地鳖纤溶蛋白对荷S180和H22小鼠的抑瘤作用研究

目的 研究地鳖虫纤溶活性先导蛋白(EFP)对荷S180和H22小鼠肿瘤的抑制作用.方法 通过体外实验,构建荷瘤小鼠模型,药物实验分为阳性对照组(环磷酰胺),阴性对照组(生理盐水),药物高浓度组、中浓度组和低浓度组.实体瘤通过瘤重计算抑瘤率,腹水瘤通过细胞浓度计算抑瘤率.结果 EFP对S180腹水瘤有较好的抑制率, 药剂量为2.90mg/kg的抑制率为69.56%,明显高于环磷酰胺(20mg/kg)的51.75%的抑制率;EFP对S180实体瘤有较好抑制作用,药剂浓度为1.45 g/kg时,抑制率为37.48%,高于环磷酰胺(20 mg/kg)的35.59%的抑制率,并呈现一定的药物剂量依赖性;药剂浓度为0.73 mg/kg时,对H22实体瘤抑瘤率为41%,高于环磷酰胺(20 mg/kg)的37%的抑制率.结论 EFP对荷S180和H22小鼠肿瘤有较好的抑制作用.     

地鳖纤溶活性蛋白含药血清对人肺癌A549细胞凋亡及凋亡相关表达的影响

目的 研究地鳖纤溶活性蛋白(EFP)含药血清对人肺癌A549细胞凋亡的影响及凋亡相关基因的表达.方法 制备不同浓度EFP小鼠含药血清;采用MTT法检测EFP对A549细胞的增殖抑制效果;采用Annexin V-FITC/PI双荧光染色观察细胞凋亡情况;应用流式细胞术检测EFP对A549细胞周期的影响;采用免疫组化法检测凋亡相关基因Bax表达水平的改变.结果 EFP含药血清各组对A549细胞有明显抑制作用;EFP使A549细胞发生细胞凋亡,细胞周期发生改变;随着药物浓度的增加,Bax表达逐渐增强,Bcl-2表达逐渐减弱.结论 EFP有较强的体外抗肿瘤活性;EFP可能通过调控Bcl-2,Bax基因表达而诱导凋亡.     

蝎毒纤溶活性肽对血管内皮细胞分泌纤溶因子的影响

目的　研究蝎毒纤溶活性肽 (SVFAP)对血管内皮细胞释放组织型纤溶酶原激活剂 (t -PA)和纤溶酶原激活剂抑制物 (PAI - 1)的影响。方法　将不同浓度SVFAP与脐静脉内皮细胞共同孵育 10min及 4h后 ,分别收集培养液 ,以发色底物法测定培养液中t-PA和PAI -1的活性。结果　SVFAP在用药后 10min及 4h各浓度大多使t-PA活性增强 ,PAI - 1活性降低 ,t-PA/PAI - 1比值升高。结论　SVFAP的纤溶作用与抑制内皮细胞分泌PAI - 1和促进t-PA释放有关。     

蝎毒纤溶活性肽预处理对缺氧血管内皮细胞抗凝和纤溶功能的影响

目的 应用人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺氧模型,探讨蝎毒纤溶活性肽(SVFAP)对缺氧损伤内皮细胞的保护作用.方法 对培养的HUVECs传代并分组:对照组常规培养;缺氧组将其放入含95% N2、5% CO2混合气体的缺氧环境中培养12 h,制备HUVECs缺氧损伤模型;药物干预组分别将终浓度为2,4,8 mg/L的SVFAP加入细胞培养液中进行培养,1 h后进行缺氧模型复制.观察各组细胞培养上清液中漂浮细胞数、抗凝、纤溶指标等变化.结果 与对照组相比,模型组培养液中的漂浮细胞数显著增高,前列环素(6-keto-PGF1α)和NO水平显著下降,组织型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)活性增高,组织型纤溶酶原激活物(t-PA)活性显著降低; 蝎毒纤溶活性肽在较高剂量组能显著提高6-keto-PGF1α和NO水平、调节PAI-1和t-PA活性.结论 实验制备的HUVECs缺氧损伤模型存在着内皮细胞(EC)受损, 纤溶、抗凝功能失调; 蝎毒纤溶活性肽对缺氧环境下受损EC具有保护作用.     

