五种天然药物抑制晶状体上皮细胞增殖效应比较

目的：对五种天然药物姜黄素（curcumine,Cur）、榄香烯（elemene,Ele）、三氧化二砷（arsenite trioxide,As2O3）、雷公藤内酯醇（triptolide,Tfi）、莪术（rhizoma curcumae,Rc）抑制重组人碱性成纤维细胞生长因子（recombinant human basic fibroblast growth factor,rhbFGF）诱导的牛晶状体上皮细胞（lens epithelial cell,LEC）增殖效应进行比较。方法：将rhbFGF诱导体外培养的LEC发生增殖,并用Cur、Ele、As2O3、Tri、Rc分别与其共同孵育后,用MTT法检测LEC的活性：用流式细胞术（flow cytometer,FCM）检测LEC增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达。结果：增殖组LEC活性、PCNA蛋白表达显著高于对照组（P〈0．01）;Cur组、Ele组、As2O3组、％组、Rc组的LEC活性、PCNA蛋白表达均比增殖组显著降低（P〈0．01）。其中Cur、Ele的作用最强,As2O3的作用次之,Tri作用较弱,Rc作用最弱（P〈0．01）。Cur和Ele的作用相近（P〉0．05）。结论：五种天然药物Cur、Ele、As2O3、Tri、Rc均可抑制LEC增殖。Cur和Ele的作用最佳,有希望成为防治后发性白内障的有效药物。     

榄香烯抑制表皮生长因子诱导的晶状体上皮细胞增殖的信号转导机制

目的：研究榄香烯（elenene，Ele）抑制重组人表皮生长因子（recombinant human epidermal growth factor，rhEGF）诱导的晶状体上皮细胞（lens epithelium cell，LEC）增殖时对细胞内钙（Ca^2＋）、环磷酸腺苷（cyclic adenosine monophosphate，cAMP）、环磷酸鸟苷（cyclic guanosine monophosphate，cGMP）的影响，探讨其抑制增殖的细胞信号转导机制。方法：采用rhEGF诱导LEC增殖后，用荧光分光光度法检测LEC内钙离子浓度（[Ca^2＋]i）、放射免疫分析法检测LEC内cAMP和cGMP含量，探讨Ele的影响。结果：（1）Ele组LEC内[Ca^2＋]i；比增殖组显著增高（P〈0．01）；（2）增殖组LEC内cAMP浓度比对照组明显下降、cGMP浓度比对照组明显升高（P〈0．01）；（3）Ele组LEC内cAMP浓度比增殖组显著升高、cGMP浓度比增殖组显著降低（P〈0．01）。结论：Ele抑制LEC增殖的作用是通过细胞内[Ca^2＋]i、cAMP和cGMP信号系统及多条信号转导途径的相互作用实现的，这可能是Ele抑制LEC增殖、防治后发性白内障的细胞和分子生物学机制。     

榄香烯对晶状体上皮细胞增殖的抑制作用

目的：研究榄香烯（Ele）对重组人表皮生长因子（rhEGF）诱导的晶状体上皮细胞（LEC）增殖的抑制作用及剂量．效应和时间．效应关系，探寻防治后发性白内障的有效方法。方法：四甲基偶氮唑蓝法（MTT）测定不同浓度Ele对增殖状态的牛LEC活性的抑制作用，同时观察时间．效应关系；流式细胞术（FCM）检测不同浓度的Ele对增殖状态的牛LEC增殖细胞核抗原（PCNA）蛋白表达的抑制作用，同时观察时间．效应关系。结果：低、中、高不同浓度的Ele作用24h后，其增殖抑制率随浓度增加而增高，呈明显的剂量．效应关系；中浓度的Ele作用6、12、24、48、72h后，其增殖抑制率随作用时间延长而增高，呈明显的时间．效应关系。Ele对LEC内PCNA蛋白表达有明显的下调作用，低、中、高不同浓度的Ele作用24h后，其PCNA表达率随浓度增加而降低，呈明显的剂量．效应关系；中浓度的Ele作用6、12、24、48、72h后，其PCNA表达率随作用时间延长而降低，呈明显的时间．效应关系。结论：Ele能有效抑制IhEGF诱导的LEC增殖，对防治后发性白内障具有广阔的前景。     

