沉默囊性纤维化跨膜传导调节因子对大鼠海马神经元细胞线粒体功能及氧化应激的影响

目的探讨沉默囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)在大鼠海马神经元细胞线粒体功能及氧化应激中的作用。方法18只SD大鼠随机分为CFTR小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)组、阴性对照组、空白对照组各6只。分离3组海马神经元细胞,取对数生长期细胞进行实验。CFTR siRNA组神经元细胞转染CFTR siRNA,阴性对照组转染阴性对照siRNA,空白对照组不转染。转染后培养48 h,采用Western blot法检测3组神经元细胞线粒体CFTR蛋白相对表达量,JC-1荧光探针检测线粒体膜电位,荧光分光光度法检测线粒体活性氧(reactive oxygen species,ROS)和过氧化氢(hydrogen peroxide,H2O2)表达,氧电极法测定线粒体呼吸控制率(respiratory control rate,RCR),荧光素酶发光法检测线粒体三磷酸腺苷(adenosine triphosphate,ATP)浓度,高效液相色谱法检测线粒体谷胱甘肽(glutathione,GSH)和氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)表达。结果转染后培养48 h,CFTR siRNA组神经元细胞线粒体CFTR蛋白相对表达量(0.09±0.01)、线粒体膜电位[(247.16±34.28)mV]、ATP[(11.71±2.54)mol/g]、RCR(4.69±0.82)、GSH[(0.71±0.12)nmol/μg]、GSH/GSSG值(0.31±0.08)低于空白对照组[0.42±0.07、(432.18±56.04)mV、(24.18±3.64)mol/g、7.94±1.21、(1.62±0.23)nmol/μg、1.65±0.27]和阴性对照组[0.38±0.06、(434.07±52.13)mV、(22.97±3.43)mol/g、7.83±1.18、(1.57±0.21)nmol/μg、1.63±0.24](P<0.05),线粒体H2O2水平(1.73±0.11)高于空白对照组(1.00±0.02)和阴性对照组(1.08±0.06)(P<0.05);空白对照组神经元细胞线粒体CFTR蛋白相对表达量及线粒体膜电位、ATP、RCR、H2O2、GSH、GSH/GSSG值与阴性对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论沉默大鼠神经元细胞线粒体CFTR可引起海马神经元细胞线粒体功能障碍,增强氧化应激反应。     

清肾颗粒对5/6肾切除大鼠肾组织线粒体自噬及肾小管上皮-间质细胞转化的影响

目的：探讨清肾颗粒对5/6肾切除大鼠肾组织线粒体自噬及肾小管上皮细胞转分化（Epithelial-mesenchymal,EMT）的影响。方法：雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、模型组、清肾颗粒组,每组各10只。除假手术组外,其余20只大鼠均制作5/6肾切除模型。清肾颗粒各组分别给予相应剂量清肾颗粒水溶液;假手术组、模型组以生理盐水灌胃。连续给药8周后,无菌采取腹主动脉血,代谢笼留取24h尿液,摘取左侧肾脏。检测血、尿肌酐浓度,并计算内生肌酐清除率;Western blot法检测肾组织中Pink1、Parkin、LC3-Ⅱ、α-SMA;免疫荧光法检测肾组织中LC3-Ⅱ和线粒体膜蛋白VDAC1共定位表达;HE和Masson染色光镜观察大鼠肾脏病理改变;透射电镜检测肾小管上皮细胞中线粒体的超微结构。结果：与假手术组比较,模型组大鼠的线粒体自噬相关蛋白Pink1、Parkin、LC3Ⅱ表达量均显著下降,肾小管EMT标志蛋白α-SMA显著升高（P<0.05）。与模型组比较,清肾颗粒组大鼠的Pink1、LC3Ⅱ蛋白表达量显著升高,α-SMA表达量显著降低（P<0.05）,Park...     

沉默UVRAG对白血病细胞K562线粒体自噬的影响

目的：探讨紫外线抵抗相关基因（UVRAG）对白血病细胞K562线粒体自噬的影响。方法：用不同浓度线粒体自噬诱导剂羰基氰化物间氯苯腙（CCCP）诱导K562细胞6、12和24 h,利用CCK-8法检测细胞活力;将K562细胞分为NC、UVRAG-siRNA、UVRAG-siRNA+CCCP和CCCP共4组,采用Western blot检测UVRAG蛋白质表达情况;流式细胞学技术检测活性氧、线粒体结构完整性的变化情况;Western blot检测自噬相关蛋白P62、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ的表达情况。结果：与NC组相比,UVRAG-siRNA转染组UVRAG蛋白表达显著下降（P<0.01）;与CCCP组相比,U VRAG-siRNA+CCCP组活性氧减少（P<0.05）,线粒体结构破坏减少（P<0.05）,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达下降（P<0.01）,P62蛋白表达上升（P<0.05）;与NC组相比,UVRAG-siRNA组P62蛋白、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白的表达,活性氧及线粒体结构完整性差异不显著（P>0.05）。结论：CCCP作用下,沉默UV...     

