孕酮对幼年大鼠感染性脑水肿水通道蛋白4表达的影响

目的 观察内毒素(LPS)致幼年大鼠感染性脑水肿后,腹腔注射孕酮(Prog)对水通道蛋白4(AQP4)表达的影响.方法 将90只幼年大鼠随机分为对照组(C,n=10),内毒素组(LPS,n=40)和内毒素+孕酮组(LPS+Prog,n=40).建立LPS致大鼠感染性脑水肿模型后1 h,LPS+Prog组和LPS组分别腹腔注射孕酮和生理盐水,以后每6小时注射一次.手术后6、12、24和48 h处死动物,分别行脑组织含水量的测定,用免疫组化和RT-PCR检测脑组织内AQP4表达水平.结果 LPS组脑组织含水量明显高于C组和LPS+Prog组(P<0.01).在LPS注射6 h时,幼鼠脑组织 AQP4表达明显增加,12 h达高峰.LPS+Prog组在LPS注射后12 h时,脑组织中AQP4在蛋白水平和mRNA水平的表达均低于LPS组(P<0.01).结论 孕酮可能在转录和翻译水平下调AQP4的表达,从而抑制LPS诱导的幼年大鼠感染性脑水肿的发生发展.     

大鼠脑出血周边组织MMP-2、MMP-9的动态表达及其与脑水肿关系的研究

目的:研究大鼠脑出血周边组织MMP-2、MMP-9的动态表达及其与脑水肿形成的关系。方法:1Wistar大鼠60只,随机分为对照组和脑出血组,均分为(6h、24h、48h、72h、120h)5个时间点。2测定出血周边脑组织含水量、EB含量以及MMP-2/9蛋白表达。结果:1脑出血周边组织EB含量在24h迅速增高,48h达到高峰,显著高于对照组。2大鼠脑出血6h后含水量明显增高,72h达高峰,在6～120h内脑组织含水量与EB含量呈正相关。3对照组有极少量MMP-2阳性细胞表达;出血组中6h达高峰,各时点均显著高于对照组。4MMP-9在对照组极少量表达;出血组48h达高峰,在6～120h其表达与脑含水量和EB含量均呈正相关。结论:大鼠脑出血后MMP-2/9的释放与激活,是脑出血后早中期脑水肿形成的主要因素,导致BBB通透性增加而形成血管源性脑水肿。     

MMP-9和咬合蛋白在弥漫性脑损伤大鼠皮层的表达变化及与脑水肿的关系

目的：观察弥漫性脑损伤大鼠脑水肿及损伤区皮层MMP-9和咬合蛋白表达的变化。方法成年健康SD雄性大鼠160只,按随机数字表法分为对照组（ n ＝60）和模型组（ n ＝100）。应用Marmarou’s法建立弥漫性脑损伤大鼠模型。2组分别于术后3、12、24、72、144 h行干湿重法检测2组大鼠脑组织含水量变化,行免疫组化和Western blot检测损伤区周围皮层MMP-9和咬合蛋白表达水平。对各结果进行相关性分析。结果与对照组比较,模型组各时间点大鼠脑组织含水量明显增加,脑组织损伤区周围皮层MMP-9表达明显增高（ P ＜0．05）,咬合蛋白表达明显降低（ P ＜0．05）。脑组织含水量变化与MMP-9表达变化呈正相关（ P ＜0．05）,脑组织含水量变化与咬合蛋白表达变化呈负相关（ P ＜0．05）,MMP-9蛋白表达变化与咬合蛋白表达变化呈负相关（ P ＜0．05）。结论弥漫性脑损伤发生后损伤区皮层MMP-9蛋白表达明显增加,咬合蛋白表达明显降低,脑水肿形成。 MMP-9表达的增加,导致了咬合蛋白破坏,脑水肿形成。     

高血压性脑出血周围脑组织超微结构及脑水肿发生机制研究

目的:高血压性脑出血后周围脑组织超微结构变化,基质金属蛋白酶2,9(MMP-2,MMP-9)表达在高血压性脑出血后(早期)脑水肿发生中的作用。方法:应用免疫组织化学方法检测高血压性脑出血患者出血后6h,12h,24h,48h,72h,120h,1W,2W血肿周围脑组织中MMP-2、MMP-9的表达,透射电镜下观察,血肿周围脑组织超微结构变化。结果:研究表明在高血压性脑出血患者血肿周围有脑水肿发生,正常对照组中未发现明显的MMP-2,MMP-9阳性表达,而在高血压性脑出血组出血24 h内MMP-2及MMP-9则见明显表达(P<0.01)。结论:MMP-2及MMP-9在脑出血患者血肿周围脑组织的表达增高与高血压性脑出血后脑水肿的发生具有密切的关系。     