姜黄素抑制尾加压素-Ⅱ诱导的人晶状体上皮细胞增殖及[Ca^2＋]i、cAMP、cGMP信号转导机制

目的：探讨姜黄素（curcumin,Cur）抑制尾加压素Ⅱ（urotensinⅡ,U-Ⅱ）诱导的人晶状体上皮细胞（human lens epithelial cell,HLEC）增殖及[Ca^2＋]i、cAMP、cGMP信号转导机制。方法：将U-Ⅱ诱导体外培养的HLEC发生增殖,并用不同浓度的Cur与其共同孵育后,用MTT法检测HLEC的活性;用流式细胞术（flowcytometer,FCM）检测HLEC增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达;用荧光分光光度法检测HLEC内游离钙离子浓度[Ca^2＋]i;用放射免疫分析法检测HLEC内环化腺苷酸（cyclic adenosine monophosphate,cAMP）和环化鸟苷酸（cyclic guanosine monophosphate,cGMP）浓度。结果：U-Ⅱ组HLEC活性、PCNA蛋白表达和cGMP浓度均高于对照组（P〈0.01）;Cur组HLEC活性、PCNA蛋白表达和cGMP浓度均比U-Ⅱ组降低（P〈0.01）。U-Ⅱ组HLEC[Ca^2＋]i比对照组显著升高（P〈0.01）,U-Ⅱ组cAMP浓度比对照组显著降低（P〈0.01）;Cur组与U-Ⅱ组比较[Ca^2＋]i、cAMP浓度显著升高（P〈0.01）。结论：Cur可抑制U-Ⅱ诱导的HLEC增殖。[Ca^2＋]、cAMP-PKA、cGMP-PKG是其重要的细胞信号转导机制。Cur有可能成为防治后发性白内障的有效药物。     

活性维生素D3对大鼠系膜增生性肾炎细胞增殖与凋亡的影响

目的：研究活性维生素D3对系膜增生性肾小球肾炎细胞增殖与凋亡的影响。方法：72只雄性SD大鼠随机分为对照组、肾炎组、活性维生素D3干预组,每组24只,分别于造模和给药后第1,3,7,14天每组随机处死6只大鼠,肾组织标本HE染色确定肾脏病理损害分级,免疫组化法检测PCNA、Bcl-2在肾组织中的分布,Westernblot检测PCNA蛋白的表达量。结果：与对照组相比,肾炎组PCNA和Bcl-2表达明显增强（P〈0．01）;活性维生素D,干预组PCNA和Bcl-2表达明显减少（P〈0．01）。PCNA、Bcl．2表达与病理分级呈正相关（P〈0．01）,PCNA、Bcl-2各指标问的表达呈正相关（P〈0．01）。结论：活性维生素D3可以通过抑制PCNA的表达而抑制系膜细胞增生,减少Bcl-2表达促进凋亡,延缓疾病的进展。     

表皮生长因子对萎缩性胃炎大鼠胃黏膜上皮增生的影响

目的：探讨表皮生长因子（epidermal growth factor,EGF）对大鼠萎缩性胃炎（chronic atrophic gastritis,CAG）动物模型的治疗作用。方法：大鼠CAG模型建立后,分别给予EGF、硫糖铝及生理盐水处理,12周后取出全胃,观察各组大鼠胃黏膜病理变化、测定腺体增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达、测量胃黏膜腺体厚度（L1）和黏膜肌层（L2）之比及胃窦固有腺体总个数。结果：EGF组、硫糖铝组大鼠胃黏膜腺体排列规则,未发现有恶性增殖现象。EGF组胃窦L1／L2值为8．6±1．2,较硫糖铝组、模型组（6．6±1．6,5．0±0．9）明显增加（P〈0．05,P〈0．01）。EGF组、硫糖铝组的胃窦腺体个数值分别为（52．0±5．8）和（34．8±4．3）,较模型组（27．1±2．2）明显增加（P〈0．01）;EGF组、硫糖铝组PCNA表达阳性的高度分别为（84．5±2．9）um和（76．8±1．7）um,较模型组[（63．3±9．2）um]明显增加（P〈0．01,P〈0．05）,但EGF组的效果要优于硫糖铝组（P〈0．01）。结论：EGF对于大鼠CAG动物模型具有恢复治疗作用,且在促进胃腺体增殖作用方面的效果优于硫糖铝。     

