哇巴因与地高辛对大鼠心肌钠泵α亚单位基因表达影响的对比研究

目的　对比研究哇巴因与地高辛对大鼠心肌钠泵 (Na ,K ATP酶 )亚单位基因表达的影响 ,探讨内源性哇巴因(EO)的生物学效应以及洋地黄类药物药理作用的分子机制。方法　每天给予大鼠注射小剂量哇巴因 (2 0 μg·kg 1·d 1)与地高辛 (32 μg·kg 1·d 1) ,每周测量一次大鼠血压 ;6周后处死动物 ,应用RT PCR技术在mRNA水平探讨大鼠心肌钠泵α1、α2 及α3亚单位基因表达的改变。结果　给予大鼠注射哇巴因 6周后血压明显升高 (132 6± 9 0mmHgvs 115 7± 8 2mmHg ,P <0 0 1) ,而地高辛组大鼠血压与对照组比较无明显差异。哇巴因与地高辛均可导致大鼠心肌钠泵α亚单位基因表达的改变 :两者均可引起钠泵α3亚单位表达增强 ,而对α2 亚单位表达无影响 ;哇巴因组大鼠心肌钠泵α1亚单位表达减弱 ,而地高辛组α1亚单位表达无改变。结论　哇巴因与地高辛可导致不同的钠泵基因表达改变 ,这可能是内源性哇巴因发挥生理作用的分子机制之一 ,并且可能是哇巴因与地高辛药理及毒理作用 (包括两者对血压的调节 )不同的重要原因。     

内皮素及其受体在哇巴因高血压鼠发病机制中的作用

目的探索内皮素技其受体任大鼠哇巴因因高乐发病机制中的作用：方法雄性SD大鼠随机分为哇巴因组和生理盐水对照组，分别给予哇巴因或生理盐水腹腔注射6周，每周测量收缩压．分别于实验2、4、6间放免法测定血浆及心脏组织中内皮素的含量，实时荧光定量RT—PCR法检测大鼠左心室内皮素A、B两种受体mRNA水平，并用免疫组化法检测左心室内皮素A、B两种受体蛋白的表达：结果大鼠腹腔注射哇巴因4周后收缩乐开始上升．6周后哇巴因组大鼠血压与对照组相比何显著性差异（P〈0．001）。大鼠腹腔注射哇巴因2周后，血浆及心脏组织内皮素水平升高（P〈0．01），左心室内皮袭A型受体mRNA水平升高：4周时A型受体mRNA水平进一步升高且A型受体蛋白表达也增强，而B型受体mRNA及蛋白的表达存整个实验过程中均无显著变化。结论哇巴因高血压鼠血压升高前即出现血浆及心脏组织中内皮素含量增加，左心室内皮素A型受体转录及表达增强，提示内皮素可能通过其A型受体参与了畦巴因引起的血压升高及靶器官损害。     

哇巴因与地高辛对大鼠肝脏钠泵A亚单位基因表达的影响

目的　观察哇巴因与地高辛对大鼠肝脏钠泵基因表达的影响 .方法　分别给大鼠注射哇巴因 (2 0 μg· kg- 1·d- 1 )、地高辛 (32 μg·kg- 1·d- 1 )和生理盐水 (1m L· kg- 1·d- 1 ) ,观察给药后 6wk大鼠血压的动态变化 ;并分别应用分子生物学 RT- PCR及免疫组织化学技术 ,探讨各组大鼠肝脏钠泵 α1 ,α2 及 α3 亚单位 m RNA及蛋白水平基因表达的改变 .结果　给予哇巴因 2 wk后大鼠血压开始升高 ,至 6 wk时明显高于生理盐水组 (17.7± 1.2 ) vs(15 .4± 1.1) k Pa,P<0 .0 1) ,而实验过程中地高辛组血压与对照组比较差异不明显 .无论是在 m RNA水平还是在蛋白水平 ,哇巴因对大鼠肝脏钠泵α1 亚单位表达无影响 ,而地高辛使α1 亚单位表达增强 ;两组大鼠 α2 亚单位表达均无改变 ;哇巴因使 α3 亚单位蛋白水平表达减弱 ,而 m RNA水平增强 ,地高辛组大鼠肝脏钠泵 α3 亚单位无论在 m RNA水平及蛋白水平表达均增强 .结论　哇巴因在高血压发病中可能起着重要作用 ;哇巴因与地高辛可导致不同的钠泵基因表达改变 ,为进一步揭示内源性哇巴因生理与病理作用以及洋地黄类药物药理与毒理作用的分子机制提供了理论及实验依据     

