克罗卡林对急性脑缺血再灌注大鼠的脑保护作用

目的 探讨急性脑缺血再灌注后大鼠脑内小胶质细胞的活化及K-ATP通道开放剂克罗卡林(Cromakalin)的脑保护作用.方法 将72只SD大鼠,随机分为3组:A组为假手术组,B组为单纯缺血再灌注组,C组为克罗卡林干预组.应用改良Zea Longa线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,免疫组化染色检测OX42(小胶质细胞的标志)和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达情况;应用特异性尼氏染色进行海马CA1区神经元计数.结果 A组各时间点海马 CA1区OX42,iNOS均有少量表达,B组OX42,iNOS随时间推移表达增多,72 h达高峰,7 d减少,与A组相比两者表达明显增多,差异有统计学意义(P<0.01).C组各时间点OX42、iNOS与B组相比表达明显减少,差异有统计学意义(P<0.01).结论 Cromakalin能明显抑制急性脑缺血再灌注后大鼠脑内OX42增殖,减少iNOS的表达,降低海马神经元的死亡程度,具有脑保护作用.     

丁苯酞对血管性痴呆大鼠认知功能、海马神经元结构及nNOS的影响

目的研究丁苯酞对血管性痴呆（VD）大鼠认知功能、海马神经元结构、及神经元型一氧化氮合酶（nNOS）的影响。方法采用结扎双侧颈总动脉方法制备慢性前脑缺血动物模型,100只老龄大鼠随机分5组,应用水迷宫、透射电镜及免疫组化方法对各组大鼠学习记忆、神经元结构、nNOS表达进行观察。结果与假手术组比较,大鼠学习记忆能力在造模后差异有显著性意义（P〈0.05）;大鼠海马区神经元在造模后变性水肿明显,与模型组比较,丁苯酞不同剂量治疗1月后,大鼠学习记忆能力明显改善（P〈0.05）,神经元变性水肿减轻,nNOS阳性神经元表达减少（P〈0.05）。结论丁苯酞能显著改善VD大鼠学习记忆能力;减轻神经元变性水肿;抑制nNOS阳性神经元表达。     

丁苯肽对血管性痴呆大鼠学习记忆障碍的实验研究

目的 探讨丁苯肽对血管性痴呆大鼠学习记忆障碍的治疗作用及机制.方法 健康雄性Wistar大鼠42只随机分为假手术组、模型组、丁苯肽组,双侧颈总动脉永久结扎法制作动物模型,丁苯肽罐胃,Y-型迷宫评价学习记忆能力,免疫组化检测海马p38MAPK及iNOS表达情况,Tunel染色法检查细胞凋亡.结果 丁苯肽组大鼠学习记忆能力强于模型组,低于假手术组,差异均有意义(P<0.05),p38MAPK、iNOS及神经元凋亡较模型组低,高于假手术组,3组两两比较P<0.05.结论 丁苯肽能改善VD大鼠的学习记忆障碍,具体可能是通过降低海马p38MAPK、iNOS表达,减少细胞凋亡而起作用.     

脑脉泰对慢性脑缺血大鼠认知功能的保护作用及其机制研究

目的研究脑脉泰影响脑组织神经生长因子(NGF)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达,进而改善慢性脑缺血大鼠的认知功能。方法采用大鼠双侧颈总动脉永久结扎法(2-VO)制备慢性脑缺血模型。术后分别给予脑脉泰不同剂量灌胃治疗6 w。应用Morris水迷宫测定大鼠的学习记忆能力、HE染色观察海马CA1区神经元形态、免疫组化方法检测大鼠脑组织NGF及GFAP的表达。结果与假手术组相比,模型组大鼠的学习能力和记忆能力降低,脑组织中NGF表达减少(P<0.01),GFAP表达增多(P<0.01);脑脉泰给药能够改善大鼠的记忆和学习能力,增加脑组织中NGF表达(与模型组相比,低剂量组P<0.05,高剂量组P<0.01),降低GFAP表达(与模型组相比,低、高剂量均为P<0.01)。结论脑脉泰可能通过提高脑组织NGF和降低GFAP表达来改善慢性脑缺血大鼠的认知功能。     

胶质纤维酸性蛋白在老年痴呆大鼠海马中的表达

为探讨慢性缺血痴呆鼠学习减退与海马内星形胶质细胞表达的关系,基于老年大鼠慢性脑缺血痴呆模型,采用免疫组化技术及迷宫实验,定量分析海马星形胶质细胞变化与学习能力、记忆能力的关系。结果发现,慢性缺血痴呆鼠海马CAl区GFAP阳性细胞数目明显增多,胞体肥大,突起增粗、变长,与对照组相比有显著意义(P<0.05),Y型迷宫测试结果显示,痴呆组大鼠的学习、记忆能力与对照组相比,明显下降。提示海马星形胶质细胞可能参与慢性缺血痴呆大鼠的学习记忆功能。     

