血红蛋白双重杂合子对不同糖化血红蛋白检测系统结果的影响

目的观察Hb Q-H和Hb J-Bangkok合并β地中海贫血(简称"地贫")双重杂合子患者糖化血红蛋白A1c(HbA1c)对不同糖化血红蛋白检测系统结果的影响。方法收集20例表观健康成年人和20例2型糖尿病(T2DM)患者标本,用于5个糖化血红蛋白检测系统间的结果比对。收集1例Hb Q-H患者标本和1例Hb J-Bangkok合并β地贫双重杂合子患者标本,用Capillarys2行血红蛋白毛细管电泳,用gap-PCR、PCR-RDB和基因测序方法鉴定2例异常标本的珠蛋白基因。同时用BioRad VARIANTⅡ(VⅡ)、BioRad VARIANTⅡTurbo2.0(VⅡ-T2.0)、Capillarys 2 Flex Piercing(C2FP)、Primus Ultra2(Ultra2)、Roche PPI 800(PPI 800)5个糖化血红蛋白检测系统检测所有标本的HbA1c结果,其中对于双重杂合子标本,每个检测系统检测3次,保存图谱和检测结果并对比分析。结果 Hb Q-H标本的基因型为--α~(QT)/--SEA;β~N/β~N,珠蛋白α1链发生HbA1 CD74GC突变,形成Hb Q-Thailand血红蛋白变异体,无正常的α珠蛋白肽链。Hb J-Bangkok合并β地贫的基因型为:αα/αα;β~(CD56)/β~(CD41-42),珠蛋白β链第56位密码子发生GGCGAC点突变,形成Hb J-Bangkok血红蛋白变异体,无正常的β珠蛋白肽链。对于Hb Q-H标本,5个HbA1c检测系统中有3个检测系统报告了HbA1c结果;VⅡ和VⅡ-T2.0系统图谱与正常图谱存在明显区别,未报告HbA1c结果;C2FP系统图谱与正常图谱相似,HbA1c结果为3.7%;Ultra2系统和PPI系统报告了HbA1c结果,分别为5.3%和5.7%,不存在异常提示。对于Hb J-Bangkok合并β地贫标本,5个HbA1c检测系统中有3个检测系统报告了HbA1c结果;VⅡ系统图谱与正常图谱存在明显区别,未报告HbA1c结果;VⅡ-T2.0系统图谱与正常图谱存在区别,存在84.9%的P4峰,报告了HbA1c结果为4.7%;C2FP系统图谱与正常图谱存在明显区别,未报告HbA1c结果。Ultra2系统和PPI系统均报告了HbA1c结果,分别为4.7%和3.8%,不存在异常提示。结论 Hb Q-H患者与Hb J-Bangkok合并β地贫患者标本均不含正常的HbA,应无HbA1c结果。对于二者,VⅡ系统及VⅡ-T2.0系统的结果图谱存在明显异常,提示结果不可报告;Hb Q-H对C2FP系统存在明显干扰,报告了HbA1c结果,而Hb J-Bangkok合并β地贫标本C2FP系统未报告HbA1c结果;二者对PPI及Ultra2系统存在明显干扰。     

异常血红蛋白NewYork合并β地中海贫血的临床表型分析

正血红蛋白病是一类常染色体隐性遗传病,可分为地中海贫血(简称地贫)和异常血红蛋白病2类。常见的地贫可分为α地贫和β地贫,其特征是珠蛋白肽链的合成减少或缺如,而异常血红蛋白病则表现为珠蛋白肽链结构的异常。地贫和异常血红蛋白病携带率高,防控非常重要。迄今为止,在我国已经发现多种α和β链异常血红蛋白病,其中南方地区最常见者包括Hb Q-Thailand、Hb G-Chinese、Hb E、Hb NewYork和Hb Bangkok[1-2]。其     

免疫比浊法测定血清糖化血红蛋白A1c

免疫比浊法测定血清糖化血红蛋白Ａ１ｃ郭健陆红刘宏谢洁红胡汉成杨振华（卫生部临床检验中心特检室，北京１００７３０）关键词糖化血红蛋白Ａ１ｃ免疫比浊法本文介绍的免疫比浊法测定ＨｂＡ１ｃ，可用于自动生化分析仪，精密度好，操作简便。１原理免疫比浊法测定ＨｂＡ...     