哇巴因-高血压鼠肾脏钠转运

目的以内源性锂作为肾脏近端小管钠重吸收的标志物,探讨哇巴因-高血压鼠肾脏钠转运情况及在高血压发病机制中的作用.方法将40只180～220 g雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为正常对照组(n=20)和哇巴因组(n=20).每日给予对照组大鼠腹腔注射生理盐水1ml/(kg·d),哇巴因组大鼠腹腔注射哇巴因27.8μg/(kg·d),每周测量收缩压及体重各1次.分别于饲养2和6周后分两批处死动物.收集各组血清及24 h尿,测定血清和尿钠、钾、锂和肌酐浓度,计算内生肌酐清除率(Ccr)、钠排泄分数(FENa)、锂排泄分数(FELi)、尿锂钠比(ULi/UNa)、尿钾钠比(UK/UNa)及远端肾小管钠重吸收率(FDRNa).结果2周后,哇巴因组血压与对照组相比差异无显著性(P＞0.05),4周后哇巴因组血压显著高于对照组(P＜0.01).2组体重在各时间段差异均无显著性(P＞0.05).2和6周哇巴因组大鼠的Ccr和FENa与对照组相比差异无显著性(P＞0.05);2、6周哇巴因组大鼠的FELi、ULi/UNa、UK/UNa及FDRNa均显著低于对照组(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.001).结论哇巴因-高血压鼠肾脏近端小管钠重吸收增加,且发生于血压升高之前,提示肾脏近端肾小管钠重吸收增加可能是哇巴因引起大鼠血压升高的机制之一.     

哇巴因多克隆抗体对两肾夹肾血管性高血压大鼠血流动 …

为探讨哇巴因多克隆抗体的降压作用及哇巴因与高血压发病的关系，给“两肾一夹＋盐（２ｋ１ｃ＋盐）”、“两肾一夹（２ｋ１ｃ）”肾血管性高血压大鼠随机静注哇巴因多克隆抗体、硝普钠、正常兔免疫球蛋白（ＩｇＧ）及生理盐水，颈动脉插管观察注射后３ｈ内血压动态变化。结果表明：哇巴因多克隆抗体对“两肾一夹＋盐”肾血管型高血压大鼠具有明显的降压作用，而对“两肾一夹”高血压模型降压作用不明显。正常兔免疫球蛋白对高血压模     

哇巴因对大鼠心脏超微结构及心功能的影响

目的 探索哇巴因对大鼠心脏超微结构及心功能的影响。方法 雄性SD大鼠随机分为哇巴因组和生理盐水对照组,分别给予哇巴因或生理盐水腹腔注射,每周测量收缩压。4周后,对两组动物进行心脏超声检查,并予有创血流动力学检查评估心功能,透射电镜观察心脏超微结构的变化。结果 SD大鼠腹腔注射哇巴因4周后,两组间血压尚无显著差异。心脏超声检查提示,哇巴因组大鼠左心室收缩及舒张末期内径、舒张末期左心室后壁厚度、室间隔厚度以及左心室质量增加,等容舒张时间延长,E／A值、射血分数及左心室短轴缩短率降低,与对照组相比有显著性差异（P〈0．05）。有创血流动力学检查显示,哇巴因组大鼠左心室收缩压、左心室内压最大上升／下降速率降低,左心室舒张压升高。透射电镜观察显示,哇巴因组大鼠心肌细胞肿胀,肌纤维断裂,Z线消失,线粒体增生肿胀,部分空泡化,细胞间胶原纤维增生。结论 哇巴因可引起大鼠左心室增大、室壁增厚、心脏收缩及舒张功能受损,心肌超微结构损伤,此效应发生在血压升高前,提示哇巴因可能有直接的心肌损害作用。     

