溃疡性结肠炎患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞的临床意义

目的研究溃疡性结肠炎（UC）患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量、相关细胞因子的水平以及Foxp3的表达,分析它们在UC发病中的作用。方法收集UC患者及健康对照组外周抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞。分析UC患者外周血CD4^＋CD25^＋调节性T细胞百分率,RT-PCR检测T细胞Foxp3mRNA的表达。结果与正常对照组相比,UC患者外周血CD4^＋T、CD25^＋T、CD4^＋CD25^＋T／CD4^＋T细胞百分率均显著下降（P〈0．05）,血清中细胞因子IL-10、TGF-β1的水平也明显低于对照组,T细胞Foxp3mRNA的表达也明显降低（P〈0．05）,并且CD4^＋CD25^＋T／CD4^＋T细胞百分率和Foxp3mRNA水平与UC患者疾病的活动指数呈负相关。结论UC患者外周血存在细胞免疫功能失调,CD4^＋CD25^＋调节性T细胞数量与功能状态发生改变,T淋巴细胞耐受机制的破坏可能与UC的疾病活动状态和发病机制有关。     

皮肌炎患者外周血CD4^＋ T细胞中TGF-β1 mRNA表达及意义

目的：检测活动期皮肌炎（dermatomyositis,DM）患者外周血CD4^＋T细胞中转化生长因子β1（transforminggrowth factor-β1,TGF-β1）以及血清磷酸肌酸激酶（CK）含量。初步探讨CD4^＋T细胞TGF-β1在皮肌炎发病机制中的作用。方法：收集12例活动期皮肌炎患者和12例健康对照者外周血,采用免疫磁珠分离法获得CD4^＋T细胞,通过RT-PCR方法检测出各组TGF-β1表达水平。观察CD4^＋T细胞中TGF-β1表达与CK含量的相关性。结果：活动期皮肌炎患者外周血CD4^＋T细胞中TGF-β1相对表达量为0.751±0.107,显著高于健康对照0.438±0.170（P〈0.05）。CD4^＋T细胞TGF-β1表达量与CK含量呈中度正相关（r=0.67,P〈0.05）。结论：活动性皮肌炎患者外周血CD4^＋T细胞中TGF-β1 mRNA表达显著升高,可能与皮肌炎疾病发生有关。     

溃疡性结肠炎患者调节性T细胞及Foxp3基因的研究

目的研究溃疡性结肠炎(UC)患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞数量、相关细胞因子的水平以及Foxp3基因的表达,分析它们在UC发病机制中的作用。方法收集UC患者及健康对照组外周抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞。PE标记的抗CD4单抗,FITC标记的抗CD25单抗,作双色流式细胞术,分析UC患者外周血CD4 CD25 调节性T细胞百分率,ELISA法检测血清中相关细胞因子IL-10、TGF-β1的水平,RT-PCR检测T细胞Foxp3 mRNA的表达。结果与正常对照组相比,UC患者外周血CD4 T、CD25 T细胞百分率作及CD4 CD25 T/CD4 T均显著下降(P均<0.05),细胞因子IL-10、TGF-β1的水平也显著降低(P<0.05),T细胞Foxp3 mRNA的表达也明显降低(P<0.05)。结论UC患者外周血存在细胞免疫功能失调,CD4 CD25 调节性T细胞数量与功能状态发生改变,T细胞耐受机制的破坏可能与UC的疾病活动状态和发病机制有关。     

TGF-β1上调CD4+CD25+调节性T细胞FOXP3的表达

目的 探讨转化生长因子-β1(TGF-β1)在肺癌患者CD4 CD25 调节性T细胞比例增高中发挥的作用.方法 采用酶消化法培养原代肺癌细胞,将培养的肺癌细胞及肺癌细胞培养上清液分别与自身来源的外周血单个核细胞共培养,不同浓度(2、5、10 ng/ml)的TGF-β1进行干预后,检测各组CD4 CD25 调节性T细胞标志物FOXP3 mRNA的表达.结果 肺癌细胞与外周血单个核细胞共培养组FOXP3 mRNA的表达呈阳性,且随着TGF-β1干预浓度的增加,FOXP3 mRNA的表达强度逐渐增高,两者呈正相关(r=0.663,P＜0.05);外周血单个核细胞经肺癌细胞培养上清液孵育后亦有FOXP3 mRNA的表达,TGF-β1干预后,FOXP3 mRNA的表达虽有上调但与干预前相比,差异无显著性意义(P＞0.05).结论 TGF-β1能上调外周血单个核细胞中FOXP3的表达,即增加CD4 CD25 调节性T细胞的比例,从而参与肺癌免疫逃逸机制.     