siRNA沉默Drp1对鱼藤酮诱导的帕金森病模型细胞自噬和凋亡的影响

目的探究siRNA沉默动力相关蛋白1(Drp1)后对鱼藤酮诱导的帕金森病模型细胞自噬以及细胞凋亡的影响。方法体外培养人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,用1μm、5μm、10μm、20μm鱼藤酮进行处理24 h、48 h,MTT法检测细胞抑制情况。将细胞分为鱼藤酮最佳浓度处理组(20μm鱼藤酮处理,损伤组)、阴性转染组(损伤组基础上转染Drp1阴性序列)、Drp1siRNA处理组(损伤组基础上转染Drp1 siRNA)、Drp1抑制剂组(损伤组基础上添加Mdivi-1试剂)、自噬促进剂组(损伤组基础上添加雷帕霉素)。观察各组线粒体自噬情况、细胞线粒体功能相关蛋白(Mfn2、Drp1、NRF1)、自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3、P62)、凋亡蛋白(Bcl-2、Bax)表达情况和细胞凋亡情况。结果与对照组相比,鱼藤酮处理组细胞抑制率均升高,随着浓度以及培养时间的增加,细胞抑制率逐渐增加(P0.05)。损伤组、阴性转染组、自噬促进剂组LC3II定位在细胞线粒体,且细胞线粒体结构受损,外周出现自噬双层膜。与Drp1 siRNA转染组、Drp1抑制剂组相比,损伤组、阴性转染组、自噬促进剂组Drp1、LC3II、Beclin-1、Bax蛋白表达和细胞凋亡率升高,Mfn2、NRF1、P62、Bcl-2蛋白表达降低(P0.05)。结论 Drp1参与鱼藤酮诱导帕金森病细胞线粒体自噬,沉默Drp1后可降低鱼藤酮诱导帕金森病细胞线粒体自噬以及细胞凋亡,具有保护作用。     

肝细胞生长因子激活剂的抑制剂-1基因对宫颈癌细胞自噬及凋亡调控的影响

目的探讨肝细胞生长因子激活剂的抑制剂-1(hepatocyte growth factor activator inhibitor-1, HAI-1)基因对宫颈癌细胞自噬及凋亡调控的机制。方法对数生长期HeLa细胞分为转染组和对照组,转染组转染HAI-1质粒,对照组细胞正常培养。采用实时荧光定量PCR法检测2组细胞HAI-1 mRNA表达情况,采用AO染色和流式细胞术检测2组细胞自噬情况,采用ELISA检测2组细胞自噬相关因子LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ和Beclin-1蛋白水平,应用流式细胞仪检测2组细胞凋亡率,采用Western blot法检测细胞Bax和Bcl-2蛋白相对表达量。结果转染组细胞HAI-1 mRNA相对表达量(1.57±0.26)、AO细胞荧光强度(52.14±3.88)、LC3-Ⅱ蛋白[(3.42±0.85)μg/L]、Beclin-1蛋白[(14.69±1.96)μg/L]水平、细胞凋亡率[(86.75±6.42)%]、Bax蛋白相对表达量(1.24±0.13)和Bax/Bcl-2(7.75±0.83)高于对照组[0.48±0.09、5.47±0.32、(1.10±0.22)μg/L、(10.12±0.53)μg/L、(12.64±1.33)%、0.25±0.06、0.17±0.05)](P0.05),LC3-Ⅰ蛋白水平[(0.59±0.11)μg/L]、Bcl-2蛋白相对表达量(0.16±0.04)低于对照组[(3.26±0.82)μg/L、1.47±0.15](P0.05)。结论 HAI-1转染通过增加HeLa细胞中LC3-Ⅱ和Beclin-1蛋白表达,降低LC3-Ⅰ蛋白表达,提高Bax/Bcl-2来调节宫颈癌细胞的自噬和凋亡。     

儿童免疫性血小板减少症中自噬上调抑制前血小板形成

目的:研究儿童免疫性血小板减少症(ITP)中巨核细胞自噬水平上调对前血小板生成的影响。方法:通过吉姆萨染色和免疫荧光染色法分别观察巨核细胞形态及前血小板的生成,Western blot法检测细胞骨架蛋白和自噬相关蛋白的表达,自噬调节药物(自噬诱导剂Rap,自噬抑制剂3-MA)调控小鼠巨核细胞的自噬。结果:ITP患儿巨核细胞内存在空泡状结构,自噬相关蛋白LC3-II/I和复合物Atg12-Atg5的表达量均显著高于对照组(LC3-II/I:ITP 1.32±0.18 vs Ctrl 0.49±0.16,P0.05; Atg12-Atg5:ITP 0.69±0.17 vs Ctrl 0.12±0.08,P0.05);免疫荧光染色显示,ITP患儿巨核细胞细胞微丝排布异常,同时肌球蛋白磷酸化显著增强((ITP 0.74±0.09; Ctrl 0.05±0.02,P0.05);自噬诱导剂和抑制剂能调控小鼠巨核细胞生成前血小板并改变细胞周期蛋白的表达,Cyclin D1(Veh 1.08±0.12; Rap 0.46±0.04; Rap+3-MA 0.70±0.03),Cyclin D2(Veh 0.47±0.04; Rap 0.27±0.04; Rap+3-MA 0.41±0.03),P21(Veh 0.15±0.01; Rap 0.04±0.01; Rap+3-MA 0.05±0.01)。结论:ITP患儿巨核细胞自噬上调是前血小板形成障碍的关键因素。     