藻蓝蛋白对大鼠脑缺血再灌注后MMP-2和MMP-9表达的影响

目的探讨藻蓝蛋白对大鼠局灶性脑缺血再灌注后基质金属蛋白酶-2和9（MMP-2和MMP-9）表达的影响。方法应用线栓法建立大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌注（MCAO／R）模型，应用藻蓝蛋白进行干预，干湿重法测定脑组织含水量（BWC），比色法测定脑组织伊文斯蓝（EB）含量，免疫组化技术检测脑组织MMP-2和MMP-9的表达。结果脑缺血再灌注6h BWC和EB含量增加，至2d达高峰，应用藻蓝蛋白后均明显减少。对照组脑缺血再灌注24h脑组织MMP-2阳性细胞即开始出现，3～7d阳性细胞数达高峰，14d仍高于假手术组。藻蓝蛋白组MMP-2阳性细胞的变化趋势与对照组相似，但同一时间点明显低于对照组。对照组缺血侧脑组织MMP-9阳性细胞于再灌注后6h开始出现，12h明显增高，至2d达高峰，3d开始减少，至14d时恢复至假手术组水平。藻蓝蛋白组MMP-9阳性细胞变化趋势与对照组相似，同一时间点相比明显低于对照组。结论藻蓝蛋白可能通过下调MMP-2和MMP-9的表达而减轻脑水肿，对脑缺血再灌注损伤具有保护作用。     

卡托普利对脑缺血再灌注损伤大鼠血脑屏障通透性及MMP-9表达的影响

目的观察血管紧张素转化酶抑制药卡托普利对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后血脑屏障通透性和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响,并探讨其机制。方法采用血管内栓线阻断法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型,于脑缺血2h、再灌注24h后测定脑组织含水量、伊文斯蓝(EB)含量,放射免疫方法测定血浆中血管紧张素Ⅱ的含量,免疫组织化学方法测定MMP-9表达。结果研究发现,脑缺血2h、再灌注24h,缺血再灌组大鼠脑组织含水量及EB含量明显增加,MMP-9呈现高表达。而卡托普利组脑组织含水量、EB含量及MMP-9表达明显低于脑缺血再灌注组(P<0.05)。结论卡托普利通过减少血管紧张素Ⅱ的生成从而降低脑缺血再灌注大鼠基质金属蛋白酶-9的活性及血脑屏障通透性,发挥对脑缺血再灌注损伤的保护作用。     

大鼠脑出血后MMP-2、MMP-9的表达与神经元凋亡关系的实验研究

目的 探讨脑出血后基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的表达和血肿周围神经细胞凋亡发生情况之间的关系,以明确MMP-2、MMP-9对脑出血后神经细胞发生凋亡的贡献作用.方法 80只雄性Wistar大鼠按照出血后的时闻分成对照组和出血后6 h、12 h、1 d、2 d、3 d、6 d和10 d组,分别应用免疫组化和流式细胞仪方法检测血肿周围脑组织MMP-2、MMP-9的表达和神经细胞凋亡率,同时检测脑组织的含水量并进行脑出血动物的神经缺损评分,并统计这些指标的相关性.结果 MMP-9,细胞凋亡率,神经功能缺损评分和脑组织含水量的动态变化均一致,脑出血后6 h开始升高,2 d达到高蜂,10 d与对照组差异仍有统计学意义(P<0.05).而MMP-2则是脑出血后1 d开始升高,6 d达到高峰,10 d后开始下降,与细胞凋亡率,神经功能缺损评分和脑组织含水量无明显相关性.结论 神经细胞凋亡和脑组织含水量直接与神经功能缺损相关,而MMP-9的高表达则促进神经细胞的凋亡,脑组织含水量的增加.     