警惕糖化血红蛋白A1c在地中海贫血患者中误用

毛细管电泳法检测3例不同基因突变和缺失的地中海贫血患者结果显示3例患者Hb均异常,用阳离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)检测其糖化血红蛋白A1c(HbA1c)图谱均出现异常,而用硼酸盐亲和层析法、免疫比浊法检测结果均在仪器可报告范围内,但该结果并不能代表患者HbA1c水平。检测HbA1c时要了解患者的Hb是否存在异常,以避免指标误用。     

毛细管电泳法糖化血红蛋白检测系统在缺铁性贫血患者中的应用

目的探讨缺铁性贫血（IDA）对糖化血红蛋白(Hb A_1c)检测的影响以及毛细管电泳法检测Hb A₂在IDA中的应用。方法收集IDA确诊患者79例,以79名血常规和铁蛋白均正常者作为对照组。分别检测2个组的空腹血糖、糖化血清蛋白、铁蛋白、Hb A_1c及Hb A₂。采用2种方案研究IDA对Hb A_1c检测的影响:（1）检测对照组和IDA组Hb A_1c,分析IDA对Hb A_1c结果的影响;（2）采用毛细管电泳法检测Hb A₂,比较IDA患者治疗前后各项血液学指标[包括血红蛋白（Hb）、红细胞平均体积（MCV）、平均红细胞血红蛋白含量（MCH）]及铁蛋白、Hb A_1c、Hb A₂的差异。分析毛细管电泳法检测对照组和IDA组的Hb A₂结果,通过受试者工作特征（ROC）曲线建立毛细管电泳法Hb A₂筛查IDA的临界值。结果对照组和IDA组空腹血糖和糖化血清蛋白差异均无统计学意义（P均>0.05）,而铁蛋白和Hb A_1c结果差异均有统计学意义（P<0.05）。IDA组治疗前后Hb、MCV、MCH、铁蛋白、Hb A_1c及Hb A₂结果差异均有统计学意义（P<0.01）。毛细管电泳法Hb A₂筛查IDA的临界值为2.25%,敏感性为93.4%,特异性为92.1%。结论 IDA对Hb A_1c的检测会产生一定的影响。毛细管电泳法在检测Hb A_1c的同时还能提供Hb A₂结果,可用于筛查IDA。     

Premier Hb9210糖化血红蛋白分析仪性能验证

目的：对Premier Hb9210糖化血红蛋白分析仪的分析性能进行验证,以了解该检测系统在本室能否达到厂家声明的分析性能指标以及我国《糖化血红蛋白实验室检测指南》的要求,是否适用于我室进行临床检测。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)EP15-A2文件、《临床化学设备线性评价指南》、《临床实验室检验项目参考区间的制定》[4]及仪器说明书对该仪器配套检测系统的准确度、携带污染、精密度、线性范围、参考区间按顺序进行验证。结果准确度验证全部结果相对偏差满足厂家声明要求,绝对偏差满足《糖化血红蛋白实验室检测指南》的要求,配对资料T检验A组与B组、A组与C组,B组与C组P值分别为0.718、0.673、0.936,两者差异无统计学意义。携带污染验证高-低标本检测值(x±s)为5.02±0.057, CV％为1.14％;低-低标本值(x±s)为4.93±0.069,CV％为1.39％;携带污染为0.09,误差限度为0.21。精密度验证3个不同水平的HbA1c 样本,检测结果(HbA1c％,x±s)为4.78±0.077、7.93±0.086、11.56±0.083,不精度(CV％)分别为1.61、1.08、0.72不精密度分别为0.82％,0.72％和0.79％。糖化血红蛋白浓度在4.0％~18.7％内回归分析呈线性,直线回归方程：y=1.005x-0.142,R2=1≥0.95。结论 Premier Hb9210糖化血红蛋白分析仪在我室能达到厂家声明的分析性能指标以及《糖化血红蛋白实验室检测指南》的要求,适用于我室临床检测糖化血红蛋白A1c(HbA1c)。     