环氧-二十碳三烯酸通过抑制线粒体分裂抑制肺气肿

目的研究环氧-二十碳三烯酸(EET)对慢性阻塞性肺病(COPD)肺气肿的影响和对线粒体动态变化的调节作用,探讨肺气肿和线粒体分裂的关系,进一步阐明EET对肺气肿的抑制作用及其相关分子机制。方法①采用野生型C57BL/6小鼠(WT小鼠)和Ephx2基因敲除小鼠(Ephx2-/-小鼠),随机分为吸入过滤空气组和熏烟组,每周暴露到相应的环境中5 d,每天1 h,熏烟16周建立COPD模型。造模结束后取小鼠肺组织,病理切片HE染色观察肺气肿严重程度;电子显微镜观察线粒体动态变化;肺组织匀浆提蛋白检测线粒体动态调控蛋白Drp1和MFN、自噬调控蛋白PINK1的表达水平。②采用人支气管上皮细胞(Beas-2B细胞系),用香烟烟雾提取物(CSE)刺激24 h建立模型,外源性加入14,15-EET(1μmol/L)(功能最强的EET亚型),研究14,15-EET对Drp1、PINK1和Parkin的作用。结果①与空气组比较,熏烟组小鼠出现明显的肺气肿[(96.38±39.01)μm vs.(29.18±16.6)μm;(57.53±17.81)μm vs.(25.13±10.12)μm],差异有统计学意义(P<0.05),而且Ephx2-/-小鼠的肺气肿程度较WT小鼠减轻[(57.53±17.81)μm vs.(96.38±39.01)μm],差异有统计学意义(P<0.05)。②与空气组比较,熏烟组小鼠肺组织上皮细胞内线粒体分裂明显增加[(5.33±2.52)μm vs.(15.33±5.03)μm;(10.33±1.53)μm vs.(16.33±4.73)μm],差异有统计学意义(P<0.05),而Ephx2-/-小鼠的线粒体分裂水平较WT小鼠减轻[(10.33±1.53)μm vs.(5.33±2.52)μm],差异有统计学意义(P<0.05)。③熏烟造成小鼠肺组织线粒体分裂蛋白Drp1表达水平升高(0.29±0.22 vs.0.18±0.06),融合蛋白MFN2表达下降(0.03±0.01 vs.0.13±0.01),线粒体自噬调节蛋白PINK1的表达升高(0.25±0.04 vs.0.14±0.028),差异有统计学意义(P<0.05)。④CSE刺激Beas-2B细胞后,外源性加入14,15-EET能够抑制Drp1、PINK1和Parkin的表达(1.97±0.43 vs.3.21±0.56,0.84±0.07 vs.2.01±0.20,1.24±0.13 vs.1.87±0.27),差异有统计学意义(P<0.05)。结论①EET可能通过抑制线粒体分裂减轻肺气肿;②其分子机制可能为抑制线粒体分裂调节蛋白Drp1。     

糖原合成酶激酶3β介导细胞自噬在急性肝衰竭中的作用

目的探讨细胞内信号分子糖原合成酶激酶3β(GSK3β)介导细胞自噬在急性肝衰竭(ALF)发生过程中的作用。方法采用氨基酸缺乏的培养基对转染绿色荧光蛋白(GFP)-LC3质粒的C57BL/6小鼠原代肝细胞进行12 h饥饿处理,对照组给予0.2%浓度的二甲基亚砜(DMSO)处理,实验组给予不同浓度的SB216763抑制GSK3β活性后,进行12 h饥饿处理,计数GFP-LC3阳性细胞比例。此外检测在给予10μM的SB216763后不同饥饿处理时间下小鼠肝细胞自噬相关蛋白(LC3Ⅱ、p62、Atg5、Atg7及Beclin-1)的表达水平。采用D-氨基半乳糖(D-Gal N)联合脂多糖(LPS)建立小鼠ALF模型,给予25 mg/kg的SB216763抑制GSK3β活性后检测小鼠肝组织内自噬相关基因和蛋白的表达水平。结果与DMSO+饥饿组相比,给予SB216763(5μM、10μM)的两个干预组GFP-LC3阳性细胞比例均显著增加[(11.6±2.9)%、(44.0±9.8)%、(59.2±13.7)%,P均0.05]。Western-blotting检测结果显示,与对应不同饥饿处理时间(3 h、6 h、12 h)的DMSO+饥饿组比较,SB216763+饥饿组的肝细胞中LC3Ⅱ、Atg5、Atg7和Becilin-1蛋白表达均显著增加,而p62蛋白表达均显著下降(P均0.05)。D-Gal N/LPS诱导的ALF小鼠模型中,SB216763+D-Gal N/LPS组的肝脏组织中自噬相关基因Atg5[(0.626±0.024)vs.(0.243±0.029)]、Atg7[(1.70±0.10)vs.(0.33±0.08)]和Beclin-1[(1.24±0.16)vs.(0.49±0.04)],相关蛋白LC3Ⅱ[(0.173±0.031)vs.(0.093±0.009)]、Atg5[(1.53±0.11)vs.(0.32±0.05)]、Atg7[(0.92±0.14)vs.(0.58±0.12)]和Becilin-1[(0.263±0.050)vs.(0.130±0.022)]的表达水平均较D-Gal N/LPS组显著增高(P均0.05)。结论通过抑制GSK3β活性可促进细胞自噬,从而在ALF中发挥保护性作用。     

