缩泉丸中益智仁盐炙前后对肾阳虚大鼠肾脏功能的改善作用

目的:通过分析缩泉丸中益智仁盐炙前后对肾阳虚多尿模型大鼠肾脏功能的改善作用及肾脏水通道蛋白2(AQP-2)表达的影响,探讨"盐炙入肾-肾主水"的作用机制。方法:采用腺嘌呤致肾阳虚多尿大鼠模型,比较缩泉丸中益智仁盐炙前后对肾阳虚多尿模型大鼠脏器系数、尿量,血中肌酐、尿素氮和β2-微球蛋白,肾脏AQP-2 mRNA和蛋白表达差异的影响。结果:与模型组相比,给药组能降低大鼠尿量,对各脏器指数的变化有一定抑制作用,降低血清肌酐、尿素氮和β2-微球蛋白含量的异常升高;提高AQP-2 mRNA和蛋白的表达,且与生品组相比,盐炙品组降低尿素氮,β2-微球蛋白含量和提高AQP-2mRNA和蛋白的表达作用显著增强。结论:益智仁盐炙后纳入缩泉丸中能较好地改善模型大鼠的肾脏功能和AQP-2的表达,盐炙后作用明显增强,证实了缩泉丸中益智仁盐炙增强疗效的科学性。     

益智仁盐炙前后对肾阳虚多尿大鼠肾脏改善作用研究

目的比较益智仁盐炙前后对肾阳虚多尿模型大鼠脏器指数和肾脏病理变化的影响,初步探讨益智仁温肾缩尿机制。方法采用腺嘌呤致大鼠肾阳虚多尿模型,比较益智仁盐炙前后石油醚部位对大鼠尿量,肾上腺、肾脏、脾脏、胸腺指数及肾脏病理变化的影响。结果与模型组相比,益智仁生品和盐炙品组有显著缩尿作用(P<0.05);脏器指数除肾上腺外,各给药组肾、脾、胸腺指数与模型组比较均显著改善作用(P<0.05);模型组大鼠肾脏肾小球萎缩、代偿性肥大,肾小管有萎缩变小或扩张等病理改变,给药各组与模型组相比均有不同程度的改善。结论益智仁盐炙前后对腺嘌呤所致肾阳虚多尿模型大鼠肾脏指数和病理变化均具较好改善作用,但盐炙后作用明显增强。     

益智仁盐炙对水负荷多尿模型大鼠缩尿作用的研究

目的:通过比较盐炙益智仁对水负荷多尿模型大鼠的缩尿作用,进一步验证益智仁盐炙人肾传统炮制理论的正确性.方法:SD大鼠按尿量、体重均匀分成正常组、模型组、缩泉丸组、益智仁石油醚部位生品(低、中、高剂量)组、盐炙品(低、中、高剂量)9组,缩泉丸组剂量为1.5 g·kg-1,益智仁石油醚部位生品和盐炙品低、中、高剂量分别为含生药4.5,9,18g·kg-1.各组按10 mL·kg-1体积灌胃给药1周后,用1％盐水造成大鼠水负荷多尿模型.采用代谢笼法测定大鼠尿量、首次排尿时间,并计算6h排泄率;放免法测定大鼠血清精氨酸加压素(AVP)含量.结果:与模型组相比,益智仁生、炙品(除生品低剂量组外)能显著降低0～1h段大鼠尿量(P＜0.01),延长大鼠首次排尿时间(生品高剂量组P＜0.05,盐炙品低、中、高剂量组P ＜0.01),显著降低大鼠6h排泄率(生品高剂量组P＜0.05,盐炙品高剂量组P＜0.01).与模型组相比,各组AVP含量均升高,其中生品高剂量、盐炙品中、高剂量组有极显著性差异(P＜0.01).结论:益智仁石油醚部位具有缩尿作用,盐炙能增强其作用.     

