保肾片诱导大鼠肾间质成纤维细胞凋亡的实验研究

采用血清药理学方法 ,通过保肾片对大鼠肾间质成纤维细胞的作用研究 ,探讨中药保肾片治疗、延缓慢性肾功能衰竭进展的作用机理。目的 :研究中药保肾片对大鼠肾间质成纤维细胞是否具有诱导凋亡作用。方法 :取SD大鼠肾间质成纤维细胞进行体外培养 ,采用血清药理学方法 ,取含药大鼠血清加入体外培养的细胞中 ,应用倒置显微镜、光镜、透射电镜及流式细胞仪等仪器观察研究保肾片对大鼠肾脏肾间质成纤维细胞的诱导凋亡作用。结果 :与正常大鼠血清对照组相比 ,含药大鼠血清能诱导成纤维细胞发生凋亡。结论 :保肾片延缓慢性肾衰进展的作用机理之一与诱导肾间质成纤维细胞发生凋亡有关。     

保肾片对大鼠肾间质成纤维细胞作用的实验研究

目的 :从细胞水平上探讨对慢性肾功能衰竭疾病治疗有效的中药复方保肾片对体外培养的大鼠肾间质成纤维细胞的影响。方法 :本实验取SD大鼠肾间质成纤维细胞进行体外培养 ,以保肾片喂服SD大鼠后的含药血清加入到培养细胞中 ,应用MTT法和流式细胞仪检测细胞的增殖和凋亡。结果 :喂服中药保肾片的大鼠血清 ,与不喂药的大鼠血清对照组相比 ,显著抑制细胞增殖 (P <0 .0 5 ) ,并且能诱导细胞发生凋亡。结论 :保肾片延缓慢性肾衰进展的作用机理可能与抑制肾间质成纤维细胞增殖和诱导其发生凋亡有关     

保肾片诱导人肾脏系膜细胞凋亡的实验研究

目的 :探讨对慢性肾衰治疗有效的中药复方保肾片对人肾脏系膜细胞是否具有诱导凋亡作用。方法 :以健康志愿者服用保肾片 ,取含药人血清加入系膜细胞体外培养体系中 ,应用倒置显微镜、光镜、透射电镜及流式细胞仪观察研究保肾片对系膜细胞的诱导凋亡现象。结果 :含中药保肾片的血清组 ,与正常人血清对照组相比 ,能诱导系膜细胞发生凋亡。结论 :保肾片延缓慢性肾衰进展的作用机理之一与诱导系膜细胞发生凋亡有关。     

扶肾降浊法含药血清对肾小管间质损害大鼠成纤维细胞COLⅠ及COLⅢm RNA和蛋白表达的影响

目的观察扶肾降浊法中药对系膜增生性肾炎大鼠肾小管间质成纤维细胞Ⅰ、Ⅲ型胶原(COLⅠ及COLⅢ)mRNA和蛋白的调节作用。方法采用扶肾降浊法中药水溶液灌胃Wistar大鼠常规制备含药血清,体外培养12、16、20周龄系膜增生性肾炎大鼠模型的肾间质成纤维细胞,采用实时荧光定量PCR法和Western blotting法研究扶肾降浊法含药血清对病理状态间质成纤维细胞COLⅠ及COLⅢmRNA和蛋白表达的影响。结果系膜增生性肾炎模型大鼠肾间质成纤维细胞的COLⅠ及COLⅢmRNA和蛋白表达上调(P0.05),扶肾降浊法含药血清能下调病理状态肾间质成纤维细胞的COLⅠ及COLⅢmRNA和蛋白表达(P0.05)。结论扶肾降浊法含药血清可下调病理状态肾间质成纤维细胞的COLⅠ及COLⅢmRNA表达,减少COLⅠ及COLⅢ蛋白表达,对肾间质成纤维细胞具有保护作用。     

