大鼠低温保存同种带瓣主动脉和肺动脉移植物免疫排异反应的研究

探讨同种移植物对宿主免疫状态的影响以及排异反应对移植物的作用。方法通过低温保存的大鼠同种异体带瓣主动脉和肺动脉异位移植的动物模型,观察同种移植后宿主体液和细胞免疫指标的变化,以及移植物的病理改变。结果低温保存同种带瓣管道移植后有明显的免疫排异反应发生,细胞和体液免疫参与免疫排异反应的过程;慢性免疫排异反应以细胞免疫为主。结论免疫排异反应导致移植血管内膜增厚、管壁钙化、狭窄和闭塞。     

吻合血管的同种异体骨移植后移植物再血管化的研究

目的 探讨吻合血管的同种异体骨移植后移植物在宿主体内再血管化过程及其规律.方法 建立吻合血管的同种异体骨移植修复兔股骨大段缺损的模型,实验分成两组,实验组(吻合旋股外血管股骨中上段等位异体骨移植组)和对照组(未吻合血管的股骨中上段等位异体骨移植组).对移植物骨膜、皮质骨及骨髓进行组织学切片,同时对微血管内皮细胞进行免疫组化染色,血管计数后.进行统计学分析,制备墨汁灌注标本,观察各部位微血管再生情况.结果 实验组即可见骨膜、皮质骨和骨髓同时出现再血管化现象,而对照组则由浅至深逐渐出现再血管化现象,在术后2、4、8、16周实验组微血管密度分别为10.0±1.8、15.8±1.5、13.8±1.5、13.8±1.5,对照组分别为2.8±0.8、6.0±0.9、5.5±1.0、6.0±1.1,实验组明显高于对照组;墨染显示实验组墨染范围及程度明显强于对照组.结论 吻合血管的异体骨移植能加快移植物再血管化的过程.     

小鼠异位心脏移植血液循环重建模型的建立

目的 建立新的一种简单、稳定的小鼠腹腔异位心脏移植模型.方法 将供体心脏肝上下腔静脉与受体下腔静脉端侧吻合,供体升主动脉与受体腹主动脉端侧吻合.用C57BL/6J (H-2b)作供体和受体做同基因心脏移植,用C57BL/6J (H-2b)作供体BALB/C (H-2d)受体做同种异体心脏移植.结果 新方法血管吻合时间(21.3±1.6)min比传统方法吻合时间(28.5±1.4)min明显缩短,心脏复跳时间从(2.3±0.9)min降低到(1.4±0.5)min.同基因和同种异体移植的两种方法比较,1周生存率差异无统计学意义(P>0.05).结论 小鼠心脏移植新模型明显缩短移植物温缺血时间,有利于移植物长期存活.     

两种方法冷冻保存异体髌腱重建膝关节交叉韧带比较

目的 观察程序冷冻液氮保存和-80℃深低温保存方法处理同种异体髌腱后重建膝关节交叉韧带的愈合过程并比较其差异.方法 将兔的1/2骨-髌腱-骨复合体经程序冷冻液氮保存和-80℃深低温保存2周后,观察冻存变化差异并行同种异体移植重建前交叉韧带,分别于术后3周和8周观察细胞毒反应、细胞活性、最大载荷和形态学变化等指标进行比较并与自体移植组对照. 结果 ①经程序冷冻液氮保存方法处理后,髌腱的最大载荷无明显下降,细胞活性得到了较好的保存,组织学观察冷冻损伤较-80℃深低温保存方法轻微.②程序冷冻液氮保存处理的移植物在术后未表现明显的排斥反应,且免疫反应随时间的推移而下降.③移植后3周,各组移植物的最大载荷差异无显著性,移植后8周,程序冷冻液氮保存组移植物的最大载荷优于-80℃深低温保存组,但和自体移植组相近.④和-80℃深低温保存组相比,程序冷冻液氮保存组的移植物在术后的愈合过程和组织学行为更接近于自体移植组.结论 ①经程序冷冻液氮保存和-80℃深低温保存方法冻存的兔异体髌腱重建膝关节交叉韧带后愈合过程和自体韧带移植重建过程相似.②程序冷冻液氮保存法优于传统的-80℃深低温保存法.     