环孢素A对大鼠急性脑缺血再灌注损伤小胶质细胞的活化及iNOS表达的影响

目的 观察环孢素A(Cyclosporin,CSA)对大鼠脑缺血再灌注损伤后小胶质细胞(microglia,MG)活化及诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase, iNOS)表达的影响,探讨其脑保护作用的可能机制.方法 将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、环孢素A组.改良线栓法制备建立局灶性脑缺血-再灌注动物模型,即大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,分别于手术后1 d,3 d,7 d,14 d免疫组化法观察大鼠海马一区OX-42及iNOS的表达情况,同时对大鼠神经行为学进行评分.结果 模型组、环孢素组1 d即有OX-42的大量表达,3 d时OX-42达到高峰,14 d时接近正常;iNOS 1 d达峰,7 d及14 d时接近正常.环孢素组OX-42、iNOS较模型组减少(P<0.05),且神经行为学评分优于模型组(P<0.05).结论 小胶质细胞的激活及iNOS大量表达和脑缺血-再灌注损伤密切相关,环孢素A可显著减少脑缺血再灌注损伤后小胶质细胞的激活和iNOS的表达,对大鼠脑缺血再灌注损伤有一定的保护作用.     

丁苯酞对大鼠脑缺血再灌注损伤后HSP10表达的影响

目的研究丁苯酞干预对大鼠脑缺血再灌注损伤后不同时点脑组织中热休克蛋白10(HSP10)表达的影响,并探讨丁苯酞对缺血性脑血管病保护作用的机制。方法采用夹闭双侧颈总动脉的方法制作大鼠前脑缺血再灌注模型;H&E染色和NSE免疫组化染色神经元,观察脑组织的形态变化和记数各组神经元数目;免疫组织化学检测对照组、缺血再灌注组及丁苯酞干预组大鼠脑组织HSP10的表达水平变化。结果脑缺血再灌注后丁苯酞干预组及缺血再灌注组HSP10表达水平于再灌注后6h开始上调,3d达到高峰,丁苯酞干预组各时间点HSP10阳性表达指数均高于缺血再灌注组,丁苯酞干预组脑组织的损伤程度明显轻于脑缺血再灌注组(P<0.05)。结论丁苯酞可能通过上调大鼠缺血再灌注损伤后脑组织HSP10的表达,从而抑制前脑缺血再灌注损伤后细胞凋亡,减少神经元死亡,减轻缺血再灌注后脑组织的损伤。     

丁基苯酞对慢性脑缺血大鼠海马区NO表达的影响

目的研究丁基苯肽对慢性脑缺血大鼠海马区一氧化氮（NO）表达的影响。方法 80只大鼠随机分为假手术组、模型组、预处理组、处理组。根据硝酸还原酶法和β-NADPH组织化学染色法,又将每个小组分为两个亚组。模型组、预处理组和处理组利用双侧颈总动脉永久结扎术制备动物模型,假手术组不结扎双侧颈总动脉。预处理组在造模前及造模后均给予丁基苯酞,处理组在造模后给予丁基苯酞,假手术组和模型组在造模后给予同等剂量的生理盐水,4组分别在造模后1个月处死大鼠取材。用硝酸还原酶特异性还原NO产物的方法测定大鼠前脑缺血模型中海马NO释放量的异常变化。β-NAD-PH组织化学染色显示一氧化氮合酶（NOS）阳性神经元,光镜下观察。结果模型组、预处理组及处理组海马区NO、NOS阳性神经元数目与假手术组相比均有明显增加。与模型组相比,预处理组和处理组海马区NO、NOS阳性神经元数目减少。与处理组相比,预处理组海马区NO、NOS阳性神经元数目减少更明显。结论慢性脑缺血缺氧能使大鼠海马区NO含量明显增加,丁基苯肽（NBP）能减轻这种变化。     

