食品中单增李斯特菌国标定量方法实验室验证结果与分析

目的对食品中单增李斯特菌国标定量方法进行实验室验证。方法将单增李斯特菌标准菌株活化,经一系列稀释后染菌样品。再用单增李斯特菌国标定量方法讨论稿中平板计数和MPN法检测样品中单增李斯特菌浓度。使用3种分离培养基鉴定,对比检测效果,确定检出限。结果平板计数法的检出限为100CFU／250ml和10CFU／250ml。MPN计数法的检出限为10CFU／250ml和1CFU／250ml。平板计数法中科玛嘉单增李斯特菌显色培养基检出限低于PALCAM分离培养基,而MPN计数法中,3种分离培养基鉴定结果一致。结论平板计数法和MPN计数法均适合于食品中单增李斯特菌定量检测,MPN计数法灵敏度更高。平板计数法中科玛嘉单增李斯特菌显色培养基普遍优于PALCAM分离培养基,3种培养基都适合MPN计数法,鉴定符合率高。科玛嘉和ALOA上生长典型菌落较PALCAM容易判别。     

78件熟肉制品单核细胞增生性李斯特氏菌污染情况调查

为了解北京市石景山区熟肉制品被单核细胞增生性李斯特氏菌 (以下简称单增李斯特氏菌 )的污染情况 ,1999年对采自市场和加工企业委托检验的 78件熟肉制品进行了单核增生性李斯特氏菌污染情况调查。1　材料与方法78件熟肉制品分为两大类 ,其中灌肠类 5 6件 ,酱卤类 2 2件。单增李斯特氏菌标准菌株 ,由中国商检技术研究所提供。依据ＧＢ4789.3 0 94《食品卫生微生物学检验》规定的检验程序和操作步骤对样品进行检验。2　结果与讨论2 1　 78件熟肉制品单增李斯特氏菌检出情况 :总检出率为7 69% ;总检出单增李斯特氏菌的样品均来自灌肠类 ,其…     

Veriflow DNA签名捕获技术在检测食品中单增李斯特菌的应用

【目的】建立快速检测食品中单增李斯特菌的实验方法。【方法】与国家标准方法对比研究Veriflow方法检测单增李斯特菌的效能,对3种食品样品和4种环境表面样品进行单增李斯特菌的定性检测,以建立和验证快速检测食品中单增李斯特菌的实验方法。【结果】Veriflow方法的检测结果与国标方法的结果差异无统计学意义(P0.05)。Veriflow方法的特异性验证结果显示该法对单增李斯特菌检测的包容性和特异性均为100%。Veriflow方法的检测时间只需26 h,短于国家标准的检测时间(6 d),检测效率明显提高。【结论】Veriflow是一种准确、特异性强并且操作简单的单增李斯特菌快速检测方法,具有良好的推广前景。     

单增李斯特氏菌核酸层析检测试剂盒在食品检测中的应用

目的研究单增李斯特氏菌核酸层析检测试剂盒的准确性和特异性。方法从市场采集自然样品70份,经过2步增菌后,用核酸层析检测试剂盒进行检测,同时用传统方法进行验证。结果 70份样品试剂盒检测阳性3份,阴性67份,而传统方法检测阳性4份,其中1份阳性样品试剂盒检测为阴性。试剂盒检测的准确率达到98.60%。特异性试验表明该剂盒检测标准菌株特异性好,与常见的食源性致病菌均无交叉反应。结论单增李斯特氏菌核酸层析检测层析试剂盒特异性好,检测准确率高,能够满足食品中单增李斯特氏菌检测的需要。     

单增李斯特菌PCR-ELISA快速检测技术研究

目的建立快速检测单增李斯特菌的PCR-ELISA方法,将其应用于人工污染的食物样品检测。方法根据GenBank数据库资料,应用分子生物学软件DNAMAN6.0和Primer Premier5.0,以单增李斯特菌的致病基因hlyA为基础,选用PCR引物,应用地高辛标记试剂盒,获得单增李斯特菌特异的地高辛标记片段。根据PCR目的片段序列,设计特异性捕获探针,建立了单增李斯特菌PCR-ELISA快速检测方法。应用该方法对不同血清型的单增李斯特菌食品分离株进行了检测,并将PCR方法与PCR-ELISA方法对人工污染单增李斯特菌的牛奶样品的检测敏感性进行了比较。结果应用单增李斯特菌特异的PCR-ELISA方法完成检测约需6h。该方法对单增李斯特菌分离株检测的结果,与国家食源性疾病检测网的鉴定结果100%符合。经过12h的增菌培养,PCR-ELISA方法最低可从25ml样品中检出1CFU,检测敏感性为传统PCR方法的10～100倍。结论建立了单增李斯特菌PCR-ELISA快速检测方法。该方法敏感性高、特异性强、可靠性好,对于提高食源性疾病预警、预测能力,增强检测的时效性和准确性,具有推广应用价值。     

