大肠杆菌抗血清的制备及应用

制备了大肠杆菌抗原和抗血清,并用抗血清检测药品中污染的相应抗原.在家兔耳静脉注射大肠杆菌原,获得相应抗体,用玻片法和试管法检测样品中污染的大肠杆菌.结果大肠杆菌混合抗血清可与药品中污染的大肠杆菌形成特异性凝胶,该混合抗血清可直接检测药品中污染的大肠杆菌.     

药品微生物限度检查中大肠杆菌检查特例

目的对疑似大肠杆菌的菌株进行检测.方法MUG-Indole法和药典法.结果MUG-Indole法简便、快速、准确,优于药典法.结论检查大肠菌群比检查大肠杆菌更能说明药品中污染控制菌的情况.     

空肠弯曲菌表面蛋白特异性多表位抗原的设计、表达与鉴定

构建空肠弯曲菌表面蛋白特异性多表位抗原原核表达载体,并在大肠杆菌中诱导表达,免疫动物后检测其抗血清与空肠弯曲菌菌体的反应性。从空肠弯曲菌的6个表面蛋白中分析到特异性抗原表位,人工合成其串联基因片段,将其插入原核表达载体,获得重组质粒pET-32a(+)-CJMEA-A,经IPTG诱导后表达出25k的目标蛋白,纯化后免疫新西兰大白兔,Western blot和间接ELISA检测重组蛋白抗原性和抗血清反应性。结果表明目标蛋白具有良好的反应原和免疫原性,抗血清能与菌体发生反应。其抗体可用于C.jejuni免疫磁珠和免疫胶体金等检测方法的建立。     

药品微生物限度检查中大肠杆菌检查特例

目的:对疑似大肠杆菌的菌株进行检测。方法:MUG Indole法和药典法。结果:MUG Indole法简便、快速、准确,优于药典法。结论:检查大肠菌群比检查大肠杆菌更能说明药品中污染控制菌的情况。     

口服中成药中检出大肠杆菌的意义和污染途径的探讨

卫生部颁发的药品卫生标准中明确规定“口服药品每克或每毫升不得检出大肠杆菌”,从而有效地控制了药品的卫生质量。本文从细菌学的角度阐述中成药中检出大肠杆菌的意义,并对其污染的途径作一探讨。大肠杆菌在自然界中分布极广,常大量存在于人和动物的肠道中,随粪便排出,土壤水源往往受粪便污染而成为大肠杆菌孽生地。大肠杆菌可分为普通大肠杆菌和致病性大肠杆菌,致病性大肠杆菌能引起食物中毒和婴儿腹泻;普     

甘草酸人工抗原的合成鉴定及免疫原性分析

目的制备中药甘草的活性成分甘草酸(GA)的人工抗原及抗血清,为制备GA的单克隆抗体、并建立快速检测GA的酶联免疫吸附测定(ELISA)提供技术基础。方法将GA与载体蛋白牛血清白蛋白(BSA)偶联起来制得完全抗原后,经基质辅助激光解吸飞行时间质谱鉴定其相对分子质量,用此抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗血清,并通过间接ELISA法和竞争ELISA法检测其抗体效价和特异性。结果合成的人工抗原GA-BSA中GA与BSA的结合比约为7∶1;免疫小鼠得到特异针对GA的多抗血清,GA抗体的效价为1∶8000。结论成功地合成了GA的人工抗原,且该抗原有较好的免疫原性,可应用于建立GA的免疫分析方法。     

口服BS-WC和WC霍乱死菌苗的抗原成分的交叉免疫电泳分析

霍乱毒素B亚单位(BS)是有效的口服免疫原,灭活的全菌体(WC)中的脂多糖(LPS)是主要的保护性菌体抗原。作者采用交叉免疫电泳法(XIE)对BS-WC混合菌苗和WC菌苗中的抗原成分进行了分析。作者用BS-WC和WC菌苗提取物及相应的抗血清作为实验材料,用01群霍乱弧菌菌     

药品在被少量大肠杆菌污染而造成漏检的有关问题的探讨

目的:探讨药品在被少量大肠杆菌污染后,按中国药典现行方法检验是否存在漏检可能,建立了在该种情况下可行的大肠杆菌检查的方法.方法:对8个品种人为污染少量大肠杆菌后,按中国药典检查.结果:药品在被少量大肠杆菌污染后,按药典法大肠杆菌阳性检出率为0～66%,改进法为100%.结论:药品在被少量大肠杆菌污染后,按中国药典现行方法检验存在漏检可能.     