溃疡性结肠炎患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的临床意义

目的 研究溃疡性结肠炎(UC)患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞数量、相关细胞因子的水平以及Foxp3的表达,分析它们在UC发病中的作用.方法 收集UC患者及健康对照组外周抗凝静脉血,分离纯化T淋巴细胞.分析UC患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞百分率, RT-PCR检测T细胞Foxp3mRNA的表达.结果 与正常对照组相比,UC患者外周血CD4+T、CD25+T、CD4+CD25+T/CD4+T细胞百分率均显著下降(P﹤0.05),血清中细胞因子IL-10、TGF-β1的水平也明显低于对照组,T细胞Foxp3mRNA的表达也明显降低(P﹤0.05),并且CD4+CD25+T/CD4+T细胞百分率和Foxp3mRNA水平与UC患者疾病的活动指数呈负相关.结论 UC患者外周血存在细胞免疫功能失调,CD4+CD25+调节性T细胞数量与功能状态发生改变,T淋巴细胞耐受机制的破坏可能与UC的疾病活动状态和发病机制有关.     

炎症性肠病患者肠黏膜白细胞介素18的表达及意义

目的：探讨炎症性肠病患者肠黏膜白细胞介素18（IL－18）的表达及与疾病活动性的关系。方法：活动期克罗恩病（CD）和溃疡性结肠炎（UC）患者分别为23例和20例，其中CD9例、UC11例经药物（SASP或SASP＋糖皮质激素）治疗后达缓解期；20例对照来自于非炎症性肠病患者手术切除之正常结肠组织。采用半定量RT－PCR检测肠黏膜IL－18 mRNA表达，免疫组化方法原位检测肠黏膜组织中IL－18蛋白表达量。结果：活动期CD患者肠黏膜IL－18mRNA表达显著高于活动期UC和对照组，活动期UC与对照组比较差异无显著性。免疫组化显著肠黏膜上皮细胞和固有层单个核细胞（主要是巨噬细胞和树突状细胞）表达IL－18；活动期CD患者表达量显著高于活动期UC和对照，活动期UC与对照比较差异无显著性；缓解期CD患者IL－18表达与活动期相比显著下降，UC患者IL－18表达下降则差异无显著性。结论：IL－18参与了炎症性肠病的发病过程，并与CD活动有关。     

肾癌患者外周血中TGF-β1mRNA表达及其意义

目的探讨肾癌外周血TGF-β1mRNA表达水平的高低对肾癌发病的作用及其诊断和鉴别价值。方法采用RT-PCR方法检测80例肾癌患者和80例正常对照者外周血中TGF-β1mRNA的表达水平。结果肾癌患者组与健康对照组TGF-β1mRNA水平差异有统计学意义（P〈0.05）,肾细胞癌组与其他类型肝癌的TGF-β1mRNA水平比较无显著性差异（P〈0.05）,不同分期的TGF-β1mRNA水平比较有统计学意义（P〈0.05）。结论 TGF-β1mRNA表达水平升高与肾癌的发病相关,且随病程发展会逐渐升高。     