补骨脂不同炮制品对肾阳虚、脾虚大鼠的影响研究

目的:探讨补骨脂盐炙工艺对肾阳虚、脾虚模型动物作用的差异,以阐明补骨脂炮制工艺的药效差异。方法:以主要脏器指数、血清cAMP/cGMP、TNF-α、Na~+-K~+-ATP酶含量为评价指标,观察不同工艺的补骨脂炮制品即补骨脂生品、水炙品、盐炙品对氢化可的松所致肾阳虚模型大鼠及大黄所致脾虚腹泻模型大鼠的影响。结果:不同工艺的补骨脂炮制品对肝指数、肾指数、胸腺指数、血清cAMP/cGMP、TNF-α、Na~+-K~+-ATP酶均有显著性影响(P0.05);且补骨脂盐炙品与生品有显著性差异(P0.05)。结论:补骨脂给药组的燥性强度依次为生品组水炙品组盐炙品组,加热和盐处理都可缓和补骨脂生品的燥性。     

苍术炒焦前后正丁醇部位对湿阻中焦证大鼠水盐代谢影响

目的:通过研究苍术炒焦前后正丁醇部位对湿阻中焦证大鼠水盐代谢的药效,阐释焦苍术药效改变的机制,为临床合理用药提供客观依据。方法:以湿阻中焦证大鼠为模型,比较不同给药组大鼠血清醛固酮(ALD)、肾小管水孔蛋白2(AQP2)和血浆K~+、Na~+、Cl~-等电解质水平。结果:模型组大鼠血清ALD、肾小管AQP2与正常组相比明显升高,血浆K~+、Na~+和Cl~-浓度均有所降低,以K~+浓度降低较为显著;与模型组比较,各给药组均表现为ALD和AQP2不同程度降低,其中生品正丁醇部位高剂量组(正生高)对ALD和AQP2水平有显著性影响,且其调节血浆电解质水平能力与阳性组无显著性差异(P0.05)。结论:苍术炒焦以后,燥性得以缓和,焦苍术对模型大鼠水盐代谢的调节作用明显减弱。     

补骨脂盐炙对肾阳虚、脾虚模型动物燥性影响研究

目的:探讨补骨脂盐炙对肾阳虚、脾虚模型动物燥性的影响。方法:以主要脏器指数、血清cAMP/cGMP、TNF-α、Na~+-K`+-ATP酶含量为评价指标,观察不同剂量补骨脂生品和盐炙品对氢化可的松所致肾阳虚模型大鼠及大黄所致脾虚腹泻模型大鼠燥性的影响。结果:不同剂量补骨脂生品和盐炙品对肝指数、肾指数、胸腺指数、血清cAMP/cGMP、TNF-α、Na~+-K~+-ATP酶均有显著性影响(P0.05);且补骨脂高剂量组盐炙前后功效比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:补骨脂盐炙后可缓和燥性,作用强度与剂量相关。     

益肾化浊颗粒对腺嘌呤饲喂法所致慢性肾衰大鼠血清中Bun，Crea含量的影响

目的：探讨益肾化浊颗粒对腺嘌呤饲喂法致慢性肾衰大鼠的治疗作用及作用机制。方法：采用0.75%腺嘌呤饲喂法复制大鼠慢性肾衰模型,动物随机分成6组,即空白对照组、模型对照组、尿毒清颗粒对照组和益肾化浊颗粒大、中、小剂量组,连续给药30 d后,计算肾脏指数,ELISA法测定血清中尿素氮（Blood Urea Nitrogen,Bun）和肌酐（Creatinine,Crea）含量,HE染色观察肾脏组织病理学变化。结果：与模型对照组大鼠比较,各给药组大鼠肾脏脏器指数差异均无统计学意义,各给药组大鼠血清中Bun和Crea含量均显著降低,益肾化浊颗粒大剂量组大鼠肾小管扩张程度较轻（P〈0.05）。结论：益肾化浊颗粒可使腺嘌呤饲喂法所致慢性肾衰大鼠血清中Bun、Crea含量下降,改善肾脏病理变化。     

