Effects of Berberine and Matrine against Formation of Mixed Biofilms of Vulvo-vaginal Candidiasis

目的 研究中药有效成分小檗碱、苦参碱抗外阴阴道念珠菌病混合菌生物被膜形成的作用.方法 体外建立白念珠菌、铜绿假单胞菌混合菌的生物被膜,采用四唑鎓盐(tetrazolium salt,XTT)减低法及形态学方法观察白念珠菌混合菌生物被膜的形成过程;采用形态学观察、活菌计数法评价小檗碱、苦参碱对白念珠菌混合菌生物被膜的最小抑制浓度.结果 白念珠菌混合菌培养48 h形成成熟的生物被膜;125 mg/L小檗碱能抑制白念珠菌混合菌生物被膜的形成.500 mg/L苦参碱未见有抑制白念珠菌混合菌生物被膜形成的作用.结论 小檗碱具有抗生物被膜形成的作用,可用于预防外阴阴道念珠菌病.     

小檗碱对小鼠外阴阴道假丝酵母菌病的作用研究

目的观察小檗碱对小鼠外阴阴道假丝酵母菌病的治疗效果。方法 ICR小鼠112只,采用雌激素化+阴道灌洗白假丝酵母菌菌液,构建外阴阴道假丝酵母菌病小鼠模型。随机分为正常组、模型组、实验组(小檗碱低、中、高剂量)和制霉菌素组,各18只,相应药物干预10天,观察小鼠在接菌后4、7、14天症状、体征、微生物学及组织病理学改变。结果接菌第7天,小檗碱高剂量组和制霉菌素组感染症状、体征消失,与模型组比较,小檗碱高剂量组真菌载量和阴道灌洗液真菌阴性鼠数均明显下降[(1.83±0.75)104CFU/m L比(18.17±2.93)104CFU/m L,P0.05;5鼠比0鼠,P0.05]。小檗碱高剂量组和制霉菌素组效果相当[(1.83±0.75)104CFU/m L比(1.67±1.21)104CFU/m L,P0.05;5鼠比6鼠,P0.05]。结论小檗碱能有效治疗雌激素化小鼠外阴阴道假丝酵母菌病。     

蒺藜中甾体皂苷TTS-12对白念珠菌生物被膜形成的抑制作用

目的观察蒺藜甾体皂苷类化合物TTS-12对白念珠菌生物被膜形成的影响,探讨其可能的作用机制。方法采用激光共聚焦显微镜观察TTS-12对白念珠菌生物被膜生长形态的影响;采用XTT法考察不同浓度TTS-12对白念珠菌生物被膜形成的影响;应用光密度值测定及实时定量RT-PCR(real-time RT-PCR)法考察不同浓度TTS-12对白念珠菌细胞表面疏水性(cell surface hydrophobicity,CSH)及相关基因表达的影响。结果与未加TTS-12的正常对照细胞相比,经TTS-12处理的白念珠菌生物被膜结构疏松,TTS-12可剂量依赖性地抑制白念珠菌生物被膜的形成,其生长动力学及细胞表面疏水性值下降,CSH1基因表达水平降低(P<0.01)。结论TTS-12可能通过降低白念珠菌CSH1基因表达来抑制白念珠菌生物被膜的形成。     

小檗碱对外阴阴道假丝酵母菌病小鼠的疗效研究

观察小檗碱对小鼠外阴阴道假丝酵母菌病的治疗效果。方法 采用雌激素化+阴道灌洗白假丝酵母菌菌液,构建外阴阴道假丝酵母菌病小鼠模型。实验分为正常组、模型组、实验组（小檗碱低、中、高剂量）和制霉菌素组。干预10天,在接菌后的4d、7d、14d不同的时间点分别从症状、特征、微生物学检测、组织病理学改变进行观察。结果 各治疗组在症状、特征、微生物学检测、组织病理学上较模型组均有不同程度改善：感染的症状、体征消失或减轻,真菌载量、镜检菌丝较模型组明显下降（P<0.01）,阴道组织内菌丝和白细胞也明显减少或消失,其中高剂量组和制霉菌素组效果类似,明显优于低剂量组（P<0.01）。结论 小檗碱能有效的治疗雌激素化小鼠外阴阴道假丝酵母病。     

