薤白皂苷对冠心病寒痰阻滞证患者血小板聚集率的影响及机制研究

目的:研究薤白皂苷对冠心病寒痰阻滞证患者血小板聚集率及表面受体的影响,初步分析薤白皂苷的作用机制。方法:取冠心病寒痰阻滞证患者静脉血分离富含血小板血浆,按实验分组分别加入薤白皂苷等不同浓度受试药物,计算血小板聚集抑制率,流式细胞术检测ADP诱导活化血小板P-选择素(CD62P)、GPIIb-IIIa表达情况及对P2Y1和P2Y12受体的作用。结果:冠心病寒痰阻滞证薤白皂苷中、高浓度抑制ADP诱导的血小板聚集显著高于生理盐水对照的血小板聚集; 4μmol/L的薤白皂苷显著降低活化血小板CD62p的表达率; 4μmol/L的薤白皂苷下GPIIb/IIIa的表达率低于活化后表达率;低、中、高浓度的薤白皂苷分别联合P2Y1、P2Y12括抗剂对ADP诱导的血小板聚集率均显著高于ADP诱导的血小板聚集率。结论:薤白皂苷对于冠心病寒痰阻滞证患者ADP诱导的血小板聚集有更好的抑制作用,其可能作用于P2Y1和P2Y12,通过降低胞浆内巧离子浓度和升高CAMP含量抑制血小板聚集的效果。     

广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶对血小板聚集、释放及超微结构的影响

目的研究广西眼镜蛇毒L-氨基酸氧化酶(L-amino acid oxidase,LAAO)对人体外血小板聚集、释放及超微结构的影响。方法比浊法测定广西眼镜蛇毒LAAO对二磷酸腺苷(ADP)、胶原、凝血酶、花生四烯酸(AA)引起的血小板聚集率的影响,双抗夹心放免法测定GMP-140含量,并观察血小板超微结构。结果广西眼镜蛇毒LAAO剂量能明显抑制二磷酸腺苷(ADP)、胶原、凝血酶、花生四烯酸(AA)引起的血小板聚集,并呈明显的正相关;明显降低凝血酶诱导的血浆GMP-140水平,减轻血小板超微结构的损伤程度。结论广西眼镜蛇毒LAAO能明显抑制二磷酸腺苷(ADP)、胶原、凝血酶、花生四烯酸(AA)引起血小板聚集、降低凝血酶引起的血小板释放功能,减轻血小板损伤。     

丹酚酸B对血小板聚集及释放sP-sel和sCD40L的影响

目的:探讨丹酚酸B(SaIB)对二磷酸腺苷(ADP)和凝血酶(Th)诱导的血小板聚集率以及释放的可溶性P选择素(sP-sel)和可溶性CD40L(sCD40L)的影响。方法:采集健康志愿者静脉血,制备富血小板血浆(PRP),以终浓度10μmol/L ADP和0.4 U/mL Th为诱导剂,测定血小板聚集率,分别以300μg/mL和600μg/mLSalB预孵育血小板,测定聚集抑制率。制备血小板悬液,分为静息组、激活组(以终浓度50μmol/L ADP和0.4U/mL Th为诱导剂激活)、SalB组(以终浓度300μg/mL和600μg/mL SalB预孵育,再以诱导剂激活)。采用ELISA方法检测各组上清液中sP-sel和sCD40L含量,比较sP-sel和sCD40L的相关性。结果:SalB可显著减低ADP和Th诱导的血小板聚集率,600μg/mL组聚集抑制率高于300μg/mL组(P<0.01)。与静息组比较,激活组sP-sel和sCD40L释放显著增加(P<0.01)。与激活组比较,SalB可使Th诱导的sP-sel和sCD40L释放及ADP诱导的sP-sel释放显著降低(P<0.01);但对ADP诱导的sCD40L释放没有影响,与激活组比较差异无统计学意义(P>0.05)。ADP和Th诱导时,sP-sel与sCD40L水平呈正相关(P<0.05,P<0.01),相关系数r_P>0.5。结论:SalB可降低体外血小板聚集率及活化产物sP-sel和sCD40L的释放,具有阻抑血小板活化、聚集与释放的作用。     