口服药品卫生检验中控制菌标准的探讨

“大肠杆菌”和“大肠菌群”在人体和温血动物粪便中大量存在,不仅数量多,且易检出。药品中检出“大肠杆菌”或“大肠菌群”,表示药品被粪便污染,同时有可能污染其他肠道致病菌和寄生虫卵,因此“大肠杆菌”和“大肠菌群”常作为粪便污染指示菌。《中国药典》2000年版用“大肠杆菌”作为口服药品控制标准,而日本、瑞士等国家用“大肠菌群”作为口服药品控制菌标准。而且为了有效地控制药品卫生质量一些国家已将染菌程度作为评价药品质量标准之一。本文实验结果表明“大肠菌群”在药品中较“大肠杆菌”更为广泛存在,尤其是在原料药中,而且检定方法更为符合更为合理,能真实地反映药品被粪便污染的情况,有效地控制药品卫生质量。     

药品中大肠杆菌检验的几点体会

早在20世纪初,医学界已将大肠杆菌作为粪便污染的指示菌。大肠杆菌与人体是共栖关系,人体供给这类腐生菌以生长条件,这类菌的代谢产物能抑制肠道内其他分解蛋白质的细菌生长,同时也就减少蛋白质分解产物对机体的危害,此菌能合成VB、VK,供人体吸收利用。大肠杆菌大量存在于人和温血动物的肠道中,随粪便排出体外,污染环境,如土壤,水源、饮食、药品等,因而检查药品中有无大肠杆菌及数量多少,则可判断药品是否被粪便污染及污染的程度。     

以大肠菌群作为卫生指示菌可提高口服药品的安全性

目的 比对大肠菌群和大肠杆菌在口服药品中的检出率。方法 在口服药品中，以人工污染大肠杆菌，然后分别按《中国药典》2000年版和目标《食品卫生检验方法》进行大肠杆菌和大肠菌群的检查。结果 大肠菌群的检出率比大肠杆菌高。结论 以大肠菌群作为口服药品粪便污染的指示菌，有利于提高药品的安全性。     

口服药品中大肠菌群的检查

目的：比较口服药品中大肠杆菌与大肠菌群的检出率。方法：按中国药典2000年版微生物限度检查法和最大可能数法(MPN)进行检查。结果：40批样品中均未检出大肠杆菌，其中有6批检出大肠菌群，检出率为15％。结论：检查大肠菌群比大肠杆菌更能反映药品受污染的程度。     

霍乱毒素与大肠杆菌不耐热肠毒素之间的免疫学关系

作者用人大肠杆菌286C_2株的不耐热肠毒素(LT)、霍乱毒素(CT)以及两种肠毒素A、B亚单位的六种相应抗血清检测LT与CT之间的抗原关系。免疫双扩散试验表明:两种肠毒素的A亚单位之间和B亚单位之间与羊抗CT血清形成的沉淀线部分相连,说明抗原性部分相同;而兔抗LT-A和LT-B血清只与同源亚     

MUG快速检定药品中大肠杆菌的方法研究

ＭＵＧ用于药品中大肠杆菌的检定是一种新技术。通过４０６株大肠杆菌的试验结果，９６．５％的菌株β－葡萄糖醛酸苷酶阳性。以２０种药品人工污染大肠杆菌，用ＭＵＧ法与部颁法比较，结果表明：本法与部颁法的敏感性相同，在增菌后２４ｈ内能检出大肠杆菌，未见假阳性，方法简便，省时省力，容易观察判断结果。     