宝鸡市单核细胞增生性李斯特菌污染状况监测结果分析

目的了解宝鸡市食品中单核细胞增生性李斯特菌（简称单增李斯特菌）的污染状况,发现本市受单增李斯特菌污染的高危食品,为预防食物中毒提供科学依据。方法按照国家标准检验方法进行菌株分离,鉴定用APIListe—ria生化鉴定条和VITEK2COMPACT高智能全自动微生物仪。对2005—2011年采集的971份食品进行检测。结果．本市单增李斯特菌的阳性检出率为12．05％。2005年阳性检出率最高,为24％;2011年检出率最低,为6．29％。检测的13类样品中,8类食品受到单增李斯特菌不同程度的污染。生禽肉检出率最高,为32．94％;冰淇淋、果汁、面皮、糕点及饼干、沙拉都均未检出单增李斯特菌。结论宝鸡市单增李斯特菌的污染比较普遍,污染率较高,应该引起监管部门的注意。     

沙门菌检验能力验证结果与分析

目的 验证并分析实验室对食品中沙门菌的检验能力。方法 按照《沙门菌检验作业指导书》要求,进行NIFDCPT-135的3份巧克力样品的前处理,按照GB 4789. 4—2016《食品安全国家标准食品微生物检验沙门氏菌检验》进行沙门菌的分离和生化鉴定,并以VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪对分离出的可疑菌落进行复核鉴定。结果 NIFDCPT-135的3份巧克力,CODE0038样品中检出沙门菌双相亚利桑那亚种; CODE0053样品和CODE0647样品中均检出奇异变形杆菌,未检出沙门菌。VITEK 2 Compact全自动微生物分析仪复核鉴定结果完全一致。结论 本次实验室对巧克力中沙门菌检测能力验证结果合格,验证过程对于提高实验室的检测能力产生了积极作用,亦为提高其他微生物检测能力提供了参考。     

四川省食品单核细胞增生性李斯特菌污染监测

目的 检测四川省食品中单核细胞增生性李斯特菌的污染状况，初步确定污染高危食品，为食物中毒监测提供科学依据。方法用国标法检测，经VITEK32全自动微生物鉴定系统和APllisteria试剂条鉴定。结果 从461份9种食品中检出单增李斯特菌90株，总的污染率为19．5％，其中污染最严重的是冻禽类为47．5％，其次为水产品达42.5％。结论 四川省食品中存在单增李斯特菌的污染，应加强相应的卫生监管力度。     

全自动微生物磁珠分选系统检测单核细胞增生李斯特菌效果研究

目的:研究全自动微生物磁珠分选系统对食品中单增李斯特氏菌的检测效果。方法:取400份自然样品,用磁珠分选系统和国标法对样品进行对比检测。结果:全自动微生物磁珠分选系统相较国标法对自然样品中单核细胞增生李斯特氏菌阳性检出率有一定程度提高。结论:全自动微生物磁珠分选系统简单易用,标准化程度高,可以和国标检测方法相结合以提高单增李斯特氏菌的检出率。     

2010-2013年达州市市售食品单增李斯特菌 污染监测结果分析

摘要:目的　了解达州市市售食品单增李斯特菌污染状况,为科学监管提供参考。方法　依照食品国家安全标准“单核细胞增生李斯特氏菌检验”GB 4789.30-2010方法对达州市81类市售食品进行检测。结果　共检测达州市8类市售食品571件,检出单增李斯特菌20株,其中,水产品中单增李斯特菌检出率最高,为20.0%;3类采样地点中,农贸市场销售的食品中单增李斯特菌检出率高,为5.1%;达州市周边县市单增李斯特菌检出率为8.3%,高于达州市主城区食品的检出率。结论　达州市市售食品存在单增李斯特菌污染,但污染严重程度低于我省部分市州,需要对高风险的食品类别和销售地点进行重点监管。     