芍药苷联合川芎嗪对肌动蛋白微丝诱导血小板活化及血小板凝溶胶蛋白水平的干预效应研究

目的研究肌动蛋白微丝(F-actin)体外刺激对血小板活化及血小板凝溶胶蛋白(gelsolin)浓度的影响,同时观察活血化瘀中药赤芍-川芎有效成分配伍的体外干预效应。方法以人水洗血小板作为研究对象,分为低(2.5μmol/L)、中(5μmol/L)、高(10μmol/L)浓度F-actin组以及花生四烯酸(AA)、二磷酸腺苷(ADP)、凝血酶(thrombin)组,同时设中药F-actin(10μmol/L)组和中药AA组使用芍药苷和川芎嗪联合干预,阿司匹林F-actin(10μmol/L)组和阿司匹林AA组使用阿司匹林作为干预药物,另设对照组。采用流式细胞术检测血小板活化标志物CD62p的表达,使用血小板聚集仪测定最大血小板聚集率(PAR),采用ELISA法测定血小板gelsolin浓度。结果与对照组比较,不同浓度F-actin及AA、ADP、thrombin均可引起PAR和CD62p表达升高(P<0.01),且F-actin呈浓度依赖性。与AA组比较,低、中浓度F-actin组PAR与CD62p表达下降(P<0.01),高浓度F-actin、ADP、thrombin组则无明显差异(P>0.05)。与对照组比较,中、高浓度F-actin组及AA组可诱导血小板gelsolin浓度增高(P<0.05,P<0.01)。与AA组比较,低、中浓度F-actin以及ADP、thrombin组gelsolin浓度下降(P<0.05)。与高浓度F-actin组或AA组比较,川芎嗪和芍药苷与阿司匹林均可抑制F-actin和AA诱导的PAR和CD62p表达升高(P<0.05)。与高浓度F-actin组或AA组比较,川芎嗪和芍药苷可降低F-actin或AA诱导的gelsolin升高(P<0.05),但阿司匹林无此效应(P>0.05)。结论 F-actin体外能够激活血小板导致其聚集、活化,10μmol/L浓度能够诱导血小板大量分泌gelsolin,其效应与AA相似。血小板gelsolin可能是芍药苷和川芎嗪体外抗血小板聚集、活化的一个有效干预靶点。     

冠心Ⅱ号系列组方对家兔血小板聚集的影响

目的:比较冠心Ⅱ号系列方对家兔血小板聚集的影响.方法:测定家兔药前血小板聚集率,根据体重及血小板聚集率将家兔分为6组.后灌胃给药7d后,测定各组家兔给药后血小板聚集率,计算各组药前与药后血小板聚集率差值并进行统计分析.结果:与空白对照组比较,各给药组均可显著抑制3种诱导剂诱导的血小板聚集(P＜0.01).对胶原、花生四烯酸(AA)诱导的血小板聚集,微米制剂、汤剂优于有效组分组(P＜0.05).对二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集,组间无明显差异.结论:对于胶原、AA诱导的血小板聚集,微米制剂与汤剂作用优于有效组分重组复方组.对于ADP诱导的血小板聚集,冠心Ⅱ号各组无明显差异.     

蝮蛇蛇毒中小分子肽抑制血小板聚集作用的研究

目的:研究华南地区蝮蛇粗毒中分离得到的蛇毒多肽AHP-4的抑制血小板聚集作用。方法:分别用二磷酸腺苷、胶原和花生四烯酸诱导兔血小板聚集,观察不同剂量的AHP-4对血小板聚集的抑制率,并计算IC50。结果:AHP-4在体外可剂量依赖性地抑制由二磷酸腺苷、胶原和花生四烯酸诱导的兔血小板聚集,其IC50分别为25.4nM、256.6nM、11.2nM。结论:从AHP-4对这三种诱导剂诱导的体外兔血小板聚集的作用来看,其作用机制可能如下:阻断二磷酸腺苷与二磷酸腺苷受体的结合;抑制花生四烯酸的代谢产物的生成;抑制血小板膜上磷脂酶的激活。     