抗恩诺沙星抗血清的制备及其ELISA检测

目的:建立快速、灵敏的恩诺沙星残留酶联免疫检测方法(ELISA)。方法:采用混合酸酐法,将恩诺沙星与牛血清白蛋白和卵清蛋白分别合成免疫抗原(Enrofloxac in-BSA)和包被抗原(Enrofloxac in-OVA)。通过背部多点免疫法免疫日本大白耳兔,制备抗恩诺沙星的特异性抗血清。结果:利用所获得的特异性抗血清,建立的恩诺沙星ELISA检测方法,其线性范围为5 ng.mL-1～2.5μg.mL-1(R2=0.9935),且与HPLC方法具有良好的相关性(R2=0.9892,n=9)。牛奶、大鼠血浆和尿液中的加样回收率分别为98.4%～105.8%,91.7%～101.2%,97.0%～110.3%。运用所建立的方法,对大鼠体内血浆及药品中恩诺沙星的含量进行了测定。结论:本研究所建立的检测恩诺沙星的ELISA方法具有样品前处理简单,灵敏度高及分析速度快等优点,适合用于恩诺沙星的体内分析及动物性食品中恩诺沙星的残留分析。     

测定司帕沙星间接竞争酶联免疫检测方法建立及应用

目的 建立快速、灵敏的司帕沙星残留间接竞争酶联免疫检测方法。方法 采用混合酸酐法,将司帕沙星与牛血清白蛋白和卵清蛋白分别合成免疫抗原(sparfloxacin-BSA)和包被抗原(sparfloxacin-OVA)。通过背部多点免疫法免疫大白耳兔,制备了抗司帕沙星的特异性抗血清。结果 利用所获得的特异性抗血清,建立了测定司帕沙星的间接竞争酶联免疫检测方法(ciELISA),其线性范围为5ng/mL～2μg/mL(R2=0.9942),且与HPLC方法具有良好的相关性(R2=0.9918)。样品牛奶、大鼠血浆和尿液中的加样回收率分别为93.7～110.3％、105.6～113.3％和90.2～98.1％％。应用所建立的方法,对司帕沙星大鼠体内药物分析及药品中的含量进行了测定。结论 本研究所建立的检测司帕沙星残留的酶联免疫检测方法具有样品处理简单,灵敏度高及分析速度快等优点,非常适合于生物样品分析及药品残留的筛选工作。     

药品中大肠菌群与大肠杆菌检出比较

口服药品控制菌检查是控制药品卫生质量的重要指标.典型大肠杆菌检查是了解药品被粪便近期污染的程度,大肠菌群的检查是了解药品被粪便近期和远期污染[1]的程度.为了给制订切实可行的有效控制菌标准提供依据,我们进行口服药品中大肠菌群与大肠杆菌的检出率比较,现将结果介绍如下.     

交叉免疫荧光试验在流行性出血热病毒抗原分析中应用的研究

我们选用来源于黑线姬鼠和褐家鼠的共12株EHF病毒,分别制备VeroE—6细胞抗原片和相应的抗血清,进行了交叉免疫荧光试验,检测的结果表明,不宜用上述方法来研究EHF病毒株间的抗原差异。现将结果报告如下。     

部分药品按品种采用大肠菌群控制的建议

我国药品微生物限度标准规定，药品中不得检出大肠杆菌。药品中典型大肠杆菌的检出，一般认为是药品受粪便的近期污染，有十分重要的卫生学意义。因此，采用大肠菌群作为药品受粪便污染的指示菌，其安全性比采用大肠杆菌更高。我国食品卫生国家标准中1985年早已采用了大肠菌群作为卫生指标。药品是给患者防病治病的特殊商品其质量更应高于食品卫生要求。国外先进国家已将部分产品检查肠杆菌科及某些革兰氏阴性杆菌作为控制标准。     

降纤酶定性及半定量检测方法Ⅰ.点-免疫结合测定法

以降纤酶为抗原，降纤酶特异抗血清为抗体，应用碱性磷酸酶免疫斑点法，对降纤酶制剂进行特异性定性及半定量检测，最低检出量１０ｎｇ。与凝血酶无交叉反应，也不受赋形剂干扰。且可直接用于蛇毒液中降纤酶含量测定。