单增李斯特菌鉴定方法比较研究

[目的]对单增李斯特菌鉴定方法进行研究。[方法]分别用API检测方法、16SrRNA序列分析法和焦磷酸测序法对17株单核细胞增生李斯特菌进行检测。[结果]3种方法均能准确鉴定单增李斯特菌。[结论]焦磷酸测序方法检测单增李斯特菌特异性强、经济、操作简便、检测快速,为单增李斯特菌的快速、高通量检测提供了一种新的手段。     

2010年细菌能力验证试验结果分析

目的能力验证试验是利用实验室间指定检测数据的对比,确定实验室从事特定测试活动的技术能力[1]。能力验证活动对完善和强化实验室质量管理体系,增强和提高实验室的竞争力具有重要的实际意义[2]。方法 GB 4789.4-2010食品微生物学检验沙门氏菌检验,GB 4789.30-2010食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验。结果 TO504-D样品检出甲型副伤寒沙门氏菌,TO504-E样品检出单核细胞增生李斯特氏菌。结论 CNAS对该实验室检测样品能力验证试验结果的结论为满意。     

焦磷酸测序法检测单增李斯特菌

目的:建立单增李斯特菌的焦磷酸测序检测方法。方法:通过焦磷酸测序法对hly基因的保守片段进行测序来检测单增李斯特菌,从基因序列上对单增李斯特菌进行鉴定。结果:焦磷酸测序法可准确鉴定94株单增李斯特菌。结论:本方法可用于单增李斯特菌的检测鉴定,具有准确、快速和实时等优点,可满足对单增李斯特菌快速、高通量检测的需求。     

食品中产单核细胞增生李斯特菌污染状况的分析

[目的]了解马鞍山市7类食品中单增李斯特菌污染状况,并评价不同方法的检测效果,为食品中单增李斯特菌定量风险评估提供科学依据. [方法]依据国标GB4789.30-2003和国家食源性疾病监测网2007年年度工作手册进行,同时用EB增菌法、LB增菌法和Fraser肉汤培养法对食品样品进行单增李斯特菌分离鉴定并进行比较. [结果]7类482份食品样品,检出单增李斯特菌(L.m)56株,检出率为11.62%;在288份生肉和水产品中检出28株产H2S李斯特菌,阳性率为9.72%. [结论]在7类食品中除冰淇淋外,均不同程度受到L.m污染,尤以速冻面米食品污染严重,其次为熟肉制品、生畜禽肉和水产品.LB增菌法明显优于EB增菌法,Fraser肉汤培养法和LB增菌法检出率相等,而后者操作更方便.     

能力验证试验单核细胞增生李斯特氏菌分离与鉴定

目的能力验证是对实验室检测能力和管理状况进行客观检验的有效方法[1],能力验证活动对完善和强化实验室质量管理体系,增强和提高实验室的竞争力具有重要的意义[2]。方法 GB4789.30-2010食品微生物学检验单核细胞增生李斯特氏菌检验。结果 mini VIDAS检测、荧光PCR检测结果阳性,API、溶血试验等鉴定为单核细胞增生李斯特氏菌。结论CNAS对该实验室检测样品能力验证试验结果结论为满意。     

2013-2014年北京市顺义区熟肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌致病因子检测分析

目的用PCR方法检测熟肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌致病因子,为顺义区熟肉食制品中单增李斯特氏菌污染危害风险评估提供依据。方法利用细菌培养法从熟肉制品监测样本中分离单增李斯特氏菌,PCR检测阳性菌株的16sRNA、侵袭蛋白P60、李氏溶血素、迟发型超敏反应蛋白等致病因子。结果180件食品样本共分离出6株单增李斯特氏菌;通过PCR检测致病因子,6株细菌都检出16sRNA和迟发型超敏反应蛋白的目的基因,5株检出李氏溶血素和侵袭蛋白目的基因,各引物检测目的基因的敏感性略有差异。结论顺义区熟肉制品中单核细胞增生李斯特氏菌污染较为严重,83.33%（5/6）菌株携带李氏溶血素、侵袭蛋白P60等致病因子     