益肾降浊方防治慢性肾衰肾组织纤维化的机理研究

目的:观察益肾降浊方对5/6肾切除慢性肾衰(CRF)大鼠肾组织TGF-β_1、BMP-7及体外培养SD大鼠肾小球系膜细胞(MC)和肾间质成纤维细胞(FC)增殖情况,探讨益肾降浊方治疗慢性肾功能衰竭的机理。方法:采用动物模型和细胞培养的方法。清洁级7周龄雄性SD大鼠60只,随机分为空白组、假手术组、CRF模型组、CRF对照组、CRF治疗组。分别进行手术造模并予不同药物治疗后,免疫组化法观察肾组织TGF-β_1、BMP-7;体外培养SD大鼠肾小球系膜细胞(GMC)、肾间质成纤维细胞(RIF),制备各组含药血清,细胞给药后MTT法测定细胞增殖情况。结果:益肾降浊方可降低CRF大鼠血清BUN、SCr(P0.05),降低残余肾组织中TGF-β_1而提高BMP-7(P0.05);肾组织HE染色结果示肾组织纤维化减轻;益肾降浊方含药血清能抑制体外培养SD大鼠GMC和RIF的增殖(P0.05)。结论:益肾降浊方能够有效地减缓慢性肾衰肾组织纤维化发展,是防治慢性肾衰的有效方药。     

保肾冲剂血清对人系膜细胞增殖及分泌IL-1β的影响

目的 探讨保肾冲剂含药血清对人膜细胞（MC）增及分泌炎性介质的作用。方法 应用血清药理学方法，观察不同浓度保肾冲剂含药血清对体外培养的人肾小球系膜细胞增殖及分泌IL－1β水平的影响。结果 3种浓度含药血清均能在一定程度上对抗LPS诱导的MC增殖及IL－1β蛋白质产量的增加，这种对抗作用呈现出一定的剂量依赖性。结论 保肾冲剂血清能抑制MC增殖并能干预活化MC分泌细胞因子。     

保肾冲剂血清对人系膜细胞增殖及分泌IL-6的影响

目的 探讨保肾冲剂含药血清对人系膜细胞（MC）增殖及分泌炎性介质的作用。方法 应用血清药理学方法，观察不同浓度保肾冲剂含药血清对体外培养的人肾小球系膜细胞增殖及分泌IL－6水平的影响。结果 三种浓度含药血清均能在一定程度上对抗LPS诱导的MC增殖及IL－6蛋白质产量的增加，这种对抗作用呈现出一定的剂量依赖性。结论 保肾冲剂血清能抑制MC增殖并能干预活化MC分泌细胞因子。     

黄芪促进高糖环境下肾间质成纤维细胞表达肝细胞生长因子的作用

目的体外研究高糖刺激人肾脏间质成纤维细胞时肝细胞生长因子(HGF)表达,同时进一步观测了黄芪延缓糖尿病肾病进展是否与影响 HGF 表达相关。方法将人肾脏间质成纤维细胞培养于不同浓度葡萄糖中,分不同时间段采用 RT-PCR 方法检测 HGF mRNA 转录水平,ELISA 方法检测 HGF 蛋白分泌。之后用黄芪含药血清刺激细胞,观察 HGF 表达情况。结果高浓度葡萄糖培养的细胞早期就有 HGF 表达,之后表达逐渐下降。说明 HGF 表达与高糖作用存在相关性。结果进一步证实,黄芪含药血清可以显著刺激细胞表达 HGF。结论黄芪可以通过诱导 HGF 的产生,起到抗纤维化作用,从而延缓糖尿病肾病的进展。     

肾炎灵诱导大鼠肾系膜细胞凋亡的研究

目的研究肾炎灵对大鼠系膜细胞凋亡的影响。方法取SD大鼠肾脏进行肾系膜细胞体外培养,用肾炎灵喂服系膜增生性肾炎大鼠,以含药大鼠血清加入到体外培养的大鼠系膜细胞中,应用倒置显微镜、光镜、流式细胞仪等观察、检测肾炎灵对系膜细胞凋亡的影响。结果喂服肾炎灵大鼠的血清可诱导部分系膜细胞发生凋亡。结论肾炎灵的作用机制可能与其诱导肾系膜细胞发生凋亡有关。     