急性冠状动脉综合征患者调节性T细胞亚群Th3细胞的改变及临床意义

目的探讨调节性T细胞亚群Th3细胞在急性冠脉综合征（ACS）发病中的作用。方法32例急性心肌梗死（AMI）、37例不稳定型心绞痛（UAP）和31例稳定型心绞痛（SAP）患者为研究对象,采用流式细胞学检测外周血单个核细胞,并计算Th3细胞比例（CD4＋TGF-β1＋／CD4＋T细胞）,ELISA检测血浆中Th3相关细胞因子TGF-β1的表达水平。结果SAP组Th3细胞比例和TGF—β1表达水平显著高于AMI组和UAP组,相比较差异有统计学意义（P〈0．05）;而AMI组和UAP组Th3细胞比例和TGF-β1表达水平比较差异无统计学意义（P〉0．05）。Th3细胞的比例与TGF—β1的表达水平呈正相关（r=0．547,P〈0．01）。结论Th3细胞下调可能与ACS的发生和发展有关,Th3细胞可能成为预防和治疗ACS新靶点。     

针灸干预对溃疡性结肠炎动物肠黏膜炎症反应、机体免疫应答平衡的影响

目的:研究针灸干预对溃疡性结肠炎(UC)动物肠黏膜炎症反应、机体免疫应答平衡的影响。方法:选择成年、雄性、SPF级别的SD大鼠并随机分为对照组、UC组和针灸组,建立UC动物模型后给予针灸干预。干预后14天时,检测肠黏膜中炎症介质及Th1/Th2/Th17/Treg细胞因子的表达量、血清中炎症介质及Th1/Th2/Th17/Treg细胞因子的含量。结果:UC组大鼠肠黏膜中NF-kB、HMGB-1、TNF-α、IL-1β、IFN-γ、IL-17的mRNA表达量及血清中HMGB-1、TNF-α、IL-1β、IFN-γ、IL-17的含量显著高于对照组,肠黏膜中IL-4、IL-5、TGF-β1的mRNA表达量及血清中IL-4、IL-5、TGF-β1的含量均显著低于对照组;针灸组大鼠肠黏膜中NF-kB、HMGB-1、TNF-α、IL-1β、IFN-γ、IL-17的mRNA表达量及血清中HMGB-1、TNF-α、IL-1β、IFN-γ、IL-17的含量显著低于UC组,肠黏膜中IL-4、IL-5、TGF-β1的mRNA表达量及血清中IL-4、IL-5、TGF-β1的含量均显著高于UC组。结论:针刺干预对溃疡性结肠炎动物肠黏膜炎症反应和免疫应答均具有调节作用。     

血管紧张素-（1-7）对TGF-β1诱导的大鼠心肌成纤维细胞Smad3、Smad7 mRNA表达的影响

目的：观察血管紧张素-（1—7）对TGF-β1诱导幼年大鼠心肌成纤维细胞增殖以及Smad3、Smad7mRNA表达的影响。方法：分离培养SD仔鼠心脏成纤维细胞,以Ang-（1—7）、TGF-β1、Ang-（1—7）＋TGF-β1组、TGF-βI型受体抑制剂等干预,通过WST-1法检测细胞增殖,RT—PCR测定心脏成纤维细胞Smad3、Smad7mRNA的表达。结果：①与空白对照组比较,TGF-β1组心脏成纤维细胞的OD值增加（P〈0．05）;与TGF-β1组比较,0．001～1．0μmol／L血管紧张素－（1-7）和5μg／TGF-β1共同干预后OD值逐渐降低（P〈0．05）。②与对照组比较,TGF-β1组心脏成纤维细胞的Smad3mRNA表达升高（P〈0．05）,Smad7mRNA表达降低（P〈0．05）。结论：血管紧张素-（1—7）能有效抑制TGF-β1引起的心脏成纤维细胞的增殖,其作用不通过TGF-βI型受体介导。     