脑室注射痴呆大鼠海马胶质纤维酸性蛋白表达与学习记忆能力的关系

目的探讨星形胶质细胞在老年性痴呆大鼠海马中的表达与老年性痴呆大鼠学习记忆能力减退的关系。方法雄性SD大鼠20只,随机分为痴呆组与假手术组;用Morris水迷宫检测大鼠的学习、记忆能力;用免疫组化技术定量检测大鼠海马CA1区胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达;分析海马星形胶质细胞变化与学习、记忆能力的关系。结果假手术组海马CA1区锥体细胞排列紧密有序,细胞核大而圆、染色浅、核仁明显、未见明显胞浆浓染、核固缩等神经元变性受损征象。而痴呆大鼠海马CA1锥体神经细胞排列疏松、数目减少、细胞形态异常,许多细胞出现体积缩小、核浓染、核固缩;痴呆鼠海马CA1区GFAP阳性细胞数目明显增多,胞体肥大,突起增粗、变长现象明显,而假手术组海马CA1区仅见少量GFAP阳性细胞,突起较少、短,染色较淡。计数和测量海马CA1区GFAP阳性细胞数目、总面积、平均光密度,痴呆组与假手术组相比均明显增加,有显著意义(P<0.05);水迷宫测试显示痴呆组大鼠隐藏平台获得时间比假手术组明显延长,空间探索时间明显缩短,具有显著意义(P<0.05);显示痴呆组大鼠学习记忆能力与假手术组比较均明显下降;将痴呆大鼠学习成绩与海马CA1区GFAP表达数目之间进行相关分析,两者间存在负相关关系,认为星形胶质细胞参与了学习记忆过程。结论提示海马星形胶质细胞的过度表达可能影响痴呆大鼠的学习记忆能力。     

γ-氨基丁酸对慢性脑缺血致血管性痴呆大鼠学习记忆能力的影响

目的观察γ-氨基丁酸（GABA）对慢性脑缺血致血管性痴呆（VD）大鼠学习记忆能力及海马CA1区神经元形态学的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、GABA组,采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD模型。GABA组术后腹腔注射GABA0.5g.kg-1.d-1,连续注射60d;用Morris水迷宫实验检测大鼠空间学习记忆能力;Nissl染色观察大鼠海马CA1区神经元形态学变化。结果 GABA能明显改善VD大鼠学习记忆能力,也能减轻海马CA1区神经元损伤。结论 GABA能改善慢性脑缺血致VD大鼠的学习记忆能力,减轻海马神经元损伤可能是其机制之一。     

Ⅱ组代谢性谷氨酸受体阻断剂延缓痴呆大鼠学习记忆的减退过程

目的 探讨α-甲基-(4-四唑基-苯)甘氨酸[α-methyl-(4-tetrazolyl-phenyl)Glycine,MTPG]对老年痴呆大鼠学习、记忆功能的影响.方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、痴呆组与MTPG加痴呆组;首先进行凝聚肽Aβ 25-35大鼠左侧脑室注射建立AD大鼠模型,1周后行MTPG的右侧脑室注射,4周后用Morris水迷宫检测大鼠的学习、记忆能力.用免疫组化技术检测大鼠海马Cal区胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)的表达.结果 痴呆人鼠海马Cal锥体神经元密度明显降低,而MTPG加痴呆组海马Cal区锥体神经元密度明显改善.MTPG加痴呆组海马CAI 区GFAP阳性细胞的表达与痴呆组相比明娃减少,差异有统计学意义(P＜0.05).水迷宫测试,MTPG加痴呆组与痴呆组大鼠比较,学习记忆能力有明显提高(P＜0.05).将大鼠学习成绩与海马CAI区GFAP表达数目之间进行相关分析,二者间存在负相关关系.结论 海马星形胶质细胞的过度表达可能影响痴呆大鼠的学习记忆功能,而MTPG可延缓痴呆大鼠学习记忆功能的减退过程.     

盐酸法舒地尔对慢性脑低灌注损伤大鼠海马细胞的保护作用

目的 观察Rho激酶抑制剂盐酸法舒地尔(hydroxy fasudil, HF)对慢性低灌注脑缺血所致大鼠海马神经细胞损伤的保护作用。方法 采用永久性结扎大鼠双侧颈总动脉(permanent occlusion of the bilateral CCA, 2VO)制备大鼠慢性不完全性全脑缺血模型,将SD大鼠随机分为假手术组、脑缺血模型组和HF治疗组,运用Morris 水迷宫行为学方法检测大鼠空间学习记忆能力; 用HE染色观察海马组织形态学改变。结果 Morris 水迷宫检测发现模型组大鼠学习记忆能力受损,与假手术组比较逃避潜伏期延长、空间辨别能力下降; 组织学观察模型组大鼠海马CA1细胞发生丢失,组织结构异常。连续给予盐酸法舒地尔30 d能改善大鼠学习记忆功能,减少脑缺血所致的大鼠海马神经细胞丢失。结论 盐酸法舒地尔可减少慢性脑缺血所致的大鼠海马神经元的丢失,改善学习记忆功能。     