AG490对大鼠脑液压冲击伤后脑水肿及水通道蛋白4表达的影响

目的研究AG490对大鼠脑液压冲击伤后继发性脑水肿及水通道蛋白4(AQP-4)表达的影响。方法取健康成年雄性SD大鼠104只,按照随机数字表法分为假手术组8只,对照组48只,AG490组48只,对照组及AG490组随机各分为6个亚组分别对应伤后各时间点3h、6h、12h、24h、48h、72h。对照组及AG490组给予液压冲击打击,制作大脑损伤模型;假手术组仅给予颅骨钻孔术不给予液压冲击。AG490组于伤后1小时按照5mg/kg给予腹腔注射AG490,对照组接受等量生理盐水。干湿重法测定脑组织含水量,免疫组织化学法测定脑组织AQP-4蛋白的表达,HE染色后光镜下观察细胞形态学改变。结果 (1)和假手术组比,对照组及AG490组脑组织含水量均升高(P<0.05)。AG490组各时间段均比对照组脑组织含水量少(P<0.05)。(2)AQP-4表达阳性细胞镜下呈棕黄色空泡状。AG490组各时间亚组AQP-4表达水平均较对照组减低(P<0.05)。(3)光镜下见AG490组各时间点均较对照组病理损伤轻。结论脑损伤后急性期应用AG490可以明显减轻创伤后脑水肿,其作用可能与抑制AQP-4在损伤脑组织中的表达有关。     

大鼠脑缺血/再灌注后早期AQP4的动态表达及其与脑水肿关系的研究

目的研究局灶性脑缺血/再灌注损伤大鼠脑组织病理变化及脑组织水通道蛋白4(AQP4)和相关蛋白表达变化,以探索AQP4与脑水肿的关系。方法♂成年SD大鼠150只,体质量250~300 g,随机分为假手术(Sham)组和脑缺血/再灌注损伤模型(I/R)组,其中I/R组又分为I/R-6 h、I/R-12 h、I/R-24 h、I/R-48 h 4个时间点组别。采用线栓法阻塞大脑中动脉建立局灶性脑缺血/再灌注模型,于相应时间点进行神经症状评分,EB染色检测脑组织通透性,TTC染色观察脑梗死体积,干湿重法检测脑含水量的变化,免疫组化(IHC)检测大鼠脑缺血/再灌注后不同时间点梗死灶周围AQP4的表达,Western blot及RT-PCR检测AQP4及相关蛋白表达情况。结果与Sham组相比较,随着再灌注时间增加,I/R模型组大鼠神经功能评分、脑梗死体积、脑组织通透性,脑组织含水量均持续增加,IHC显示AQP4的表达逐渐上调,分布愈加广泛;Western blot及RT-PCR结果验证了AQP4表达水平的增高趋势,同时对相关蛋白表达检测显示,MMP-9表达增高,Occludin及JAM-1表达显示降低趋势,在I/R-48h模型组表达差异性均最明显(均P<0.01 vs Sham)。结论脑缺血/再灌注后,伴随脑组织损伤的加剧,AQP4与MMP-9表达共同被激活,导致Occludin及JAM-1等TJPs蛋白降解增加,共同参与了脑水肿的形成。     

己美舒利对大鼠脑损伤后脑水肿及髓过氧化物酶、金属蛋白酶-2的影响

目的阐明环氧化酶-2（cox-2）抑制剂尼美舒利对大鼠创伤性脑损伤的影响与机制。方法健康雄性SD大鼠40只,随机分为4组：对照组、尼美舒利组【6mg／（kg·d）1、创伤组、创伤＋尼美舒利组f6mg／（kg·d）1。利用300g,／m的自由落体重力打击装置创建SD大鼠创伤性脑损伤模型,创伤后24h进行神经功能评分,随后处死动物并断头取脑组织。脑水肿及血脑屏障通透性分别以干湿重称重法及伊文思蓝染色测定,测量脑组织中髓过氧化物酶（MPO）及金属蛋白酶-2（MMP-2）的含量以及病理组织形态学观察。结果创伤组脑组织含水量及EB含量比对照组明显增加（P〈0．05）,创伤＋尼美舒利组脑组织含水量及EB含量比创伤组明显减少（P〈0．01）。创伤＋尼美舒利组脑组织MMP-2、MPO表达比创伤组减少,MPO蛋白表达与MMP-2蛋白表达呈正相关。结论在创伤性脑损伤大鼠模型中,尼美舒利通过保持血脑屏障完整性,抑制MPO、MMP-2的过度表达（可能通过其抗炎能力）而发挥其神经保护作用。     