全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞纤溶活性的影响

目的观察不同浓度全蝎纯化液对凝血酶诱导血管内皮细胞（VEC）释放组织型纤溶酶原激活物（t-PA）、纤溶酶原激活物抑制物（PAI）活性的影响。方法以凝血酶和不同剂量的全蝎纯化液同时作用于培养的人脐静脉内皮细胞（VEC-340）,12h后收集细胞液测定t-PA和PAI活性。结果与空白组比较,凝血酶组t-PA活性降低,PAI活性增高,差异有统计学意义（P〈0.01）,与凝血酶组比较,全蝎大剂量、中剂量、小剂量组t-PA活性均增高,PAI活性降低,差异均有统计学意义（P〈0.01）。结论凝血酶对VEC-340细胞具有损伤作用,可诱导内皮细胞抗血栓性发生变化。全蝎纯化液可促进血管内皮细胞释放t-PA,抑制PAI分泌,对纤溶平衡具有调节作用。提示这可能与全蝎纯化液增加血管内皮细胞抗血栓能力有关。     

地鳖纤溶蛋白对人脐静脉内皮细胞、肺癌、乳腺癌细胞VEGF和bFGF表达的影响

目的研究地鳖纤溶蛋白(EFP)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)和人肺癌(A549)、乳腺癌(MCF-7)细胞分泌血管内皮细胞生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响。方法采用含药血清体外培养人脐静脉内皮细胞、肺癌、乳腺癌细胞,通过MTT法和双抗夹心酶联免疫吸附分析法(ELISA)观察地鳖纤溶蛋白对细胞的体外增殖和分泌VEGF和bFGF的影响。结果 EFP含药血清对人脐静脉内皮细胞、肺癌、乳腺癌细胞有显著抑制作用,ELISA法检测结果表明EFP含药血清对人脐静脉内皮细胞、肺癌、乳腺癌细胞的VEGF和bFGF表达均有抑制作用。结论 EFP可抑制肿瘤细胞VEGF和bFGF表达。     

健脾复方对人大肠癌移植瘤裸小鼠血管内皮生长因子及肿瘤微血管密度的影响

目的研究健脾复方对人大肠癌移植瘤裸小鼠血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）和肿瘤微血管密度（microvessel density,MVD）的影响。方法对60只BALB／C裸小鼠建立人大肠癌原位移植瘤模型,并按1：1：1：1：1随机分为健脾复方＋5－Fu组、健脾复方组、塞来昔布组、5－Fu组和模型对照组,分别予相应的干预措施处理8周。分别观察VEGFmRNA（采用RT—PCR法）和MVD（免疫组化法）的表达,并对影响其表达的相关因素进行分析。结果与模型组比较,健脾复方＋5－Fu、健脾复方、塞来昔布和5－Fu的治疗均可降低VEGFmRNA的表达（P〈0．01）,健脾复方＋5－Fu、健脾复方可进一步降低MVD表达,且与5．Fu组和模型对照组的差异有显著性（P〈0．05）。回归分析显示VEGFmRNA和MVD的表达与不同的治疗方案具有相关性。结论健脾复方单独使用或联合5－Fu,均可显著抑制大肠癌瘤块VEGFmRNA和MVD的表达,提示健脾复方有抑制肿瘤生长、复发、转移的潜能。     

地鳖纤溶蛋白含药血清对人肝癌和乳腺癌抑制作用

目的研究地鳖纤溶蛋白(EFP)及含药血清对人肝癌HepG-2和人乳腺癌MCF-7细胞的增殖抑制作用。方法制备EFP,并制备不同浓度EFP小鼠含药血清;采用MTT法分别将EFP和EFP含药血清加入HepG-2和MCF-7细胞悬液中,分别检测增殖抑制效果。结果 EFP直接用药各组均对HepG-2无抑制作用,而EFP含药血清各组对HepG-2细胞均有明显抑制细胞增殖作用;EFP组和EFP含药血清组均能不同程度的抑制MCF-7细胞增殖。结论 EFP有较强的体外抗肿瘤活性;血清药理学方法更能真实的反映药物作用。     