两种方法检测糖化血红蛋白比较分析

目的对免疫比浊法与高效液相色谱法(HPLC)检测糖化血红蛋白进行方法学比较。方法采用免疫比浊法与高效液相色谱法测定100例糖尿病患者糖化血红蛋白,分别进行精密度、线性范围及相关性分析。结果免疫比浊法与HPLC法的线性范围分别为3.1%～14.8%和4.0%～18.1%,批内、批间变异系数(CV)均小于5%,两种方法测定糖化血红蛋白的结果差异无统计学意义(P>0.05),相关性好,回归方程为Y=1.016 X+0.336%(r=0.977 8)。结论两种检测方法均能较好地满足临床需求。     

不同方法检测缺铁性贫血患者糖化血红蛋白A1c的一致性

目的观察不同方法检测缺铁性贫血(IDA)患者糖化血红蛋白A1c(HbA1c)的一致性。方法参照美国国家糖化血红蛋白标准化计划(NGSP)认证Ⅰ级实验室要求,以通过NGSPⅠ级实验室认证的VariantⅡ检测系统为参考系统,以分别代表离子交换高效液相色谱法(IE-HPLC)、酶法、免疫比浊法和亲和层析高效液相色谱法(AC-HPLC)的VariantⅡTurbo、Modular P、Leadman、Primus Ultra2检测系统为实验系统,用20份健康体检者和20例糖尿病(DM)患者的HbA1c浓度范围为4.2%~14.6%的样品进行比对;再以通过比对的4个检测系统和VariantⅡ检测系统检测20例IDA患者和20例IDA合并DM患者样品并对检测系统间的数据进行直线回归分析。结果 5个检测系统检测20例IDA患者和20例IDA合并DM患者样品,直线回归分析斜率范围为0.973 0~1.023 1,r2范围为0.995 5~0.998 1,偏差的95%CI的最大范围为-0.48%~0.48%、百分偏差的最大范围为-5.62%~5.95%。结论 IDA患者HbA1c水平用不同检测方法可获得一致的检测结果。     

毛细管电泳法快速检测糖化血红蛋白

目的建立毛细管电泳法快速检测糖化血红蛋白（HbA1C）的方法并初步探讨其临床应用价值。方法实验中采用长30 cm、内径25μm的未涂层熔融石英毛细管,利用血红蛋白在415 nm波长处的特异性吸收峰,二极管阵列（PDA）检测。结果在8分钟内完成整个实验,HbA1C和非HbA1C成功分离,峰型清晰锐利,且能对HbA1C进行定量分析。结论该法高效、快速、重复性好,具有一定的推广应用价值。     

Capillarys 2 Flex Piercing 糖化血红蛋白检测系统性能验证

目的：评价 Capillarys 2 Flex Piercing 全自动毛细管电泳仪检测糖化血红蛋白(HbA1c)的检测性能。方法参照美国临床实验室标准化协会(CLSI)及厂家声明对 Capillarys 2 Flex Piercing 全自动毛细管电泳仪测定 HbA1c 的精密度、正确度、可报告范围、抗干扰能力、不同检测系统结果一致性进行验证。结果Capillarys 2 Flex Piercing 全自动毛细管电泳仪检测正常HbA1c 水平的批内、批间变异系数(CV)分别为0.80%、0.92%,病理 HbA1c 水平的批内、批间 CV 分别为1.10%、1.32%;正确度验证的偏差均小于厂家声明的5%;可报告范围验证的回归方程为 Y =1.002X +0.023(r 2=0.023,P =0.000),在4.4%~18.3%范围内的检测结果能达到线性要求;在 HbA1c 浓度分别在低、中、高水平时,干扰物总胆红素、脂血、血红蛋白对测定HbA1c 的偏差绝对值均未超过5%;与 Bio-Rad Variant Ⅱ糖化血红蛋白分析仪检测结果的一致性分析的回归方程为 Y =0.9877X -0.1344(r 2=0.9942,P =0.000),呈良好的线性关系;基于生物学变异的最佳允许总误差为2.31%。结论Capillar-ys 2 Flex Piercing 全自动毛细管电泳仪检测 HbA1c 的性能达到 CLSI 指南和厂家说明书的要求,可以满足临床检测需求。     

