超高效液相色谱-串联质谱法测定中毒样品中3-硝基丙酸

目的建立超高效液相色谱-串联质谱法测定甘蔗、甘蔗渣、呕吐物、血清和尿液中3-硝基丙酸(3-NPA)含量的方法。方法样品加入乙腈和氯化钠超声振荡提取并离心,上清液经PSA固相萃取柱净化后用10%氨水-甲醇溶液(10∶90,V/V)洗脱,洗脱液用氮气吹至近干,用0.4%甲酸水溶解,0.22μm微孔滤膜过滤。选用Waters acquity BEH C18色谱柱(2.1 mm×150 mm×1.7μm)、乙腈-水为流动相、梯度洗脱分离、ESI源、负离子模式、多反应监测方式,基质匹配外标法定量测定3-NPA的含量。结果在1.0~50μg/kg的浓度范围内,3-NPA在甘蔗和血清等基质中有良好的线性关系,相关系数分别为0.9993和0.9998,方法检出限为0.06~0.30μg/kg,定量限为0.20~1.0μg/kg;在加标水平为1.0、10.0和100.0μg/kg时3-NPA的加标回收率在86.9%~102.0%之间,相对标准偏差在1.80%~4.19%之间。结论超高效液相色谱-串联质谱法可准确、快速测定各种中毒样品中的3-NPA,可用于因误食霉变甘蔗引起中毒的应急事件处理。     

凝胶净化-高效液相色谱法测定霉变甘蔗中3-硝基丙酸

目的建立凝胶净化-高效液相色谱法测定霉变甘蔗中3-硝基丙酸(3-nitropropionic acid,3-NPA)的方法。方法样品利用乙腈涡旋震荡提取,提取液经凝胶渗透色谱净化后,用高效液相色谱法进行测定。色谱柱为Agilent Eclipse plus C_(18)柱(4.6 mm×150 mm,5μm),柱温40℃,进样体积10μL,流动相为A:0.02 mol/L的KH_2PO_4水溶液(以磷酸调pH 3.0),B:乙腈,等度洗脱。结果方法线性范围为0.5～20.0 mg/kg,相关系数为0.99989,方法检出限为0.05 mg/kg,定量限为0.15 mg/kg,不同浓度水平的加标回收率为91.7%～99.4%,精密度为7.23%～8.62%(n=6)。结论该方法稳定准确,适用于霉变甘蔗中3-硝基丙酸的检测。     

免试剂离子色谱法测定变质甘蔗中3-硝基丙酸

目的:建立变质甘蔗中3-硝基丙酸(3-NPA)的简便快速离子色谱法。方法:利用dionex1500型离子色谱仪,选用AS19阴离子分析柱,20 mmol KOH淋洗液,流速为1.00 ml/min,电导检测器。样品用纯水超声提取后,经高速离心0.2μm滤膜过滤后直接进样。结果:本法相关性好(r=0.9998),精密度高(RSD<3.0),样品平均加标回收率为96%～102%,定性检出限为0.03 mg/kg,定量检出限为0.08 mg/kg。结论:该方法简便快速、灵敏度高、选择性强,适用于变质甘蔗食物中毒分析。     

3-硝基丙酸的代谢研究

3-硝基丙酸是引起变质甘蔗中毒的主要毒性物质。本实验采用定位氚标记物,对3-硝基丙酸体内外代谢进行了研究。结果表明,[2,3-~3H]3-硝基丙酸在体外实验条件下不被大鼠肝微粒体酶所代谢。进入动物体内后,肾、肝的放射性最高,各脑区分布未见明显差别,放射性核素与脑组织成分无特异性结合,3天内从尿、粪排出的总放射性为灌胃量的22.3％,其余的以最终代谢产物均匀掺入各组织中。     

我国部分地区甘蔗中3-硝基丙酸含量的调查

3-硝基丙酸是变质甘蔗食物中毒的主要毒性物质。利用薄层色谱测定法测定了河南、河北、广西、福建和广东五省的甘蔗中3-NPA的含量。1987年测定88份,阳性率为21.6％,含量范围为2～134ppm;1988年测定了308份,阳性率为12.7％,含量范围为2～400ppm。文中对影响甘蔗污染3-硝基丙酸的因素做了讨论。     

3－硝基丙酸在大鼠体内的代谢研究

３－硝基丙酸（３－ＮＰＡ）是引起变质甘蔗中毒的主要毒性物质。本文报告了采用气相色谱－热能检定器的化学痕量分析方法和同位素示踪技术，研究３－ＮＰＡ在大鼠体内的代谢。结果表明，３－ＮＰＡ具有经胃肠道吸收快，组织分布广泛、转化、消失较快的特点。灌胃后５ｍｉｎ不同脑区均可检出３－ＮＰＡ，其中纹状体、海马的含量明显高于大脑皮层，这与变质甘蔗中毒患者的发病特点与病理改变相一致。     

3－硝基丙酸脂质过氧化作用的实验研究

９只雄性大鼠以８０ｍｇ／ｋｇ３－硝基丙酸（３－ＮＰＡ）经口染毒后１５、３０和４５ｍｉｎ时，在肝脏中用电子自旋共振仪可检测到较强的自由基信号。肾上腺素红法测定发现５×１０－３～１０－２ｍｏｌ／Ｌ３－ＮＰＡ可明显促进肝与脑微粒体和线粒体产生自由基。８０ｍｇ／ｋｇ３－ＮＰＡ灌胃染毒大鼠肝和脑中ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性上升，ＭＤＡ含量升高。因此３－ＮＰＡ在体内和体外均有诱发脂质过氧化作用的能力。     