土鳖虫纤溶活性蛋白抗小鼠血栓形成作用研究

目的:研究土鳖虫纤溶活性蛋白的抗凝、纤溶和抗血栓形成作用。方法:小鼠灌胃土鳖虫纤溶活性蛋白后,取血浆测定白陶土部分凝血活酶时间(KPTT)、凝血酶时间(TT)和凝血酶原时间(PT),测定组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)和其抑制物(PAI)的活性;用角叉菜胶诱发小鼠体内血栓形成,测量尾部血栓形成的长度。结果:土鳖虫纤溶活性蛋白能够显著延长小鼠TT,使t-PA活性增强,同时抑制PAI的活性,显著抑制角叉菜胶所致的尾部血栓形成。结论:土鳖虫纤溶活性蛋白能部分抑制凝血途径,激活纤溶系统,抑制血栓形成。     

地鳖虫纤溶活性蛋白组分抑制肿瘤作用研究

目的 地鳖虫纤溶活性蛋白组分对体内外肿瘤的抑制作用.方法 用MTT法、流式细胞术和AnnexinV-FITC/PI双荧光染色分别检测地鳖虫纤溶活性蛋白组分对体外培养的Hela细胞增殖、细胞周期及凋亡情况的影响;用S<,180>荷瘤小鼠检测地鳖虫纤溶活性蛋白组分的体内抑瘤作用.结果 地鳖虫纤溶活性蛋白组分对体外培养的Hela细胞具有抑制细胞增殖、改变细胞周期并能诱导细胞凋亡的作用,对S<,180>荷瘤小鼠具有抑瘤作用.结论 地鳖虫纤溶活性蛋白组分具有一定的抑制肿瘤作用.     

原发性肝细胞癌血管内皮生长因子与微血管密度的免疫组化研究

目的 :探讨血管内皮生长因子 (VEGF)、微血管密度 (MVD)与原发性肝细胞癌 (PHCC)发展的关系。方法 :应用免疫组织化学技术检测 42例PHCC组织及 10例癌旁组织中VEGF的表达和MVD。结果 :42例PHCC组织中 2 3例 (5 4.8% )VEGF阳性表达 ,MVD均值为 15 3 .7± 5 6.0 ,显著高于癌旁组织。VEGF表达阳性组MVD明显高于阴性组 (P <0 .0 5 )。VEGF ,MVD与淋巴结转移、门静脉癌栓形成、包膜完整性和患者生存期长短密切相关 (P <0 .0 1) ,而与癌结节多少和患者HBsAg是否阳性无关。结论 :PHCC组织中VEGF ,MVD与其浸润、转移及预后有关 ,可作为监测PHCC预后的重要指标     

鸦胆子油乳对人肺癌A549细胞血管内皮 生长因子表达的影响

目的：研究鸦胆子油乳对人肺癌A549细胞血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)表达的影响。方法：以健康人外周血单个核细胞(peripheral polymorphonuclear neutrophil，PMN)为正常对照，分别用不同剂量的鸦胆子油乳(0.5，1.25，2.5，5 g·L-1)与人肺癌A549细胞共育48 h，采用定量sandwich酶免疫技术和RT-PCR法分别测定PMN细胞和A549细胞培养上清液VEGF分泌和细胞内VEGF mRNA的表达，未加药组采用等量RPMI 1640培养液。结果：A549细胞上清液VEGF分泌量较外周血单个核细胞显著上升(120.73 vs 21.21，P<0.05)，2.5 g·L-1鸦胆子油乳作用48 h能使A549细胞VEGF分泌显著减少(20.30 vs 120.73，P<0.05)。A549细胞VEGF mRNA表达较骨髓单个核细胞也显著上升(0.957 3 vs 0.464 9，P<0.05)，鸦胆子油乳(0.5，1.25，2.5 g·L-1)作用48 h对A549细胞VEGF mRNA表达无显著影响，5 g·L-1鸦胆子油乳可显著降低A549细胞VEGF mRNA表达(0.468 2 vs 0.957 3，P<0.05)。结论：鸦胆子油乳能降低A549细胞VEGF的分泌和表达，该作用可能是其抗肿瘤的作用机制之一。     

