葡萄糖神经酰胺合酶与白血病细胞耐药的关系

本研究旨在观察葡萄糖神经酰胺合酶（glucosylceramide synthase，GCS）基因及其蛋白在人白血病细胞的表达及其与肿瘤多药耐药的关系。首先以β—actin基因为内参照物，采用RT—PCR方法分析了53例耐药／非耐药白血病患者外周血标本，并对药物敏感的HL-60细胞株和对阿霉素耐药的HL-60／ADR细胞株中GCS基因的表达水平进行检测，同时与多药耐药基因（mdr1）的表达进行比较。继而采用Western blot法分析HL-60细胞株及HL-60／ADR细胞株中GCS蛋白及P-gP蛋白的表达情况。结果表明：白血病患者耐药组临床标本中的GCS基因扩增条带光密度相对比值明显高于非耐药组（P〈0．05），且GCS基因扩增条带光密度值显著增强时往往伴有mdr1基因的高表达，两者呈正相关（P〈0．01、r=0．6）。HL-60／ADR细胞株GCSmRNA及蛋白均过度表达，且明显高于HL-60细胞株，与此同时，HL-60／ADR细胞株的mdr1mRNA和P-gP的表达亦显著增高。结论：GCS可能在白血病多药耐药中起着重要作用。     

宫颈癌中多药耐药1基因的表达和意义

目的探讨多药耐药1基因在宫颈癌中表达及其临床意义。方法应用荧光定量PCR法检测42例宫颈癌组织及10例正常宫颈组织中多药耐药1基因mRNA的表达情况。结果宫颈癌组织中多药耐药基因1 mRNA表达(0.573±0.320)明显高于正常宫颈组织(0.186±0.099)(P<0.001);宫颈癌组织中多药耐药基因1 mRNA表达高中分化组(0.678±0.269)高于低分化组(0.383±0.325)(P<0.05),在其他临床病理相关因素上差异无统计学意义(P>0.05)。结论多药耐药1基因在宫颈癌的原发性多药耐药中可能起重要作用,检测多药耐药1基因的表达情况对预测宫颈癌的化疗效果、协助临床选择化疗方案有一定意义。     

细支气管肺泡癌与肺腺癌组织中P53蛋白及LRP表达的对比分析

野生型P53基因突变是肺癌中最常见的基因突变之一。检测肿瘤细胞中突变型P53蛋白的表达,对评估肿瘤生物学行为、化疗耐受性等方面具有较好的临床价值;肺耐药蛋白（1ungresistance—related protein,LRP）是肺多药耐药基因产物的一种,检测肿瘤细胞中LRP的表达,     

多药耐药1基因与膀胱癌耐药及其逆转的关系

膀胱肿瘤细胞产生耐药性，导致肿瘤化疗的失败，其主要原因之一是多药耐药1基因的过度表达。本文对多药耐药1基因与膀胱癌耐药关系及临床逆转进行探讨。     

超声造影剂联合超声介导耐药基因反义寡脱氧核苷酸转染肝癌细胞逆转多药耐药效应的研究

目的 探讨超声造影剂联合超声介导mdr1、mrp基因反义寡脱氧核苷酸(ASODN)转染QGY耐药肝癌细胞对多药耐药(MDR)的逆转.方法 分别将mdr1、mrp-ASODN+超声造影剂+超声辐照转染QGY/CDDP肝癌细胞,检测转染后细胞贴壁率、药物敏感性、耐药基因mRNA表达和相应耐药蛋白表达变化.结果 mdr1-ASODN转染后,细胞贴壁率和耐药基因mRNA表达变化大(P＜0.05),细胞药物敏感性和耐药蛋白P-gp、MRP表达变化小(P＞0.05).实验组(2组)作用更大(P＜0.05).mrp ASODN转染后,细胞贴壁率、药物敏感性、耐药基因的mRNA表达和耐药蛋白P-gp、MRP表达均变化明显(P＜0.05),实验组(2组)作用更大(P＜0.05).结论 mdr1、mrp-ASODN+超声造影剂+超声辐照能够低毒部分逆转肝癌细胞MDR,是潜在肿瘤基因治疗方法.     