哇巴因-高血压鼠高血压发展期间肾脏钠转运的改变

目的 本研究以内源性锂作为肾脏近端小管钠重吸收的标志物,研究哇巴因-高血压鼠在高血压发展期间,肾脏钠转运的变化情况,以进一步阐明哇巴因在高血压发病机制中的作用。方法 将80只80-100g雄性SD大鼠随机分为正常对照组（n=40）和哇巴因组（n=40）。每日分别给予两组大鼠腹腔注射生理盐水1ml／kg或哇巴因27．8μg／kg,每周测量收缩压及体质量各1次。分别于饲养2、4、6和8周后分4批处死动物。处死前1周置于代谢笼中,测定各组每只大鼠摄食量。收集血清及24h尿,测定血清和尿中的钠、锂和肌酐浓度,计算内生肌酐清除率、钠排泄分数、锂排泄分数及远端肾小管钠重吸收率（FDRNa）。结果 两组的体质量及食物摄人量在实验的各个阶段均无显著差异（P〉0．05）。2周时,哇巴因组血压与对照组相比无显著性差异（P〉0．05）,4周后哇巴因组血压显著高于对照组（P〈0．001）并以一种剂量依赖的方式升高,7周后,血压不再继续升高,处于维持阶段。对照组在整个实验过程中血压与治疗前的基础值相比无显著性差异（P〉0．05）。两组的内生肌酐清除率及血清钠在实验的各个阶段均无显著差异（P〉0．05）。2、4、6周时哇巴因组的锂排泄分数均显著低于对照组（P〈0．01）,2周和6周时,哇巴因组的FENa低于对照组,但无统计学差异（P〉0．05）。4周时,哇巴因组的钠排泄分数显著低于对照组（P〈0．05）,表明哇巴因组近端小管钠重吸收的增加,同时伴随着钠排泄的减少。2、4、6周时哇巴因组的钠排泄分数均显著低于对照组（P〈0．05）,表明远端小管起了一定的代偿作用。8周时,两组的锂排泄分数,钠排泄分数及FDRNa均无显著性差异（P〉0．05）。结论 哇巴因可以使哇巴因-高血压鼠肾脏近端小管钠重吸收增加,肾排钠减少,导致其压力利钠关系改变,在高血压的发生发展中起着重要的作用。     

胆汁酸的致高血压作用及其可能机制

为探讨胆汁酸的致高血压作用及其可能机制，检测了原发性高血压、继发性高血压、肝胆患者以及自发性高血压大鼠血浆总胆汁酸水平；同时给予Ｗｉｓｔａｒ大鼠分别喂以胆酸１周及５周，观察大鼠血压变化及肠系膜动脉对去甲肾上腺素血管收缩反应的变化；然后利用结扎正常血压Ｗｉｓｔａｒ大鼠腹主动脉或静脉注甲肾上腺素造成急性血压升高模型，观察血浆总胆汁酸水平的变化。结果显示：血浆总胆汁酸水平在原发性高血压轻度升高，继发性高     

甘草甜素和胆酸引起大鼠血压升高致心肌肌间动脉损伤的光镜观察

目的：研究甘草甜素及胆酸引起大鼠血压升高致心肌肌间动脉损伤的病理学改变。方法：给予大鼠分别口服甘草甜素６周、胆酸１周及５周，观察大鼠血压升高后心肌肌间动脉损伤的光下改变。结果：口服甘草甜素及胆酸组的动脉血压较对照组明显升高；口服甘草甜素及胆酸组血压升高大鼠心肌肌间动脉的病理学变化包括平滑肌细胞的增生和透明变性。结论：甘草甜素和胆酸参与了高血压的发病过程。     