诃子鞣质对白色念珠菌及其生物被膜的影响

目的研究诃子鞣质对生物被膜型白色念珠菌的抑制作用。方法采用MTT法检测诃子鞣质对生物被膜形成的影响;光镜下观察生物被膜内白色念珠菌的形态学变化;采用荧光显微镜观察吖啶橙/溴化乙锭染色的生物被膜内白色念珠菌的死亡方式。结果诃子鞣质对生物被膜的形成及成熟期生物被膜中的白色念珠菌有抑制作用,并存在时间和剂量依赖性;鞣质导致被膜内白色念珠菌细胞变形,形态结构改变,芽管和假菌丝形成抑制,但未见确切细胞凋亡。结论诃子鞣质对白色念珠菌生物被膜的形成有抑制作用,它可能通过非凋亡途径导致生物被膜内白色念珠菌的死亡。     

硝酸咪康唑与氟康唑治疗重度外阴阴道念珠菌病的疗效观察

目的探讨重度外阴阴道念珠菌病（VVC）的临床特征及硝酸咪康唑栓1 200 mg两次疗法与氟康唑150 mg两次疗法治疗重度外阴阴道念珠菌病的效果。方法根据Sobel分类,将245例重度VVC患者随机分为两组：硝酸咪康唑组,123例,使用硝酸咪康唑阴道软胶囊1 200 mg睡前阴道用药,72 h加用一粒;氟康唑组,122例,使用氟康唑150 mg口服,72 h后加服150 mg。于治疗完成后第7-14 d和28-35 d进行真菌学疗效评价。结果硝酸咪康唑和氟康唑对重度VVC的近期真菌学治愈率分别为90.27%（102/113）和87.72%（100/114）（P〉0.05）;远期真菌学治愈率分别为76.11%（86/113）和70.18%（80/114）（P〉0.05）。白念珠菌在重度VVC致病菌中所占的比例为93.06%（228/245）。硝酸咪康唑不良反应的发生率为1.63%（2/123）,氟康唑组未见明显不良反应。结论硝酸咪康唑栓1 200 mg两次疗法治疗重度VVC安全有效。白念珠菌是重度外阴阴道念珠菌的主要致病菌。     

各类细菌性感染的治疗原则及病原治疗（八）

阴道传染 阴道感染根据病因和病原体的不同．可分为细菌性阴道病，念珠菌性外阴阴道病和滴虫性阴道炎。细菌性阴道病的最常见病原体为阴道加德纳菌、各咱厌氧菌和弯杆菌属。念珠菌性外阴阴道病的病原体80％以上为白念珠菌：     

外阴和阴道

联合应用波姆光和糖皮质激素治疗外阴上皮内非瘤样病变的临床观察;外阴硬化性苔癣病因及治疗研究进展;外阴阴道念珠菌病的阴道黏膜先天抗白色念珠菌机制的研究；单克达克宁栓及达克宁栓联合定君生治疗外阴阴道念珠菌病的临床观察。     

80例严重外阴阴道念珠菌病的疗效观察

外阴阴道念珠菌病是由不同种念珠菌感染所致,是最常见的妇女外阴阴道炎之一。近年来,外阴阴道念珠菌病的发生率有上升趋势,加之患者对本病缺乏认识故使病情得不到及时控制而发展为严重外阴阴道念珠菌病。我们在门诊时采用易启康(伊曲康唑胶囊100mg/粒,由四川成都倍特药业有限公司生产)联合达克宁栓(硝酸咪康唑栓400mg/枚,由西安杨森制药有限公司生产)三日疗法治疗严重外阴阴道念珠菌病,临床观察效果良好,现报道如下。1资料与方法1.1一般资料1.1.1研究对象及分组2004年5月至2005年2月我院妇产科门诊诊断为严重外阴阴道念珠菌病80例,均为非妊…     