黄芪对高糖环境下肾间质成纤维细胞表达纤溶酶原激活物抑制剂的影响

目的:体外研究高糖刺激人肾间质成纤维细胞时纤溶酶原激活物抑制剂(PAI-1)的表达,以及黄芪延缓糖尿病肾病与其相关性。方法:将人肾间质成纤维细胞培养于不同浓度葡萄糖中,24 h 后采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测 PAI-1 mRNA 转录水平,免疫组化方法检测 PAI-1蛋白的表达。随即用黄芪药物血清刺激细胞,观察 PAI-1表达情况。结果:高浓度葡萄糖培养的细胞 PAI-1表达升高,并呈现剂量和时间依赖性。说明 PAI-1表达与高糖作用存在相关性。同时等渗甘露醇也可以诱导 PAI-1表达。黄芪含药血清可以显著抑制细胞表达 PAI-1。结论:高糖可诱导 PAI-1表达,抑制细胞外基质成分降解。黄芪通过抑制 PAI-1的产生,起到抗纤维化作用,从而延缓糖尿病肾病的进展。     

宁肾颗粒对LPS诱导大鼠系膜细胞增殖及凋亡的影响

目的：本研究旨在探讨宁肾颗粒对脂多糖（LPS）诱导大鼠系膜细胞（MCs）增殖及凋亡的影响。方法：采用MTT法、细胞流式技术、Western bolt法检测不同剂量宁肾颗粒中药血清对LPS诱导大鼠系膜细胞增殖、凋亡及血小板源生长因子-BB（PDGF-BB）蛋白表达的作用。结果：含药血清能抑制LPS诱导大鼠MCs增殖、促进MCs凋亡,下调PDGF-BB蛋白的过度表达。结论：宁肾颗粒可抑制LPS诱导的MCs异常增殖、促进MCs凋亡,其分子机制可能与抑制PDGF-BB蛋白的过度表达有关。     

中医药抗肾间质纤维化机理研究进展

近年来，中医药研究者在防治肾间质纤维化方面进行了大量的探索性研究，已发现许多中药（包括单味中药和复方中药），可通过抑制成纤维细胞增殖和促使其凋亡等发挥抗肾纤维化作用，从而延缓肾脏疾病的进展，这将为中医药防治肾纤维化开辟广阔的应用前景。现将相关研究进展综述如下。     

中药复方延缓肾间质纤维化研究进展

肾间质纤维化(renal interstitial fibrosis)是慢性肾脏病(chronic kidney disease)的基本病理改变，延缓肾间质纤维化对于改善CKD的进展结局和患者生存质量具有重要意义。近年来，国内外大量实验研究证实中药复方制剂在延缓慢性肾脏病进展，改善肾间质纤维化方面具有显著疗效，但是缺乏中医药对延缓RIF作用机制的系统认识。通过检索国内外中药复方制剂在细胞、动物实验方面的相关研究，对近5年来中药复方在延缓肾间质纤维化机制方面的研究进展进行综述，以期为中医药抗肾间质纤维化、延缓CKD进展提供更多可能性。     

慢性肾小管间质病变中药干预机制研究进展

肾小管损伤及间质纤维化（RIF）作为独立危险因素,比肾小球病变对肾脏病预后的影响更为重大。近年来对中药防治RIF的作用机制研究取得了一定的进展,其机理主要包括：抑制肾小管间质炎症反应始动或促动因素、抑制肾小管上皮细胞一间充质转变作用、激活细胞外基质降解酶途径、抑制肾小管上皮细胞凋亡、抑制肾间质成纤维细胞活化及增殖等,这些作用机制的揭示对指导临床用药提供了可靠的药理学依据。     

寿尔智胶囊对体外培养大鼠海马神经元细胞凋亡的影响

目的:研究寿尔智胶囊对海马神经元细胞凋亡的影响,从而探讨中药防治阿尔茨海默病(Alzheimer's dementia,AD)的机理.方法:运用血清药理学方法、流式细胞仪技术等,观察寿尔智胶囊含药血清对体外培养新生Wistar鼠海马神经元细胞凋亡的影响.结果:寿尔智胶囊含药血清可以保护培养的海马神经元,具有抗凋亡作用.结论:寿尔智胶囊有助于老年痴呆的防治,可发挥延缓衰老作用.     