miR-802对叉头框转录因子M1抑制A549/DDP细胞顺铂耐药性的靶向调控作用

目的探讨miR-802抑制非小细胞肺癌A549/DDP细胞的顺铂耐药性及其对叉头框转录因子M1(forkhead box protein M1, FoxM1)的靶向调控作用。方法 A549、A549/DDP细胞采用反转录PCR法检测miR-802相对表达量。将A549/DDP细胞分为空白转染组和miR-802过表达组(过表达组),分别转染miR-NC和miR-802类似物(miR-802 mimics),转染24、48、72、96 h后,采用反转录PCR法检测2组细胞miR-802相对表达量,并采用CCK-8法检测2组细胞增殖率;转染48 h后,CCK-8法检测转染后A549/DDP细胞对DDP的敏感性,采用流式细胞仪检测2组细胞凋亡率和细胞周期,采用Western blot法检测转染后A549/DDP细胞内FoxM1蛋白相对表达量。结果 A549/DDP细胞miR-802相对表达量(0.21±0.03)低于A549细胞(0.85±0.12)(P<0.05);转染24、48、72、96 h,过表达组细胞miR-802相对表达量依次增高(P<0.05),且均高于空白转染组(P<0.05);转染48、72、96 h,空白转染组细胞增殖率依次增高(P<0.05),且均高于过表达组(P<0.05);转染48 h,过表达组细胞半数抑制浓度[(35.28±2.17)mg/L]和细胞早期凋亡率[(17.2±1.1)%]均高于空白转染组[(14.22±1.28)mg/L、(9.0±0.8)%](P<0.05),S期和G2/M期细胞比率[(21.30±0.20)%、(8.35±0.33)%]及细胞内FoxM1蛋白相对表达量(0.21±0.04)均低于空白转染组[(27.54±0.52)%、(14.67±0.70)%、0.44±0.06](P<0.05)。结论 miR-802可能通过抑制FoxM1表达而降低非小细胞肺癌A549/DDP细胞的顺铂耐药性。     

休克肠淋巴液对大鼠红细胞膜泵活性及氧自由基的影响

目的 观察休克肠淋巴液引流对失血性休克大鼠、休克肠淋巴液回输对正常大鼠红细胞膜泵活性及氧自由基的影响.方法 雄性Wistar大鼠24只,按随机数字表法分为假休克组、休克组、休克肠淋巴液引流组、休克肠淋巴液回输组,每组6只.休克组与引流组于麻醉和手术后复制失血性休克模型,引流组于休克1 h引流肠淋巴液;假休克组仅麻醉与手术;回输组于麻醉和手术后将引流的休克肠淋巴液回输.各组于休克3 h或相应时间点取腹主动脉血制备红细胞膜悬液,检测红细胞膜泵活性与自由基指标.结果 与假休克组比较,休克组红细胞膜Na+-K+-ATP酶(μmol·mg-1·h-1)、Ca2+-ATP酶(μmol·mg-1·h-1)、超氧化物歧化酶(SOD)活性(NU/mg)均显著降低(Na+-K+-ATP酶:0.039±0.011比0.068±0.010;Ca2+-ATP酶:0.035±0.016比0.087±0.015; SOD活性:0.785±0.289比1.202±0.328,P＜0.05或P＜0.01),丙二醛(MDA)含量(nmol/mg)显著升高(1.914±0.225比0.913±0.138,P＜0.01);与休克组比较,引流组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性(0.056±0.009)、Ca2+-ATP酶活性(0.079±0.025)、SOD活性(1.220+0.380)均显著升高,MDA含量(1.214±0.127)显著下降(P＜0.05或P＜0.01).与假休克组比较,回输组红细胞膜Na+-K+-ATP酶活性(0.050+0.013)、Ca2+-ATP酶活性(0.056±0.023)显著降低(均P＜0.05),SOD活性(0.862±0.288)有所降低(P＞0.05),MDA含量(1.456±0.270)显著升高(P＜0.01).结论 休克肠淋巴液回流是引起红细胞膜泵活性降低、加重红细胞膜自由基损伤的关键因素.     