3－硝基丙酸脂质过氧化作用的实验研究

９只雄性大鼠以８０ｍｇ／ｋｇ３－硝基丙酸（３－ＮＰＡ）经口染毒后１５、３０和４５ｍｉｎ时，在肝脏中用电子自旋共振仪可检测到较强的自由基信号。肾上腺素红法测定发现５×１０－３～１０－２ｍｏｌ／Ｌ３－ＮＰＡ可明显促进肝与脑微粒体和线粒体产生自由基。８０ｍｇ／ｋｇ３－ＮＰＡ灌胃染毒大鼠肝和脑中ＳＯＤ和ＧＳＨ－Ｐｘ活性上升，ＭＤＡ含量升高。因此３－ＮＰＡ在体内和体外均有诱发脂质过氧化作用的能力。     

甘蔗及甘蔗汁中3-硝基丙酸的薄层色谱测定法

甘蔗及甘蔗汁中的3-硝基丙酸经提取、净化后,在硅胶G薄层色谱板上,与酚试剂反应,在长波紫外灯下形成黄色荧光显色物,本法最低检出量为0.2μg,按本方法测定甘蔗及甘蔗样品中3-硝基丙酸的最低检量为2ppm。在样品中加入3-硝基丙酸水平为1～10ppm时,其回收率范围为80.0～106.0%之间。     

Quantitative determination of conjugated linoleic acid isomers by silver ion HPLC in ewe milk fat

The aim of this research was to validate a method for the quantification of conjugated linoleic acid (CLA) isomers in the fat of ewe's milk. The isomers in the form of methyl ester (FAME) are separated by silver ion high performance liquid chromatography (Ag⁺HPLC) and the quantification was based on the measurement of the integrated area under the 231 nm peaks, using external CLA reference standards. The response linearity is maintained in a wide range of concentrations and the quantification limit estimated was of 0.005 μg/injection for the cis-9,trans-11 and trans-10,cis-12 isomers. Referred to the samples this limit would be 0.008 mg/g of fat in the usual working conditions. In the precision assay an RSDr of 2.14% for the isomer cis-9,trans-11 was calculated and for the rest of the CLA isomers varied between 2.08 and 7.5%. The recovery assays were performed adding CLA cis-9,trans-11 triglyceride and the mean recovery was 96%. The method proposed allows the determination of the individual content of different CLA isomers using one single technique, HPLC and supposes saving time and resources.     

Striatal mitochondria response to 3-nitropropionic acid and fish oil treatment

Background: Mitochondrial dysfunction is involved in neurodegenerative diseases, such as Huntington's disease (HD). 3-Nitropropionic acid (3-NP) is a mitochondrial toxin that specifically inhibits complex II of the electron transport chain (ETC) and is used to generate an experimental model of HD.

Objective: To study the effect of fish liver oil (FO) over the mitochondrial dysfunction induced via partial ETC inhibition by 3-NP.

Methods: This study was performed in rats and consisted of two phases: (i) administration of increasing doses of 3-NP and (ii) administration of FO for 14 days before to 3-NP. The rats’ exploratory activity; complex I, II, III, and IV activities; and rearing behavior were observed. Additionally, the number of TUNEL-positive cells and various mitochondrial parameters, including oxygen consumption, transmembrane potential, adenosine triphosphate synthesis, and ETC activity, were measured.

Results: We observed that FO exerted a protective effect against the 3-NP-induced toxicity, although complex II inhibition still occurred. Instead, this effect was related to strengthened mitochondrial complex III and IV activities.

Discussion: Our results show that FO exerts a beneficial prophylactic effect against mitochondrial damage. Elucidating the mechanisms linking the effects of FO with its prevention of neurodegeneration could be the key to developing recommendations for FO consumption in neurological pathologies.     

3-硝基丙酸尾-壳核损伤动物模型的建立和初步应用

首先以3-硝基丙酸(3-NPA)10mg/kg腹腔注射,每日6次,每次间隔1.5h的染毒方式,在大鼠中复制出一个重复性较好的3-NPA尾-壳核损伤的动物模型。然后利用模型染毒方式研究了3-NPA中毒大鼠血脑屏障的改变情况。结果表明血脑屏障破坏属于继发性改变。     

HPLC法测定食品中山梨酸的不确定度评估

目的 通过对HPLC法测定食品中山梨酸含量的不确定度进行分析,找出影响测量中对合成不确定度贡献较大的分量.方法 详细介绍进行不确定度评定的方法和步骤.结果 果汁中山梨酸的相对不确定度为0.76％,扩展不确定度为0.01 g/kg.结论 该方法对类似HPLC法测定物质含量的不确定度评定有借鉴和参考作用.     

高效液相色谱法测定饮料中苯甲酸含量的不确定度分析

高效液相色谱法是测定食品中山梨酸苯甲酸的国标第二法。本文对用该法测定饮料中苯甲酸的测量不确定度进行分析 ,以期找出影响不确定度的因素 ,对不确定度进行评估 ,给出不确定度 ,能如实反映测量的置信度和准确性 ,为管理科室评价报告提供科学依据 ,为客户提供优质服务。对不确定度进行分析 ,要求检测人员严格按照操作规程操作仪器 ,确保测量过程中仪器正常运转 ,消除各种影响实验结果的意外因素 ,尽量减少人为误差。1　材料和方法1.1　测试方法依据GB/T5 0 0 9.2 9[1] ,用由国家标准物质研究中心提供的编号为BW (E) 10 0 0 0 6苯甲酸标…