肾交感神经在哇巴因高血压鼠肾脏钠转运中的作用

目的 哇巴因可以使Sprague-Dawley(SD)大鼠肾脏近端小管钠重吸收增加,在高血压的发生和发展中起着重要的作用.本研究探讨肾交感神经在哇巴因高血压鼠(OHR)肾脏钠转运中的作用.方法 将双侧去肾交感神经(RDNX)的SD大鼠及假手术鼠分别随机分入对照组和哇巴因组.对照组每日给予腹腔注射生理盐水1ml/(kg·d),哇巴因组每日给予腹腔注射哇巴因27.8μg/(kg·d),每周测量收缩压(SBP)、体质量,心率各1次.实验过程中各组动物的饲养及生活条件完全相同.于治疗4周后处死.处死前1d用代谢笼收集24h尿,禁食过夜,次日晨取血后处死.肾脏称重后,置于-70℃冰箱保存.血清及尿样标本置于-40℃冰箱保存,同批测定.采用火焰原子吸收分光光度法检测血,尿钠浓度,原子吸收分光光度法测定血,尿内源性锂浓度;苦味酸法测定血,尿肌酐浓度;放射免疫法测定血浆肾素活性;高效液相-电化学法测定肾脏去甲肾上腺素含量.结果 四组大鼠体质量、心率、摄食量及钠摄入量均无显著性差异(P＞0.05).治疗4周后,对照去神经组(CDNX)SBP显著低于对照假手术组(Csham),哇巴因去神经组(ODNX)SBP亦显著低于哇巴因假手术组(Osham)(P均＜0.05),且SBP同样下降约10mmHg.而Osham组及ODNX组血压显著高于相应的对照组(P均＜0.01).ODNX组血压亦显著高于Csham(P＜0.01).哇巴因组的钠排泄分数(FENa),锂排泄分数(FELi)及远端肾小管钠重吸收率(FDRNa)分别显著低于相同处理的对照组(P＜0.05,P＜0.01,P＜0.05),说明哇巴因组无论是否去肾神经,近端小管钠重吸收与对照组相比都显著增加,肾脏钠排泄及远端小管钠重吸收均显著减少;而ODNX组与Osham组相比,FENa,FELi及FDRNa均无显著性差异(P＞0.05).CDNX组与Csham组相比,FENa,FELi及FDRNa亦无显著性差异(P＞0.05),表明去肾神经与否,对肾钠转运功能没有影响.各组间内生肌酐清除率(Ccr)及血浆肾素活性无显著性差异(P＞0.05).哇巴因组和对照组RDNX后双肾去甲肾上腺素含量均显著低于相应的假手术组(P＜0.01).结论 肾交感神经在维持SD大鼠基础动脉压水平上起着重要的作用.尽管RDNX使得OHRSBP显著降低,但并不能阻断哇巴因的升高血压的作用,不改变OHR肾脏钠转运.我们的研究表明OHR肾脏近端小管钠重吸收增加和血压升高不依赖于肾交感神经.     

多巴胺对大鼠肾髓质间质细胞内脂质颗粒的影响

目的：探讨血压的变化对肾髓质间质细胞内脂质颗粒的影响。方法：对正常大鼠股静脉滴注多巴胺使其血压升高，通过形态学观察和图像分析，计数肾髓质间质细胞细胞内抗高血压脂质颗粒的数量变化。结果：实验组大鼠肾髓质间质细胞内脂质颗粒的数量明显少于对照组大鼠。结论：血压升高后刺激了肾髓质间质细胞脱颗粒以维持机体血压平衡，说明肾间质细胞在机体抗高血压过程中的重要性。     