大黄素对狼疮性肾炎成纤维细胞生物学行为的影响

目的：观察中药大黄素对狼疮性肾炎（ＬＮ）肾间质成纤维细胞生物学行为的影响。方法：将ＬＮ患者肾活检组织体外培养分离出成纤维细胞，分别用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法和流式细胞术检测不同温度的大黄素对人肾成纤维细胞增殖，凋亡及ｃ－ｍｙｃ蛋白水平表达情况。结果：大黄素能明显抑制人肾成纤维细胞的分裂增殖，并通过促使ｃ－ｍｙｃ蛋白高水平表达诱导细胞发生凋亡。结论：大黄素有抑制成纤维细胞生殖和促其凋亡的作用，从而达到减     

中药含药血清对体外培养类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞影响的实验研究

目的：归纳总结中药含药血清对体外培养成纤维样滑膜细胞的影响的实验研究进展,为相关研究提供参考。方法：通过分析中药含药血清对体外培养成纤维样滑膜细胞影响的相关文献,探讨治疗类风湿关节炎的机理。结果：以含药血清代替中药粗提物进行实验,能较准确的反映药物在体内的生物转化过程及其作用结果。结论：运用血清药理学方法及体外培养细胞的方法进行类风湿关节炎成纤维样滑膜细胞的实验研究方便快捷。     

复方肾华片对5/6肾切除大鼠的疗效观察

目的观察复方肾华片对大鼠残余肾功能的保护作用。方法以安博维为对照,复方肾华片治疗5/6肾切除大鼠12周后,观察血压、尿蛋白、血生化及肾脏病理变化情况。结果复方肾华片能降低5/6肾切除大鼠的血清肌酐、尿素氮(P<0.05),24h尿蛋白排泄(P<0.01),降低血清胆固醇浓度(P<0.05),升高血清白蛋白,减轻肾小球硬化及肾间质纤维化程度,但对大鼠血压没有影响。结论复方肾华片可以通过非血流动力学机制,减轻5/6肾切除大鼠的肾损害,延缓慢性肾功能不全的进展。     

肾衰保肾胶囊延缓腺嘌呤致大鼠慢性肾功能衰竭的实验研究

目的：探讨中药方剂肾衰保肾胶囊对腺嘌呤致慢性肾功能衰竭（CRF）大鼠肾功能的影响。方法：通过灌服腺嘌呤建立大鼠慢性肾衰模型，检测各组大鼠血浆BUN，Scr的变化，肾组织纵切后做HE、Masson染色，在光学显微镜下观察肾脏病理改变与肾纤维化情况。结果：肾衰保肾胶囊能够显著改善腺嘌呤致CRF大鼠的肾功恶化（P〈0．01），降低蛋白尿（P〈0．01），有效延缓慢性肾衰竭的进展。     

中医药防治肾间质纤维化的研究进展

肾间质纤维化 (renal interstitial fibrosis,RIF)是各种肾脏疾病发展到慢性肾功能衰竭的共同途径 ,主要病理特征为肾间质成纤维细胞的增生和细胞外基质如 、 、 、 型胶原、纤维连接蛋白、层粘蛋白的过度积聚。近年来中医药在肾间质纤维化防治方面亦开展了探索性的相关研究 ,并取得初步成果 ,现将此方面的进展综述如下。单味中药研究　 1　补益药　 1 .1　黄芪 :牟氏[1 ] 将人肾脏间质成纤维细胞分别培养于不同浓度的葡萄糖中 ,于 2 4 h后用 RT-PCR方法检测 HGFm RNA的转录水平 ,继而用不同浓度的肝细胞生长因子 (HGF)刺激细胞来观…