白细胞介素-12 B及其受体在炎症性肠病患者外周血和肠黏膜中的表达及意义

目的 探讨白细胞介素(IL)-12B及其受体在炎症性肠病(IBD)患者外周血及肠黏膜中的表达和意义.方法 通过结肠镜下收取结肠黏膜标本,其中活动期的克罗恩病(CD)患者、溃疡性结肠炎(UC)患者各60例,健康对照者50例.使用Western blot对活动期IBD患者发病部位肠黏膜蛋白水平进行检测,以同期结肠镜检查未见异常的患者作为对照.收集患者及健康体检者的外周血2 mL,留取血浆,提取血细胞总RNA,用Real-time PCR法检测IL-12B及其受体IL-12RB1的mRNA表达,用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血浆IL-12p40的表达.结果 外周血Real-time PCR结果显示IL-12B mRNA在CD、UC患者中的表达均增高,且差异有统计学意义(P<0.05);IL-12RB1的mRNA在CD、UC患者中表达也增高,但只有CD患者有统计学意义(P<0.05).肠黏膜Real-time PCR结果显示IL-12B mRNA在CD、UC患者中的表达均增高,且差异有统计学意义(P<0.05);而IL-12RB1 mRNA的表达在3组之间差异无统计学意义(P>0.05).外周血及肠黏膜的Real-time PCR结果显示IBD患者中Th细胞特异性转录因子(T-bet、GATA3、RORγ-t和Foxp3)的mRNA表达有不同程度的改变,且变化都有统计学意义.相关性分析显示,外周血IL-12B与T-bet的mRNA表达呈正相关(r=0.781,P<0.01);肠黏膜IL-12B与T-bet和RORγ-t的mRNA表达均呈强正相关(r=0.807,P=0.000;r=0.831,P=0.000).血清ELISA结果显示IL-12p40在IBD患者中的表达均高于健康对照者,且差异有统计学意义(P<0.05).CD患者IL-12p40表达高于UC患者(P<0.05).肠黏膜Western blot结果示IL-12p40在CD、UC患者中的表达均高于正常对照组,但只有CD患者IL-12p40蛋白的表达高于UC患者(P<0.05),其受体IL-12RB1、IL-12RB2蛋白在CD、UC中表达也高于正常对照组,但差异无统计学意义(P>0.05).结论 IL-12B mRNA和蛋白在活动期CD患者外周血及病变部位肠黏膜中表达均明显上调.IL-12B可能通过Th1和Th17途径在IBD患者尤其是CD患者炎症过程中发挥重要的促炎作用.     

C-ski、转化生长因子-β_1蛋白表达在口腔鳞状细胞癌中的意义

目的探讨C-ski、转化生长因子-β1（TGF-β1）在口腔鳞状癌中的表达及意义。方法采用免疫组化SP法检测48例口腔鳞状细胞癌组织和20例口腔正常黏膜组织中C-ski、TGF-β1蛋白的表达情况,并分析C-ski蛋白表达与口腔鳞状细胞癌患者临床病理特征的关系以及C-ski、TGF-β1两者的相关性。结果在正常口腔黏膜组织、口腔鳞状细胞癌组织中,C-ski蛋白表达阳性率分别为40%（8/20）、75%（36/48）,两者比较差异有高度统计学意义（P〈0.01）,TGF-β1蛋白表达阳性率分别为30%（6/20）、68.8%（33/48）,两者比较差异有高度统计学意义（P〈0.01）。在口腔鳞状细胞癌组织中C-ski蛋白的表达与口腔鳞状细胞癌组织的浸润深度、细胞分化程度、肿瘤分期均无相关性,而与有无淋巴结转移相关（χ2=5.807,P=0.018）;C-ski蛋白表达与TGF-β1蛋白表达呈正相关（r=9.341,P=0.002）。结论 C-ski可能作为一个潜在癌基因,在口腔鳞状细胞癌组织中上调表达参与口腔鳞状细胞癌的发生发展。     

WT1基因、TGF-β_1在急性白血病患者中表达及其临床意义

目的探讨WT1基因、TGF-β1在急性白血病患者中表达及其临床意义。方法入选2008年8月-2010年12月来我院就诊的急性髓系白血病初发（AML组）、经治疗完全缓解的急性髓系白血病患者（AML-CR组）和非恶性血液病组（对照组）各30例,分别采用实时RT-PCR和ELISA检测三组患者骨髓中WT1基因、TGF-β1表达情况,并分析二者之间的相关性。结果分析显示,AML组和AML-CR组WT1 mRNA表达显著高于对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;AML组WT1 mRNA表达高于AML-CR组,差异有统计学意义（P〈0.05）;AML组TGF-β1mRNA和TGF-β1蛋白显著低于AML-CR组、对照组,差异有统计学意义（P〈0.05）;而AML-CR组与对照组之间的差异无统计学意义（P〉0.05）。Pearson相关分析显示,对照组和AML-CR组中WT1基因、TGF-β1表达不存在相关性（P〉0.05）;而在AML组中,WT1基因、TGF-β1存在明显的线性负相关（r=0.724,P〈0.05）。结论急性白血病患者存在WT1基因高表达、TGF-β1低表达状态,并且二者存在一定的负相关,同时检测两种指标在白血病患者临床治疗和预后评价上具有一定的临床价值。     