氢气饱和生理盐水对百草枯中毒大鼠肺组织的作用

目的 探讨氢气饱和生理盐水对百草枯(PQ)中毒大鼠肺损伤及肺纤维化的保护作用.方法 该实验在南昌大学第一附属医院动物实验室完成.48只SD大鼠随机分为对照组、染毒组和干预组,每组16只.染毒组及干预组给予50 mg/kgPQ一次性灌胃染毒,对照组给予等量蒸馏水灌胃.干预组大鼠在染毒1 h后开始予腹腔注射氧气饱和生理盐水5 mL/kg,2次/d,直至处死;染毒组及对照组大鼠按体质量给予等量生理盐水腹腔内注射.于染毒第3天及第21天分别测定各组大鼠动脉血氧分压(PaO2)、肺组织8-羟基脱氧鸟苷(8-OHDG)含量及转化生长因子β1(TGF-31)的表达.结果 (1)染毒后3 d,与对照组比较,染毒组及干预组PaO2均明显下降(P＜0.01);与染毒组比较,干预组PaO2有所改善(P＜0.05).21 d后,与对照组比较,染毒组PaO2仍明显减低(P＜0.01),干预组有一定程度下降(P＜0.05);与染毒组比较,干预组PaO2明显升高(P＜0.01).(2)染毒后3 d,与对照组比较,染毒组8-OHDG含量明显增加(P＜0.01),干预组亦有一定程度增加(P＜0.05);与染毒组比较,干预组8-OHDG含量有明显下降(P＜0.01).21 d后,各组间比较差异无统计学意义(P＞0.05).(3)染毒后3 d,与对照组比较,染毒组TGF-β1表达明显增加(P＜0.01),干预组有一定程度增加(P＜0.05);干预组较染毒组间比有一定下降(P＜0.05).21 d后,与对照组比较,染毒组TGF-β1表达明显增加(P＜0.01),干预组有一定增加(P＜0.05);与染毒组比较,干预组TGF-β1表达明显下降(P＜0.01).结论 氢气饱和生理盐水能改善PQ大鼠氧化应激状态,减轻肺氧化损伤,降低肺纤维化程度.     

PCOS患者治疗前后性激素的变化及其与胰岛素抵抗、肥胖的关系

目的探究多囊卵巢综合征(PCOS)患者治疗前后性激素的变化及其与胰岛素抵抗(IR)、肥胖的关系。方法回顾性选取2020年1～12月山西省儿童医院(山西省妇幼保健院)妇产科及生殖医学中心接收的80例PCOS患者作为实验组,另收集正常育龄妇女75名为对照组。其中实验组给予饮食、锻炼指导及盐酸二甲双胍和炔雌醇环丙孕酮片等基础治疗,比较实验组治疗前后与对照组相关性激素[卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、黄体生成素(LH)]的变化。并根据IR将实验组分为PCOS-IR组(n=49)与PCOS-非IR组(n=31),根据体重指数(BMI)将实验组分为PCOS肥胖组(BMI≥25 kg/m²,n=50)与PCOS非肥胖组(BMI≥25 kg/m²,n=30),分析性激素与IR、肥胖的关系。结果实验组治疗前FSH水平为(7.63±3.64) IU/L,显著低于对照组[(10.21±5.01) IU/L],而T、LH水平为(3.18±2.01)nmol/L、(19.13±9.96) IU/L,显著高于对照组[(1.05±0.55) nmol/L、(11.38±...     

新生儿ABO溶血病并红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症临床对比分析

目的 探讨新生儿ABO溶血病、红细胞葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PD)缺乏症及两者合并患儿的临床特点.方法 对160例新生儿ABO溶血病(ABO组)、219例G-6-PD缺乏症(G6PD组)、52例新生儿ABO溶血病并G-6-PD缺乏症(ABO+G617D组)3组临床相关指标进行对比分析.结果 G6PD组血红蛋白[(159.7±24.9)g/L]高于ABO组[(150.2±23.0)g/L]和ABO+G6PD组[(149.2±22.8)g/L],差异均有统计学意义(P均<0.01);血清总胆红紊高于ABO组[(419.0±152.9)μmol/L与(355.4±113.2)μmol/L],差异有统计学意义(P<0.01);黄疸消退时间较ABO组长[(9.4±2.3)d与(8.1±2.2)d],差异有统计学意义(P<0.01).ABO+G6PD组黄疸消退时间[(12.0±2.7)d]、光疗时间[(43.2±16.0)h]、光疗次数[(3.5±1.2)次]均长或多于ABO组[(8.1.4-2.2)d、(36.1 4-15.9)h、(2.6±1.2)次]及其G6PD组[(9.4±2.3)d、(37.6±17.3)h、(2.8 4-1.3)次],差异均有统计学意义(P均<0.05).G6PD组胆红素脑病(16.O%)、低钙血症发生率(32.9%)高于ABO组(6.9%、20.0%),差异有统计学意义(P<0.05);而其贫血发生率(23.3%)则低于ABO组(40.0%)及其ABO+G6PD组(51.9%),差异有统计学意义(P<0.01).结论 新生儿ABO溶血病并G-6-PD缺乏症时,黄疸出现时间、黄疸程度、胆红素脑病发生率与新生儿ABO溶血病、G-6-PD缺乏症差异无显著性,但黄疸消退时间更长,黄疸更易反复.G-6-PD缺乏症与新生儿ABO溶血痛相比,黄疸程度更重,退黄时间更长,更易发生胆红素脑病,但贫血发生率更低.     

