针灸及其血清对荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖的影响

目的:观察针灸治疗对H_(22)荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞(CD4~+CD25~+regulatory T cells)体外增殖的影响和针灸血清刺激下的CD4~+CD25~+Treg细胞的体外增殖变化,探讨针灸及其血清对荷瘤小鼠免疫调节细胞的干预作用。方法:48只小鼠随机分为电针治疗组、艾灸治疗组、肿瘤对照组、正常对照组。采用H_(22)肿瘤细胞移植性实体瘤模型,电针和艾灸"大椎"治疗后,磁珠分离CD4~+CD25~+Treg细胞,氚标记胸腺嘧啶核苷掺入法观察不同组小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖能力和针灸血清对CD4~+CD25~+ Treg细胞体外增殖的影响。结果:肿瘤对照组CD4~+CD25~+Treg细胞增殖水平比正常对照组明显增高(P<0.05);电针治疗组和艾灸治疗组CD4~+CD25~+Treg细胞增殖水平与肿瘤对照组比较均明显降低(P<0.01)。电针治疗组和艾灸治疗组1:1、1:8稀释度血清刺激正常小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖,较正常对照、肿瘤对照组血清显著增高(P<0.05),各组1:16、1:32稀释度血清对Treg细胞作用的差别无统计学意义(P>0.05)。结论:针灸治疗能下调荷瘤小鼠CD4~+CD25~+Treg细胞体外增殖能力。不同浓度针灸血清体外刺激CD4~+CD25~+Treg细胞增殖表现出不一致的效应。     

苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠CD4~+ CD25~+调节性T细胞及相关调控分子的干预作用

目的:观察苏木、苏木+黄芪对荷瘤小鼠脾CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)表达及相关调控分子的干预作用。方法:复制C57BL/6小鼠Lewis肺癌动物模型,动态观察苏木、苏木+黄芪抑瘤率、肺转移抑制率,流式细胞术检测小鼠脾CD4+CD25+Treg表达,免疫磁珠分选小鼠脾CD4+CD25+细胞,RT-PCR检测小鼠脾CD4+CD25+细胞和瘤组织Foxp3、CTLA-4mRNA表达。结果:苏木组6d、苏木+黄芪组10d瘤重低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组20d肺转移抑制率为77.75%;15d苏木+黄芪组小鼠脾CD4+CD25+细胞表达低于荷瘤对照组(P0.05);苏木+黄芪组荷瘤小鼠瘤组织CTLA-4、Foxp3mRNA表达及脾CD4+CD25+分选后细胞Foxp3 mRNA表达低于荷瘤对照组(P0.05)。结论:益气活血中药组方苏木+黄芪可调节荷瘤小鼠脾Treg及相关调控分子表达,并且在淋巴组织和肿瘤微环境中都表现出作用。     

散结抗瘤方对S180荷瘤小鼠血管内皮生长因子和缺氧诱导因子-1α表达的影响

目的 观察散结抗瘤方对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用及对血管内皮生长因子(VEGF)、缺氧诱导因子-1α(HIF- 1α)表达的影响.方法 建立小鼠移植S180肉瘤模型.随机分为荷瘤对照组、环磷酰胺(CTX)组、散结抗瘤方组、散结抗瘤方加CTX组(联合组).连续给药15 d后处死小鼠,计算其抑瘤率,用免疫组化法检测移植瘤VEGF 和HIF- 1α表达.结果 荷瘤对照组的肿瘤生长迅速,散结抗瘤方组肿瘤生长受到抑制(P<0.05),联用CTX时抑瘤效果更显著(P<0.01).与荷瘤对照组比较,给药各组的VEGF、HIF- 1α蛋白的表达均明显降低(P<0.05).结论 散结抗瘤方可以抑制肿瘤生长,且与CTX有协同作用,该方可能通过对HIF- 1α的抑制,达到对VEGF 的表达调控,从而抑制肿瘤生长.     