MDR1基因在胃癌组织中的表达及意义

目的 探讨多药耐药基因MDR1在胃癌组织中的表达及临床意义.方法 收集2009年12月～2010年8月胃癌新鲜癌组织标本53例(实验组)、15例正常胃黏膜组织(对照组),采用逆转录-聚合酶链反应技术检测胃癌组织和正常胃组织中MDR1基因的表达,并分析与临床病理特征之间的关系及对化疗的指导意义.结果 MDR1基因在正常胃组织及胃癌组织中的表达分别为0.57±0.27和0.20±0.10(t=8.13,P＜0.001).MDR1基因的表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移之间差异具有统计学意义(t=2.83,3.47;P=0.007,0.002),而与患者性别、肿瘤部位、大小之间差异无统计学显著性意义(t=1.41,0.54,1.16;P=0.16,0.60,0.25).结论 MDR1基因的高表达可能是胃癌多药耐药产生的基础,MDR1基因的检测对制定化疗方案和选择化疗药物有一定的指导意义.     

急性髓系白血病中乳腺癌多药耐药蛋白基因的研究进展

乳腺癌耐药蛋白(BCRP)是新近发现的一种肿瘤耐药相关蛋白,与P-gp和多药耐药相关蛋白(MRP)同属ABC转运蛋白超家族。本文对BCRP的发现、组织表达、结构特点、急性髓系白血病中多药耐药BCRP基因的表达及应用等方面的研究进展进行综述。     

多药耐药基因MDR1在乳腺癌中的表达及意义

目的 探讨乳腺癌中多药耐药基因MDR1的表达及临床意义．方法 采用荧光定量RT-PCR法检测47例乳腺癌组织及15例正常对照(包括5例乳腺纤维腺瘤、10例癌旁正常组织)中MDR1基因的表达．结果 乳腺癌中MDR1基因的阳性率为46．8％，且MDR1基因的表达与患者年龄、肿瘤大小、ER、PR、绝经状况无关．对照组中无MDR1基因扩增。结论 乳腺癌中MDR1基因的表达可做为乳腺癌化疗耐药的评价指标．     

多药耐药基因在人骨髓CD34+细胞中的表达及对化疗药物的耐受性

目的　探讨人多药耐药 (MDR1)基因过表达能否提高骨髓造血干 /祖细胞对化疗药物的耐受性。方法　应用免疫磁性分选系统 (miniMACS)体外分离、纯化骨髓CD34 细胞并进行扩增 ;采用脂质体介导的基因转移方法 ,将人MDR1基因转染骨髓CD34 细胞 ,并运用流式细胞术检测基因转导前后造血干 /祖细胞中MDR1基因的编码产物 Pl70糖蛋白表达和功能变化。MTT法检测基因转导前后造血干 /祖细胞对化疗药物耐受性的改变。结果　MDR1基因转导后 4 8h骨髓造血干 /祖细胞Pl70抗原表达为 (2 3 6± 2 34) % ,明显高于转导前 (11 2± 2 2 ) % (P <0 0 1)。P170的功能活性被Rh 12 3的摄取和排除试验证实。转基因后细胞表现为典型的多药耐药表型 ,对P170谱的多种化疗药的耐受性提高了约 2～ 8倍 ,对非P170谱的顺铂、氨甲喋呤耐受性没有改变。结论　人多药耐药基因能提高骨髓造血干 /祖细胞对多种化疗药物的耐受性 ,表现为典型的多药耐药表型。     

核酶对白血病耐药细胞株K562/A02耐药性逆转的研究

肿瘤耐药及其逆转是当今肿瘤治疗研究的热点。耐药的发生与多药耐药基因 (ｍｄｒ1)及其编码的Ｐ糖蛋白 (Ｐ ｇｐ)过度表达关系密切。我们采用电击基因导入法将特异切割ｍｄｒ1ｍＲＮＡ的锤头状核酶基因导入白血病耐药细胞株Ｋ5 6 2 Ａ0 2 ,研究该核酶抑制ｍｄｒ1基因及Ｐ ｇｐ表达 ,逆转肿瘤细胞耐药性的作用。材料和方法1　细胞株　Ｋ5 6 2细胞株系人红白血病细胞株[1 ] ,由上海血液学研究所提供。Ｋ5 6 2 Ａ0 2细胞株为阿霉素诱导Ｋ5 6 2细胞建立的多药耐药细胞株 ,由中国医学科学院、中国协和医科大学血液学研究所提供。2　质粒　真核…     

多聚甲醛固定对流式细胞术检测人外周血白细胞P-糖蛋白表达的影响

多药耐药(multidrug resistance ,MDR)是影响肿瘤患者化疗效果的关键因素[1 2 ] 。MDR1基因编码的分子量为170 0 0 0的P 糖蛋白(P gp) ,可促使药物排出细胞而导致MDR。因此,P gp表达水平对肿瘤化疗效果及预后判断具有重要的指导作用。目前较多采用流式细胞术测定P gP ,所用单克     