补骨脂、肉豆蔻炮制前后在“二神丸”中对脾肾阳虚泄泻小鼠的止泻研究

目的探讨补骨脂、肉豆蔻生品与炮制品分别配方组成的古方"二神丸"对"脾肾阳虚泄泻"小鼠止泻作用的差异,以阐明炮制对方剂疗效影响。方法设立空白组、阳性药物组、"二神丸"Ⅰ(补骨脂生品+肉豆蔻生品)、"二神丸"Ⅱ(补骨脂生品+肉豆蔻煨制品)、"二神丸"Ⅲ(补骨脂盐炙品+肉豆蔻生品)、"二神丸"Ⅳ(补骨脂盐炙品+肉豆蔻煨制品)共6组,观察对番泻叶所致小鼠急性腹泻以及氢化可的松和大黄造成的"脾肾阳虚泄泻"模型小鼠泄泻的影响。结果 "二神丸"Ⅲ、Ⅳ组的小肠推进率与空白组相比有显著性差异(P<0.05);"二神丸"Ⅳ组的首次泄泻时间、稀便率、稀便级和腹泻指数与空白组比较,均有极显著性差异(P<0.01)。结论 "二神丸"Ⅳ组的止泻作用优于其他组合,即盐炙补骨脂和煨炙肉豆蔻组方的"二神丸"止泻作用增强。     

不同炮制品入药的青娥丸含药血清对人成骨细胞增殖、分化及矿化的影响

目的:研究以不同炮制品入药的青娥丸含药血清对人成骨细胞增殖、分化和矿化的影响。观察盐炙品及生品青娥丸含药血清对人成骨细胞功能的影响,探讨青娥丸对骨质疏松症的治疗机制,阐述应用盐炙品配伍入药的必要性。方法:以绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞为研究对象,制备以补骨脂和杜仲生品及盐炙品配伍入药的青娥丸,给予大鼠生品及盐炙品青娥丸水提液ig(10mL·kg-1),给药持续7d,第7天采集大鼠血液制备含药血清。实验分为空白组、空白血清组、青娥丸含药血清组、盐青娥丸含药血清组。采用MTT法检测各组含药血清对人成骨细胞增殖的影响;同时测量成骨细胞碱性磷酸酶活性来评价各组含药血清对人成骨细胞分化的作用;采用细胞钙茜素红染色方法对给予含药血清处理的人成骨细胞进行染色,观察对人成骨细胞矿化的影响。结果:与同浓度空白血清比较,青娥丸的生品和盐炙品的含药血清均有促进成骨细胞增殖的作用(P<0.05),且含药血清浓度相同时,青娥丸盐炙品含药血清促进成骨细胞增殖的作用优于生品含药血清(P<0.05);青娥丸生品及盐炙品含药血清具有促进成骨细胞分化的作用(P<0.05),且盐炙品的作用要优于生品(P<0.01);空白血清对成骨细胞的矿化无显著的作用,而青娥丸生品及盐炙品含药血清具有促进成骨细胞矿化结节形成的作用,且盐炙品的作用要优于生品。结论:青娥丸能提高成骨细胞增殖、分化及矿化活性,其对于骨质疏松症的治疗作用与其能显著提高成骨细胞功能有关,且盐炙品入药的青娥丸效果较好。     

参麦注射液保护D-NNA所致大鼠肾脏氧化损伤的研究

目的:通过研究参麦注射液保护D-NNA所致大鼠肾脏损伤,揭示参麦注射液保护肾脏组织的机制。方法:建立D-NNA诱导大鼠致肾脏损伤模型,用参麦注射液治疗模型组大鼠,通过检测血清生化指标Crea和Bun;肾脏氧化指标MDA、GSH-Px和SOD;一氧化氮水平并结合病理组织学研究,分析D-NNA造模情况和参麦注射液治疗效果。结果:经D-NNA诱导的大鼠血清生化指标Crea和Bun水平均升高,肾脏组织中MDA浓度和GSH-Px活性明显升高,SOD活性明显下降;肾脏组织中NO水平降低,病理学检查证明有严重的肾脏病变。经参麦注射液治疗后所有指标均有改善,病理学检查显示肾脏组织有明显恢复。结论:参麦注射液具有保护D-NNA所致大鼠的肾脏损伤,各氧化指标、NO水平等指标证实其主要机制为参麦注射液在肾脏内具有抗氧化作用。     