紫癜清颗粒对HSP患者CD4~+ CD25~+ Tregs细胞的影响

目的探讨紫癜清颗粒对过敏性紫癜(HSP)患者的临床疗效及外周血CD4+CD25+调节性T细胞、其转录因子FOXP3表达的影响。方法纳入60例确诊为HSP患者,随机分为两组,治疗组予以紫癜清颗粒(A组),对照组予以激素联合抗组胺药物(B组);两周为1个疗程,共观察4周,随访半年,采用流式细胞术检测外周血CD4+CD25+Treg、转录因子FOXP3的表达,同期选10例健康人作为正常对照。结果治疗组有效率与对照组相当(P0.05),但复发率较对照组减低(P0.01);A、B组治疗前外周血CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+表达比例较健康对照组明显降低(P0.01);紫癜清颗粒治疗后患者外周血CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+比例增高,与对照组治疗后患者外周血CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+的表达相比,无统计学意义(P0.05),但表达比例较对照组高。结论 1治疗组总有效率为93.33%,对照组总有效率为96.66%,说明中药汤剂紫癜清颗粒与西医传统治疗方案激素联合抗组胺药物疗效相当,但其复发率及临床副作用较西药治疗都明显减少;2A、B组治疗前CD4+CD25+Treg的表达低于正常,说明调节性T细胞可能参与了HSP的发病,而治疗后CD4+CD25+Treg及CD4+CD25+FOXP3+的表达增高,可能是紫癜清颗粒治疗HSP有效的原因。     

三叶青地上部分多糖对乳腺癌小鼠的抗肿瘤作用

目的探讨三叶青地上部分多糖对乳腺癌小鼠的抗肿瘤作用。方法小鼠乳房接种4T1细胞以建立乳腺癌荷瘤模型后,随机分为空白组、模型组、环磷酰胺组(40 mg/kg)及多糖低、中、高剂量(50、150、250 mg/kg)组,每组10只。给药28 d后,测定瘤质量及瘤体积,计算抑瘤率及脏器指数,观察肺组织转移灶,流式细胞术检测T淋巴细胞亚群比例。结果与模型组比较,多糖组瘤质量、瘤体积、肝脏指数、肺转移灶数显著降低(P0.05,P0.01),但脾脏、胸腺指数无明显变化(P0.05);中、高剂量组CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞比例显著降低(P0.01),胸腺CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+比例及脾脏CD3~+CD4~+、CD4~+/CD8~+比例显著升高(P0.05,P0.01)。结论三叶青地上部分多糖能有效抑制乳腺癌小鼠肿瘤生长及远端肺转移,其机制可能与增加机体CD4~+、CD8~+T细胞比例,抑制Treg细胞数量和功能,提高机体免疫应答有关。     

蝎毒多肽提取物促进环磷酰胺抑制Lewis肺癌的作用机制研究

目的探讨蝎毒多肽提取物增强环磷酰胺抗肿瘤的机制。方法建立小鼠Lewis肺癌皮下荷瘤模型,随机分为荷瘤对照组(模型组)、环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)组、蝎毒多肽提取物(polypeptideextract from scorpion venom,PESV)组和联合组(CTX+PESV组),每组10只。记录肿瘤生长曲线,并采用逆转录PCR法和免疫组织化学法检测肿瘤微环境中免疫抑制因子血管内皮生长因子-A(VEGF-A)和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达变化,采用免疫荧光化学法检测肿瘤组织中树突细胞(dendritic cells,DCs)表型CD80、CD86的表达变化。结果连续治疗21天后,联合组Lewis肺癌移植瘤的生长明显抑制(P<0.05);与模型组相比较,PESV组中CD80、CD86的表达有所增强,而CTX组中CD80、CD86的表达有所下降,联合组与CTX组相比强度和表达量均有所增加;与模型组比较PESV组和CTX组TGF-β1和VEGF-A mRNA表达量均降低(均P<0.05);与PESV组和CTX组比较,联合组TGF-β1和VEGF-A的mRNA表达量均降低(P<0.05)。结论 PESV可抑制Lewis肺癌中VEGF-A和TGF-β1的表达,促进DC的成熟,恢复其抗原摄取提呈功能,逆转CTX对机体的免疫损伤,从而起到诱导肿瘤细胞凋亡的作用。     