卵巢癌耐药细胞系A2780／TS紫杉醇体外化疗后耐药相关基因的表达

目的比较卵巢癌耐药与非耐药细胞系，紫杉醇体外化疗后部分耐药相关基因的表达差异。方法采用RT-PCR技术检测卵巢癌细胞系A2780与紫杉醇耐药细胞系A2780／TS部分耐药相关基因的表达差异。结果耐紫杉醇细胞株A2780／TS经紫杉醇处理后，细胞抑制率明显低于敏感细胞株A2780（P〈0．05）；A2780／TS的耐药指数（RI）约为3．650；G1、G2、S期细胞比例无明显改变（P〉0．05）；在检测的耐药相关基因中，A2780／TS中较其非耐药细胞中表达下降的有多药耐药蛋白（MDR-1）基因、P53，表达升高的有细胞色素P450181（CYP1B1）、凋亡抑制蛋白Survivin，无明显改变的有谷胱甘肽-S-转移酶（GST-Pi）、多药耐药相关蛋白（MRP-1）基因。结论在紫杉醇耐药及敏感细胞中，已知的耐药相关基因的表达差异很大，说明紫杉醇耐药机制是多因素、多通路相互复杂作用的过程，仍需要我们深入、全面、系统的研究、验证，才能最终转化为指导临床化疗方案的制定、有针对性的逆转耐药的方法。     

肺耐药相关蛋白基因和多药耐药基因测定在急性淋巴细胞白血病中的意义

目的:评价肺耐药相关蛋白基因和多药耐药基因在急性淋巴细胞白血病患者中的表达情况与临床多药耐药的关系。方法:将47例急性淋巴细胞白血病患者分为临床非耐药组(A)和耐药组(B),用RT-PCR方法检测患者骨髓中肺耐药相关蛋白基因和多药耐药基因的mRNA表达。结果:肺耐药相关蛋白基因在A、B组阳性表达分别占6/27和8/20。统计学分析显示组间差异无显著性意义(χ2=1.15,P>0.05)。多药耐药基因在A、B组阳性表达分别占3/27和9/20。统计学分析显示组间差异有显著性意义(χ2=2.98,P<0.05)。在所有20例临床耐药患者中,5例同时表达上述两个基因。而临床非耐药组患者中,无一例同时表达上述两个基本基因。结论:肺耐药相关蛋白基因不能作为独立判定急性淋巴细胞白血病多药耐药的发生指标,多药耐药基因在判定急性淋巴细胞白血病多药耐药的发生中有一定临床意义。     

多药耐药相关蛋白对急性白血病的预后意义

P 糖蛋白 (P GP)、多药耐药相关蛋白 1(MRP1)、肺耐药相关蛋白 (LRP)、乳癌耐药蛋白 (BCRP)是近年来研究较多的四种多药耐药相关蛋白。它们的过多表达是白血病化疗中产生多药耐药的重要原因之一。本文重点综述了这四种蛋白的相关表达对急性白血病化疗预后的意义。     

消化道肿瘤多药耐药机制研究进展

化疗是消化道肿瘤术后或晚期肿瘤的重要治疗手段之一。由于多药耐药 (ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ,ＭＤＲ)基因的高表达使消化道肿瘤对大多化疗药耐药 ,近年对消化道肿瘤ＭＤＲ基因调控表达的实验和临床研究为消化道肿瘤的化疗开辟了新的领域。本文就近几年在消化道肿瘤中耐药机制的研究进展作一综述。1　Ｐ 糖蛋白在消化道正常组织及肿瘤组织中的表达及功能许多ＡＴＰ结合的运输超家族 ,即ＭＤＲ1基因产物Ｐ 糖蛋白 (Ｐ ｇｐ) ,常表达于各种不同的组织 ,从高到中度地表达在胆管肝细胞、小肠粘膜细胞、胰小管及胃肠的上皮细胞 …     

