加味黄芪建中汤对脾虚证肺癌小鼠肿瘤转移及HIF-1α、V-ATPase c mRNA表达的影响

目的:探讨加味黄芪建中汤对脾虚证肺癌小鼠肿瘤转移及HIF-1α、V-ATPase c mRNA表达的影响。方法:复因素法建立脾虚证小鼠模型,进行分组并接种Lewis肺癌瘤株后的第10天,取肺及肿瘤组织,压片法计肺转移结节数,RTPCR法检测V-ATPase c mRNA的表达,Power Vision法检测HIF-1α的表达。结果:与肺癌对照组比较,肺癌脾虚组小鼠肺转移结节数增多(P<0.05),与脾虚肺癌组比较,脾虚肺癌治疗组肺转移结节数减少,HIF-1α表达下调(P<0.01)。结论:加味黄芪建中汤对小鼠肿瘤转移有抑制作用,其机制可能与肿瘤微环境的HIF-1α表达下调有关。     

脾气虚证肺癌小鼠血清IL-12，IL-10的表达及加味黄芪建中汤的影响

目的 研究脾气虚证肺癌小鼠血清IL-12、IL-10的表达及加味黄芪建中汤影响。方法 采用苦寒泻下，劳倦，节食的方法造模，在建立小鼠脾气虚证Lewis肺癌模型后，按实验设计方案处理各组小鼠。造模后加味黄芪建中汤灌胃，脱颈椎处死小鼠，取血清。分别称取每只小鼠瘤重，ELISA方法检测肺癌小鼠血清IL-12，IL-10。结果 “脾气虚”可明显影响肺癌小鼠血清IL-12、IL-10的表达；加味黄芪建中汤可下调肺癌小鼠血清IL-10（P<0.05）的表达，上调肺癌小鼠血清IL-12（P<0.05）的表达。结论 “脾气虚”可导致肺癌小鼠Th细胞的异常漂移，可能是肺癌小鼠免疫调节紊乱的一种表现失调；加味黄芪建中汤有助于恢复肺癌小鼠免疫调节。     

肺癌微环境脾气虚证肿瘤组织相关巨噬细胞microRNA的表达及加味黄芪建中汤干预机制研究

目的〓研究肺癌微环境脾气虚证肿瘤组织相关巨噬细胞microRNA的表达及加味黄芪建中汤的影响。方法〓50只小鼠采用苦寒泻下,劳倦,节食的方法造模,在建立小鼠脾气虚证Lewis肺癌模型后,加味黄芪建中汤灌胃治疗10d,脱颈椎处死小鼠,取肿瘤组织。采用microRNA基因芯片检测正常小鼠巨噬细胞与3组肿瘤组织相关巨噬细胞MicroRNA基因表达的变化。结果〓“脾气虚”组肿瘤组织相关巨噬细胞microRNA的表达谱表达异常（与正常组比较）,不同于肿瘤组,具有独特的microRNA变化,而加味黄芪建中汤可明显双向调节“脾气虚”组肿瘤组织相关巨噬细胞microRNA的表达谱的异常变化,使其恢复正常。结论〓加味黄芪建中汤可使“脾气虚”组microRNA的表达谱接近恢复正常。     

加味黄芪建中汤对脾虚证肺癌小鼠VEGF的表达及MVD的影响

目的探讨加味黄芪建中汤对脾虚证肺癌小鼠血管内皮生长因子(VEGF)和微血管密度(MVD)的影响。方法多因素法建立脾虚证小鼠模型后,进行分组并接种Lewis肺癌。第10天后,取肿瘤组织,采用免疫组化法检测肿瘤组织内VEGF表达及MVD计数水平。结果脾虚证小鼠造模成功;脾虚病机使VEGF表达与MVD计数水平增加(P0.01);加味黄芪建中汤使VEGF表达MVD计数水平降低(P0.01)。结论加味黄芪建中汤可能通过降低VEGF的表达及MVD,进而发挥对脾虚小鼠肿瘤转移的抑制作用。     