冷冻饮品加工过程中单核细胞增生李斯特菌污染状况分析

目的了解湖南省冷冻饮品生产加工过程中单核细胞增生李斯特菌(以下简称单增李斯特菌)污染状况,为食源性疾病预防和控制提供科学依据。方法采集湖南省2家冷冻饮品生产企业的生产加工各个环节的样品,包括食物样品75份(原料类、中间产品、终产品)和非食物样品279份(环境、仪器设备、人员、工具等),参照GB 4789.30-2010中方法进行单增李斯特菌检测,分离菌株采用脉冲场凝胶电泳法(PFGE)进行分子分型。结果两家企业共监测354份样品,检出28株单增李斯特菌,检出率为7.91%,均在非食品样品中检出(检出率10.04%),其中环境样品的检出率最高(16.07%),人员、仪器设备、工具检出率分别为6.35%、6.58%、10.00%;与车间前处理区(0.96%)、整箱包装区相比(4.44%),灌装区检出率较高(12.20%);O企业非食品样品的检出率(13.94%)高于P企业(4.39%)(χ~2=6.815,P=0.009)。PFGE结果显示,O企业分离的23株单增李斯特菌,分为4个型别,其中有82.6%的菌株为同一型别,P企业分离的5株单增李斯特菌,分为2个型别,其中有4株为同一型别。结论两家冷冻饮品企业在生产加工过程中均检出单增李斯特菌,主要存在于车间灌装区的地面与地面接触物中,两企业检出的单增李斯特菌均存在优势型别,提示应加强消毒与监督,预防单增李斯特菌对冷冻饮品污染的潜在风险。     

2011-2015年渭南市市售食品中单核细胞增生李斯特菌污染状况监测与分析

目的 了解渭南市市售食品中单增李斯特菌(Listeria monocytogenes, LM)的污染状况,确定可能受污染的食品种类,为消除单增李斯特菌引发的食品安全隐患,保证居民饮食安全,有效预防食源性疾病的暴发提供科学依据。 方法 2011-2015年采集渭南市餐饮服务和流通环节销售的10类共739份食品样品,依据GB 4789.30-2010《单核细胞增生李斯特氏菌检验》对单增李斯特菌进行分离和鉴定。 结果 739份样品中共检出单增李斯特菌 22株,总检出率为2.98%;2015年单增李斯特菌的检出率最高(7.05%),其次为2013年(3.41%)和2011年(1.96%);不同种类食品中生畜禽肉中单增李斯特菌的检出率最高(17.31%),其次为冷冻挂浆鱼糜制品(5.00%)和熟肉制品(3.33%);不同采样场所中采自零售便利店的样品单增李斯特菌的检出率最高(9.33%),其次为超市(3.57%)和大中小型餐馆(3.08%);不同年份及不同种类食品中单增李斯特菌的检出率差异均有统计学意义(P<0.05);不同季度中第二季度食品单增李斯特菌检出率最高(3.49%)。 结论 2011-2015年渭南市多种食品及食品餐饮流通环节中单增李斯特菌的污染情况较为普遍,存在引发公共卫生问题的安全隐患,相关部门应加强对食品卫生的监督管理,预防食源性疾病的发生。     

湖州市食品中单增李斯特菌的污染状况调查

目的:了解湖州市食品中单增李斯特菌的污染状况。方法:按国标方法,采用进口显色培养基,对食品进行单增李斯特菌的分离、生化鉴定。结果:281份样品中共检出22株,污染率为7.83%。其中冷冻/藏鸡肉中污染率最高,为25.00%。结论:湖州市食品中单增李斯特菌的污染比较严重,应加强对生肉制品等的监督管理,以防食源性疾病的发生。     

嘉兴市南湖区食品中食源性致病菌污染调查

目的了解食品中食源性致病菌的污染及菌相分布状况,为南湖区提供食品中致病菌污染资料,为食品卫生监督管理提供科学依据。方法依据国标方法,采用全自动微生物分析仪,对食品样品分别进行沙门菌、金黄色葡萄球菌、单增李斯特菌、副溶血性弧菌、海鸥菌、肠出血性大肠杆菌(O157:H7)培养、分离及血清学、生化鉴定。结果共计检测食品样品148份,检出食源性致病菌42株,检出率28.38%。其中沙门菌6株、金黄色葡萄球菌7株、单增李斯特氏菌10株、副溶血性弧菌17株,海鸥菌2株。结论南湖区11种主要食品中存在食源性致病菌污染,以副溶血性弧菌污染最为严重,其次是单增李斯特氏菌和金黄色葡萄球菌。