司来吉兰治疗血管源性脑水肿的实验研究

目的观察司来吉兰对大鼠血管源性脑水肿(VBE)的治疗作用。方法60只Wistar大鼠随机分正常、脑水肿、脑水肿甘露醇、脑水肿司来吉兰共4组。用腹腔注射苯肾上腺素的方法制成VBE模型,然后分别股静脉注射甘露醇、腹腔注射司来吉兰到大鼠腹腔,通过远红外线水分分析仪分别测定各组脑灰、白质水分含量百分比。用Evan's blue(EB)测定血脑屏障(BBB)的通透性。结果司来吉兰组同甘露醇组相比对降低BBB通透性及大脑白质水分含量均有显著效果(P<0.01),对灰质的脱水作用无显著性差异(P>0.05)。甘露醇组也可降低灰质、白质水肿,但对灰、白质无特异性差异,降低BBB通透性差。结论VBE中BBB的通透性改变与单胺氧化酶活性有关,单胺氧化酶抑制剂司来吉兰对VBE尤其对脑白质水肿有选择性治疗作用。     

巴曲酶对实验性脑出血大鼠的神经保护作用

本文旨在观察巴曲酶对大鼠脑出血后神经损伤是否具有保护作用及其可能作用机制。将大鼠分为假 手术组、模型组、巴曲酶 (4、8及16 BU•kg ^-1) 组及尼莫地平阳性对照组, 在脑立体定向仪上, 根据大鼠脑立体定位图谱定位脑部尾状核后, 用微量注射器向尾状核注射VII型胶原酶, 建立大鼠脑出血模型。术后进行大鼠神经行为学评分及电镜下观察脑组织病理形态学改变; 干湿重法测定脑含水量; 试剂盒测定超氧化物歧化酶 (SOD) 活力和丙二醛 (MDA) 含量; 荧光分光光度计法测定神经细胞内游离钙离子浓度（[Ca2⁺]_i）。结果表明, 巴曲酶可改善脑出血大鼠的神经行为学评分,减轻其脑组织细胞水肿和出血程度;使脑含水量、MDA含量及[Ca²⁺]_i下降,SOD活力升高,提示巴曲酶对脑出血后神经损伤可能存在保护作用,其作用机制可能与减轻脑水肿、提高SOD活力和降低MDA含量及抑制钙超载有关。     

黄体酮对颅脑损伤大鼠脑组织含水量及水通道蛋白-4表达的影响

目的:探讨黄体酮对脑外伤模型大鼠脑组织含水量、水通道蛋白-4(AQP-4)表达的影响机制.方法:SD雄性大鼠165只,随机分为假手术组(55只)、模型组(55只)和黄体酮组(55只),用Freeney法造成大鼠脑挫裂伤模型,干湿重法测定脑组织含水量,并采用免疫组化方法检测脑组织AQP-4蛋白的表达.结果:模型组大鼠伤后各时间点伤侧脑组织含水量、伤灶周围AQP-4蛋白表达水平均明显高于假手术组(均P<0.05);黄体酮治疗组各时间点脑组织含水量、AQP-4表达水平均较模型组降低(P<0.05).结论:黄体酮可以明显减轻创伤后脑水肿,其作用可能与抑制AQP-4在损伤脑组织中的表达有关.     

大鼠脑出血后血肿周围脑水肿与 Mip1 表达的关系

摘要： 目的 通过分析大鼠脑出血（ICH）后血肿周围脑组织中 Mip1 的表达, 探索 Mip1 对脑水肿的保护作用。 方法 90 只雄性 SD 大鼠随机分为假手术组（n=15）和 ICH 组（n=75）, ICH 组再根据造模后脑出血时间均分为 ICH 6 h、 12 h、 1 d、 3 d 和 7 d 组。应用自体股动脉血液建立大鼠尾状核脑出血模型。于上述时点断头处死大鼠, 取血肿 周围脑组织。采用 HE 染色观察血肿周围脑组织病理形态学变化, 干/湿质量法测定脑含水量 （BWC）, 免疫组化法检 测 Mip1 蛋白的表达。结果 脑出血后血肿周围区域神经元胞体明显变小, 胞浆淡染, 胞质内尼氏体明显减少, 细胞 周围出现水肿裂隙, 而假手术组脑组织神经细胞形态未见明显变化。脑出血 6 h 后脑含水量逐渐增高, 在 3 d 时达 高峰 （均 P＜0.05）, 7 d 时大致恢复正常 （P＞0.05）。大鼠脑出血后脑组织血肿周围有大量胞质或胞核呈棕色的 Mip1 阳性细胞分布, 脑出血 6 h 后 Mip1 蛋白表达水平较假手术组明显升高（均 P＜0.05）, 至 7 d 时大致恢复正常（P＞ 0.05）。结论 脑出血后血肿周围脑组织中 Mip1 高表达, 并与脑水肿进展趋势基本一致, 提示活化的 Mip1 可能参与 出血性脑水肿的病理过程。     