大鼠异体肢体移植实验技术

目的探讨建立理想的同种异体肢体移植动物模型的方法及技术。方法Wistar大鼠的后肢为移植物，SD大鼠为受体。切取Wistar大鼠的后肢，用UW灌注液，将移植物与宿主的股骨固定，端端吻合坐骨神经、股神经及股动、静脉各一根。手术后长效青霉素抗炎治疗，显微外科术后常规护理，观察移植后宿主及移植物的变化，分析影响异体肢体移植的影响因素和手术技巧。结果共实施68例异体肢体移植手术，其中建立稳定模型前完成24例，成功9例，成功率为37．5％。模型稳定后，又进行大鼠的异体肢体移植44例，成功40例，成功率为90．9％。结论建立稳定的动物实验模型，有利于提高异体肢体移植的存活率，其中熟悉大鼠肢体的解剖是成功的基础，精细稳定的显微外科微创技术是提高血管吻合成功率、保证移植成功的关键。     

大鼠同种异体肢体移植急性排斥反应动物模型的制作

目的　建立同种异体肢体移植的动物模式。　方法　Wistar大鼠的肢体移植给SD大鼠 ,术后抗炎 ,显微外科常规护理 ,观察移植后宿主及移植物的变化。　结果　大鼠的异体肢体移植 8例 ,成功 6例 ;移植物的排斥反应再现稳定 ,生存时间为 (14± 2 )d。　结论　Wistar→SD大鼠的同种异体肢体移植模型的建立 ,为基础研究提供了动物模型     

不同长度经冷冻、冻干及辐照的同种异体动脉移植实验研究

目的 研究在不同长度的同种异体动脉移植于兔股动脉后的通畅率、组织病理学变化,探讨影响移植成功的因素. 方法 健康青紫兰兔90只,随机分为A、B、C组,每组各30只兔.手术分别切除股动脉1、3、5 cm,分别用冷冻加冻干加辐照兔股动脉2、4、6 cm移植于缺损处,均采用端端吻合,术后观察通畅情况,并分别于术后1 d和1、2、6、10周切取移植血管,分别作光镜、扫描电镜检查. 结果 移植后10周,A、B、C组累计通畅率为86.7%、56.7%和40%;组织病理学检查显示,移植后10周,移植血管内膜化完成约2 cm,内膜化完成段的管壁接近正常血管,而较长移植血管由于不能完全内皮化,随着时间增加,通畅率越来越低. 结论 经冷冻加冻干加辐照处理的同种异体动脉移植成功率与移植段血管的长度密切相关,移植血管越长,移植后的通畅率越低.     

自体腘绳肌肌腱与新鲜冷冻同种异体胫前肌肌腱移植对前交叉韧带重建效果的影响

随着内固定装置和更加精确的隧道技术的发展,自体腘绳肌肌腱和同种异体胫前肌肌腱移植重建前交叉韧带（anterior cruciate ligament,ACL）开始普遍应用于关节外科。尽管自体组织移植具有很高的成功率,但一些外科医师还是倾向于采用同种异体移植物,以避免供区并发症;但同种异体移植物的有效性目前仍存在争议。本研究旨在通过前瞻性多中心随机对照实验研究,比较自体腘绳肌肌腱与新鲜冷冻同种异体胫前肌肌腱移植重建ACL在临床疗效和膝关节稳定性方面的差异。     

用骨扫描测定带血管骨移植的存活

大量材料证明采用显微外科技术进行自体带血管的骨移植,明显优于不带血管者。由于血管吻合技术的成功,使异体骨关节移植可用于先天性畸形、外伤和因肿瘤大块切除后骨缺损者,并带来许多优点。但在异体带血管移植的研究中,至今尚存在以下两个问题:(1)对异体皮肤引起的坏死、感染和受体对无神经支配移植物的自体吸收。(2)对较大的动物,由于缺少精确的组织相容性抗原,而易出现同种异体移植物的排斥,因此无法与自体移植物相对照。     

吻合血管的同种异体关节移植

同种异体关节移植已经历了一个多世纪。随着异体骨免疫学研究的进展和现代冷藏技术的提高 ,吻合血管的同种异体关节移植开始在临床应用。本文将 30年来国内外基础与临床研究进展作一综述 ,旨在推广应用。1　同种异体关节移植的历史　　Ｌｅｘｅｒ[1] 于 190 8年首次报道了临床 2 3例全关节和 11例半膝关节移植 ,经随访 15年 ,结果有 5 0 %的成功率。此后 ,由于同种异体骨关节缺乏有效的存储方法 ,加上免疫排斥反应 ,临床效果不满意 ,异体骨关节移植没有被广泛推广应用。到本世纪 6 0年代 ,一些学者发现冰冻后的异体骨关节免疫原明显降低。 7…     

