川芎嗪对青霉素致痫大鼠神经元内c-fos表达的影响

目的:用免疫组织化学方法观察川芎嗪（TM）对青霉素致痫大鼠大脑皮层神经元内c-fos表达的影响。方法:使用青霉素癫痫模型,采用BL-410生物机能实验系统记录双侧大脑皮层癫痫放电,观察腹腔注射TMP对大鼠癫痫放电大脑皮层神经元内c-fos表达的影响。结果:腹腔注射TMP（20-40mg/kg）后,大脑皮层神经元内c-fos表达较对照组明显降低。结论:TMP能明显抑制c-fos的表达,具有抗癫痫放电作用。     

褪黑素、5-羟色胺对戊四氮致痫大鼠脑内一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨褪黑素（MT）、5-羟色胺（5-HT）对致痫大鼠大脑皮质一氧化氮合酶（NOS）表达的影响。方法用免疫印迹技术和图像分析技术观察经MT预处理后致痫大鼠行为学的改变与脑内NOS表达的变化,用免疫组织化学方法检测大鼠海马内5-HT含量变化。结果戊四氮（PTZ）组大鼠大脑皮质内NOS含量明显高于对照组,PTZ＋MT组大鼠大脑皮质内NOS含量明显低于对照组,差异均有统计学意义（P〈0.05）。PTZ组、PTZ＋MT＋MT拮抗剂Luz组大脑皮质内5-HT含量与对照组比较均减少,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 MT、5-HT具有明显的抑制大鼠大脑皮质NOS表达的作用和抗痫效应。     

姜黄素在匹罗卡品致痫大鼠模型中抗癫痫和抗氧化作用的研究

背景 近期有研究报道姜黄素（中药姜黄中一直被认为具有抗氧化和抗炎作用的活性成分）在一些癫痫动物模型中显示出抗痫性发作作用,本课题试图探讨姜黄素在经典的匹罗卡品致痫大鼠动物模型观察其对痫性发作的影响及抗氧化作用。 方法 选用经典的匹罗卡品致痫大鼠模型,研究腹腔注射30, 100 或300 mg/kg不同剂量姜黄素对痫性发作的影响;探讨痫性发作对大鼠海马NOS和自由基的影响,不同剂量姜黄素对痫性发作后大鼠海马NOS和自由基变化的作用及与痫性发作程度的关系。 结果 100和300 mg/kg姜黄素腹腔注射增加大鼠痫性发作阈值。与正常对照组比较,匹罗卡品致痫后大鼠海马MDA含量,NOS和LDH活性明显增加,GSH含量和SOD活性显著下降,100和300 mg/kg姜黄素干预可以明显缓解痫性发作后NOS,LDH,GSH和SOD的变化程度,但是姜黄素不能缓解痫性发作后大鼠海马MDA含量的增加。 结论 本研究证实姜黄素在经典的匹罗卡品致痫大鼠模型中具有抗痫性发作作用,自由基和一氧化氮合酶可能与姜黄素的抗痫性发作作用有关。     

尼莫地平对青霉素诱导的大鼠癫痫的抑制作用观察

采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠腹腔注射青霉素，造成实验性癫痫模型，对大鼠痫性发作的行为改变，海马和大脑皮质的电生理变化以及双氢吡啶类钙通道阻滞剂尼莫地平的抗痫作用进行了观察。结果显示：尼莫地平能明显抑制大鼠痫性放电和痫性发作，预先腹腔注射尼莫地平再给予青霉素则不出痫性活动。     

免疫抑制剂对IL-2致痫大鼠脑内谷氨酸及IL-2受体表达的影响

目的研究免疫抑制剂对白细胞介素-2（IL-2）诱导大鼠急性癫痫的抑制作用，及其对大脑皮质及海马内谷氨酸（Glu）、IL-2受体（IL-2R）表达的影响，探讨免疫抑制剂抗痫效应及其作用机制。方法将大鼠随机分为4组：A组（生理盐水对照组）、B组（IL-2组）、C组（环孢素-A＋IL-2组）、D组（糖皮质激素处理组），对大鼠行侧脑室注射相应试剂后观察并记录大鼠行为表现，采用免疫组织化学方法检测大脑皮质及海马内Glu的含量及IL-2R的表达。结果A组无明显痫样发作；B组痫样发作程度达Ⅲ级；C组发作程度为Ⅰ级；D组无痫样发作。免疫组化染色显示，各组注药后2h，B组的大脑皮质及海马内Glu、IL-2R免疫反应较A组明显增强，差异具有显著性意义。C组与A组相比，Glu、IL-2R免疫反应无明显变化。D组与A组相比，Glu、IL-2R免疫反应减弱。结论IL-2具有致痫效应，免疫抑制剂具有一定的抗痫作用，其机制与抑制Glu和IL-2R表达有密切关系。     