补阳还五汤对缺血性脑卒中大鼠神经元自噬的保护作用及机制分析

目的探究补阳还五汤中药对大脑中动脉闭塞(MCAO)大鼠再灌注24 h后抗神经元缺血损伤的治疗效果,并分析其改善神经元自噬相关的可能作用机制。方法采用MCAO法对成年雄性SD大鼠进行大脑中动脉闭塞处理2 h,再灌注24 h后成模,分为假手术组、模型组和治疗组。模型组和治疗组大鼠在MCAO造模手术后进行24 h再灌注,治疗组腹腔注射补阳还五汤方剂,模型组和假手术组大鼠均腹腔注射接受等体积的生理盐水,共计14 d。再灌注损伤后1 d、7 d、14 d进行神经系统损伤严重程度(NSS)评分;第14天进行平衡木行走试验;采用苏木精-伊红染色法测定大脑梗死体积;采用免疫组化分析皮质缺血区存活神经元密度;采用免疫印迹法对自噬相关蛋白表达水平(Beclin1,LC3)和线粒体动力学蛋白水平(Parkin,DRP1,OPA1)。结果与假手术组比较,模型组在MACO术后1 d、7 d、14 d NSS评分显著升高;第7天模型组和治疗组间NSS评分无显著差异(P> 0. 05),第14天时治疗组大鼠NSS评分显著低于同时间点的模型组大鼠评分(P <0. 01)。与假手术组相比,模型组大鼠通过平衡木的时间均显著延长(P <0. 01);而与模型组相比,治疗组大鼠通过平衡木的时间显著缩短(P <0. 01)。第14天后,与假手术组相比,模型组大鼠脑梗死面积百分比显著升高,缺血皮质缺血区神经元密度显著下降(P <0. 01);与模型组比较,治疗组大鼠脑梗死面积百分比显著降低,皮质区神经元丢失程度显著缓解(P <0. 01)。与假手术组相比,模型组大鼠皮质区Beclin1、LC3-II、Parkin、DRP1和OPA1水平显著均下降(P <0. 001),而与模型组相比,治疗组皮质区Beclin1、LC3-II、Parkin、DRP1和OPA1蛋白表达下降程度显著缓解(P <0. 01)。结论补阳还五汤通过调节大鼠脑卒中后皮质缺血区域自噬,稳定线粒体功能,发挥神经保护作用。     

精神分裂症患者外周血液中Reelin蛋白的表达

目的探讨Reelin蛋白与精神分裂症的关系。方法将89例精神分裂症患者作为精神分裂症组,89例健康者作为对照组,采用Western blot检测其外周血Reelin蛋白的表达。结果精神分裂症组患者外周血Reelin蛋白表达水平（0.66±0.27）显著低于对照组（1.01±0.23）（P〈0.05）。精神分裂症组男、女性患者Reelin蛋白表达水平分别为0.66±0.22、0.66±0.26,二者差异无统计学意义（t=0.181,P〉0.05）,对照组男、女性受检者Reelin蛋白表达水平分别为1.01±0.25、1.02±0.26,二者差异无统计学意义（t=0.201,P〉0.05）。结论 Reelin蛋白表达的降低与精神分裂症有关。     

胃癌患者外周血凝血指标与临床分期的相关性分析

目的探讨胃癌患者术前外周血五项凝血指标与胃癌的临床分期、胃癌转移之间的相关性,以及不同临床分期患者的凝血状况及其临床意义。方法选择首次诊断为胃癌的868例患者（胃癌组）,并以同期住院的腹股沟疝患者213例作为对照组。观察两组患者术前外周血五项凝血指标：凝血酶原时间（PT）、活化部分凝血活酶时间（APTT）、纤维蛋白原（FBG）、血浆凝血酶时间（TT）和血小板（PLT）计数,对其结果进行统计学分析。结果（1）胃癌组与对照组比较,外周血血浆胛[（11．51±1．21）s与（11．27±0．91）s,t=-3．226,P〈0．01]、FBG[（3010．0±470．4）mg／L与（2307．1±651．8）mg／L,t=-4．240,P〈0．01]、PLT计数[（238．57±78．50）×10^9／L与（206．794-61．01）×10^9／L,t=-5．514,P〈0．01]明显增高。（2）两组外周血FBG差异具有统计学意义（P〈0．05）;血浆PT、PLT计数明显增高,差异有统计学意义（P〈0．01）;胃癌组各临床分期外周血APTT、TT和健康对照组相比,差异无统计学意义（P均〉0．05）。（3）胃癌无转移组与有转移组相比,术前外周血PT[（11．41±0．99）s与（11．57±1．32）s,t=-2．095,P〈0．05]延长、FBG含量[（2639．1±748．6）mg／L与（3233．2±591．60）mg／L,t=-2．307,P〈0．05]增加,PLT计数[（224．02±76．94）×10^9／L与（247．32士78．37）×10^9／L,t=-4．299,P〈0．01]显著增加。（4）胃癌患者外周血五项凝血指标与临床分期的相关分析,PT（r=0．071,P〈0．05）、FBG（r=0．271,P〈0．01）、PLT（r=0．166,P〈0．01）呈正相关,TT（r=-0．077,P〈0．05）呈负相关,其中FBG与临床分期的相关系数最大。结论胃癌患者大多数存在血液高凝状态和出血倾向,尤其以晚期胃癌显著,且随胃癌临床分期的增加,部分凝血指标出现增高趋势;临床上对凝血指标的变化监测可间接预示胃癌的发生、浸润和转移。     