PCNA、ER和PR在子宫内膜癌中的表达

目的：探讨PCNA、ER和PR在子宫内膜癌发生、发展中的作用,对子宫内膜癌的诊断、治疗及预后提供一定的理论依据。方法：SP法检测正常子宫内膜组织、增生期子宫内膜组织、不典型增生子宫内膜组织及子宫内膜癌组织中PCNA、ER和PR蛋白的表达变化,统计分析各组间PCNA、ER和PR表达变化与临床因素及病理特征间的关系,以及各指标间的相关性。结果：①子宫内膜癌组织中PCNA表达阳性率为89．47％,显著高于正常子宫内膜组、子宫内膜单纯或复杂型增生组和子宫内膜不典型增生组（P〈0．01,P〈0．01,P〈0．01）。②子宫内膜癌组织中ER表达阳性率为54．74％,显著低于正常子宫内膜组、子宫内膜单纯或复杂型增生组（P〈0．01,P〈0．01）,与子宫内膜不典型增生组无统计学意义（P〉0．05）。⑧子宫内膜癌组织中PR表达阳性率为62．Ii％,显著低于正常子宫内膜组、子宫内膜单纯或复杂型增生组（P〈0．01,P〈0．01）,与子宫内膜不典型增生组无统计学意义（P〉0．05）。④子宫内膜癌组织中PCNA、ER和PR的表达与患者年龄无相关性;PR的表达与临床分期有相关性（P〈0．05）,与病理分级、淋巴结转移和肌层浸润深度无相关性;而PCNA、ER的表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移以及肌层浸润深度有均无相关性。结论：子宫内膜癌中PCNA表达增加,ER和PR表达降低,PCNA、ER和PR参与了子宫内膜癌的发生与发展。PR在子宫内膜癌的侵袭和转移中起作用。联合检测PCNA、ER和PR的表达可以为临床治疗子宫内膜癌提供重要依据。     

茶多酚对ACC—M细胞株增殖的影响

目的体外观察茶多酚对人腺样囊性癌肺高转移细胞株（adenoid cystic carcinoma cell clones highly metastatic to thelung,ACC—M）增殖、增殖细胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen,PCNA）表达的影响。方法（1）采用MTT比色实验法观察茶多酚对ACC—M细胞增殖的影响;（2）用免疫细胞化学S-P法检测不同浓度茶多酚对ACC—M细胞中PCNA表达的影响。结果（1）茶多酚对ACC—M细胞增殖抑制作用明显（P〈0．05）;（2）细胞免疫组化结果显示：加入不同浓度茶多酚后,PCNA表达降低（P〈0．05）,且随着浓度的增加更为明显。结论荼多酚抑制ACC—M细胞增殖与影响PCNA表达有关。     

黄芪当归合剂对大鼠肾间质纤维化的影响及机制探讨

目的探讨黄芪当归合剂（A＆A）对肾间质纤维化模型大鼠的影响并探讨其可能的作用机制。方法采用单侧输尿管结扎（UUO）致大鼠肾间质纤维化模型。将大鼠随机分为3组：假手术组、模型组、黄芪当归合剂治疗组。手术后第9d处死各组大鼠,分别经免疫组化方法观察各组大鼠肾组织的血小板源性生长因子-B（PDGF-B）的表达部位、表达水平及铲平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况。Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果模型组PDGF-B、α-SMA、PCNA的表达及肾小管间质损伤指数明显高于假手术组（P〈0．05）,而黄芪当归合剂组均明显低于模型组（P〈0．05）。各项指标作相关分析PDGF-B与肾小管间质损伤指数（r=0．870,P〈0．01）、α-SMA（r=0．956,P〈0．01）、PCNA（r=0．881,P〈0．01）呈显著正相关。结论黄芪当归合剂可能通过下调PDGF-B的表达减轻肾小管间质纤雏化。     