阿托伐他汀对β淀粉样蛋白1-42诱导阿尔茨海默病大鼠模型的抗炎作用

目的 探讨阿托伐他汀对β淀粉样蛋白1-42(β-amyloid 1-42,Aβ1-42)诱导阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)大鼠模型学习记忆功能及脑内炎性因子的分泌、神经细胞损伤的影响.方法 将60只Wistar大鼠(体重300～350 g)完全随机分为对照组、模型组、他汀对照组和治疗组,每组各15只.服用阿托伐他汀(每天5 mg/kg)3周为治疗组,采用侧脑室注射Aβ1-42的方法制备大鼠痴呆模型,设假手术组为对照组.水迷宫实验观测大鼠的行为学变化,免疫组织化学方法测定海马区炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α的表达,HE染色观察海马区形态结构的变化,透射电镜观察海马区神经元和小胶质细胞超微结构的变化.结果 模型组大鼠的学习记忆成绩下降(逃避潜伏期:对照组12.0±1.2,模型组41.3±3.4,t=18.0363,P<0.01),海马区炎性因子IL-1β、IL-6、TNF-α分泌增多(IL-1β:对照组53.5±2.4,模型组101.0±3.8,t=23.8246,P<0.01);阿托伐他汀治疗组与模型组大鼠相比较,学习和记忆成绩有所改善(逃避潜伏期:25.7±1.6,41.3±3.4,t=9.1076,P<0.01),海马区IL-1β、IL-6、TNF-α分泌减少(IL-1β:60.0±3.4,101.0±3.8,t=18.0231,P<0.01).细胞形态学观察显示,与模型组相比,阿托伐他汀治疗组模型海马区神经细胞损伤减轻,胶质细胞增生减少.结论 阿托伐他汀可以减少大鼠AD模型海马区胶质细胞炎性因子的分泌,减轻神经细胞损伤,改善其学习和记忆能力.     

铅暴露鼠学习记忆障碍相关机制的研究

目的 研究铅暴露大鼠海马神经细胞精氨酸加压素(AVP)、生长抑素(SS)的阳性表达,及其与学习记忆障碍的关系.方法 将健康两月龄SD大鼠60只,随机分为对照组、染铅组,每组30只,染铅动物饮用0.1%醋酸铅去离子水3个月,制成慢性染铅大鼠模型;对照组饮用去离子水.Y-迷宫试验检测两组大鼠的学习和记忆能力,采用免疫组化方法测定大鼠海马AVP和SS阳性神经元数,观察铅暴露对其阳性表达的影响.结果 染铅组大鼠学习记忆能力较对照组明显减低(P<0.01),海马CA1区AVP 和SS阳性神经元数量均明显减少(均P<0.01),CA3区AVP(P<0.05)和SS(P>0.05)阳性神经元数量亦减少,但不如CA1区明显.结论 铅暴露大鼠学习记忆能力的减低可能与海马神经细胞AVP和SS的阳性表达减少有关.     

七叶皂苷钠对脑缺血再灌注损伤大鼠MG、iNOS表达的影响

目的观察七叶皂苷钠对大鼠脑缺血再灌注损伤后小胶质细胞(MG)及诱导型一氧化氮合酶(iNOS)表达的影响,探讨其脑保护作用的可能机制。方法将SD大鼠随机分为假手术组、对照组、七叶皂苷钠组。改良线栓法制备建立局灶性脑缺血-再灌注动物模型(MCAO模型),分别于手术后1d、3d、7d免疫组化法观察大鼠海马一区OX-42及iNOS的表达情况。结果对照组、七叶皂苷钠组3d时OX-42达峰,7d时明显降低;iNOS 1d达峰,3d明显下降,7d时接近正常。七叶皂苷钠组优于对照组(P<0.05)。结论七叶皂苷钠可能通过抑制小胶质细胞的活化和iNOS的表达,对大鼠脑缺血再灌注损伤发挥脑保护作用。     