FK506和抗淋巴细胞血清诱导兔异体膝关节移植耐受的实验研究

目的　探讨短期使用FK5 0 6和抗淋巴细胞血清 (ALS)诱导兔同种异体膝关节移植嵌合耐受的作用。　方法　雄性大耳白兔作为供体 ,雌性新西兰白兔作为受体 ,施行同种异体异位膝关节移植 ,设单独使用ALS( 1ml/kg)组、单独使用FK5 0 6( 0 5mg/kg)组、联合使用FK5 0 6和ALS组及对照组。FK5 0 6和ALS在移植术前 1d开始使用 ,ALS连续使用 3d ,FK5 0 6连续使用 15d。观察移植物的存活时间 ,检测受体内供体血细胞嵌合率 ,进行组织切片检查。　结果　对照组平均存活 ( 13 6± 0 8)d ,单独使用ALS组为 ( 17 4± 1 8)d ,单独使用FK5 0 6组为 ( 2 3 8± 1 5 )d ,联合使用FK5 0 6和ALS组为 ( 4 0 4±2 9)d。联合使用FK5 0 6和ALS组的供体血细胞嵌合率停药后 3周稳定在 10 %以上。　结论　短期使用FK5 0 6和ALS可显著延长兔同种异体膝关节移植的存活时间 ,可维持 3周的嵌合耐受。     

化学萃取同种异体肌腱联合同种异体软骨细胞重建兔肩关节前盂唇实验研究

目的研究化学萃取同种异体肌腱移植联合注射同种异体软骨细胞重建兔肩关节前盂唇损伤的效果。方法成年新西兰大白兔45只,体质量2.5～3.0 kg。取其中15只兔的跟腱,采用化学萃取法进行抗原灭活制备同种异体肌腱,将萃取后肌腱与未处理肌腱行HE染色和Masson染色对比;取膝关节软骨,采用胰蛋白酶法分离培养软骨细胞并行Ⅱ型胶原免疫组织化学染色鉴定。取剩余30只兔制备肩关节前盂唇缺损模型,将同种异体肌腱移植至受损盂唇后,随机分为两组(每组15只),A组移植术后即刻关节内注射同种异体软骨细胞,B组不作任何处理。术后4、6、8周每组各取5只兔的移植肌腱,大体观察后采用HE染色观察细胞核数量,Masson染色观察肌纤维组织胶原纤维的表达情况,AB染色检测移植后糖胺聚糖含量,评估两组同种异体肌腱组织内细胞生长情况。结果 HE染色、Masson染色显示,采用化学萃取法制备的同种异体肌腱抗原被灭活且纤维组织结构保持完好;Ⅱ型胶原免疫组织化学染色示,培养细胞为软骨细胞。肌腱移植术后AB染色示,各时间点A组糖胺聚糖含量均显著高于B组,差异有统计学意义(P0.05)。术后6周HE染色示,A组肌腱组织内的细胞核数量明显多于B组(t=20.043,P=0.000)。术后6周Masson染色示,A组肌腱组织中的细胞核明显增多,肌纤维及胶原纤维相互交错,组织结构更加紧凑,肌腱组织以蓝染为主;而B组细胞核较少,主要为原移植物的胶原纤维。结论经化学萃取法灭活抗原的同种异体肌腱,能够修复重建兔肩关节前盂唇缺损,且联合同种异体软骨细胞移植能够促进移植肌腱的愈合。     

同种异体大鼠外耳郭移植组织学改变的实验研究

目的研究同种异体大鼠外耳郭移植后组织形态学改变及免疫细胞的浸润情况.方法将动物分为自体、异体移植组.自体移植组以SD大鼠兼职供体与受体,进行自体移植;异体移植组以SD大鼠为供体,WISTAR大鼠为受体(SD→WISTAR),然后观察外耳郭的生存情况与组织学变化.结果异体外耳郭移植后可能存在快速排斥反应,组织中不但有T淋巴细胞的浸润而且也发现大量单核细胞的浸润.结论血管化的皮肤复合组织移植物的排斥反应机制与皮肤移植可能有着明显差异,进一步了解其排斥反应机制是解决移植物长期生存的理论基础.     

大鼠同种异体喉移植模型的建立

应用现代显微外科手术，将双侧连接于体供喉的颈总动脉分别与受体一侧的颈总动脉和颈外静脉进行端－侧吻合，共对１３只大鼠实施喉异位移植。建立了同种异体喉移植的实验模型。移植动物全部存活，移植术后３天，移植物周围有纤维素粘粘连，７天后粘连加重，移植物表面附有灰白色的纤维结缔组织气管内     

兔颈动脉移植后血管内皮型一氧化氮合酶基因表达的变化及意义

目的探讨兔颈动脉移植后移植血管段内皮型一氧化氮合酶信使核糖核酸(eNOSmRNA)表达的变化及其意义。方法建立大白兔颈动脉移植模型。将30只兔按随机数字表法分为4组。A组(n=3)自体血管移植;B组(n=9)新鲜异体血管移植;C组(n=9)同种异体血管经青霉素和链霉素处理常温保存后移植;D组(n=9)同种异体血管经青霉素和链霉素处理冷冻保存后移植。观察比较移植后1～3周移植血管段组织形态学变化和eNOS mRNA的表达。结果光学显微镜下观察A组结构正常,仅有炎性细胞浸润;其余各组术后1周内膜开始增生,2周内膜明显增厚,3周内膜、中膜增厚最明显,同时伴有血栓形成。其中B组改变最严重,B组血管移植后eNOS mRNA表达明显低于其他三组(P<0.05)。结论同种异体动脉血管移植后,血管eNOS基因表达明显下调,可造成移植后血管内膜增生和血栓形成。     