川芎嗪对癫痫大鼠脑组织中ATP酶含量的影响

目的研究川芎嗪(TMP)对实验性癫痫大鼠脑组织中ATP酶含量的影响。方法采用腹腔注射戊四氮(PTZ)诱发大鼠癫痫模型。将Wistar大鼠随机分为3组,即:生理盐水对照组;PTZ致痫组;TMP PTZ致痫组,用化学比色法分别测定各组大鼠大脑皮层及海马中Na -K -ATPase、Ca2 -ATPase和Mg2 -ATPase含量的变化。结果PTZ致痫组与对照组比较大鼠大脑皮层及海马的Na -K -ATPase、Ca2 -ATPase和Mg2 -ATPase含量都显著降低,差异具有显著性意义(P<0.05)。TMP PTZ致痫组与PTZ致痫组比较上述诸酶含量明显升高,差异具有显著性意义(P<0.05)。结论TMP能抑制癫痫大鼠脑电痫样波的发放,可能与改善脑内ATP酶的活性有关。     

氧化苦参碱对青霉素致痫大鼠海马神经递质的影响

目的观察氧化苦参碱（Oxy）对青霉素（PEN）致痫大鼠大脑海马谷氨酸（Glu）和γ-氨基丁酸（GABA）神经递质的影响。方法腹腔注射PEN制备癫痫动物模型,采用免疫组化SABC法测定腹腔内注射Oxy后癫痫大鼠海马Glu和GABA阳性细胞数目。结果腹腔注射Oxy的实验组癫痫大鼠海马Glu平均阳性细胞数低于未注射Oxy的模型组,而实验组GABA平均阳性细胞数高于模型组（P〈0．05）。结论Oxy抗癫痫作用机制与兴奋性神经递质Glu和抑制性神经递质GABA的作用有关。     

尼莫地平对青霉素诱导的大鼠癫痫的抑制作用观察

采用Ｗｉｓｔａｒ大鼠腹腔注射青霉素，造成实验性癫痫模型，对大鼠痫性发作的行为改变、海马和大脑皮质的电生理变化以及双氢吡啶类钙通道阻滞剂尼莫地平的抗痫作用进行了观察。结果显示：尼莫地平能明显抑制大鼠痫性放电和痫性发作，预先腹腔注射尼莫地平再给予青霉素则不出现痫性活动。由此表明尼莫地平是一种富有潜力的新型非镇静性抗痫剂     

氧化苦参碱对青霉素致痫大鼠学习记忆及海马P-JNK表达的影晌

摘要：目的观察氧化苦参碱（Oxymatrine,OXY）对青霉素（Penicillin,PEN）致痫大鼠学习记忆和海马神经元P-JNK表达的影响。方法成年SD大鼠24只随机分为生理盐水对照组（Normalsaline,NS）、癫痫模型组（Epilepsy,EP）、OXY组和JNK抑制剂组（SP600125,SP）,腹腔注射青霉素诱导大鼠癜痫发作,观察大鼠行为学改变,Morris水迷宫检测大鼠空间学习和记忆,免疫组化测定海马组织内P-JNK阳性细胞数。结果与EP组对比,OXY组大鼠逃避潜伏期和穿越平台次数明显减少（P〈0．05）;海马组织内P-JNK阳性细胞数明显降低（P〈0．05）。结论OXY可能通过抑制JNK信号通路的活化发挥对癫痫大鼠在空间学习和记忆方面的保护作用。     

C型利钠肽对青霉素及海人酸所致癫痫的作用

研究Ｃ型利钠肽对青霉素及海人酸所致癫痫的作用。以脑电总功率率及痫性行为分级评分作为癫痫发作的指标。结果；ＣＮＰ本身对脑电图无明显影响，但可明显增加海马注射青霉素致痫后大鼠的脑电总功率，减少腹腔注射后大鼠痫性行为的分级评分值。     

听源性癫痫发作对大鼠学习记忆的影响及机制探讨

目的探讨癫痫发作对大鼠学习记忆的影响及机制。方法以100dB铃声刺激60s诱发遗传性听源性癫痫大鼠癫痫发作,采用光辨别学习和放射免疫分析相结合的方法,研究大鼠癫痫发作对光辨别学习的影响及脑组织中生长抑素含量的改变。结果癫痫发作后,大鼠光辨别学习能力明显减弱,表现为达到学会标准所需的时间明显延长(6.20±0.97vs3.90±0.57,P<0.01);癫痫发作后,大鼠下丘脑、海马、颞叶皮层组织中生长抑素含量明显增高(下丘脑:551.28±68.21vs273.41±53.51,P<0.05;海马:246.71±43.26vs135.74±36.60,P<0.01;颞叶皮层:235.88±42.14vs150.01±37.71,P<0.01)。结论癫痫发作对大鼠光辨别学习有明显的抑制作用,该作用可能与下丘脑、海马及颞叶皮层组织中生长抑素含量的改变有关。     