分析前标本不同处理方式对糖化血红蛋白检测结果的影响

目的探讨糖化血红蛋白(HbA1c)分析前标本不同处理方式对测定结果的影响。方法收集3种HbA1c水平的肝素抗凝全血,分别用20μL全血+500μL试剂4和20μL红细胞+1000μL试剂4用免疫比浊法测定。结果低、中、高值的HbA1c用不同处理方式的检测结果差异有统计学意义。结论在日常工作中应重视HbA1c测定的标准化。     

免疫比浊法检测糖化血红蛋白A1c的性能评价

目的评价Roche公司第3代免疫比浊法检测糖化血红蛋白A1c(HbA1c)的性能。方法分析免疫比浊法检测HbA1c的精密度、线性,评价Hb、胎儿Hb(HbF)、三酰甘油(TG)、总胆红素(T-Bil)和不稳定HbA1c对HbA1c检测的影响、抗干扰能力及其与HPLC法测HbA1c结果的相关性;比较免疫比浊法检测HbA1c与高效液相色谱(HPLC)法的一致性。结果免疫比浊法检测HbA1c的变异系数(CV)均<2.5%。在4.7%～15.4%范围内,理论值与实测均值呈线性相关,r2值达0.999。Hb、HbF、T-Bil、TG水平分别在57～177 g/L、1.7%～11.7%、27～265μmol/L、3.2～9.85 mmol/L范围时,差异百分比均<5%;当HbF>13.5%时,差异百分比>5%。不稳定GHb(样本葡萄糖糖含量0～55.56 mmol/L)对HbA1c检测无影响。免疫比浊法(X)与高效液相色谱法(Y)相关性良好,Y=1.0188X-0.2271,r2=0.971 3。结论免疫比浊法检测HbA1c性能良好,适合临床应用。     

毛细管电泳法检测糖化血红蛋白的分析性能评估

目的评估毛细管电泳(CE)法检测糖化血红蛋白(Hb A1c)的精密度、正确度、线性和抗干扰性,并与高效液相色谱法(HPLC)进行比对。方法根据不同的评估内容,收集相应样本,分别使用SEBIA CAPILLARYSTM2 Flex Piercing毛细管电泳仪(毛细管电泳法)、ARKRAY HA-8160全自动Hb A1c分析仪(HPLC)和IFCC参考方法检测Hb A1c。采用SPSS 19.0软件进行统计描述及线性回归模型分析。结果毛细管电泳法检测Hb A1c在常见浓度(4.91%~9.67%)下的不精密度均2%;与IFCC参考方法,相关程度较好(R2=0.993);当Hb A1c浓度为5.0%~17.6%时,毛细管电泳法具有良好的线性(R2=0.995),对氨甲酰化血红蛋白、不稳定Hb A1c、胆红素、乳糜微粒等具有较好的抗干扰能力(绝对偏倚≤0.5%)。毛细管电泳法Hb A1c的测定值与HPLC具有较好的相关性(R2=0.993)。结论毛细管电泳法的精密度、正确度、线性和抗干扰性等分析性能均符合临床实验室常规检测Hb A1c的要求。     

金标法全定量检测糖化血红蛋白

糖化血红蛋白 (ＨｂＡｌｃ)能准确反映过去 4～ 8周血糖的平均水平。因此 ,在临床上 ,ＨｂＡｌｃ的含量已作为反映糖尿病病情控制情况的一个重要指标 ,我们采用金标法与免疫比浊法检测临床血标本ＨｂＡｌｃ的含量 ,对结果进行统计分析 ,并对两法进行了比较。一、材料和方法1.标本采集　用免疫比浊法检测临床采集的 46例标本 ,结果显示其中 10例标本ＨｂＡｌｃ含量在 4%～ 6%之间 ,18例在 6%～ 8%之间 ,12例在 8%～ 10 %之间 ,其余 6例则高于 10 %。再用金标法重新检测 ,收集结果并进行统计分析。2 .仪器与试剂　挪威ＮｙｃｏＣａｒｄＰｈａ…     