益气复生方联合化疗对胃癌荷瘤小鼠肿瘤生长及肿瘤浸润淋巴细胞的影响

目的观察益气复生方(YQFS)联合化疗对胃癌荷瘤小鼠体内肿瘤微环境中肿瘤浸润淋巴细胞的影响,探讨YQFS联合化疗对胃癌荷瘤小鼠肿瘤生长的作用机制。方法雄性昆明小鼠腋下接种小鼠MFC胃癌细胞,建立小鼠荷瘤模型,分为空白对照组、模型组、5-FU+YQFS低剂量组、5-FU+YQFS高剂量组和5-FU组5组。空白对照组不作处理,模型组给予0.9%NaCl溶液灌胃,5-FU+YQFS低剂量组和5-FU+YQFS高剂量组给予5-FU腹腔注射7天和不同剂量益气复生方灌胃21天,5-FU组给予5-FU腹腔注射7天,21天后取材,对MFC胃癌荷瘤小鼠肿瘤组织和脾脏称重,计算抑瘤率和脾脏指数;采用流式细胞技术检测肿瘤浸润淋巴细胞CD4~+、CD8~+细胞亚群水平和比例;采用ELISA法检测外周血中IFN-γ、TNF-α、IL-10和IL-6的表达变化;采用组织切片HE染色观察小鼠胃黏膜的病理改变。结果 YQFS联合化疗对胃癌荷瘤小鼠的抑瘤率为54.46%,与单用化疗相比,差异明显;YQFS联合化疗能够改变胃黏膜形态,降低脾脏指数。并且随着YQFS浓度的增加而降低,具有剂量依赖性(P0.05)。与模型组相比,YQFS联合化疗能够增加肿瘤浸润淋巴细胞CD4~+/CD8~+比率;增加胃癌荷瘤小鼠外周血中的IFN-γ的表达,降低IL-10、IL-6、TNF-α的表达,并且与YQFS的浓度呈剂量依赖性变化。结论 YQFS的抗肿瘤作用可能与增加荷瘤小鼠肿瘤浸润淋巴细胞CD4~+/CD8~+比率,降低小鼠脾脏指数,使外周血中的IFN-γ上调而IL-10、IL-6、TNF-α下调,恢复肿瘤免疫功能稳态,提高免疫力有关。     

四君子汤合当归补血汤提高化疗荷瘤小鼠免疫功能的实验研究

目的:观察四君子汤合当归补血汤对环磷酰胺化疗荷瘤小鼠的免疫保护作用。方法:建立小鼠肉瘤S180移植性肿瘤模型,24 h后随机分为5组:模型组、环磷酰胺(CTX)组及四君子汤合当归补血汤低、中、高剂量~+CTX组。各组接种肿瘤细胞24 h后开始用药,1次/d,连续10 d。分别检测溶血素、碳粒廓清速率、体温及外周血c AMP/c GMP、血小板和T细胞亚群,处死小鼠,检测腹腔巨噬细胞吞噬功能和骨髓有核细胞数。结果:与模型组比较,CTX组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、外周血CD3~+、CD4~+T细胞比例、CD4~+/CD8~+比值、外周血c AMP/c GMP、血小板计数和骨髓有核细胞显著降低(P0.05),CD8~+T细胞比例升高(P0.05)。与CTX组比较,四君子汤合当归补血汤各组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能、外周血CD3~+、CD4~+T细胞比例、CD4~+/CD8~+比值、外周血c AMP/c GMP、血小板计数和骨髓有核细胞均有不同程度提高(P0.05),CD8~+T细胞比例均有不同程度降低(P0.05)。结论:四君子汤合当归补血汤能拮抗化疗引起的机体免疫功能下降,增强机体免疫功能。     