外阴阴道念珠菌病复发病例治疗的临床观察

目的 探讨外阴阴道念珠菌病复发病例的治疗方法.方法 322例外阴阴道念珠菌病复发患者,观察组于月经前3天口服氟康唑胶囊150mg及咪康唑栓1.2g阴道用药.月经干净后重复,为一疗程,共2个疗程;对照组仅于月经干净后口服氟康唑胶囊150mg及咪康唑栓0.4g/d阴道用药×3天,为一个疗程,共3个疗程.结果 月经前后口服加阴道用药治疗外阴阴道念珠菌病的复发病例总治愈率96%,复发率2.9%.结论 月经前后口服加阴道用药2个疗程治疗外阴阴道念珠菌病的复发病例疗效好,复发率低,且顺应性好.     

黄芩苷对铜绿假单胞菌生物膜的影响

目的研究黄芩苷对体外铜绿假单胞菌(pseudomonas aeruginosa,Pa)生物膜(biofilm,BF)的影响。方法选取临床分离呼吸道Pa,采用LB肉汤-吸痰管系统培养BF,建立体外BF模型,银染法观察BF变化。将黄芩苷作用于BF,连续稀释法进行活菌计数,微量稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)。结果 15.65mg/L的黄芩苷即可抑制和破坏BF。结论黄芩苷对体外铜绿假单胞菌生物膜有较强的抑制作用。     

黄芩苷联合头孢他啶对铜绿假单胞菌生物膜的影响

目的 通过在体外建立铜绿假单胞菌生物膜模型,研究黄芩苷联合头孢他啶对生物膜的协同杀菌效果.方法 选取临床分离的呼吸道铜绿假单胞菌,采用LB肉汤-吸痰管系统建立体外生物膜模型,连续稀释法进行活菌计数,微量稀释法测定药物的最低抑菌浓度(MIC).结果 15.65 mg/L的黄芩苷可抑制和破坏生物膜,并增强头孢他啶对生物膜内铜绿假单胞菌的抗菌活性.结论 黄芩苷能增强头孢他啶对生物膜内铜绿假单胞菌的清除作用.     

盐酸格拉司琼体外抑菌作用的实验研究

目的:观察盐酸格拉司琼在体外对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌抑菌作用的影响。方法:将盐酸格拉司琼注射液用无菌生理盐水稀释至终浓度分别为0.5、0.25、0.125和0.0 625mg/mL,与大肠埃希杆菌、金黄色葡萄球菌、和铜绿假单胞菌培养,每个实验重复三遍,所有菌株的稀释的系列测定均进行两次。结果:格拉司琼对大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌均有明显的抑菌作用,格拉司琼对大肠埃希菌的抑菌作用随着格拉司琼浓度的增加而增加,至0.0 625mg/mL时仍有明显的抑菌作用(P<0.05)。格拉司琼对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌的抑菌作用在格拉司琼浓度为0.125mg/mL时消失。结论:格拉司琼在体外可以抑制大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌的生长,对于预防麻醉相关的感染可能有一定的临床意义。     

首发念珠菌性外阴阴道炎病原菌与耐药性分析及氟康唑顿服法效果

目的研究目前首发念珠菌性外阴阴道炎的病原菌及其对常用药物敏感性,观察氟康唑150 mg顿服对其的治疗效果.方法对150份首发念珠菌性外阴阴道炎分泌物涂片找假菌丝,同时取分泌物做念珠菌培养及行5-氟宝嘧啶、两性霉素、制霉菌素、咪康唑、益康唑、酮康唑、氟康唑药敏试验.并给予氟康唑150 mg顿服后复查临床治疗效果及病原菌培养结果.结果 150份标本培养出念珠菌假菌丝,其中白色念珠菌占96%,光滑念珠菌占2%,热带念珠菌占2%.除2份标本光滑念珠菌对氟康唑耐药外,其余标本对以上所测药物全部敏感.氟康唑150 mg顿服1周后首次复查,痊愈率为91.33%,总有效率为99.33%.结论首发念珠菌性外阴阴道炎病人白色念珠菌感染占绝大多数,对临床常用抗真菌药物敏感;氟康唑150 mg顿服治疗方便,治愈率高,可作为首发念珠菌性外阴阴道炎的首选治疗方案之一.     