哇巴因对大鼠血管平滑肌细胞内钙离子浓度的影响

目的探讨哇巴因对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞（vascular smooth muscle cells, VSMCs）内Ca2+浓度的影响。方法用组织
块贴壁法进行大鼠胸主动脉VSMCs原代培养,用免疫组织化学方法进行细胞鉴定,采用放射自显影术检测哇巴因对大鼠胸主动
脉VSMCs的结合能力,采用Fluo 3-AM（钙离子荧光探针）法研究哇巴因在短时间内对VSMCs细胞内Ca2+浓度的影响,探讨不同
浓度的钠泵α2亚单位截断性片段的拮抗作用。结果（1）放射自显影术检测结果显示,哇巴因与VSMCs间有一定的结合能力。
在0.1~100 nmol/L浓度范围,随着哇巴因浓度的增加,VSMCs与哇巴因的结合能力增加;（2）Fluo 3-AM检测VSMCs内Ca2+浓度
结果显示：不同浓度的哇巴因在短时间内能够引起VSMCs内Ca2+浓度的变化。在0~3200 nmol/L浓度范围,细胞内Ca2+离子浓
度会随着哇巴因浓度的增加呈现出逐渐升高的趋势;（3）不同浓度的钠泵α2亚单位截断性片段可以拮抗哇巴因引起的VSMCs内
Ca2+浓度的升高作用。结论哇巴因引起的细胞内高钙是高哇巴因高血压发生的细胞学基础,钠泵α2亚单位截断性片段可以拮
抗哇巴因引起的VSMCs内Ca2+浓度的升高作用,为进一步探讨哇巴因的作用机制结高血压的治疗提供了实验依据。
     

川芎嗪对高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞游离钙的影响

目的研究川芎嗪对自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞游离钙浓度的影响。方法以体外培养的自发性高血压大鼠和正常血压对照大鼠的心肌细胞及动脉平滑肌细胞为实验模型，用Fura-2荧光法检测细胞内游离钙浓度。结果自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度显著高于正常血压对照大鼠。川芎嗪对自发性高血压大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度具有显著抑制作用，并呈现量效关系。较高剂量的川芎嗪对正常血压对照大鼠心肌和血管平滑肌细胞的游离钙浓度也有抑制作用；而较低剂量的川芎嗪不仅无抑制作用，还使正常血压对照大鼠心肌细胞游离钙浓度显著升高。结论川芎嗪具有钙离子拮抗剂的特性，其在高血压防治中的作用，值得进一步探讨。     

嗜铬细胞瘤组织中内源性哇巴因表达的意义

目的 探讨内源性哇巴因（EO）在肾上腺嗜铬细胞瘤组织中表达的意义。方法 采用免疫组织化学链霉素抗生物素蛋白－过氧化酶连接法（SP法）检测EO在嗜铬细胞瘤组织中的表达。结果 血压与EO在嗜铬细胞瘤组织中的表达呈现相关关系。伴有血压升高的嗜铬细胞瘤患者，其瘤组织中EO呈弥漫性强阳性表达；而EO在不伴有血压升高的嗜铬细胞瘤患者则呈现阴性表达。结论 EO与嗜铬细胞瘤所致的高血压关系密切，为其进一步研究提供了有价值的形态学依据。     

感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠左心室肥厚与血压的关系

目的研究感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠左心室肥厚与血压的关系。方法建立感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠模型,计算左心室相对重量,观察左心室组织病理学形态特点。结果感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠CAP-HS组收缩压明显升高,左心室明显增重,心肌细胞肥大,肌纤维排列紊乱,心肌间质纤维化,其左心室重量指数明显升高（P〈0.01）;CON-HS组大鼠左心室重量指数也有升高（P〈0.05）。结论感觉神经损伤性盐敏感性高血压大鼠左心室增重,心肌组织病理学改变与血压升高和摄入高盐有关。     