西黄滴丸对S180荷瘤小鼠CD34及VEGF影响及形态学观察的实验研究

目的:研究西黄滴丸对S180肉瘤小鼠的抑瘤作用,并探讨西黄滴丸对荷瘤小鼠肉瘤组织中血管生成标记物(CD34)和相关因子血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:采用S180肉瘤小鼠模型,分为模型组,西黄丸组(2.2 g·kg-1·d-1),西黄滴丸低、中、高剂量组(1.5,3,6 g·kg-1·d-1)以及环磷酰胺组(CTX,0.02 g·kg-1),西黄丸组,西黄滴丸低、中、高剂量组ig给药,环磷酰胺组ip给药,每2 d 1次,连续10 d给药;观察西黄滴丸对S180荷瘤小鼠的抑瘤作用,并采用HE染色观察肿瘤细胞的形态变化,免疫组织化学的方法观察西黄滴丸对荷瘤小鼠肿瘤CD34及VEGF蛋白表达的影响。结果:与模型组比较,滴丸高剂量组荷瘤小鼠体重有明显升高;西黄丸组,西黄滴丸低、中、高剂量组及CTX组抑瘤率分别是26.28%,21.47%,26.92%,30.76%,35.85%;CD34的蛋白表达CTX组较模型组有明显降低(P0.01),西黄滴丸高、中、低剂量组明显降低CD34蛋白表达(P0.05),滴丸高剂量组较西黄丸组有较明显差异(P0.05);滴丸中、高剂量组及CTX组与模型组比较VEGF的蛋白表达有明显降低(P0.05),滴丸中剂量组及CTX组较西黄丸组蛋白表达有较明显差异。结论:西黄滴丸对S180荷瘤小鼠具有抑瘤的作用,其机制可能与下调肿瘤组织CD34及VEGF蛋白表达水平有关。     

芪升合剂对S180荷瘤小鼠化疗的减毒增效研究

目的观察芪升合剂对S180荷瘤小鼠化疗所致骨髓抑制的干预作用。方法将60只小鼠随机分成正常对照组、荷瘤对照组、环磷酰胺（CTX）组及芪升合剂高、中、低剂量。除正常对照组外,其余各组将S180瘤细胞接种于小鼠右前肢腋窝皮下。各给药组于接种后第1日分别灌胃相应药物,连续给药10 d;接种第4日各给药组分别腹腔注射CTX,连续3 d;正常对照组和荷瘤对照组予生理盐水灌胃。观察各组外周血常规、瘤质量、抑瘤率。结果芪升合剂可明显提高S180荷瘤小鼠化疗后白细胞数量,与CTX组比较差异有统计学意义（P〈0.01）;CTX组、芪升合剂各剂量组血小板计数明显降低,与荷瘤对照组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。荷瘤对照组肿瘤生长迅速,CTX组、芪升合剂各剂量组瘤质量明显小于荷瘤对照组（P〈0.01）;与CTX组瘤质量相比,中剂量组差异有统计学意义（P〈0.01）。CTX对荷瘤小鼠肿瘤生长有明显抑制作用,其抑瘤率达49.69%,联合芪升合剂后,高、中、低剂量抑瘤率可达60.55%、72.11%、64.48%。结论芪升合剂对S180荷瘤小鼠的化疗具有增效减毒作用。     

芪白平肺胶囊联合孟鲁司特对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者CD4~+、CD25~+调节性T细胞表达的影响

目的观察芪白平肺胶囊联合孟鲁司特对慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者CD4~+CD25~+Foxp3调节性T细胞表达的影响。方法采用随机数字表法将患者94例随机分为两组,对照组在常规治疗的基础上给予孟鲁司特钠治疗,观察组在对照组的基础上给予芪白平肺胶囊治疗。观察两组治疗前后第1秒用力呼气量(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1占FVC的百分比(FEV1/FVC%)、呼吸困难评分(MMRC)、动脉血氧分压(Pa O2)、二氧化碳分压(Pa CO2)水平、外周血Th17、CD4~+CD25~+Treg和CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg水平。结果治疗后观察组FEV1、FEV1/FVC、Pa O2、CD4~+CD25~+Treg、CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg水平均高于对照组(P0.05),MMRC评分、Pa CO2、Th17、Th17/CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg水平均低于对照组(P0.05)。结论芪白平肺胶囊联合孟鲁司特可改善AECOPD患者肺功能,提高血氧饱和度,下调Th17表达和上调CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg表达可能是其重要作用机制。     