艾灸通过成纤维细胞生长因子受体1和血管内皮细胞生长因子受体2抑制肉瘤微环境血管生成

目的:观察艾灸对肉瘤微环境中成纤维细胞生长因子受体1(FGFR1)和血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)的影响,探讨艾灸防治肉瘤的作用机制.方法:将接种S180肉瘤细胞形成移植瘤的C57BL/6J小鼠分为模型组、顺铂组和艾灸组,每组10只.艾灸组直接灸移植瘤,距离3 cm,10 min/次,每日1次,治疗14 d...     

白龙灵沙汤对S180瘤小鼠血管内皮生长因子影响的研究

目的探讨中药复方白龙灵沙汤对荷S180瘤小鼠血管的微血管密度及血管内皮生长因子(VEGF)的影响。方法小鼠右腋部皮下接种制作S180瘤模型后,随机分为5组,分别给予生理盐水、参芪片、白龙灵沙汤高、中、低剂量灌胃,运用免疫组化方法对S180瘤的抑瘤率及对S180瘤中血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达、微血管密度(MVD)等有关指标进行检测和分析。结果白龙灵沙汤对S180瘤具有较好抑瘤作用并呈剂量依赖关系;白龙灵沙汤和参芪片均能抑制S180瘤组织的MVD,且白龙灵沙汤呈剂量依赖关系;白龙灵沙汤对S180瘤组织中VEGF表达有明显抑制作用。结论白龙灵沙汤有抗肿瘤生长的作用,可抑制肿瘤血管生成,降低MVD,抑制VEGF的表达。     

恶性血液病骨髓活检塑包切片血管新生和血管内皮生长因子表达的研究

目的研究恶性血液病骨髓血管新生和血管内皮生长因子(VEGF)在骨髓活检塑包切片上的表达情况。方法应用改良的Hemapun 988塑料包埋骨髓病理切片进行免疫组化染色检测43例恶性血液病骨髓活组织中微血管密度(MVD)和VEGF表达水平。结果 MVD和VEGF在改良的Hemapun 988塑料包埋骨髓病理切片上均有较强的表达。结论 MVD和VEGF的变化均可作为恶性血液病早期诊断的指标。     

黄连纱条对压疮患者局部组织中碱性成纤维细胞生长因子和血管内皮生长因子的影响

目的观察黄连纱条对压疮患者局部组织中碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管内皮生长因子(VEGF)的影响,并探讨其作用机制。方法将109例压疮患者随机分为治疗组57例和对照组52例。2组在均予西医常规治疗及护理的基础上,治疗组采用黄连纱条引流、外敷治疗,对照组采用雷佛奴尔纱条引流、外敷治疗。2组均1个月为1个疗程,2个疗程后进行疗效比较,观察溃疡面愈合情况,并通过免疫组织化学方法检测治疗前及治疗1、2个疗程后患者压疮局部溃疡组织中bFGF、VEGF的表达情况。结果治疗组总有效率为93.0%,对照组总有效率为73.9%,2组比较差异有统计学意义(P0.05),治疗组疗效优于对照组;2组治疗1、2个疗程后bFGF、VEGF表达情况与本组治疗前比较差异有统计学意义(P0.05);治疗组治疗1、2个疗程后bFGF、VEGF表达情况与对照组同期比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论黄连纱条外敷治疗可以明显促进压疮溃疡创面局部组织中bFGF和VEGF的表达,促进溃疡创面坏死组织的脱落和新生组织及血管的生长,从而促进压疮溃疡创面的愈合。