芒果苷对柔红霉素所致大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用

目的:研究芒果苷对柔红霉素致心肌细胞凋亡的拮抗作用及其可能机制。方法:取原代培养心肌细胞以1μmol/L柔红霉素(daunorubicin,DNR)建立心肌细胞凋亡模型,以不同浓度芒果苷(25、50、100μmol/L)干预,选择银杏叶提取物EGB761(25μg/mL)作为阳性对照药物。应用光学倒置显微镜及电子显微镜观察凋亡细胞形态改变,用流式细胞术(Annexin V–FITC/PI双染色法)检测细胞凋亡率,用分光光度法检测细胞裂解液中Caspase-3酶活性,用实时荧光定量RT-PCR方法检测P53、Fas及FasL表达水平。结果:芒果苷作用于柔红霉素诱导的心肌细胞凋亡模型后,能明显抑制柔红霉素诱导的心肌细胞凋亡,降低心肌细胞凋亡率,下调Fas和FasL表达、抑制Caspase-3活化,随着药物浓度增加,抑制凋亡作用增强,其作用强度与芒果苷浓度有关,呈剂量依赖性。结论:芒果苷能有效抑制柔红霉素诱导的心肌细胞凋亡,其作用机制可能与下调Fas和FasL表达水平及抑制Caspase-3活化有关。     

丹参多酚酸盐抑制急性冠脉综合症血小板膜糖蛋白表达的临床研究

目的研究丹参多酚酸盐对急性冠脉综合症(ACS)患者血小板糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物和P选择素表达的影响。方法入选患者分为A组:标准治疗基础上加用注射用丹参多酚酸盐组200 mg/d,共纳入32人;B组:标准治疗组,共纳入31人。标准治疗指遵从ACC/AHA 2007 STEMI指南,测定治疗前后患者血小板聚集率;流式细胞仪检测治疗前后患者血小板静息状态以及二磷酸腺苷(ADP)诱导血小板活化后的PAC-1、CD62P表达比例,测定丹参多酚酸盐对血小板胞浆内钙释放影响。结果治疗7 d后,在诱导剂ADP的作用下,A组血小板最大聚集率低于B组。治疗后两组血小板基础状态PAC-1和CD62P的表达比例无显著差异;使用ADP诱导血小板活化后,A组血小板PAC-1以及CD62P表达低于B组。丹参多酚酸盐不能完全抑制ADP作用于P2Y1受体引起的胞浆内钙释放。结论丹参多酚酸盐对ACS患者的血小板膜糖蛋白GPⅡb/Ⅲa复合物和颗粒膜蛋白P选择素表达具有抑制作用,可影响血小板ADP的P2Y12受体后的信号传导。     

淫羊藿苷对血小板活化的影响及其分子机制的研究

目的:研究淫羊藿苷对血小板活化的影响,并探讨可能的分子机制.方法:血小板聚集仪检测不同浓度淫羊藿苷对胶原、凝血酶、U46619(TXA2类似物)所诱导的血小板聚集的影响.流式细胞仪检测淫羊藿苷对凝血酶、U46619诱导的血小板P-选择素表达和纤维蛋白原结合的作用.免疫印迹法分析淫羊藿苷可能影响血小板活化的分子机制.结果:淫羊藿苷能够抑制胶原、凝血酶、U46619所诱导的血小板聚集,并且抑制作用呈浓度依赖性.淫羊藿苷能够抑制凝血酶、U46619诱导的P-选择素表达和纤维蛋白原的结合.免疫印迹分析显示,淫羊藿苷抑制了血小板Akt的磷酸化.结论:淫羊藿苷可能通过抑制PI3K信号通路降低血小板活化,抑制动脉血栓的形成.     

通脉胶囊对家兔血小板聚集的实验研究

目的：观察通脉胶囊对家兔血小板聚集的作用。方法：采用Born氏比浊法,观察通脉胶囊对家兔血小板聚集率的影响。结果：通脉胶囊能明显降低二磷酸腺苷（ADP）、花生四烯酸（AA）及胶原诱导的家兔血小板聚集率（P〈0.05）。结论：通脉胶囊具有抑制血小板聚集的作用。     

桑枝不同溶剂提取物对血小板聚集、血管舒张及巨噬细胞活化的不同作用

目的:研究桑枝不同溶剂提取物对血小板聚集、离体血管舒张及巨噬细胞活化后亚硝酸盐表达的不同作用。方法:桑枝醇提物经萃取分别得到乙酸乙酯提取物(Ⅰ)、正丁醇提取物(Ⅱ)和氯仿提取物(Ⅲ)。以二磷酸腺苷、花生四烯酸、胶原诱导大鼠体外血小板聚集;LPS和干扰素γ刺激巨噬细胞活化;离体血管环舒缩实验来考察不同溶剂提取物的不同作用。结果:氯仿提取物具有较好的浓度依赖性抑制血小板聚集、舒张血管作用;乙酸乙酯提取物和正丁醇提取物则对巨噬细胞活化后过量亚硝酸盐产生具有显著的抑制作用。结论:桑枝醇提物经不同溶剂提取其药效大有不同。作者首次发现桑枝氯仿提取物在心血管系统的良性药理作用,而乙酸乙酯和正丁醇提取物抑制亚硝酸盐产生也提示其可能通过抑制过量一氧化氮释放而具有抗炎作用。     

