌株携带志贺毒素2型别的变化

目的 研究我国分离的大肠杆菌O157：H7菌株的志贺毒素型别的变化。方法使用针对志贺毒素2及其变种的引物对进行PCR检测、细菌染色体DNA的PstⅠ酶切后的Southern印迹实验和PCR产物的HaeⅢ、RasⅠ酶切分析,以及：PCR产物克隆后的序列分析方法以及致病性大质粒的PstⅠ酶切分析。结果1999年分离自徐州市的人的5株菌均携带slt1、slt2,而2000年从江苏省徐州市患者分离的10株和蜣螂标本分离的4株共计14株大肠杆菌O157：H7菌株仅携带slt2vha毒素基因,其致病性质粒的限制性酶切图谱与1999年的菌株相比也发生了改变。结论鉴于江苏省徐州市1999年的分离的5菌株全部携带slt1和slt2基因,结果提示该地的优势菌型发生了改变,可能当地大肠杆菌O157：H7感染的流行病学特点有关。针对slt2变异基因而设计的引物及其以此为基础进行的限制性片段长度多态性分析的方法对于研究O157：H7菌株的志贺毒素型别的变化能够满足特异性及灵敏性的要求。