高渗盐水联合羟乙基淀粉治疗严重脓毒症的研究

目的 评价7.5%高渗盐水(HS)联合6%羟乙基淀粉(HES)130/0.4对严重脓毒症患者早期液体复苏的效果.方法 采用前瞻性随机对照研究.选取江汉大学附属医院重症监护病房(ICU)135例严重脓毒症患者,入ICU时随机分成3组,每组45例.HS+HES组输注7.5%HS后输注6%HES 130/0.4 500 ml,再输注平衡液HES组输注6%HES 130/0.4后输注平衡液;平衡液组(RL组)仅输注平衡液.比较3组患者入ICU后6 h、24 h平均动脉压(MAP)、氧合指数(PaO2/FiO2)、动脉血乳酸、乳酸清除率、急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHE Ⅱ)评分、输液量、尿量以及多器官功能障碍综合征(MODS)发生率和住院病死率.结果 入ICU后6 h,HS+HES组MAP[mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa):68.7±3.0]、PaO2/FiO2(mm Hg:262.2±17.4)、乳酸清除率[(21±4)%]较HES组[MAP:63.8±3.5,PaO2/FiO2:252.0±21.2,乳酸清除率:(11±2)%]和RL组[MAP:62.6±3.6,PaO2/FiO2:248.4±17.0,乳酸清除率:(9±1)%]显著增高(均P＜0.01),动脉血乳酸(mmol/L:3.5±0.7)较HES组(4.1±0.7)和RL组(4.0±0.7)显著下降(均P＜0.01);APACHE Ⅱ评分(分:13.2±1.9)与HES组(14.0±1.6)无明显差异,但显著低于RL组(15.2±1.7,P＜0.01).入ICU后24 h,HS+HES组PaO2/FiO2(mm Hg:303.3±17.3)显著高于HES组(282.9±21.1)和RL组(268.9±15.2,均P＜0.01),但3组间MAP、动脉血乳酸、乳酸清除率和APACHE Ⅱ评分均无差异.人ICU后6 h、24 h,HS+HES组输液量(ml,6 h:1 877.8±215.2,24 h:5 475.6±208.8)显著低于HES组(6 h:2 505.6±276.2,24 h:6 383.3±287.4)和RL组(6 h:3 496.7±325.5,24 h:7 439.6±229.6);尿量(ml,6 h:294.2±36.9,24 h:2 793.8±37.1)显著高于HES组(6 h:248.9±25.3,24 h:2 248.9±25.3)和RL组(6 h:178.9±14.8,24 h:2 000.4±147.0,均P＜0.01).HS+HES组MODS发生率(6.7%)远低于RL组(28.9%,P＜0.05),与HES组(17.8%)无差异(P＞0.05);3组间病死率无显著差异(HS+HES组2.2%,HES组4.4%,RL组8.9%,均P＞0.05).结论 7.5%HS联合6%HES 130/0.4能提高严重脓毒症患者早期液体复苏的效果,降低MODS发生率.

Abstract：

Objective To evaluate the effect of 7. 5% hypertonic saline(HS)and 6% hydroxyethyl starch (HES)130/0.4 on early fluid resuscitation for severe sepsis. Methods Prospective randomized control trial was carried out in intensive care unit(ICU)of the Affiliated Hospital of Jianghan University. One hundred and thirty-five patients with severe sepsis were randomly divided into three groups, each group consisted of 45 patients. Patients in HS+HES group received lactated Ringer solution following 4 ml/kg of 7. 5%HS and 6%HES 130/0. 4 500 ml, those in HES group received lactated Ringer solution following 6%HES 130/0.4500 ml, and those in the lactated Ringer group(RL group)received lactated Ringer solution only. Mean arterial pressure(MAP), oxygenation index(PaO2/FiO2), arterial lactate(Lac), lactate clearance rate,acute physiology and chronic health evaluation Ⅱ(APACHE Ⅱ)score, fluid infusion volume, urine output as well as incidence of multiple organ dysfunction syndrome(MODS), and mortality were compared among three groups at 6 hours and 24 hours after ICU admission. Results At 6 hours after ICU admission, MAP [mm Hg(1 mm Hg=0. 133 kPa): 68. 7±3. 0], PaO2/FiO2(mm Hg: 262.2±17.4), lactate clearance rate [(21±4)%]in HS+HES group were significantly higher than those in HES group[MAP: 63. 8±3.5,PaO2/FiO2: 252.0 ± 21.2, lactate clearance rate:(11± 2)%]and RL group[MAP: 62.6 ± 3. 6, PaO2/FiO2 :248. 4±17.0, lactate clearance rate:(9± 1)%, all P＜0. 01]. Arterial Lac in HS+HES group(mmol/L:3. 5±0. 7)was significantly lower than that in HES group(4. 1±0. 7)and RL group(4. 0±0. 7, both P＜0. 01). There was no significant difference in APACHE Ⅱ score between HS+HES group(13. 2±1.9)and HES group(14.0±1.6), and the APACHE Ⅱ score in HS+HES group was significantly lower than that in RL group(15. 2 ± 1.7, P＜ 0. 01). At 24 hours after ICU admission, PaO2/FiO2(mm Hg: 303.3 ± 17.3)was significantly higher in HS+HES group than that in HES group(282.9 ± 21.1)and RL group(268. 9 ±15.2,both P＜ 0.01). There was no significant difference in MAP, arterial Lac, lactate clearance rate and APACHE Ⅱ score among three groups. At 6 hours and 24 hours after ICU admission, fluid infusion volume in HS+HES group(ml, 6 hours: 1 877. 8±215. 2, 24 hours: 5 475.6±208.8)was markedly less than that in HES group(6 hours: 2 505.6±276.2, 24 hours: 6 383. 3±287.4)and RL group(6 hours: 3 496. 7±325.5, 24 hours: 7 439.6±229.6), yet urine output in HS+HES group(ml, 6 hours: 294.2±36.9,24 hours: 2 793.8 ±37.1)was significantly higher than that in HES group(6 hours: 248.9 ± 25. 3,24 hours: 2 248. 9±25. 3)and RL group(6 hours: 178. 9±14.8, 24 hours: 2 000. 4±147.0, all P＜0. 01).The incidence of MODS in HS+HES group(6.7%)was statistically lower than that in RL group(28. 9%,P＜0. 05), while no obvious difference was found between HS+HES group and HES group(17.8%, P＞0. 05). There was no significant difference in mortality among three groups(HS+HES group: 2.2%, HES group: 4.4%, RL group: 8.9%, all P＞0. 05). Conclusion 7.5%HS and 6%HES 130/0. 4 could improve the effect of early fluid resuscitation on severe sepsis, and it could lower the incidence of MODS.     