盐酸乌苏里藜芦碱对肾性高血压大鼠降压机理的探讨

以酚妥拉明及新斯的明为工具药，从鼠侧脑室注入盐酸乌苏里藜芦碱研究其中枢降压机制，实验表明：侧脑室注入Ｖｅｒａ－Ｕ可显著降低肾性高血压大鼠的血压，其降压作用可被侧脑室预先注入的α受体阻断剂酚妥拉明完全阻断；侧脑室注入胆碱酯酶抑制剂后，肾性高血压大鼠血压明显升高，新斯的明升高和用不受预先注入的Ｖｅｒａ－Ｕ的影响。结果提示：Ｖｅｒａ－Ｕ侧脑室注射对肾性高血压大鼠具有迅速而显著的降压作用；其中枢机制在降压     

葛根提取物对肾性高血压大鼠血压的影响

目的：观察葛根提取物对肾性高血压大鼠血压的影响。方法：雄性SD大鼠80只,体质量180～220g,建立“二肾一夹”大鼠肾性高血压模型,将模型复制成功的大鼠随机分为4组。用血压测定仪测定给予葛根提取物前后大鼠尾动脉压的变化,并观察葛根提取物对高血压大鼠血清一氧化氮（nitricoxide,NO）含量的影响。结果：与模型组比较,葛根提取物组大鼠血压显著降低（P〈0．05,P〈0．01）;而血清NO水平显著升高（P〈0．01）。结论：葛根提取物对肾性高血压大鼠血压的降低作用可能与升高血清NO水平有关。     

自发性高血压大鼠黑质内注射谷氨酸钠的心血管效应

目的：观察自发性高血压大鼠中脑黑质神经细胞体兴奋的心血管效应。方法：给乌拉坦麻醉的自发性高血压大鼠黑质内微量注射L－谷氨酸钠、观察尾核内多巴胺水平和动脉血压、心率的变化。结果：黑质内注射谷氨酸钠后，引起自发性高血压大鼠尾核内多巴胺水平升高，动脉血压升高，心率加速。结论：自发性高血压大鼠黑质内细胞兴奋可产生明显心血管效应。     

牛磺酸对肾性高血压大鼠心肌肥厚及心源性血管活性物质间平衡的影响

目的探讨牛磺酸对肾血管性高血压大鼠心肌肥厚及心源性血管活性物质间平衡的影响。方法采用两肾一夹型肾血管性高血压大鼠模型。所有大鼠被随机分为3组(每组20只):假手术对照组;高血压对照组;牛磺酸治疗组。于术后第5周开始给予牛磺酸50m g.kg-1.d-1。采用标准尾套法间接检测清醒大鼠血压。给药8周后,大鼠处死,分离其左室心肌以用于检测左室质量/体质量比、心肌组织的血管紧张素Ⅱ和一氧化氮含量。结果与假手术组大鼠相比,未给药2K1C高血压大鼠血压明显升高,左室质量/体质量比增大,心肌组织血管紧张素Ⅱ含量增加,一氧化氮含量降低。应用牛磺酸治疗则明显抑制了肾动脉狭窄术后大鼠血压的升高,降低了2K1C高血压大鼠左室质量/体质量比和心肌血管紧张素Ⅱ含量,并使心肌一氧化氮含量升高。结论长疗程牛磺酸治疗可抑制肾性高血压大鼠心肌肥厚的发生,其机制可能与调节心肌组织局部血管紧张素Ⅱ与一氧化氮间平衡有关。     

白茅根降压茶治疗原发性高血压的实验研究

目的探讨白茅根降压茶通过养阴、清胃、利尿达到降压功效的依据。方法SD大鼠40只（分大、小剂量组各15只，对照组10只）及高血压模型大鼠30只（分大、小剂量组各15只），分别给予白茅根降压茶1．5mL／100g体重，用大鼠血压心率仪测定大鼠尾动脉收缩压及心率，观察给药前及给药后血压及心率的变化。结果给予白茅根降压茶后，正常大鼠及高血压模型大鼠血压均明显降低，同时高血压模型大鼠心率减慢。结论白茅根降压茶能够降低大鼠血压及心率。