加味黄芪建中汤对脾气虚证Lewis肺癌小鼠CXCL12、CXCR4、TGF-β基因表达的影响

目的:研究加味黄芪建中汤对脾气虚证肺癌小鼠趋化因子受体4(CXCR4)、趋化因子12(CXCL12)、转化生长因子-β(TGF-β)基因表达的影响。方法:采用苦寒泻下、劳倦、节食的方法建立小鼠脾气虚证小鼠模型,小鼠右腋部皮下接种肿瘤细胞建立Lewis肺癌模型。小鼠分为正常组、脾气虚组、肺癌组、脾气虚肺癌组、脾气虚肺癌黄芪组,其中脾气虚肺癌黄芪组用中药加味黄芪建中汤灌胃,其余各组均用0.9%NaCl溶液灌胃;连续灌胃9 d。Real-time PCR方法检测肿瘤组织CXCR4、CXCL12、TGF-β的mRNA表达。结果:与肺癌组比较,CXCL12 mRNA水平明显增高(P0.05);与脾气虚肺癌组比较,脾气虚肺癌黄芪组CXCL12 mRNA表达水平明显降低(P0.01)。肺癌组、脾气虚肺癌组和脾气虚肺癌黄芪组的CXCR4、TGF-β的mRNA表达差异无统计学意义(P0.05);脾气虚肺癌黄芪组和脾气虚肺癌组CXCL12 mRNA与CXCR4 mRNA的表达呈正相关(P0.05,P0.01)。结论:加味黄芪建中汤抑制了肿瘤微环境中的趋化因子CXCL12基因的高表达,影响CXCL12/CXCR4通路,可能通过解除肿瘤微环境免疫抑制网络的形成而达到治疗肿瘤的目的。     

加味四君子汤对脾气虚肺癌转移小鼠Fas和Bcl-2 mRNA表达的影响

目的:探讨脾气虚对肺癌转移的影响机制以及加味四君子汤的作用机制。方法:采用苦寒泻下、劳倦、饮食节制复合因素法建立脾气虚小鼠模型,连续16 d。造模第17天眼球取血测血清胃泌素浓度,综合验证脾气虚模型。脾气虚模型成功后C57小鼠右腋下接种Lewis肺癌细胞,制备肺癌小鼠模型。小鼠随机分为正常组、脾气虚模型组、肺癌组、脾气虚肺癌组、脾气虚肺癌健脾组,肺癌组及脾气虚肺癌组生理盐水灌胃,脾气虚肺癌健脾组加味四君子汤灌胃。14 d后观测肺转移结节数,采用Real-time PCR方法检测Fas、Bcl-2基因的mRNA表达。结果:与脾气虚肺癌组比较,肺癌组、脾气虚肺癌健脾组肺转移结节均较少;与肺癌组比较,脾气虚肺癌组Fas mRNA表达下调,Bcl-2 mRNA表达上调;与脾气虚肺癌组比较,脾气虚肺癌健脾组Fas mRNA表达上调,Bcl-2 mRNA表达下调。结论:脾气虚可通过抑制Fas mRNA表达及促进Bcl-2 mRNA表达,促进肺癌转移;加味四君子汤可通过促进Fas mRNA表达及抑制Bcl-2 mRNA表达,抑制肺癌转移。     

黄芪针穴位注射对Lewis肺癌化疗小鼠nm23-H_1蛋白表达的影响

[目的]探讨黄芪针穴位注射对Lewis肺癌化疗小鼠nm23-H_1蛋白表达的影响。[方法]采用Lewis肺癌瘤株传代培养后移植法造模,将60只C57BL/6J近交系小鼠随机分为:正常组、模型组、化疗组、黄芪针穴位注射加化疗组、迈普新加化疗组,运用免疫组化法分析小鼠nm23-H_1的蛋白表达,观察各组小鼠的肿瘤抑制率和肺表面的转移结节数以及饮食和体重情况。[结果]黄芪针穴位注射加化疗对Lewis肺癌小鼠nm23-H_1的蛋白表达有明显促进作用;对肿瘤生长的抑制率最大,达到28.1%;肺脏表面的转移结节最少;能减轻化疗引起的体重减轻和饮食量减少等副作用。[结论]黄芪针穴位注射加化疗能明显抑制小鼠Lewis肺癌,其机制可能与促进小鼠nm23-H_1的蛋白表达有关。还具有减轻化疗引起的体重减轻、食欲下降等副作用的优点。     