瑞舒伐他汀对急性脑缺血再灌注大鼠脑含水量及海马区MG的影响

目的通过观察瑞舒伐他汀对急性脑缺血再灌注损伤大鼠脑含水量及海马区小胶质细胞(microglia,MG)影响,探讨其脑保护作用机制。方法将96只SD大鼠,随机分为4组:正常大鼠为A组,假模型组为B组,模型组为C组,干预组为D组。应用改良的Zea Longa线栓法制作大鼠大脑中动脉缺血再灌注(MCAO)模型,应用免疫组化法观测大鼠海马区MG改变,采用干湿重法观测脑含水量变化。利用HE染色观察海马区神经元的变化。结果 A、B组不同时间点脑含水量、MG表达无明显改变。C、D组大鼠的脑含水量、MG的表达在24 h开始增高,72 h时达到峰值,7 d开始下降,14 d明显下降,与A、B组相比较,差异明显(P0.05)。D组与C组脑含水量、MG表达相比,24 h及72 h差异不明显(P0.05),7 d及14 d,D组的组脑含水量、MG表达较C组下降明显,差异具有统计学意义(P0.05)。结论瑞舒伐他汀能明显降低急性脑缺血再灌注大鼠脑水肿及MG的表达,抑制神经元过度凋亡,具有脑保护作用。     

慢性脑缺血大鼠海马区和齿状回突触素表达变化与其认知功能关系的研究

目的探讨慢性脑缺血大鼠海马区和齿状回突触素表达水平变化与学习记忆之间的关系。方法永久性结扎大鼠双侧颈总动脉,制备慢性前脑缺血大鼠致痴呆实验动物模型,通过水迷宫实验动态观察大鼠空间学习能力;应用免疫组织化学染色法测定慢性脑缺血后大鼠海马区与齿状回突触素表达水平的变化。结果手术后,实验组大鼠的学习记忆能力下降,游迷宫时间延长,进入盲端次数增加,并随缺血时间的延长而逐渐加重,缺血4周后与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05)。手术后,实验组大鼠海马区等部位的神经细胞胞浆深染、变性并发生坏死,随着缺血时间的延长,神经细胞逐渐减少,胶质细胞增多。手术后第4周,海马区和齿状回突触素阳性产物表达明显减少(均P<0.05),至第16周或第12周减少最为明显(P<0.05)。结论慢性脑缺血大鼠空间学习记忆力减退可能与海马区和齿状回突触数量减少相关。     

丁苯酞对血管性痴呆大鼠nNOS及SS的影响

目的研究丁苯酞对血管性痴呆(vascular dementia,VD)大鼠神经元型一氧化氮合酶(nNOS)及生长抑素(SS)的影响。方法采用结扎双侧颈总动脉方法制备慢性前脑缺血动物模型,100只老龄大鼠随机分5组,应用免疫组化方法对各组大鼠nNOS及SS表达进行检测。结果丁苯酞不同剂量治疗1个月后,nNOS阳性神经元表达减少(P<0.05),SS阳性细胞表达增加(P<0.05)。结论丁苯酞可抑制nNOS阳性神经元表达,增加SS阳性细胞的表达。     

丁苯酞对血管性痴呆大鼠认知功能及海马区Aβ表达的影响

目的研究丁苯酞对血管性痴呆大鼠认知功能及海马区Aβ表达的影响,探讨丁苯酞的脑保护作用。方法采用双侧颈总动脉永久结扎法制备血管性痴呆动物模型,以Morris水迷宫检测大鼠认知功能,以免疫组化法测定大鼠海马区Aβ的表达。结果模型组与假手术组相比,认知功能明显下降(P<0.05),Aβ表达明显增加(P<0.05);治疗组与模型组相比认知功能明显改善(P<0.05),Aβ表达明显减少(P<0.05);其中高剂量丁苯酞组较低剂量丁苯酞组认知功能改善明显、Aβ表达减少(P<0.05)。结论血管性痴呆大鼠海马区Aβ表达增加,给予丁苯酞治疗后,可通过减少海马区Aβ的表达,抑制神经细胞凋亡,保护神经细胞,促进脑功能恢复,从而改善血管性痴呆的认知功能障碍。     

丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中NMDA受体亚单位NR2B及突触素表达的影响

目的 观察丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中N-甲基-D-天门冬氨酸受体2B亚单位(NR2B)及突触素表达的影响.方法 采用免疫组化方法观察丁基苯酞对慢性脑缺血老龄大鼠海马中NR2B及突触素表达的影响.结果 B组与A组比较,海马CA1区、CA3区及齿状回NR2B及突触素的表达明显减少(P＜0.05),C、D组大鼠海马各区NR2B及突触素的表达与单纯缺血组比较均不同程度增加(P＜0.05);D组与C组比较,NR2B及突触素的表达增加更明显(P＜0.05).结论 慢性缺血3个月后,大鼠海马CA1区、CA3区及齿状回中NR2B 及突触素的表达明显减少,而丁基苯酞能改善这种缺血改变,增加NR2B 及突触素的表达.