缩泉丸的药理学研究

缩泉丸由乌药、益智仁、淮山药组成,具有温肾祛寒、缩尿止遗的功效。本文对该方的药理作用进行了多方面的探讨。结果表明,缩泉丸对水负荷大、小白鼠和加用利尿药大白鼠均有显著的抗利尿作用。与此同时,Na~ 、Cl~-离子的排出也明显减少,而K~ 排出增加。提示该方的抗利尿作用,有可能是通过保Na~ 来实现的。为缩泉丸临床上应用于肾虚多尿,遗尿等症,提供了科学依据。     

益智仁盐炙后缩泉丸入血成分的分析

目的分析益智仁Alpinia oxyphylla Miq.盐炙后缩泉丸的入血成分。方法大鼠灌胃缩泉丸(含盐益智仁)石油醚部位后,通过HPLC结合LC-MS法比较含药血清和空白血清化学成分。结果共标定23种入血成分,并鉴定出其中7种,分别为杨芽黄素、白杨素、益智酮甲、7-表-香科酮、益智醇、圆柚酮及其代谢产物11,12-二羟基圆柚酮。结论所发现的入血成分可能是缩泉丸发挥药效的物质基础。     

车前子不同炮制品抗大鼠膜性肾病的比较

目的:比较车前子生品和盐炙品水煎液抗大鼠膜性肾病的活性。方法:热回流法提取车前子不同炮制品;选用改良的Border法应用阳离子化牛血清白蛋白(C-BSA)建立大鼠膜性肾病模型,在给药的第6周末检测大鼠24 h尿蛋白定量(UTP)及血清总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),总蛋白(TP),尿素氮(BUN),肌酐(SCr)水平;采用电镜和光镜观察肾脏病理形态学变化,免疫组化法检测各组大鼠肾组织肿瘤坏死因子(TNF)-α,白细胞介素(IL)-1β,转化生长因子(TGF)-β1,核转录因子-κB(NF-κB)p65的表达情况。结果:与空白组比较,模型组大鼠的尿蛋白、肾指数、血清生化指标、肾脏免疫调节因子具有极显著差异(P0.01),肾脏病理形态变化明显;与模型组比较,贝那普利组、盐炙品3个剂量组和生品高剂量组均可显著降低模型大鼠尿蛋白、肾指数(P0.05,P0.01),使血清生化指标呈显著差异(P0.05,P0.01),病理形态结果显示,大鼠肾脏病变有明显的改善,4种细胞因子表达显著降低(P0.01,P0.05);与生品高剂量组比较,贝那普利组和盐炙品高、中剂量组尿蛋白量显著降低(P0.05,P0.01),贝那普利组和盐炙品高剂量组肾指数显著降低(P0.05),贝那普利组、盐炙品高、中剂量组血清中BUN,SCr,TC,TG的含量显著低于生品高剂量组(P0.05,P0.01),低剂量组仅BUN显著低于生品高剂量组(P0.05),贝那普利组、盐炙品高、中剂量组血清中TP显著升高(P0.05),贝那普利组对肾脏4种免疫调节因子的表达显著降低(P0.01),盐炙品3个剂量组中TNF-α,IL-1β的积分吸光度(IA)显著降低(P0.01),盐炙品高剂量组TGF-β1,NF-κB p65的IA表达显著低于生品高剂量组(P0.05,P0.01)。结论:车前子盐炙品对膜性肾病大鼠的肾保护作用和对肾脏中免疫调节因子的调节作用均优于生品,可继续深入车前子盐炙品的物质基础和药效机制研究。     

韭菜子不同炮制品对正常和肾阳虚小鼠交配能力的影响

目的比较韭菜子炮制品对正常小鼠和氢化可的松所致肾阳虚模型小鼠的交配能力的影响。方法韭菜子生品、盐炙品和酒炙品的含水乙醇提取物对正常和用氢化可的松造成肾阳虚小鼠灌胃,对照组给予生理盐水,用红外摄像记录30min内小鼠的跨骑潜伏期和跨骑次数。结果生品及盐炙品仅对肾阳虚小鼠交配能力的提高有统计学差异(P<0.05),酒炙品对正常和肾阳虚小鼠交配能力的提高均存在统计学差异(P<0.05)。结论韭菜子在提高阳虚小鼠交配能力上,酒炙品优于生品和盐炙品。     