加味四君子汤干预脾气虚肺癌survivin基因研究

目的:探讨加味四君子汤对脾气虚肺癌survivin基因的影响。方法:用苦寒泻下、劳倦、饮食节制复合因素法成功建立小鼠脾气虚证模型后,按实验设计方案处理各组小鼠,同时观察小鼠的整体情况。第17天,摘取肺组织,检测肺组织匀浆上清液中TNF-α。造模后以加味四君子汤灌胃14 d,脱颈椎处死小鼠,剥取肿瘤组织计算瘤重及采用RT-PCR方法检测肿瘤组织中survivin基因表达。结果:脾气虚小鼠的整体状况低下,肺组织匀浆中TNF-α与正常组比较差异有统计学意义(P<0.01)。加味四君子汤可明显改善脾气虚肺癌小鼠的整体情况,升高小鼠脾指数,抑制肺癌生长且可下调脾气虚肺癌组织survivin基因表达。结论:加味四君子汤可以抑制脾气虚证肺癌小鼠肿瘤的生长,其机制可能与下调survivin基因表达有关。     

肺金生方对Lewis肺癌小鼠VEGF-C、 nm23表达的影响

目的:探讨肺金生方对Lewis肺癌小鼠VEGF-C、nm23表达的影响。方法:取60只C57BL/6小鼠,常规接种Lewis肺癌瘤株,随机分为生理盐水组、环磷酰胺(CTX)组、中药低剂量组、中药中剂量组、中药高剂量组、CTX加中药组,每组10只。各组给予相应药物灌胃14天后处死,取肺组织观察肺转移数,取肿瘤组织甲醛固定后免疫组化检测VEGF-C、nm23表达。结果:肺金生方中、高剂量对Lewis肺癌小鼠自发肺转移有抑制作用(P<0.01),中药肺金生方各剂量组及CTX、CTX加中药组均能降低VEGF-C表达(P<0.01、P<0.05),而中药中、高剂量组、CTX加中药组均能提高nm23的表达(P<0.01),中药中、高剂量组nm23表达比CTX加中药中剂量组更高(P<0.05)。结论:肺金生方抑制Lewis肺癌小鼠自发肺转移可能与其降低VEGF-C表达和提高nm23的表达有关。     

芪柴煎剂治疗肺脾气虚、肝气郁结证型变应性鼻炎的临床观察

目的：观察芪柴煎剂治疗肺脾气虚、肝气郁结证型变应性鼻炎的临床疗效。方法：以芪柴煎剂为方,对84例肺脾气虚、肝气郁结证型变应性鼻炎患者进行论治。结果：显效44例,有效34例,总有效率为92．9％。结论：芪柴煎剂治疗肺脾气虚、肝气郁结证型变应性鼻炎有显著疗效。     

肺岩宁方对肺癌小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞比例及Foxp3表达的影响

目的：研究肺岩宁方对Lewis肺癌小鼠CD4＋CD25＋调节性T细胞（T regulatory cell,Treg）比例及转录因子Foxp3表达的影响。方法：建立小鼠Lewis肺癌细胞移植瘤模型后,将32只6～8周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为模型组、中药组、化疗组和综合治疗组。给予相应药物干预14d后,观察小鼠的一般状况、饲料消耗量、体质量、去瘤体质量、移植瘤质量、肺脏指数、脾脏指数和胸腺指数,并检测各组小鼠胸腺、脾脏和移植瘤CD4＋CD25＋Treg细胞的比例及Foxp3mRNA的表达。结果：肺岩宁方可降低肺癌小鼠脾脏和胸腺指数,增加去瘤体质量,减少移植瘤质量,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。肺岩宁方可显著降低Lewis肺癌小鼠胸腺、脾脏和移植瘤中的CD4＋CD25＋Treg细胞比例,并抑制Foxp3mRNA的表达,与模型组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：肺岩宁方通过降低CD4＋CD25＋Treg细胞比例、下调Foxp3 mRNA表达而增强机体的抗肿瘤免疫应答发挥抑瘤作用。     

加味黄芪建中汤治疗功能性消化不良临床观察

目的：为观察黄芪建中汤加味治疗功能性消化不良（FD）的临床疗效。方法：选FD患者120例,随机分为治疗组和对照组,每组各60例,分别用加味黄芪建中汤和多潘立酮、多酶片进行治疗,1个月后观察临床效果。结果：治疗组总有效率88.34%,对照组总有效率68.33%,t检验结果表明,两个组之间存在极显著差异（P〈0.01）,说明治疗组疗效明显优于对照组。结论：加味黄芪建中汤能有效治疗FD。     

补肺汤对COPD肺气虚证模型大鼠胸腺指数和脾脏指数的影响

目的 观察补肺汤对慢性阻塞性肺疾病( COPD)肺气虚证模型大鼠胸腺指数、脾脏指数的影响,探讨补肺汤治疗COPD肺气虚证的作用及其机制.方法在90只SD大鼠中随机取10只作为正常对照组,其余作为造模组,采用烟熏及气管滴入脂多糖(lip polysaccharide,LPS)双因素复合制作COPD肺气虚证大鼠模型.造模成...     