癫痫对大鼠光辨别学习及心脑组织中P物质含量的影响

本研究在遗传性听源性癫痫大鼠模型上，采用了行为和放射免疫分析相结合的方法，研究了大鼠癫痫发作对光辨别学习的影响及心脑组织中Ｐ物质含量的改变，癫痫发作后，大鼠光辨别学习能力明显减弱，表现为达到学会标准所需的时间明显处长，达标率明显降低；大鼠下丘脑、海马中Ｐ物质的含量明显降低，而颞叶皮层和心脑组织中Ｐ物质含量明显增高，大鼠光辨别学习能力下降的同时，下丘脑、海马中Ｐ物质含量明显降低，而颞叶皮层和心脑组织     

Changes in Behavior and Amino Acid Neurotransmitters in the Brain of Rats with Seizure Induced by IL-1β or IL-6

To explore the mechanism of epilepsy induced by IL-1β and IL-6, the changes of glutamic acid (Glu) and GABA immunoreaction in the cerebral cortex and hippocampus of rats with seizure induced by IL-1β or IL-6 were studied. Rats were randomly divided into 3 groups: control group (i. c. v. injection of IL-6). 120 min after the icv injection of reagents of IL-1β or IL-6, behavioral changes were observed and Glu and GABA in the cerebral cortex and hipocampus were examined by means of immunohistochemistry. Our results showed that no seizure developed in the control group, while moderate seizure was observed in IL-1β group and IL-6 group. Compared with the controls, the immunoreaction of Glu was significantly increased, while GABA was obviously decreased in IL-1β group and IL-6 group after 120 min. Our study suggested that the IL-1β and IL-6 might promote and induce epilepsy by increasing Glu and decreasing GABA in the cerebral cortex and hippocampus.     

穴位埋药线对难治性癫痫大鼠大脑海马及皮质多药耐药基因MDR1b的影响

目的探讨穴位埋药线对难治性癫痫大鼠大脑海马及皮质中多药耐药基因MDR1b的影响。方法选用雄性SD大鼠120只。随机分为空白对照组、模型组、拉莫三嗪组、普通线组、药线组。普通线组与药线组均取大椎、肝俞（双）、血海（双）、丰隆（双）穴,先埋一侧穴位,间隔15d后埋对侧穴位;拉莫三嗪组按照人用拉莫三嗪剂量为5mg／（kg·d）换算灌胃大鼠。每日2次;模型组给予灌胃同等体积（2mL／d）的蒸馏水,均干预30d。采用荧光实时定量聚合敏链反应（RT—PCR）的方法检测多药耐药基因MDR1b在海马与颞叶皮层的表达。结果与模型组相比,药线、普通线、拉莫三嗪干预后能降低致痫大鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平（P〈0．05）;与空白对照组比较,模型组中致痫鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平明显升高（P〈0．01）;与普通线组比较,药线组明显降低致痫大鼠海马区多药耐药基因MDR1b的表达水平（P〈0．05）;模型组的海马区与颞叶皮质区多药耐药基因表达差异有统计学意义（P〈0．05）。结论埋药线逆转与降低致痫大鼠海马区及皮质区多药耐药基因的表达水平．可能是其抗癫痫生物学作用机制之一。     

新生大鼠反复惊厥对NMDA受体表达的长期影响

目的：研究反复惊厥对大鼠脑内N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体表达，以及成年期认知功能和惊厥阈的长期影响。方法：生后6d(用P6表示，下同)的Wistar大鼠随机分成两组，每组6只，惊厥组每日吸入三氟乙醚诱导惊厥发作1次，每次持续30min，连续6d；对照组同样操作但不吸入三氟乙醚。两组大鼠于P60-P65行Morris水迷宫实验，检测大鼠的学习记忆功能。于P75时给予大鼠腹腔注射戊四唑(PTZ)测定大鼠的惊厥阈。随即断头处死大鼠，分离大脑皮质和海马，匀浆提取细胞膜蛋白，应用免疫印记法测定NMDA受体亚基l(NRl)和NR2A-2D表达的变化。结果：从P6l至P65，两组大鼠寻找平台时间均逐渐缩短，惊厥组大鼠在P65的平均寻找平台时间较对照组显著延长。惊厥组大鼠注射PTZ后发生惊厥的潜伏期与对照组比较差异无显著性。在大脑皮层，惊厥组大鼠较对照组NRl和NR2B表达水平明显下调，在海马这两种亚基表达水平无明显改变，在大脑皮层和海马区，惊厥组较对照组NR2A表达水平明显下调，NR2C表达水平明显上调。两组在皮层和海马均无NR2D表达。结论；新生大鼠反复惊厥可导致远期认知障碍，同时伴有NMDA受体的数量和结构上的长期改变，NMDA受体表达的这种改变可能在发育期惊厥导致的脑长期认知功能损害中起重要作用。     