补骨脂盐炙前后对肾阳虚大鼠肝肾功能及水通道蛋白表达的影响

目的观察补骨脂盐炙前后对肾阳虚大鼠肝肾功能及口腔唾液腺水通道蛋白5(AQP5)、结肠AQP4、肾脏AQP2基因表达的影响,分析阐明盐炙缓和补骨脂毒副作用的机制。方法采用sc氢化可的松的方法复制大鼠肾阳虚模型,以化学试剂法测定大鼠血清中总蛋白(TP)、白蛋白(Alb)、天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、血肌酐(Scr)和血尿素氮(BUN)的量,荧光定量PCR(q RT-PCR)法测定口腔唾液腺AQP5、结肠AQP4、肾脏AQP2 m RNA的表达。结果与模型组比较,补骨脂生品和盐炙品组大鼠血清中的ALT、AST量显著升高,Alb量显著降低(P0.05);补骨脂盐炙品组ALT、AST水平低于生品组;各给药组BUN及Scr水平显著高于模型组(P0.05)。q RT-PCR结果显示,与对照组比较,模型组大鼠AQP2、AQP4 m RNA表达明显降低(P0.05),AQP5的m RNA表达明显增加(P0.05);与模型组比较,补骨脂生品组大鼠AQP4 m RNA表达显著升高(P0.05),AQP5 m RNA表达显著降低(P0.05);与补骨脂生品组比较,补骨脂盐炙品组AQP2、AQP5 m RNA表达明显升高(P0.05),AQP4 m RNA表达明显降低(P0.05)。结论补骨脂盐炙后可缓解药物对肾阳虚大鼠肝肾功能的副作用;同时缓解生品的燥性,盐炙对药物燥性的缓解作用可能与其对体内AQP的基因表达调控有关。     

不同炮制品的杜仲含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女成骨细胞增殖与分化的影响

目的研究杜仲盐炙前后含药血清及其环烯醚萜类成分对绝经后妇女的成骨细胞增殖和分化的影响。探讨杜仲对骨质疏松症的治疗机制,阐述应用盐炙品入药的必要性。方法以绝经后妇女股骨松质骨分离得到的成骨细胞为研究对象,给予大鼠生品及盐炙品杜仲水提液灌胃(10 ml·kg-1),给药持续7 d,第7天采集大鼠血液制备含药血清。实验分为空白对照组、空白血清组、杜仲含药血清组、盐杜仲含药血清组。以雌二醇作为对照阳性药物。采用MTT法检测各组含药血清及各单体成分对人成骨细胞增殖的影响;同时测量成骨细胞碱性磷酸酶活性来评价各组含药血清及各单体成分对人成骨细胞分化的作用。结果杜仲生品和盐炙品含药血清均能促进人成骨细胞的增殖,提高碱性磷酸酶的活性,且血清浓度为20%时,杜仲盐炙品含药血清对成骨细胞增殖、分化的促进作用显著优于生品(P0.01);同时杜仲中4种环烯醚萜类成分对人成骨细胞的增殖和分化均有促进作用。结论杜仲生品和盐炙品含药血清均具有良好的促进人成骨细胞增殖和分化的作用,其中盐炙品的作用显著优于生品。杜仲中环烯醚萜类成分可能是其补肾健骨作用的有效成分。     