复方黄芪合剂对小鼠免疫功能影响简

目的：观察复方黄芪合剂对小鼠免疫功能的影响。方法：将实验小鼠随机分为复方黄芪合剂高剂量组（24g·kg-1）、复方黄芪合剂低剂量组（12g·kg-1）、香菇茵多糖片组（0．03g·kg-1）和蒸馏水对照组,通过测定药物对小鼠的胸腺和脾脏指数、碳粒廓清吞噬指数（K）及校正吞噬指数（d）和血清溶血素抗体积数的影响,观察复方黄芪合剂对机体免疫功能的影响。结果：复方黄芪合剂可增强小鼠的脾脏指数（P〈O．05）及胸腺指数（P〈0．01）．升高碳粒廓清吞噬指数（P〈0．01）及校正吞噬指数（P〈0．01）,提高血清溶血素抗体积数（P〈0．05,P〈0．05）。结论：复方黄芪合剂对小鼠的特异性和非特异性免疫功能有促进作用。     

培土生金法对慢性阻塞性肺疾病线粒体膜电位影响的实验研究

目的观察培土生金法对慢性阻塞性肺疾病(COPD)稳定期模型大鼠肺组织线粒体膜电位(△·ψm)、肺组织病理的影响。方法 120只SD大鼠随机分成正常对照组(n=20)和模型组(n=100)。模型组采用气管内注射脂多糖加烟熏的方法,制作COPD大鼠模型,从模型组中选出大鼠80只,再随机分为黄芪建中汤(高、中、低剂量组)、金水宝胶囊组和生理盐水组。给药8周后,用流式细胞仪检测肺组织线粒体膜电位,在光镜下观察肺病理形态变化。结果 COPD模型组大鼠见肺气肿病理形态变化,黄芪建中汤可明显改善COPD模型组支气管壁和肺泡炎性细胞浸润、肺泡扩张融合等病理改变;COPD模型组大鼠肺脏组织中线粒体膜电位较正常对照组明显下降(P<0.01);与模型组相比:黄芪建中汤(高、中、低剂量组)、金水宝胶囊组肺脏组织中线粒体膜电位明显升高(P<0.01),升高的次序为黄芪建中汤高剂量组>黄芪建中汤中剂量组>金水宝胶囊组>黄芪建中汤低剂量组。黄芪建中汤高剂量组与黄芪建中汤中剂量组、黄芪建中汤中剂量组与金水宝胶囊组,金水宝胶囊组与黄芪建中汤低剂量组之间差异均有统计学意义(P<0.01)。结论通过培土生金法治疗,不仅对COPD大鼠呼吸系统的症状和体征有明显改善,而且可以显著提高肺组织线粒体膜电位,对COPD稳定期的防治具有一定的理论和实践意义。     

十全大补汤与化疗药物联合治疗移植性大肠癌小鼠抗肿瘤作用实验研究

目的：研究经典方剂十全大补汤（以下简称sqdbt）联合常用化疗药物5-氟尿嘧啶（以下简称5-fu）对HT29移植性大肠癌小鼠的抑瘤作用及其可能作用机制。方法：采用HT29移植性大肠癌瘤株制作大肠癌小鼠模型。24h后随机分成单纯肿瘤组、sqdbt组、5-向组、sqdbt＋5-fu组,给药4周后,观察小鼠一般状态的变化,计算胸腺指数与脾指数,脾脏组织制备脾细胞悬液,流式细胞分析T细胞亚群。结果：经药物治疗后,HT29大肠癌小鼠体内肿瘤生长受到不同程度的抑制,sqdbt＋5-向组大肠癌小鼠一般状态较好;胸腺指数与脾指数最高,机体免疫状态最好;T细胞亚群流式分析结果表明,sqdbt＋5-fu组小鼠较单纯肿瘤组小鼠CD4^＋细胞比例显著升高（P〈0．05）,CD8^＋细胞比例显著下降（P〈0．01）,CD4^＋／CD8^＋比值明显升高（P〈0．01）。结论：十全大补汤具有提高HT29大肠癌小鼠生存质量的作用,并可以抑制HT29大肠癌小鼠肿瘤生长,提高机体免疫力,对化疗药物治疗肿瘤有减毒增效的作用。     