CD105和TGF-β1在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨CD105和TGF-β1在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及临床意义。方法运用免疫组织化学SP法检测CD105和TGF-β1在50例NSCLC和15例非肿瘤性肺组织中的表达,分析它们与NSCLC临床病理特征的关系。结果肿瘤组织中,CD105标记的微血管密度（MVD）明显高于非肿瘤性肺组织（P〈0.01）,NSCLC分化越低,CD105标记的MVD值越高,且Ⅲ、Ⅳ期MVD值显著高于Ⅰ、Ⅱ期（P〈0.01）,淋巴结转移组的MVD值显著高于无淋巴结转移组（P〈0.01）。TGF-β1在NSCLC和非肿瘤组织中的阳性表达率分别为92%和42%,两者间的差异具有高度统计学意义（P〈0.01）。TGF-β1表达强度与NSCLC的临床分期及淋巴结有无转移密切相关（P〈0.01）,同时与肿瘤中MVD值呈正相关关系（r=0.444,P〈0.01）。结论CD105和TGF-β1在NSCLC生长、浸润和转移过程中发挥了一定的作用。     

高糖对人近端肾小管上皮细胞TGF-β1、PAI-1基因表达的影响

目的观察高糖（HG）对人近端肾小管上皮细胞（HKC）分泌转化生长因子β1（TGF-β1）和纤溶酶原激活物抑制因子1（PAI-1）mRNA表达水平的影响。方法采用数字表法随机分为低糖组（5.5mmol／L,LG组）和HG组（25mmol／L）,分别培养于HKC中,于培养0、24和48h时收获细胞,并采用RT-PCR法检测两组HKC分泌TGF-β1和PAI-1 mRNA的表达水平。结果HG组培养24h和48h时的HKC分泌TGF-β1和PAI-1 mRNA表达水平均较LG组明显升高（均P〈0.01）。且两组培养48h时的上述指标均较24h时明显升高（均P〈0.O01）;经Spearman相关分析显示,HKC分泌PAI-1和TGF-β1 mRNA的表达水平之间存在正相关性（r=0.802,P〈0.01）。结论HG可刺激HKC分泌TGF-β1和PAI-1 mRNA表达水平的增高。     

miR-155和PDCD4在炎症性肠病患者中的表达及关系

目的：探讨微小RNA-155(miR-155)、程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在炎症性肠病(IBD)患者血清、肠黏膜组织中的表达水平及其相关性。方法：选取2018年11月—2022年3月克罗恩病(CD)患者78例为CD组,78例溃疡性结肠炎（UC）患者为UC组,另选取同期行肠镜检查的50例结肠息肉患者为对照组。比较对照组、CD组、UC组血清、肠黏膜组织miR-155、PDCD4 mRNA表达水平;按简化CD活动指数（CDAI）将CD患者分为轻度CD活动组（24例）、中度CD活动组（28例）、重度CD活动组（26例）,依据Mayo评分将UC患者分为轻度UC活动组（23例）、中度UC活动组（30例）、重度UC活动组（25例）,比较不同活动度CD与UC患者血清、肠黏膜组织miR-155、PDCD4 mRNA表达水平;分析CD、UC患者血清、肠黏膜组织中miR-155表达水平与PDCD4 mRNA的关系。结果：CD组、UC组患者血清、肠黏膜组织miR-155表达水平高于对照组（P<0.05）,PDCD4 mRNA表达水平低于对照组（P<0.05）;随CD/UC活动度增加,CD/...     