流式细胞仪检测益肺清化膏对荷瘤小鼠瘤组织E-cad CD44v6表达水平的影响

目的:通过流式细胞仪检测使用益肺清化膏后荷瘤小鼠体内移植的Lewis肿瘤细胞表达E-cad、CD44V6的情况.方法:C57BL/6小鼠45只,随机分为中药组、CTX组对照及空白对照组.每只小鼠均右侧腋窝皮下接种肿瘤匀浆液0.2mL/鼠.第2天中药组开始灌胃给药,连续15天;CTX对照组CTX腹腔注射给药,分别于第3、7、11、15天给药1次;空白对照组予洁净自来水灌胃,每天1次,连用15天.第21天颈椎脱臼处死动物,取瘤组织处理后上机检测.结果:中药治疗后瘤组织内的E-cad水平呈高表达状态,阳性表达率达14.77%,优于CTX组内6.16%和对照组2.75%的表达水平.其中中药组与对照组的表达水平比较,有非常显著的差异(P＜0.01);CTX组与中药组比较差异不明显.中药治疗后,瘤组织内的CD44V6水平呈低表达状态,阳性表达率为3.73%,弱于CTX组10.8%和对照组13.48%的表达水平.其中中药组与对照组的表达水平比较有较为显著的差异(P＜0.05);CTX组与中药组比较差异不明显.结论:研究证实,益肺清化膏可有效地提高E-cad的表达,降低CD44V6的表达水平.CTX对照治疗的结果对E-cad、CD44V6的作用不肯定.     

健脾解毒中药对Lewis肺癌小鼠脾脏CD4~+CD25~+Treg细胞免疫调节的影响

目的:研究健脾解毒中药方对Lewis肺癌小鼠脾脏淋巴细胞增殖及CD4+CD25+Treg细胞的影响,探讨健脾解毒中药治疗肺癌的机理。方法:将18只C57BL/6纯系小鼠右腋皮下接种Lewis肺癌细胞0.2ml,随机分为中药组和模型组,并设6只正常鼠对照观察。造模后第5天开始给药,中药组灌服健脾解毒方0.4ml/只,模型组予生理盐水。第14天处死小鼠,CCK-8法检测脾淋巴细胞增殖,流式细胞术检测小鼠脾脏CD4+CD25+Treg细胞含量。结果:荷瘤中药组和荷瘤模型组与正常组比较,脾淋巴细胞增殖功能均有降低,三组差别有统计学意义(P<0.05);荷瘤中药组和荷瘤模型组脾细胞中CD4+CD25+Treg细胞占CD4+T细胞的比例明显高于正常组,三组差别有统计学意义(P<0.05)。结论:实验证实,Lewis肺癌荷瘤环境下,脾细胞的CD4+CD25+Treg细胞的数量增多,脾淋巴细胞增殖低下。健脾解毒中药可增强荷瘤鼠细胞免疫功能。     

白花蛇舌草诱导HSP70表达对H22肝癌细胞移植瘤T淋巴细胞的影响

目的观察白花蛇舌草对H22肝癌细胞移植瘤鼠瘤体T淋巴细胞亚群的影响。方法将中药处理后的H22肝癌细胞,采用HSP70单抗封闭技术分为白花蛇舌草和党参未封闭、封闭及RPMI-1640空白对照共5组;观察各组CD4+、CD8+T淋巴细胞表达情况。结果与空白对照组比较,白花蛇舌草未封闭组CD8+、封闭组CD4+表达明显上调;党参封闭组CD4+表达也明显上调;与白花蛇舌草封闭组比较,白花蛇舌草未封闭组CD8+T淋巴细胞表达明显上调。结论白花蛇舌草诱导恶性肿瘤瘤体HSP70的高表达,增强机体对肿瘤的免疫作用,其机理可能与提高瘤体CD4+、CD8+CTL表达有关。     