大黄附子汤对腺嘌呤致慢性肾衰竭小鼠外周血TGF-β1、BMP-7水平及肾组织Smad 6、P38蛋白表达的影响

目的探讨大黄附子汤干预腺嘌呤所致慢性肾衰竭的疗效及可能作用机制。方法将雄性KM小鼠随机分为正常组、模型组、地塞米松组及大黄附子汤低、中、高剂量组,每组15只。除正常组外,其余各组采用腺嘌呤致小鼠慢性肾衰竭模型,实验第3周起,大黄附子汤低、中、高剂量组每天给予浓度为0.84、4.2、42mg/g大黄附子汤灌胃,灌胃体积1ml/20g;地塞米松组小鼠首次灌胃剂量为0.06mg/kg,维持剂量0.015mg/kg;正常组和模型组小鼠给予生理盐水1ml/20g灌胃。各组均每日灌胃1次,共3周。记录各组小鼠一般情况,实验结束后测小鼠体重,计算肾脏系数,检测肾功能[包括尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)]、电解质(包括K~+、Na~+、Cl~-)及外周血转化生长因子β1(TGF-β1)、骨形态发生蛋白7(BMP-7)水平,取肾组织做病理切片HE染色,检测肾组织Smad 6、P38蛋白表达。结果模型组小鼠肾组织病理呈现肾小球变性、数量减少、球囊粘连,肾间质胶原沉积,出现明显间质纤维化;与模型组比较,地塞米松组和大黄附子汤低、中、高剂量组肾脏组织病变改善,其中大黄附子汤高剂量组改善效果最显著。与模型组比较,大黄附子汤各剂量组小鼠体重、肾脏系数、外周血BMP-7水平均升高,TGF-β1及Cl~-水平均下降(P0.05);并且大黄附子高剂量组在降低小鼠BUN、Scr及TGF-β1方面、升高BMP-7水平及肾组织Smad 6蛋白表达方面优于大黄附子中、低剂量组(P0.05)。结论大剂量大黄附子汤可改善腺嘌呤所致慢性肾衰竭小鼠肾功能和肾脏病理,其机制可能通过TGF-β1/BMP-7及Smads信号通路来减轻或阻止肾纤维化的发展。     

基于电子鼻技术区分益智仁的不同炮制品

目的:利用电子鼻技术建立气味指纹图谱以区别益智仁不同炮制品。方法:采用电子鼻技术对益智仁生品、清水炒制品、盐炙品进行检测,获得电子鼻在传感器的响应值,利用主成分分析、判别因子分析及统计质量控制分析等化学计量学对响应值进行数据处理。结果:经化学计量学分析,益智仁生品及其炮制品能明显区分开。益智仁生品与炮制品的气味差异较大,清水炒制和盐炙益智仁气味差异较小。结论:电子鼻技术可用于益智仁炮制品的区分,推测益智仁气味的变化主要由加热炮制引起。     

益智仁盐炙前后指纹图谱对比研究

目的 建立益智仁盐炙前后高效液相色谱(HPLC)指纹图谱,探讨盐炙对益智仁内在成分的影响.方法 对益智仁生品、盐炙品饮片进行HPLC/UV指纹图谱分析,色谱柱采用Diamonsil C_(18)(250 mm×4.6 mm,5 μm),以乙腈和水梯度洗脱,检测波长为260 nm,柱温:35℃,流速:1.0 ml/min.结果 益智仁盐炙后有两个新的色谱峰出现,7个特征峰相对含量发生变化.结论 益智仁通过盐炙后化学成分既有量的变化,也有质的变化.     

缩泉丸不同提取部位缩尿作用的谱效关系

目的:益智仁盐炙后组成缩泉丸,建立缩泉丸不同提取部位的指纹图谱,阐明各共有峰所代表的化学成分对缩尿药效的贡献大小,揭示其药效物质基础。方法:通过观察不同提取部位对单纯水负荷模型小鼠尿量系数的影响研究缩泉丸的缩尿药效,流动相乙腈-水梯度洗脱,检测波长230 nm,建立缩泉丸不同提取部位的HPLC指纹图谱,采用灰色关联分析法建立缩泉丸的谱效关系。结果:不同成分(共有峰编号)对缩泉丸缩尿作用贡献大小排序为8号9号7号11号17号5号19号29号18号10号6号12号23号。结论:建立的HPLC指纹图谱方法简便、重复性良好,可作为缩泉丸中益智仁盐炙后物质基础改变及药效改变的依据。初步证明缩泉丸的缩尿药效物质是一些极性较小的成分,且主要集中在石油醚部位,缩尿作用是这些成分协同作用的结果。