血小板源性生长因子-B在肾间质纤维化模型大鼠肾组织中的表达及意义

目的探讨血小板源性生长因子-B（PDGF-B）在肾闰质纤维化中的表达及意义,比较黄芪当归合剂（A8LA）、霉酚酸酯（MMF）的肾脏保护作用并探讨其可能的作用机制。方法采用单侧输尿管结扎致肾间质纤维化大鼠模型。将大鼠随机分为4组：假手术组、模型组、黄芪当归合剂组、霉酚酸酯组。手术后第9天处死各组大鼠,经免疫组化方法观察各组PDGF-B的表达部位、表迭水平及α-平滑肌肌动蛋白（α—SMA）、增殖细胞核抗原（PCNA）的表达情况。Masson染色评定各组肾小管间质损害程度。结果模型组PDGF-B、α-SMA、PCNA的表达及肾小管阃质损伤指数明显高于假手术组（P〈0．05）,而黄芪当归合剂组、霉酚酸酯组均明显低于模型组（P〈0．05）。黄芪当归合剂组与霉酚酸酯组相比两组差异无显著意义（P〉0．05）。各项指标作相关分析．PDGF-B与肾小管间质损伤指数（r=0．870,P〈0．01）、α—SMA（r=0．956,P〈0．01）,PCNA（r=0．881,P〈0．01）呈显著正相关。结论PDGF-B在肾间质纤维化的病程进展中起重要促进作用,黄芪当归合剂、霉酚酸酯则可能通过下调PDGF-B的表达减轻肾间质纤维化。     

色满卡林对自发性高血压大鼠血管平滑肌细胞凋亡的影响

目的：观察色满卡林对自发性高血压大鼠(SHR)血管平滑肌细胞(VSMCs)凋亡的影响。方法：30只12 wk龄SHR,随机分为高血压组、色满卡林组,另设正常对照组。色满卡林组给予色满卡林0.6 mg·kg~(-1)·d~(-1),分2次灌胃；另2组每日给予等量的生理盐水,共16 wk。监测尾动脉收缩压。用免疫组化法检测Bcl-2,Bax和PCNA蛋白表达。荧光标记TUNEL法检测VSMCs凋亡,计算VSMCs凋亡指数(SMAI)。结果：高血压组与正常对照组比较,收缩压明显增高(P＜0.05)；VSMCs中的Bcl-2,PCNA蛋白表达明显增强(P＜0.05)；SMAI明显减少(P＜0.01)；Bax蛋白表达2组间差异无显著意义(P＞0.05)。与高血压组比较,色满卡林组尾动脉收缩压呈降低趋势,但差别无显著意义(P＞0.05)；VSMCs的Bcl-2和PCNA蛋白的表达减少(P＜0.05),Bcl-2/Bax比值下降；SMAI增加(P＜0.05)。结论：色满卡林促进了SHR的VSMCs凋亡,可能机制是通过调节VSMCs的Bcl-2/Bax蛋白表达平衡。     

三氧化二砷对肝癌细胞内活性氧水平的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）对肝癌细胞增殖及细胞内活性氧（ROS）水平的影响。方法用As2O3作用于体外培养的人肝癌SMMC-7721细胞株，分别用MTT法和流式细胞仪观察SMMC-7721细胞增殖情况并检测ROS。结果MTT结果显示As2O3能明显抑制SMMC-7721细胞的增殖．并呈时间和浓度依赖性。流式细胞仪分析显示As2O3作用后的人肝癌SMMC-7721细胞内ROS水平明显增高（P〈0．01）．并也呈时间和浓度依赖性。结论As2O3可通过抑制人肝癌SMMC-7721细胞的增殖和提高细胞内ROS水平诱导细胞凋亡而发挥抗肿瘤作用，这可能也是As2O3抗肝癌的主要途径之一。     

三氧化二砷诱导K562/ADM细胞凋亡的作用机制研究

目的 :观察三氧化二砷 (As2 O3 )对K5 6 2 ADM细胞的诱导凋亡效应 ,探讨其作用机制。方法 :应用噻唑蓝 (MTT)比色法、Wright Giemsa染色、DNA琼脂糖凝胶电泳和流式细胞术 (FCM)观察K5 6 2 ADM细胞凋亡 ;FCM测定K5 6 2 ADM细胞Fas、Bcl 2、P5 3蛋白水平的变化 ;比色法检测Caspase3活性变化。结果 :As2 O3 可抑制K5 6 2 ADM细胞增殖 ;K5 6 2 ADM呈典型凋亡形态改变 ;DNA电泳可见梯状条带出现 ;FCM分析示亚G1期细胞比例增高 ,G2 M期阻滞 ;Fas、P5 3蛋白表达明显上调 ;Caspase3活性明显增强。结论 :As2 O3 可通过Fas依赖性Caspase3激活而诱导K5 6 2 ADM细胞凋亡。     