PTZ诱导的癫痫急性发作大鼠大脑神经元中F-actin、Calponin3和ROCK2的表达及其意义

目的:探讨戊四氮(PTZ) 诱发的大鼠癫痫急性发作对大脑神经元中F-actin、Calponin3和ROCK2蛋白表达水平的影响,阐明癫痫急性发作时阻断F-actin异常解聚、触发F-actin重构的可能机制。方法:3周龄Wistar 幼鼠56只分为对照组(n=6)和癫痫组(n=50)。对照组大鼠给予腹腔注射生理盐水;癫痫组大鼠经腹腔注射60 mg·kg^-1 PTZ建立癫痫急性发作模型,造模成功的24只大鼠分别在癫痫急性发作后的相应时间点(1、2、3和7 d时)随机处死6只用于取材。采用Alex-488标记的phalloidine进行荧光染色观察大鼠大脑海马组织中分子层的F-actin荧光强度;采用免疫荧光染色法观察大鼠大脑皮层和海马神经元中Calponin3和ROCK2的分布;采用Western blotting法检测大鼠海马组织中Calponin3、ROCK2和磷酸化ROCK2蛋白的相对表达水平。结果:与对照组比较,癫痫急性发作1 d后,癫痫组大鼠大脑树突棘密集的海马中分子层的F-actin荧光强度降低(P<0.05),点状聚集结构消失。免疫荧光染色,对照组大鼠Calponin3在神经元胞质中弥漫性分布,而癫痫急性发作7 d后,癫痫组大鼠神经元中Calponin3则聚集在细胞皮质;对照组大鼠ROCK2仅在少量神经元突起中分布,而癫痫急性发作7 d后,癫痫组大鼠大量神经元胞体和突起中均可见ROCK2分布。Western blotting检测,与对照组比较,癫痫组大鼠各时间点海马组织中Calponin3相对表达水平显著降低(P<0.05),但是随着时间延长,1周内逐渐升高并趋向正常水平。与对照组比较,癫痫组大鼠海马组织中ROCK2蛋白相对表达水平从癫痫急性发作后3 d开始显著增加并持续至造模后7 d(P<0.05);磷酸化ROCK2蛋白相对表达水平则从癫痫急性发作后1 d就开始显著增加并持续到7 d(P<0.05),且随着时间延长逐渐降低。结论:PTZ诱导幼鼠癫痫急性发作导致F-actin异常解聚,同时激活RhoA/ROCK2信号途径,上调ROCK2和Calponin3蛋白表达水平。     

胆囊收缩素cDNA探针制备及其在癫痫发病机制研究中的应用

①目的　制备胆囊收缩素（ Ｃ Ｃ Ｋ）ｃ Ｄ Ｎ Ａ 探针,并以此探针检测遗传性听源性癫痫易感大鼠癫痫发作后脑内 Ｃ Ｃ Ｋｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达。②方法　将含０．５ｋｂｐ Ｒａｔ Ｃ Ｃ Ｋｍ Ｒ Ｎ Ａ 的质粒 Ｐ Ｕ Ｃ１３ 扩增、回收和纯化,用随机引物标记法,得到地高辛精（ Ｄｉｇ）标记 Ｃ Ｃ Ｋｃ Ｄ Ｎ Ａ 探针。用原位杂交技术,对癫痫发作后大鼠海马和大脑皮层 Ｃ Ｃ Ｋｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达进行研究。③结果　 Ｃ Ｃ Ｋｃ Ｄ Ｎ Ａ 探针标记效率为５０ｍ ｇ／ Ｌ;遗传性听源性癫痫易感大鼠癫痫发作后脑内 Ｃ Ｃ Ｋｍ Ｒ Ｎ Ａ 表达显著增加。④结论　本实验制备的 Ｄｉｇ Ｃ Ｃ Ｋｃ Ｄ Ｎ Ａ 探针,具有较好的特异性和灵敏度;原位杂交实验证实, Ｃ Ｃ Ｋ 参与了癫痫发作过程。