新鲜和深低温冷冻同种异体骨软骨移植长期转归实验研究

[目的]观察和比较新鲜和深低温冷冻同种异体骨软骨移植后的长期转归情况,为同种异体骨软骨移植治疗关节软骨缺损进一步提供理论基础。[方法]建立兔膝关节软骨缺损模型,行新鲜和深低温冷冻同种异体骨软骨移植。在术后12个月和18个月,骨软骨移植物取材进行关节软骨蛋白多糖、软骨细胞活性检测和软骨细胞超微结构观察。[结果]新鲜和冷冻骨软骨移植物中蛋白多糖阿尔新蓝染色强度和存活软骨细胞比率术后均下降,且在各时间点新鲜移植组的结果优于冷冻移植组,有统计学差异(P0.05)。超微结构显示软骨细胞退行性改变。[结论]新鲜和深低温冷冻同种异体骨软骨在移植术后较长时间均出现严重退变,冷冻骨软骨移植物退变较严重,其作为关节软骨缺损治疗方法目前是不可行的。     

环孢素A对吻合血管异体骨移植血管平滑肌细胞表型转变的影响

目的 通过研究环孢素A对吻合血管异体骨移植血管平滑肌细胞(VSMCs)表型改变的影响,探讨移植物血管动态变化的规律. 方法 建立兔吻合血管异体骨移植修复股骨大段缺损的模型,动物分为实验组(术后应用环孢素A)及对照组(术后未应用环孢素A),在不同时段取出移植物血管制作组织学切片,观察血管壁形态和结构变化,研究VSMCs的表型改变. 结果 实验组和对照组的供体血管都呈进行性狭窄,血管内膜逐渐增厚,但实验组血管壁增厚的速度明显慢于对照组.实验组血管平滑肌细胞收缩型标志蛋白α-肌动蛋白呈递减性表达;对照组也表现出同样的规律,但衰减速度明显快于实验组. 结论 吻合血管异体骨移植后移植物血管发生进行性狭窄;环孢素A能在一定程度上抑制VSMCs表型的转变,延长移植物通血时间.     

关于关节软骨愈合和再生研究的现代进展(四)

3 .2 .3　同种异体软骨细胞移植 (ｔｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎｏｆａｌｌｏｇｅｎｉｃｃｈｏｎｄｒｏｃｙｔｅｓ)　同种异体软骨细胞移植治疗关节软骨缺损 ,在一些实验研究 (特别是兔 )中 ,获得成功[1] 。但是 ,那些成功的动物实验 ,并不包括马的实验在内[2 ,3] 。Ｆｒｅｅｄ等[1] 在观察研究同种异体软骨细胞移植修复关节软骨缺损时发现 ,将取自一个兔膝的关节软骨细胞经术后多羟基乙酸 (ｐｏｌｙｇｌｙｃｏｌｌｉｃａｃｉｄ)培养 1个月 ,植于另一兔膝关节的关节软骨缺损上时 ,仅产生很轻微的免疫反应。实验研究者们指出培养可使由细胞…     

冷保存的同种异体动脉移植物在活体肝移植中的应用

活体肝移植(living donor liver transplantation,LDLTX)是目前解决供肝短缺矛盾的有效方法之一.LDLTX术中为保证移植肝有良好的静脉流出道,许多情况下需用血管移植物重建移植肝的部分肝段静脉;20世纪70至80年代就有同种异体动脉移植物在肝移植中使用的报道,主要用于尸体供肝的动脉重建,随后血管移植物越来越多地用于肝移植的血管重建,同时也有相应的研究报道[1-4].我中心在一部分活体肝移植的肝静脉重建中采用了冷藏保存的同种异体动脉移植物,现将临床研究结果报告如下.     

60例骨科显微术后病人的护理

我科自1978年至1987年3月,共进行了60例显微外科手术。其中皮瓣和吻合的皮瓣移植20例;吻合血管的肌皮瓣移值9例;第二是趾移植再造拇指或手指7例(失败1例);吻合血管的拇趾甲皮瓣移植再造拇指7例;吻合血管游离神经移植1例;吻合血管骨或骨膜移植5例;同种异体骨、关节、肌腱及自体拇趾甲皮瓣移植再造拇指1例;断指再植7例(失败2例);断肢再植3