三氧化二砷对小鼠肝癌生物学行为的影响

目的研究三氧化二砷对HepA小鼠肝癌生长、血管生成及侵袭与转移特性的影响。方法建立皮下种植肝癌小鼠模型,用药后观察小鼠肿瘤体积变化及抑瘤率;利用免疫组织化学观察移植瘤中血管内皮生长因子（VEGF）,对移植瘤的微血管密度（MVD）进行计数。结果三氧化二砷对小鼠肝癌瘤体体积和抑瘤率均具有抑制作用;三氧化二砷能抑制肿瘤新生血管生成,降低VEGF的表达,并能降低肿瘤MVD,与未用药对照组相比差异均有统计学意义（P〈0．05）。结论三氧化二砷能缩小肿瘤体积、增加抑瘤率,并能降低VEGF的表达,减少微血管密度。     

阿魏酸钠对慢性低氧大鼠肺血管重建的影响及作用机制

目的研究阿魏酸钠对慢性低氧大鼠肺血管形态、p53及PCNA蛋白表达及细胞增殖与凋亡的影响。方法30只雄性SD大鼠采用随机单位组设计方法分为对照组、低氧组和联合治疗组,每组10只。采用常压间断低氧8h/d,连续21d的方法复制慢性低氧性肺动脉高压模型。对照组吸入空气（其他条件与低氧组相同）。联合治疗组大鼠腹腔注射15mg／（kg·d）的阿魏酸钠。观察阿魏酸钠对慢性低氧大鼠肺血管形态学指标、p53及增殖细胞核抗原PCNA基因蛋白表达、细胞的增殖与凋亡的影响。结果低氧21d后,低氧组管壁厚度占血管外径的百分比、管壁面积占血管总面积的百分比、增殖指数及p53基因表达较对照组均明显升高（P〈0．01）,管腔面积占血管总面积的百分比、凋亡指数较对照组明显降低（P〈0．01）;联合治疗组管壁面积占血管总面积的百分比、管壁厚度占血管外径的百分比、增殖指数及p53基因表达与低氧组相比明显降低,差别有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）。管腔面积占血管总面积的百分比、凋亡指数与低氧组相比明显升高,差别有统计学意义（P〈0．01）;联合治疗组除管腔面积占血管总面积的百分比、凋亡指数及p53基因表达与对照组差异有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）外,其他指标与对照组比较差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论阿魏酸钠可抑制慢性低氧大鼠肺血管重建,其机制可能与抑制p53及PCNA基因的表达,导致细胞增殖被抑制、细胞凋亡被促进等有关。     

葛根素对慢性低氧高二氧化碳性肺动脉高压大鼠肺血管低氧诱导因子1α的影响

目的：探讨葛根素降低大鼠慢性低氧(O_2)高二氧化碳(CO_2)性肺动脉高压的作用是否与抑制肺小动脉低氧诱导因子1α(HIF-1α)表达有关。方法：清洁级SD雄性大鼠30只随机分为正常对照组(NC)、低O_2高CO_24 wk组(HH)、低O_2高CO_2加葛根素组(HP)。免疫组织化学法检测肺细小动脉HIF-1α蛋白的表达,核酸原位杂交法检测肺细小动脉HIF-1αmRNA表达。结果：HH组平均肺动脉压,右室/(左室+室间隔)重量比高于NC组(P＜0.01),HP组低于HH组(P＜0.01)。HH组血浆一氧化氮含量低于NC组(P＜0.01),HP组高于HH组(P＜0.01)。HH组肺细小动脉HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达高于NC组(P＜0.01),HP组肺细小动脉HIF-1α蛋白表达及HIF-1αmRNA表达低于HH组(P＜0.05)。结论：葛根素减轻大鼠慢性低O_2高CO_2性肺动脉高压的作用可能与其抑制肺血管HIF-1α表达有关。