甜菜碱体外抑菌活性的研究

目的 研究甜菜碱对临床病原菌的体外抑菌活性.方法 采用试管二倍稀释法进行体外抑菌试验,测定甜菜碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌和白色念珠菌的最小抑菌浓度.结果 甜菜碱对4种病原菌标准菌株的最小抑菌浓度（MIC）为大肠杆菌的MIC 6.25 mg/ml、铜绿假单胞菌的MIC 3.125 mg/ml、金黄色葡萄球菌的MIC 6.25 mg/ml、白色念珠菌的MIC 25 mg/ml.结论 甜菜碱对4种病原菌的标准菌株都有明显的抑菌作用,尤其对铜绿假单胞菌的MIC值最低.     

鱼腥草素钠增强妥布霉素抗铜绿假单胞菌生物被膜作用及抗菌协同作用

目的：研究鱼腥草素钠增强妥布霉素抗铜绿假单胞菌生物被膜的作用。方法：微量倍比稀释法测定鱼腥草素钠、妥布霉素对铜绿假单胞菌的最小抑菌浓度（MIC）,棋盘稀释法测定两者联合抗菌作用,结晶紫染色法测定单药及联合用药对铜绿假单胞菌生物被膜的最小抑膜浓度（SMIC）,扫描电镜下观察药物对铜绿假单胞菌生物被膜形态的影响,采用倾注平板法进行菌落数计数。结果：鱼腥草素钠对铜绿假单胞菌的MIC为512μg/mL,妥布霉素对铜绿假单胞菌的MIC为4μg/mL,两药联合后MIC分别为64μg/mL和1μg/mL,分级抑菌浓度指数（FIC）为0.375,提示两药协同作用明显。妥布霉素对铜绿假单胞菌生物被膜SMIC50黏附期为8μg/mL,早期生物被膜阶段为16μg/mL,成熟期生物被膜阶段为32μg/mL,两药联合后铜绿假单胞菌生物被膜SMIC50黏附期为8μg/mL,早期为0.5μg/mL,成熟期为8μg/mL,鱼腥草素钠对妥布霉素抗铜绿假单胞菌生物被膜有增强作用。结论：鱼腥草素钠与妥布霉素抗菌协同作用明显,鱼腥草素钠对妥布霉素抗铜绿假单胞菌生物被膜有增强作用。     

pvdQ基因在铜绿假单胞菌对白假丝酵母菌形态抑制作用中的功能

目的拟研究长链高丝氨酸内酯降解基因pvdQ在铜绿假单胞菌对白假丝酵母菌形态抑制作用中的功能。方法通过乙酸锂转化法构建CAI-4HWP1-LacZ菌株,使用X-gal平板显色法检测3-oxo-C12-HSL对白假丝酵母菌形态转换的影响;观察与铜绿假单胞菌pvdQ高表达株、野生株PAO1共同培养时,白假丝酵母菌的形态变化,了解pvdQ基因在铜绿假单胞菌对白假丝酵母菌形态抑制作用中的功能。结果 400μg 3-oxo-C12-HSL即可完全抑制白假丝酵母菌的形态转换。铜绿假单胞菌pvdQ高表达株和野生株PAO1均可抑制白假丝酵母菌菌丝形成。pvdQ高表达株对白假丝酵母菌的形态抑制作用较野生株PAO1减弱。结论铜绿假单胞菌通过分泌信号分子3-oxo-C12-HSL,可抑制白假丝酵母菌形态转换。随着pvdQ表达增加,铜绿假单胞菌对白假丝酵母菌的形态抑制作用减弱,即pvdQ基因在铜绿假单胞菌对白假丝酵母菌形态抑制作用中起负性调节作用。其作用机制可能与pvdQ基因对3-oxo-C12-HSL的水解作用有关。     