经腹腔注射地塞米松和与环磷酰胺建立昆明种小鼠胃癌模型的比较

目的观察经腹腔注射地塞米松(DEX)与环磷酰胺(CTX)两种不同药物对小鼠免疫抑制的作用及成瘤率的比较,为小鼠胃癌模型的建立提供实验依据。方法将昆明小鼠随机分为空白对照组、地塞米松组及环磷酰胺组,每组小鼠各20只,雌雄各半,分别经腹腔注射给予0.9%生理盐水、DEX、CTX连续7d。后将SGC-7901人胃癌细胞悬液经腹腔注射在CTX组及DEX组小鼠体内,观察10d,结束实验。流式细胞仪检测其CD3+、CD4+、CD8+数值变化,ELISA检测IL-4,CCK-8法检测脾脏细胞活性。结果 1)与空白对照组相比,免疫抑制组(CTX组和DEX组)血清IL-4含量、CD4+/CD8+T淋巴细胞比值及脾细胞转化吸光度差值明显降低(P0.05);CTX组CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+T淋巴细胞比值、脾细胞转化吸光度、血清IL-4含量差值比DEX组下降明显,差异有统计学意义(P0.05)。2)CTX组(73.68%)较DEX组(40%)小鼠成瘤率高,差异有统计学意义(x2=22.718,P0.01)。结论通过接种肿瘤细胞,在昆明种SPF级小鼠上成功构建了SGC-7901人胃癌细胞肿瘤模型,对成瘤小鼠相关细胞因子进行检测分析,由环磷酰胺预处理后引起的小鼠免疫抑制成瘤率相比地塞米松导致小鼠免疫抑制成瘤率较高(P0.05),说明环磷酰胺在免疫抑制后小鼠经腹腔注射成瘤率方面较地塞米松有一定优势。     

针刺联合紫杉醇对小鼠肺鳞状癌细胞凋亡相关因子P糖蛋白表达的影响

目的:观察针刺肺俞穴对新型抗癌药物紫杉醇在肺鳞状细胞癌小鼠体内分布趋势的影响,为化疗药物靶向给药的研究提供新思路,进一步验证针药并举协同增效的机理。方法:选用肺鳞状细胞癌小鼠36只,采用随机的方式,分为4组,即模型组、针刺肺俞组、紫杉醇药物组、针药结合组(针刺肺俞+紫杉醇药物组),每组6只。针刺治疗针、药、针药结合组,施以电针疗法,每天1次,连续5 d。紫杉醇以腹腔注射给药,最后1次针刺后立即给药。给药后1、2、8、12、24 h每一时间点取6只小鼠肺、肝脏组织。用ELISA法进行各脏器P糖蛋白表达分析。结果:针刺、紫杉醇、针刺联合紫杉醇均能抑制肿瘤生长,具有良好的抑瘤作用。针剌联合紫杉醇抑瘤效果更加显著。结论:针刺联合紫杉醇治疗有更显著的抗肿瘤作用,并能改善实验动物的生存状态,针药结合对肺癌小鼠的治疗效果明显优于单一疗法。     