温下方联合顺铂对A549/DDP裸鼠移植瘤的抑制作用及对药物转运蛋白表达的影响

目的探讨温下方与顺铂(DDP)合用对肺癌多药耐药裸鼠模型皮下移植瘤生长的抑制作用及其相关机制。方法建立耐药特性稳定的肺腺癌移植瘤裸小鼠动物模型。温下方0.2ml(含生药0.4g)/10g体质量灌胃给药干预。观察温下方与顺铂合用对裸鼠移植瘤生长的影响;RT-PCR法检测多药耐药基因(mdr1)和多药耐药相关蛋白基因(mrp)mRNA表达;免疫组化法检测上述基因相应蛋白P-gp、mrp的表达。结果与顺铂干预组(DDP组)相比,温下方与顺铂联合应用组(WCF+DDP组)荷瘤裸鼠体重下降较慢(P<0.05),移植瘤体积和瘤重量明显下降,肿瘤生长速度较缓(P<0.05),移植瘤中mdr1、mrpmRNA及P-gp、mrp蛋白的相对表达量均显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温下方与化疗药合用对肺癌多药耐药裸鼠皮下移植瘤生长具有抑制作用,其机制可能通过降低药物转运蛋白mdr1和mrp基因及蛋白表达,增强A549/DDP对化疗药物的敏感性有关。     

荧光定量RT-PCR检测白血病多药耐药基因及其临床意义

目的　在Light-CyclePCR仪上对多药耐药基因 (MDR1)定量的技术方法和临床应用进行探讨。方法　应用荧光定量逆转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)检测了 30例急性白血病患者和 8例正常人外周血MDR1基因的表达。结果　该实验方法标准曲线线性良好 (r=1.0 ) ,耐药组MDR1基因拷贝数与非耐药组有显著性差异 (P <0 .0 1) ,正常人亦有低水平MDR1基因的表达。结论　荧光逆转录 -多聚酶链反应 (RT -PCR)是一种可靠的定量方法 ,能快速、特异地检测临床肿瘤标本中MDR1,为临床医生用药、预防MDR发生、考核逆转MDR效果等方面提供了有价值的量化指标。     

糖蛋白P及其介导的多药耐药及逆转策略

多药耐药（MDR）是肿瘤细胞对多种化疗药物产生抗药性的同时，对其它结构不同、靶位不同、作用方式不同的抗肿瘤药物产生交叉耐药性，是最重要、最常见的肿瘤耐药现象，肿瘤细胞对抗癌药物产生耐受性成为肿瘤化学治疗最大障碍之一。近年来研究发现肿瘤的多药耐药主要与一种分子量为170KD的跨膜糖蛋白P（P-gp）有关，由多药耐药基因1（MDR1）编码，本文将讨论有关P-gP及由其介导的肿瘤多药耐药的逆转策略的研究进展。     

shRNA干扰MDR1基因逆转胃癌细胞多药耐药性的研究

目的利用短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)技术沉默多药耐药基因1(multidrug resistance,MDR1),探讨其对SGC7901/L-OHP细胞株多药耐药性的逆转作用。方法采用逐步增加药物浓度法建立耐奥沙利铂(oxaliplatin,L-OHP)的胃癌细胞株SGC7901/L-OHP,用shRNA技术沉默MDR1基因在SGC7901/L-OHP细胞中的表达,以real-time PCR检测细胞中MDR1mRNA的表达,Western blot检测细胞中P糖蛋白(P-glycopmtein,P-gp)的表达,MTT法检测转染后SGC7901/L-OHP细胞对L-OHP和5-FU的敏感性。结果shRNA沉默SGC7901/L-OHP细胞株MDR1基因后,与空白组和阴性质粒组比较,MDR1mRNA表达抑制(P0.01),且P-gp表达下调(P0.05)。干扰后的SGC7901/L-OHP细胞对L-OHP和5-FU的敏感性显著升高(P0.05)。结论shRNA可有效沉默SGC7901/L-OHP胃癌耐药细胞株MDR1基因的表达,提高耐药的胃癌细胞对化疗药的敏感性。     

肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及临床意义

为了研究肺耐药蛋白基因和多药耐药相关蛋白基因在急性白血病骨髓细胞中的表达及其临床意义，采用半定量逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测初治急性白血病、复发难治白血病及正常对照骨髓细胞肺耐药蛋白基因(lung resistance protein，LRP)及多药耐药相关蛋白基因(multidrug resistance protein，MRP)的表达。结果显示，正常对照骨髓细胞LRP表达阴性，初治急性髓细胞白血病(AML)组及复发难治组LRP表达水平与正常对照组相比明显升高，增高的LRP mRNA水平与对初次化疗不敏感及预后差有关，LRP表达阳性患的完全缓解率明显低于表达阴性。经直线相关分析发现，LRP表达与MRP表达水平成正相关。结论：LRP可能是一项新的耐药指标，其高表达与急性髓细胞白血病的疗效及预后密切相关，同时检测LRP和MRP的表达可以指导治疗，估计预后。