帕米膦酸二钠辅助NP化疗乳腺癌骨转移对血清ICTP、OSC、OPG及尿NTX的影响

目的探讨帕米膦酸二钠辅助NP(长春瑞滨和顺铂)方案化疗乳腺癌骨转移的效果及对血清Ⅰ型羧基末端肽(ICTP)、骨钙素(OSC)、骨保护素(OPG)、尿Ⅰ型胶原吡啶交链氨基末端肽(NTX)的影响。方法回顾性选取2015年5月至2017年5月盘锦辽油宝石花医院收治的98例晚期乳腺癌发生骨转移的患者作为研究对象,按照治疗方案不同分为两组,其中49例患者接受NP方案化疗(NP组)、另外49例患者接受NP方案+帕米膦酸二钠治疗(联合组)。比较两组的化疗效果,化疗前、治疗2个月后的血清ICTP、OSC、OPG及尿NTX水平变化,2年生存率及不良反应。结果治疗后,联合组患者的痊愈率24.49%、显效率51.02%、有效率16.33%、无效率8.16%,NP组患者的痊愈率14.29%、显效率36.73%、有效率32.65%、无效率16.33%,联合组的疗效优于NP组,差异有统计学意义(P <0.05)。治疗前,联合组和NP组患者的血清ICTP、OSC、OPG及尿NTX水平差异无统计学意义(P> 0.05);治疗2个月后联合组的ICTP、OSC、OPG尿NTX为(3.80±0.91) ng/m...     

3-甲基腺嘌呤对大鼠新生期惊厥致神经行为损伤的干预

目的 探讨大鼠新生期反复惊厥急性期应用自噬抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)对惊厥所致神经行为损伤的干预作用及机制。方法 实验在苏州大学衰老与神经疾病实验室进行。日龄6d(P6,下同)的Sprague-Dawley大鼠45只随机(随机数字法)分成三组,每组15只,惊厥组在P6吸入三氟乙醚诱导惊厥发作,持续30 min,连续6d;对照组同样操作但不吸入三氟乙醚;3-MA组惊厥前腹腔注射3 -MA(总量2μL),同样方法吸入三氟乙醚诱导惊厥,方法同惊厥组。三组大鼠于P12进行游泳行为评分测试大鼠神经运动发育,P17进行旷场实验,P43～P49行Morris水迷宫测试大鼠学习记忆功能,于PS0取海马组织,采用免疫印迹技术(Western blot)检测抗凋亡基因Bcl-2及自噬标记蛋白Beclin1的表达。各组行为学指标和蛋白水平采用方差分析进行统计。结果 惊厥后各组大鼠游泳行为测评,各项评分惊厥组明显低于对照组及3-MA组(P＜0.01),旷场实验显示惊厥组延迟时间[(13.33±6.69)8]较对照组[(7.11±2.37)8]和3-MA组[(9.91±4.23)s]显著延长,差异具有统计学意义(F=4.39,P＜0.05);Morris水迷宫测试RS组第4、5天逃避潜伏期较对照组和3-MA组明显延长(P＜0.05)。惊厥组海马Bcl-2表达水平(0.587±0.139)较对照组(0.782±0.083)及3-MA组(0.799±0.163)显著降低,差异具有统计学意义(F=4.71,P＜0.05)。各组Beclin1的表达差异无统计学意义(F =0.27,P＞0.05)。结论 3-MA能显著改善大鼠惊厥后神经行为损伤,并可能与上调海马抗凋亡基因Bcl-2表达有关。