小鼠肺肾两虚型肺癌模型的建立

目的建立小鼠肺肾两虚型肺癌模型。方法24只C57BL／6雄性小鼠随机分为正常组、Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型组（简称模型组）和肺’肾两虚型Lewis肺癌细胞移植瘤组（简称复合模型组）,每组8只。将40只同品系小鼠随机分为Lewis肺癌细胞皮下移植瘤模型组（简称模型组）、肺肾两虚型Lewis肺癌细胞移植瘤组（简称复合模型组）,每组20只,以观察生存期。采用烟熏刺激法连续14d建立肺气虚模型,采用皮下注射氢化可的松25mg／kg,1次／日,连续给药14d建立肾虚模型,将Lewis肺癌细胞（2×106个）注射于小鼠右腋部皮下,建立Lewis肺癌细胞移植瘤模型。观察小鼠的一般状况、饲料消耗量、体质量、生存时间、去瘤体重与移植瘤重量、脾脏指数、胸腺指数、肺脏组织病理学改变,并检测各组小鼠胸腺、脾脏和移植瘤CD4＋CD25~Treg细胞的含量、Foxp3 mRNA的表达水平等评价肺’肾两虚型肺癌模型的情况。结果与模型组比较,复合模型组小鼠出现活动减少、睡眠时间缩短、蜷曲、毛发脱落、摄食减少、体质量下降、呼吸浅快、小便量多等肺肾两虚证的表现;其中位数生存时间（19d）显著缩短,生存期范围离散程度较模型组小（P〈0．01）;脾脏指数显著降低（P〈0．01）;小鼠胸腺和脾脏CD4＋CD25＋Treg细胞的含量明显增多,Foxp3 mRNA的表达水平上调（P〈0．01）。结论建立了小鼠Lewis肺肾两虚型肺癌动物模型,为研究中医药抗肺癌提供科学的实验工具。     

参芪扶正注射液对肺癌小鼠化疗后免疫功能调节的影响

目的探讨参芪扶正注射液对肺癌小鼠化疗后免疫功能调节的影响。方法选取20只健康纯系BALB/c雄性小鼠,采用简单随机法分为实验组和对照组各10只,自接种后第14天使用注射用顺铂3 mg/(kg.d)连续腹腔注射7 d,建立肺癌小鼠化疗后动物模型。实验组给予参芪扶正注射液60 mL/(kg.d)腹腔注射给药,对照组给予0.9%氯化钠注射液60 mL/(kg.d)腹腔注射,疗程为10 d。末次给药后24 h检测胸腺指数、脾脏指数,脾淋巴细胞中T细胞亚群、B淋巴细胞、脾淋巴细胞膜、CD3+CD25+百分率及脾淋巴细胞转化能力。结果实验组小鼠脾脏指数、脾CD3+、CD3+CD4+CD8-诱导的脾淋巴细胞比对照组均显著升高(P<0.05)。结论参芪扶正注射液可提高肺癌小鼠化疗后机体免疫功能。     

Experimental study of qi deficiency syndrome and Codonopsis pillosulae and Astragalus injection on the immune response in mice

According to TCM theory "hunger impairs one's Qi", the authors had made mouse model of Qi deficiency syndrome (QDS) through controlling amount of food fed. Compared with mice of normal group, the body weight, thymus index and spleen index obviously decreased in mice of QDS group. The similar effects on humoral immunity and cell-mediated immunity were also obtained. It was found that the Codonopsis pilosulae and Astragalus Injection (CPAI) possessed the promoting action of thymus index, spleen index, humoral immunity and cell mediated immunity on QDS mice and normal mice except spleen index. However, QDS mice were more sensitive to CPAI than the normal mice. 4 x 10(9) SRBC/mouse was administered to normal donor mice by i.p., the super-optimal immunization could obviously induce generation of Ts cells. The CPAI could also reduce generation of Ts cells. This paper had proved that the inherent relation between Qi and immune response of organism, and that the CPAI could promote immune response by means of reducing Ts cells.