人参总皂甙对兔血小板的作用

 本研究观察了人参总皂甙（GS )对兔血小板某些功能的影响，結果表明，GS可明显抑制由花生四烯酸（AA)、ADP和胶原诱导的血小板聚集和释放反应。GS抑制血小板的作用可能涉及多种机理，不仅由AA、ADP和胶原诱导的血小板TXA2合成被GS抑制，而且血小板磷脂酶,A2、磷酸二酯酶和钙调素的活性也被GS所抑制。     

活血健脑胶囊对实验性家兔血小板聚集的影响

目的：探讨活血健脑胶囊对实验性家兔血小板聚集的影响.方法：观察活血健脑胶囊对由二磷酸腺苷（ADP）、胶原、花生四烯酸（AA）诱导的兔血小板聚集作用,连续7 d灌胃给药后,采用Born氏比浊法测量其血小板聚集率.并对其作用的特点进行初步分析.结果：活血健脑胶囊对由ADP、胶原及AA诱导的家兔血小板聚集有抑制作用,与对照组比较（P＜0.05～P＜0.01）.但活血健脑胶囊高剂量组对由AA诱导的聚集有明显抑制作用;与对照组比较（P＜0.05～P＜0.01）.活血健脑胶囊中剂量、低剂量组对由AA诱导的血小板聚集无明显影响.结论：活血健脑胶囊具有抑制血小板聚集的作用.     

蜜蜂蜂毒涂膜剂对家兔血小板功能的影响

目的:研究蜜蜂蜂毒涂膜剂对家兔血小板功能的影响。方法:雄性家兔36只,随机分为生理盐水组、空白基质组、疏血通阳性对照组及蜜蜂蜂毒涂膜剂低(2.19 mg/kg)、中(4.38 mg/kg)、高(8.76 mg/kg)剂量组,每组6只。分别采用血小板活化因子(PAF)和二磷酸腺苷(ADP)诱导家兔血小板聚集实验和血小板释放实验,采用酶联免疫法检测血小板颗粒内容物β血小板球蛋白(β-TG)、5-羟色胺(5-HT)、血小板膜糖蛋白GPⅡb-Ⅲa复合物和CD62p,比浊法测定血小板聚集作用。结果:与空白基质组比较,ADP诱导时,蜜蜂蜂毒涂膜剂各剂量组血小板聚集率、GPⅡb-Ⅲa复合物表达显著降低,中剂量组β-TG、CD62p表达显著降低(P0.05或P0.01);PAF诱导时,蜜蜂蜂毒涂膜剂各剂量组5-HT、CD62p表达显著降低,中剂量组血小板聚集率和β-TG表达显著降低(P0.05或P0.01)。结论:蜜蜂蜂毒涂膜剂可能通过抑制血小板释放活性物质达到抗血小板聚集作用。     

三七三醇皂甙对动物血小板功能及血栓形成的影响

三七三醇皂甙（PTS）在体外（1～4mg／ml）和体内十二指肠给药（75～300mg／kg）都明显抑制由ADP、胶原、花生四烯酸（AA）诱导的大鼠及家兔血小板聚集，同时亦抑制胶原诱导大鼠血小板TXA2释放，而对大鼠胸主动脉壁PGI2生成无明显影响。PTS（50～200mg／kg）明显抑制大鼠实验性血栓形成，剂量与效应相关。提示：PTS抗血栓作用与其抑制血小板聚集和TXA2释放有关。     

丹红合剂对家兔血小板聚集的影响

目的 观察丹红合剂对家兔血小板聚集的影响.方法 采用随机数字表法将40只大耳白家兔随机分为5组,每组8只,分别为空白对照组(予等容量的0.5％羧甲基纤维素纳),丹红合剂5、2.5、1.25 g/kg组,阿司匹林0.025 g/kg组.各组均按1ml/kg容积灌胃,1次/d,连续给药8d.于末次给药1h后心脏取血,用二磷酸腺苷(ADP)、胶原、花生四烯酸(AA)3种诱导剂进行血小板聚集实验.结果 丹红合剂5、2.5、1.25 g/kg组对ADP诱导的家兔血小板聚集率的抑制率分别为9.4％、5.1％、0.6％,对胶原诱导的家兔血小板聚集抑制率分别为34.5％、11.1％、5.6％;对花生四烯酸(AA)诱导的家兔血小板聚集抑制率分别为21.4％、11.6％、2.3％.结论 丹红合剂具有抑制血小板聚集作用.     