Smad3选择性调节TGF-β1促进大鼠骨髓间充质干细胞成骨分化的实验研究

目的探讨转化生长因子β1（TGF-β1）信号转导通路下游信号分子Smad2、Smad3在TGF-β1促进大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）成骨分化中的作用。方法采用RT-PCR、Western blot检测TGF-β1促MSCs成骨分化过程中Smad2、Smad3mRNA和蛋白表达的变化;脂质体介导稳定转染Smad3ΔC,间接免疫荧光试验鉴定;采用RT-PCR检测转染细胞中碱性磷酸酶（ALP）和核心结合因子（cbfa1）mRNA的表达,用对硝基苯磷酸盐（PNP）法检测细胞ALP活性,用茜素红染色法检测细胞矿化能力,观察Smad3ΔC对MSCs成骨分化的影响。结果在TGF-β1刺激后24h,MSCs中Smad3的mRNA和蛋白表达量明显减少（P〈0.01）,而整个刺激过程中,Smad2的mRNA和蛋白表达量无明显变化（P〉0.05）;稳定转染细胞中c-Myc抗原阳性表达;受TGF-β1刺激后,MSCs和V-MSCs（空载体转染组）中ALP、cbfa1mRNA的表达水平、矿化能力明显高于Smad3ΔC-MSCs;随TGF-β1刺激时间延长,Smad3ΔC-MSCs中ALP活性增加缓慢,仅于48h有明显增加（P〈0.05）,但与同时段MSCs和V-MSCs中ALP活性相比,差异有极显著性意义（P〈0.01）。结论TGF-β1促进MSCs成骨分化这一生物学效应的输出受Smad3特异性和选择性的调节。     

三七总皂甙对TGF-β/Smads信号通路的作用

目的研究三七总皂甙（PNS）对TGF-β/Smads信号通路的作用。方法将雄性SD大鼠80只随机分为4组：假手术（SOR）组、单侧输尿管梗阻（UUO）模型组、PNS治疗组和氯沙坦治疗组。做肾组织病理学检查,Real-TimePCR检测实验大鼠肾组织TGF-β1mRNA,Western Blotting检测TGF-β1蛋白,免疫组化检测TGF-β1、p-Smad2/3的表达。结果三七总皂甙干预后大鼠肾脏TGF-β1mRNA及其蛋白表达下调（P〈0.05）,p-Smad2/3在肾小管间质的表达亦减少（P〈0.05）,与氯沙坦作用相似（P〉0.05）。结论PNS能有效减轻UUO大鼠肾小管间质的损伤;PNS从基因、蛋白水平抑制TGF-β1、p-Smad2/3的表达,通过TGF-β1/p-Smad2/3信号通路而发挥抗肾间质纤维化的作用。     

雌激素受体β1在溃疡性结肠炎患者中的表达及其临床意义

目的：探讨雌激素受体（ER）β1（ERβ1）在溃疡性结肠炎（UC）及其旁正常黏膜的表达及其临床意义。方法收集UC标本50例,制作石蜡组织芯片,并以周围正常肠黏膜组织作为对照,行免疫组织化学染色,分析其ERβ1、雌激素受体α（ ERα）、雄激素受体（ AR）、孕激素受体（ PR）表达情况及临床意义。结果50例UC组织中,ERβ1阳性率为64．0％（32／50）,周围正常肠黏膜ERβ1阳性率为82．0％（41／50）,两者差异有显著性（P＝0．01）;UC中ERβ1表达情况与患者性别有关,分别为男性（75．0％）高于女性（60．0％）（P＝0．02）,绝经前期（80．0％）高于绝经期后（40．0％）（P＝0．03）,且与临床严重程度、临床类型有关,P值分别为0．037,0．01,而与年龄无关。正常大肠黏膜中ERβ1的阳性表达率男性（30．0％）高于女性（24．0％）,差异有显著性（P＝0．02）。 ERα,AR,PR在UC及周围正常肠黏膜中阴性表达。结论 UC及其旁正常黏膜都可表达ERβ1,ERβ1,与患者性别、临床严重程度、临床类型有关,与年龄无关,并且绝经后妇女患病的风险高于绝经前妇女。