清肝化瘀颗粒对H_(22)荷瘤小鼠的抗肿瘤作用研究

目的研究清肝化瘀颗粒对H_(22)荷瘤小鼠抗肿瘤作用及免疫功能的影响。方法建立H_(22)荷瘤小鼠模型,将108只荷瘤小鼠随机分为模型组、氟尿嘧啶组、平消胶囊组、清肝化瘀颗粒各剂量组(0.45,0.90,1.35,1.80,2.25,2.70g/kg),每组12只,予相应药物观察10天,第11天荷瘤小鼠眼球取血,处死小鼠,称取小鼠体重、瘤重、肝脾指数,采用流式细胞术检测小鼠外周血中CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+、CD4~+CD25~+Tregs细胞比例。结果氟尿嘧啶组、平消胶囊组、清肝化瘀颗粒各剂量0.45,0.90,1.35,1.80,2.25,2.70g/kg的抑瘤率分别为61.7%、22.0%、16.3%、35.2%、37.6%、42.3%、28.1%、28.0%,清肝化瘀颗粒最佳剂量为1.80g/kg。氟尿嘧啶组小鼠体重、肝脾指数显著低于模型组,平消胶囊组、清肝化瘀颗粒各剂量组小鼠体重、肝脾指数与模型组相比无统计学差异。清肝化瘀颗粒各剂量组CD3~+、CD3~+CD4~+、CD3~+CD8~+高于模型组,但差异无统计学意义。清肝化瘀颗粒1.80g/kg、2.70g/kg组CD4~+CD25~+Treg显著低于模型组,平消胶囊组、清肝化瘀颗粒0.90g/kg剂量组与模型组无显著差异。模型组CD8~+与CD4~+CD25~+Treg做Pearson相关性分析,r=-0.726,P0.05,,所有造模组做Pearson相关性分析,相关性r=-0.481,P0.001。结论清肝化瘀颗粒对H_(22)荷瘤小鼠有明显抗肿瘤作用,可能通过其抑制CD4~+CD25~+Tregs细胞起作用。     

补中益气汤联合顺铂对小鼠移植性肺癌增效减毒的协同作用研究

目的:探讨补中益气汤联合顺铂对小鼠移植性肺癌增效减毒的协同作用。方法:建立Lewis肺癌细胞荷瘤小鼠模型,随机分为模型组、顺铂组、补中益气汤组、联合给药组,每组10只。各组给药22 d后解剖小鼠,称重瘤块质量计算抑瘤率,并在显微镜下计数肺转移瘤灶的个数;ELISA检测小鼠血清中IL-2、IL-10、IFN-γ、TNF-α的水平;流式细胞术检测小鼠外周血CD4+CD2+5Foxp3+调节性T细胞(T regulatory cell,Treg)的表达比例; WB检测小鼠移植性肺癌细胞凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53、Fas、Fasl和耐药相关蛋白MRP1、ERCC1的表达情况。结果:与模型组相比,补中益气汤以及联合顺铂均能有效抑制肿瘤的生长和肺转移灶的数量(P 0. 05)。补中益气汤、顺铂以及联合给药均能显著调节IL-2、IL-10、IFN-γ、TNF-α的表达水平,且联合组的IL-2、IL-10、TNF-α水平差异极显著(P 0. 01)。流式分析结果显示各组给药后均能显著降低小鼠外周血CD4+CD2+5Foxp3+Treg细胞比例,且联合给药组的降低效果最明显,与顺铂组相比差异显著(P 0. 05)。WB结果显示补中益气汤、顺铂以及联合给药均能促进促凋亡相关蛋白Bax、p53、Fas、Fasl的表达,降低抑凋亡相关蛋白Bcl2的蛋白表达(P 0. 05)。此外,与模型组相比,顺铂组的多药耐药相关蛋白MRP1、ERCC1的表达显著升高(P 0. 05),而补中益气汤联合顺铂给药后能显著降低MRP1、ERCC1的蛋白表达(P 0. 05)。结论:补中益气汤联合顺铂对Lewis肺癌细胞荷瘤小鼠抗肿瘤具有增效减毒的作用,其机制可能与调节细胞因子IL-2、IL-10、IFN-γ、TNF-α表达和Treg细胞比例,以及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、p53、Fas、Fasl和耐药相关蛋白MRP1、ERCC1的表达有关。     