川芎嗪通过抑制ERK5/P70S6K/Rac1信号通路发挥抗血小板活化及血栓形成作用

目的探讨川芎嗪抗血小板活化作用及其分子机制。方法运用缺氧诱导血小板损伤模型。采用比浊法检测血小板聚集,检测血小板在纤维蛋白原上的黏附,流式细胞术检测血小板CD62p的表达,CM-H2DCFDA染色检测血小板ROS的释放,Western blotting法检测ERK5、P70S6K、Rac1的磷酸化蛋白表达量,采用体内血栓形成试验检测川芎嗪对血栓的作用。结果川芎嗪可有效抑制血小板聚集,与模型组相比差异明显(P<0.01、P<0.001);与模型组比较,川芎嗪可显著抑制血小板在纤维蛋白原上的黏附,ROS的释放(P<0.05、P<0.001);同时川芎嗪能显著抑制血小板CD62p的表达,ERK5、P70S6K、Rac1的磷酸化,抑制血栓形成(P<0.05)。结论川芎嗪可通过ERK5/P70S6K/Rac1信号通路抑制血小板聚集、黏附、释放,从而抑制血栓形成。     

氯吡格雷对不稳定型心绞痛患者血小板功能的影响

目的 探讨氯吡格雷对不稳定型心绞痛（UAP）患者血小板功能的影响,比较UAP患者与健康对照组血小板聚集率及血小板活化状态。方法 选择住院确诊的UAP患者55例,分别于服药前、服药1周后、服药1月后奎腹抽血,检测血小板聚集率和血小板活化状态。结果 UAP组患者血小板聚集率及血小板CD63、CD62P、凝血酶敏感蛋白（TSP）水平较正常对照、组明显增高（P〈0．05）,服药前与服药1周及1月后血小板聚集率及血小板CD63、CD62P、TSP水平相比差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 氯吡格雷不仅抑制了血小板的聚集,而且还抑制了血小板的活化,这一作用对于不稳定型心绞痛患者的急诊经皮冠状动脉腔内成形术及支架置入术有重要的意义。     

17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮对大鼠凝血功能和血小板聚集的影响

目的:研究17-甲氧基-7-羟基-苯并呋喃查尔酮(YLSC)对体内外血小板聚集和凝血功能的影响.方法:将50只SD大鼠随机分为5组:对照组(含0.5％ DMSO的生理盐水),YLSC低、中、高剂量组(2.5,5,10 mg·kg-1),阳性药阿司匹林组(10 mg·kg-1).尾静脉注射相应药物1周后,腹主动脉采血,分别加入二磷酸腺苷(ADP)、胶原和花生四烯酸(AA)诱导血小板聚集,测定大鼠体内外血小板聚集率;同时观察YLSC对大鼠凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血激酶时间(APTT)及凝血酶时间(TT)的影响.结果:与对照组相比,YLSC能显著抑制ADP和胶原诱导的大鼠体内、外血小板最大聚集率(P＜0.05或P＜0.01),最大抑制率分别为38.4％,42.5％,对AA诱导的血小板聚集无明显抑制作用;YLSC能显著延长大鼠血浆TT,APTT(与对照组比较,P＜0.05或P＜0.01),对PT无显著影响.结论:YLSC具有对抗血小板聚集和抗凝血作用.     

舒络胶囊抗血小板聚集及抗血栓形成的作用

目的:观察舒络胶囊(水蛭、蜈蚣、川芎等)对血小板聚集和血栓形成的影响.方法:大鼠均分为大中小3剂量,灌胃给药;用二磷酸腺苷(ADP)、胶原(C0L),花生四烯酸(AA)诱导大鼠血小板聚集;采用大鼠动静脉旁路和电刺激大鼠静总动脉两种血栓形成方法;以阿司匹林为阳性对照.结果:舒络胶囊大中剂量组均能明显抑制ADP、胶原、AA诱导大鼠的血小板最大聚集率,显著抑制两种方法引起的大鼠的血栓形成.结论:舒络胶囊具有抑制大鼠血栓形成和抗血小板聚集作用.