两种方法检测糖化血红蛋白结果的对比分析

目的比较2种方法测定糖化血红蛋白(HbA1c)的结果之间的差异。方法采集糖尿病患者静脉全血标本,使用两种方法,即胶乳增强免疫比浊法在日立7170A全自动生化分析仪上,与高效液相色谱法(HPLC)在全自动糖化血红蛋白仪BIO-RADD10上,同时测定其HbA1c,对结果进行比较分析。结果 HPLC(X)与胶乳增强免疫比浊法(Y)测定结果呈明显正相关(r=0.9682);回归方程:y=1.127x-0.004。但胶乳增强免疫比浊法测定HbA1c的结果值较HPLC法明显偏高(P<0.01),以HPLC法为参照,胶乳增强免疫比浊法结果的相对偏倚为12.65%。结论实验室应尽量采用HPLC法为检测方法,或以其为参考方法对胶乳增强免疫比浊法进行校准或设置相应的参考区间,以提高结果的准确性与可靠性。     

3种仪器检测糖化血红蛋白结果分析

目的 比较3种仪器检测糖化血红蛋白的结果。方法 分别采用D-10全自动糖化血红蛋白分析仪(离子交换色谱法)、HA-8160全自动糖化血红蛋白分析仪(亲和色谱法)和7170A全自动生化分析仪(免疫比浊法)检测75例全血样本,对检测结果进行方差齐性检验,方差齐后,进行单因素方差分析和相关性分析。结果 D-10全自动糖化血红蛋白分析仪和HA-8160全自动糖化血红蛋白分析仪测定结果呈正相关(r2=0.996),回归方程为Y=0.953 X+0.519;D-10全自动糖化血红蛋白分析仪和7170A全自动生化分析仪测定结果呈正相关(r2=0.996),回归方程为Y=0.925 X+0.576;HA-8160全自动糖化血红蛋白分析仪和7170A全自动生化分析仪测定结果呈正相关(r2=0.998),回归方程为Y=0.969 X+0.081。结论 在保证实验室质量控制的前提下,均可以采用以上3种不同的仪器检测糖化血红蛋白。     

标本的处理方法对糖化血红蛋白测定结果的影响

目的探讨用不同方法处理标本对糖化血红蛋白(HbA1c)测定结果的影响。方法收集4种不同HbA1c水平的EDTAK2和肝素钠抗凝全血,分别用10μl全血+400μl溶血剂、10μl红细胞+800μl溶血剂和10μl洗涤红细胞+800μl溶血剂处理后用免疫比浊法测定HbA1c。结果全血与红细胞、洗涤红细胞的HbA1c测定结果差异均有统计学意义(P<0.05),不同抗凝方法的测定结果差异无统计学意义,红细胞和洗涤红细胞测定结果差异无统计学意义。结论 HbA1c检测的标准化应予以重视。     

自制糖化血红蛋白质控品及其临床应用

目的 利用血液标本制备低、中、高3个浓度水平糖化血红蛋白A1c(HbA1c)质控品。方法 收集健康体检者静脉血标本,离心去除血浆后的红细胞经洗涤后加入0.01 mol/L pH 6.8磷酸盐缓冲液溶解红细胞,在血红蛋白液中加入终浓度555.6 mmol/L葡萄糖,37℃水浴48 h,当HbA1c达到预期值后,4℃透析24 h去除葡萄糖。异常水平质控品(水平2、水平3)分别用水平1与37℃温育生成的高值HbA1c混合而成。结果 葡萄糖浓度≤55.5 mmol/L时,37℃温育24～72 h, HbA1c几乎没有变化;葡萄糖终浓度为555.6 mmol/L,温育48 h即可达到预期值(13.0%～16.0%)。-20℃冰冻保存的质控品,开瓶复融后至少稳定14 d,瓶间均匀性CV均<2.0%,反复冻融8次对结果无影响,-20℃冰冻保存1年结果稳定。结论 采用健康体检者静脉血标本制备HbA1c质控品,稳定性良好、标本易得、方法简单,便于推广使用。     

尿糖、血糖、糖化血清蛋白和糖化血红蛋白在糖尿病中的临床应用

糖尿病（diabetes mellitus，DM）是一种多病因的代谢紊乱综合征，它是由于胰岛β细胞分泌不足和／或周围组织细胞对胰岛素的生物效应有抵抗性或耐受性，或者两者兼有而使血糖升高。目前临床上以2型糖尿病常见。其中有相当一部分患者因为其临床表现不典型或受就医条件的限制，并没有得到及时诊治，而是在求治其它疾病时才被发现，