麦粒灸对荷瘤小鼠肿瘤组织中Bax和Bcl-2表达的影响

目的：观察麦粒灸对荷瘤小鼠肿瘤组织中B细胞淋巴相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)表达水平的影响,从肿瘤细胞凋亡角度探讨麦粒灸治疗肿瘤的作用机制。方法：将40只C57BL/6小鼠皮下接种Hepa1-6肿瘤细胞,建立荷瘤小鼠模型,随机分为对照组、麦粒灸组、环磷酰胺(CTX)组、麦粒灸+CTX组,每组10只。对照组给予腹腔注射生理盐水0.2ml/d,1次/d,连续3d;CTX组、麦粒灸＋CTX组按荷瘤小鼠体质量给予腹腔注射CTX 30mg/kg,1次/d,连续3d;麦粒灸组、麦粒灸＋CTX组给予麦粒灸“足三里”(双侧)、“三阴交”(双侧)、“大椎”,每穴5壮,1次/d,连续10d。每日观察并记录小鼠干预前后的一般情况;检测瘤体质量及抑瘤率;HE染色法观察肿瘤形态变化;实时荧光定量PCR法和Western blot法检测肿瘤组织中Bax、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平。结果：经治疗后,麦粒灸组、CTX组、麦粒灸＋CTX组抑瘤率分别为23.9%、45.9%、67.1%。与对照组比较,麦粒灸组、CTX组、麦粒灸+CTX组肿瘤组织Bax mRNA及蛋白表达水平均升高(P＜0.01,P＜0.05)、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平均降低(P＜0.01,P＜0.05),麦粒灸组肿瘤坏死区明显增多;与CTX组比较,麦粒灸＋CTX组肿瘤组织Bax mRNA及蛋白表达水平显著升高(均为P＜0.05)、Bcl-2 mRNA及蛋白表达水平显著降低(均为P＜0.05),肿瘤细胞核分裂明显减少。结论：麦粒灸能够明显减轻Heap1-6荷瘤小鼠的瘤体质量,对肿瘤的生长有抑制作用;与CTX合用,抑瘤作用更有效,其机制可能与调节Bax、Bcl-2的表达水平有关。     

益肺逐积方联合环磷酰胺对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织CD151、整合素α3及β1 mRNA表达水平的影响

目的研究益肺逐积方联合环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对Lewis肺癌小鼠肿瘤组织CD151、整合素(integrin,ITG)α_3及ITGβ_1mRNA表达水平的影响。方法 C57BL/6小鼠右前肢腋窝皮下接种Lewis细胞建立肺癌小鼠模型,随机分为模型组、CTX组、益肺逐积方组、联合用药组,每组10只,造模次日益肺逐积方组和模型组分别给予益肺逐积方(14.95g/kg)和等体积生理盐水灌胃,1次/d;CTX组在造模后72h和10d腹腔注射CTX(40mg/kg);联合用药组在CTX组基础上灌胃益肺逐积方。给药期间观察小鼠状态及成瘤情况,给药14d后测量体重、瘤体积计算抑瘤率;常规石蜡切片检测肿瘤组织病理变化;荧光定量PCR检测肿瘤组织CD151、ITGα_3及ITGβ_1mRNA表达。结果与模型组比较,益肺逐积方组与联合用药组肿瘤体积减小(P0.05);抑瘤率由高到低依次为:联合用药组、益肺逐积方组、CTX组。病理学检测结果显示肿瘤组织呈实片状排列并向骨骼肌浸润,肿瘤细胞沿细支气管壁及肺泡壁弥漫性生长。与模型组比较,益肺逐积方组、CTX组及联合用药组CD151mRNA表达降低(P0.01,P0.05),联合用药组ITGα_3mRNA表达量降低(P0.05)。与CTX组比较,益肺逐积方组ITGβ_1mRNA的表达量降低(P0.05)。结论益肺逐积方与CTX联合用药可更有效抑制Lewis肺癌小鼠肿瘤生长,益肺逐积方可通过下调肿瘤组织CD151和ITGα_3及ITGβ_1mRNA表达水平,达到治疗肺癌的功效。