基于厚朴酚对白色念珠菌黏附性及其生物膜形成的影响探讨其抗龋作用

目的 观察厚朴酚对白色念珠菌黏附性及生物膜形成的影响,以探讨其能否用于治疗白色念珠菌相关龋病。方法 运用微孔板法复制白色念珠菌体外黏附及生物膜模型,采用XTT〔2,3-bis(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-2H-tetrazolium-5-carboxanilide〕减低法评价不同浓度厚朴酚对白色念珠菌黏附、生物膜形成的影响。结果 厚朴酚对白色念珠菌的黏附具有抑制作用,其作用具有时间及浓度依赖性,62.5 mg/L和125 mg/L厚朴酚可以显著的抑制白色念珠菌的黏附,与阴性对照组相比,差异均有统计学意义(P < 0.05);实验所选5个浓度的厚朴酚对白色念珠菌的生物膜均有不同程度的抑制作用,其中125 mg/L厚朴酚对生物膜的抑制率达到66.32%。结论 厚朴酚可通过抑制白色念珠菌的黏附而有效降低其致病性,并对已形成的生物膜具有明显的抑制作用,提示其作为抗龋药物有良好的应用前景。     

赤丹丸与其组方药材的体外抑菌试验

目的：研究赤丹丸及其组方药材的体外抑菌作用。方法：采用液体培养基2倍稀释法测定赤丹丸及其组方药材的水提取物和乙醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌的体外最低抑菌浓度（MIC）和最低杀菌浓度（MBC）。结果：赤丹丸及其组方药材的水提取物和醇提取物对白色念珠菌的抑菌作用明显弱于对其它3种菌的作用（P〈0．05），其中药材的水提取物体外抑制白色念珠菌作用相对较强（P〈0．05）；各种提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌的抑菌作用也各有差异。药材水提取物对铜绿假单胞菌、白色念珠菌的抑菌作用最强（P〈0．05）；赤丹丸醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌的抑菌作用最强（P〈0．05）。结论：赤丹丸及其组方药材的水提取物与醇提取物对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌均具有体外抑菌作用。     

In-vitro antimicrobial effectiveness of herbal-based mouthrinses against oral microorganisms

Objective: To evaluate the in vitro antimicrobial effectiveness of commercial herbal-based mouthrinses against oral microorganisms. Methods: A total of three mouthrinses(OX, Pesona and Watsons) were tested for their antimicrobial activity against six oral organisms, Streptococcus mutans(S. mutans), Streptococcus sobrinus(S. sobrinus), Lactobacillus salivarius(L. salivarius), Staphylococcus aureus(S. aureus), Pseudomonas aeruginosa(P. aeruginosa) and Candida albicans(C. albicans) by standard agar-disk diffusion assay. Oradex mouthrinse containing 0.12% chlorhexidine gluconate and sterile distilled water was served as positive and negative controls, respectively. Results: All mouthrinse formulations were effective in inhibiting the growth of S. mutans, S. sobrinus, L. salivarius and C. albicans. Among the tested mouthrinses, Pesona was the only effective mouthrinse against S. aureus and P. aeruginosa, similar to Oradex mouthrinse. Pesona mouthrinse formulation appears to be as effective as Oradex mouthrinse formulation to kill S. aureus and P. aeruginosa. Statistical analysis showed no significant difference among the tested formulations regarding their antimicrobial activities(P 0.05).Conclusions: Pesona was not the only herbal mouthrinse effective in inhibiting the growth of S. mutans, S. sobrinus, L. salivarius and C. albicans in vitro. All tested formulations were effective against those strains. Our findings may serve as a guide for selecting a kind of herbal mouthrinses as well as providing information to the dental professionals about the efficacy of these products.