吗啡对大鼠脑缺血再灌注后脑含水量及S100β的影响

目的：探讨吗啡预处理对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑含水量及脑脊液S100β的影响。方法：Pusinelli方法建立四动脉阻断全脑缺血模型：成年雄性大鼠36只,随机分为假手术组（n=12）、脑缺血再灌注组（n=12）、吗啡预处理组（n=12）。脑缺血8min,再灌注48h后,每组取6只大鼠断头取脑制作石蜡切片,HE染色观察海马区组织病理学改变;另取剩余6只大鼠于枕骨大孔抽脑脊液后立即断头取脑,干湿称重法测量脑含水量,酶联免疫吸附法检测脑脊液中S100β蛋白含量。结果：吗啡预处理组细胞受损的病理学改变显著轻于脑缺血再灌注组。吗啡预处理组脑含水量及S100β蛋白含量明显低于脑缺血再灌注组（P〈0.05或P〈0.01）。结论：吗啡预处理可减轻缺血性脑损伤,提高脑缺血耐受性。     

新型水蛭肽嵌合蛋白治疗脑出血后脑水肿的实验研究

目的探讨新型基因工程药物水蛭肽嵌合蛋白（TNHH）对大鼠脑出血后脑水肿的治疗作用及其机制。方法将96只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组、TNHH组,以自体血注入大鼠尾状核方法建立脑出血模型,假手术组只进针不注血。TNHH组静脉注射TNHH（2mg／kg）,分别于造模前30min及造模后每12h给药1次。于6,24,72,168h时分别用Longa标准测定神经功能缺损,干、湿重法检测脑含水量,分光光度法测定脑血肿周围脑组织髓过氧化物酶（MPO）活性。结果与假手术组相比,脑出血模型组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、MPO活性均显著增高（P〈0．05或P〈0．01）;与脑出血模型组相比,TNHH组大鼠神经功能缺损评分、脑含水量、MPO活性显著下降（P〈0．05或P〈0．01）。结论TNHH对大鼠脑出血后脑水肿有治疗作用,其机制可能与抑制凝血酶活性、降低中性粒细胞浸润有关。     

番茄红素的抗大鼠脑缺血活性及线粒体保护作用

目的:考察番茄红素的抗大鼠脑缺血活性,探讨其线粒体作用机制。方法:100只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、番茄红素低、中、高剂量组(50,100和200 mg.kg-1),各组均在缺血前1 h灌胃给药。采用Longa线栓法造成大鼠大脑中动脉阻断后再灌注模型,缺血2 h,再灌注24 h,观察大鼠神经行为学表现、脑组织梗死率以及脑组织水肿程度的改变;同时检测缺血侧(损侧)脑组织ATP含量、线粒体膜电位水平及线粒体呼吸链复合酶IV活性。结果:番茄红素能明显改善脑缺血再灌注引起的神经行为学评分降低,显著降低脑组织梗死率和水肿程度。番茄红素能增加缺血脑组织的ATP含量,提高线粒体膜电位水平,增强呼吸链复合酶IV活性。结论:番茄红素对大鼠的脑缺血再灌注损伤有明显保护作用,其机制可能与保护和改善细胞能量代谢和线粒体功能有关。     

新生大鼠缺氧缺血性脑损伤AQP-4表达及依达拉奉治疗效果的研究

目的：探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（hypoxic-ischemic brain damage,HIBD）后脑组织水通道蛋白-4（AQP-4）的表达变化及依达拉奉（edaravone）对其治疗效果的影响。方法：将7日龄Wistar大鼠120只随机分为3组：假手术组、缺氧缺血模型组（HIBD组）及依达拉奉治疗组,每组各40只。每组根据处死的时间不同又分5个亚组：6、24h、3、5、7d组,每亚组各8只,各组分别于不同时间点处死动物,测脑组织含水量,并采用免疫组化方法检测AQP-4的表达。结果：AQP-4在缺氧缺血6h即增强,3d达高峰,5～7d逐渐降低（P〈0.01）;治疗组各时间点AQP-4表达水平较HIBD组明显降低（P〈0.01）。结论：AQP-4参与了HIBD脑水肿的发生发展过程,依达拉奉可降低AQP-4的表达,从而减轻脑水肿,这可能是其脑保护作用机制之一。